血細(xì)胞檢驗-白細(xì)胞檢驗（臨床檢驗課件）

臨床檢驗基礎(chǔ)第六講白細(xì)胞分類計數(shù)傳統(tǒng)顯微鏡分類法01血液分析儀分類計數(shù)法02CONTENTS01傳統(tǒng)顯微鏡分類法PartOne檢測原理04結(jié)合白細(xì)胞計數(shù)結(jié)果，可間接求出每升血液中各種白細(xì)胞的絕對值02經(jīng)Wright染色后03放置于顯微鏡下，按白細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征逐個分別計數(shù)，得出各種白細(xì)胞百分率01將血液涂成薄膜質(zhì)量保證技術(shù)誤差0102質(zhì)量考核與評價03形態(tài)識別01020304血涂片制備和染色觀察部位：體尾交界處或片頭至片尾的3／4區(qū)域

分類計數(shù)的范圍和移動規(guī)律:“城垛式”

分類計數(shù)的白細(xì)胞數(shù)量：計數(shù)越多，誤差越小技術(shù)誤差注意事項1)觀察全片2)計數(shù)異常和幼稚血細(xì)胞:①白細(xì)胞包括在白細(xì)胞分類的比值或百分率中。②幼稚紅細(xì)胞以分類100個白細(xì)胞時見到幼稚紅細(xì)胞的數(shù)量來報告。3)觀察其他血細(xì)胞或成分：紅細(xì)胞、血小板05全國臨床檢驗方法學(xué)學(xué)術(shù)研討會推薦的方案見表。

質(zhì)量考核與評價

由于手工制備的血涂片細(xì)胞分布不均勻，分類計數(shù)結(jié)果變化大，很難對每張血涂片進行嚴(yán)格的質(zhì)量控制。目前亦缺乏統(tǒng)一的質(zhì)量控制方法，關(guān)鍵在于熟練操作技術(shù)，嚴(yán)格控制各個操作環(huán)節(jié)，盡量減少誤差。形態(tài)識別桿狀核和分葉核標(biāo)準(zhǔn)的不同，單核細(xì)胞與大淋巴細(xì)胞的鑒別、染色較差的涂片，脫顆粒的嗜堿性粒細(xì)胞與中性粒細(xì)胞的區(qū)分等。凡不能識別的細(xì)胞應(yīng)歸為“未能識別的白細(xì)胞”。參考值成人白細(xì)胞分類參考值

百分率(％)絕對值(×109／L)中性桿狀核粒細(xì)胞1~50.04~0.5中性分葉核粒細(xì)胞50~702~7嗜酸性粒細(xì)胞0.5~50.05~0.5嗜堿性粒細(xì)胞0~10~1淋巴細(xì)胞20~400.8~4單核細(xì)胞3~80.12~0.8中性粒細(xì)胞增多1粒細(xì)胞2淋巴細(xì)胞3單核細(xì)胞4臨床意義1.中性粒細(xì)胞增多白細(xì)胞總數(shù)與中性粒細(xì)胞(neutrophil，N)白細(xì)胞總數(shù)與中性粒細(xì)胞數(shù)量增多及減少的定義見表.

在外周血中，由于中性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的50％一70％，臨床意義基本一致。淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等數(shù)量上的改變也會引起白細(xì)胞總數(shù)的變化。因此，還應(yīng)具體分析。

1)中性粒細(xì)胞生理性增多：常不伴有白細(xì)胞質(zhì)量的改變。年齡：1)生理性增多：日間變化：一日之間最高值與最低值之間可相差1倍。運動、疼痛和情緒的影響：如劇烈運動可使短時間內(nèi)白細(xì)胞高達35X109／L，以中性粒細(xì)胞為主。當(dāng)運動結(jié)束后迅即恢復(fù)原有水平。妊娠與分娩：分娩后2～

5d內(nèi)恢復(fù)正常。其他：吸煙者白細(xì)胞的生理波動很大，30%以內(nèi)波動多無意義，只有通過定時和反復(fù)觀察才有意義。2)病理性：數(shù)量變化

核左移(shifttotheleft)：外周血中桿狀核粒細(xì)胞增多或(和)出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細(xì)胞時稱為核左移。核右移(shihtotheright)：

中性粒細(xì)胞核分葉5葉以上者超過3％則稱為核右移，常伴有白細(xì)胞總數(shù)減低。

核象變化

2)病理性增多：外周血白細(xì)胞>10X109／L

①反應(yīng)性增多，可見于：

A、急性感染或炎癥：為引起白細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞增多最常見的原因。球菌、桿菌、真菌、放線菌、病毒、立克次體、螺旋體、寄生蟲等。增高程度與病原體種類、感染部位和程度以及機體的反應(yīng)性等有關(guān)

B、類白血病反應(yīng)：指機體在有明確病因的刺激下，出現(xiàn)白細(xì)胞數(shù)中度增高(<50Xl09／L)，多以成熟中性粒細(xì)胞增多為主，原始、早幼粒細(xì)胞增多少見(<10％)，常伴較明顯的中性粒細(xì)胞中毒性改變，其他細(xì)胞均無明顯變化。C.廣泛組織損傷或壞死：嚴(yán)重外傷、手術(shù)創(chuàng)傷、大面積燒傷、凍傷以及血管栓塞(如心肌梗死、肺梗死)所致局部缺血性壞死等使組織嚴(yán)重?fù)p傷者，在12～36h內(nèi)常見白細(xì)胞增高，以中性分葉核粒細(xì)胞增多為主。有無術(shù)后感染，與心絞痛鑒別。

D、急性溶血：缺氧及分解產(chǎn)物刺激E、急性失血：消化道大量出血、內(nèi)臟破裂如脾破裂或輸卵管妊娠破裂等，白細(xì)胞總數(shù)常在1～2h內(nèi)迅速增高，可達(10～

20)X109／L，但此時的紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白量仍可暫時保持正常范圍，待組織間液吸收回血液或補充循環(huán)血容量后，才出現(xiàn)紅細(xì)胞和血紅蛋白減低。早期診斷內(nèi)出血的參考指標(biāo)。F、急性中毒：a、外源性中毒：化學(xué)物質(zhì)或藥物如汞、鉛、安眠藥急性中毒，生物毒素如昆蟲毒、蛇毒以及植物毒素如毒蕈中毒。b、內(nèi)源性中毒：如尿毒癥、糖尿病酮癥酸中毒、子癇、內(nèi)分泌疾病危象等。G、惡性腫瘤：

非造血系統(tǒng)惡性腫瘤可出現(xiàn)持續(xù)性白細(xì)胞增高，以中性分葉核粒細(xì)胞增多為主。其機制可能為：①腫瘤壞死分解產(chǎn)物刺激②腫瘤細(xì)胞(如肝癌、胃癌等)促粒細(xì)胞生成因子。③惡性腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移，破壞骨髓調(diào)控作用等H、其他原因：見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性溶血性貧血、痛風(fēng)及嚴(yán)重缺氧應(yīng)用皮質(zhì)激素、腎上腺素、氯化鋰等。

②異常增生性增多

A、白血?。築、骨髓增殖性疾?。喊ㄕ嫘约t細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥和骨髓纖維化癥(也可包括慢性粒細(xì)胞白血病)等。本組疾病均系多能干細(xì)胞的病變引起，具有潛在演變?yōu)榧毙园籽〉内厔?。其特點為除了一種血細(xì)胞成分的主要增多外，常伴有其他一種或兩種血細(xì)胞的增生，故常有中性粒細(xì)胞增多，白細(xì)胞數(shù)常在(10—30)X109／L。

(2)中性粒細(xì)胞減低(neutropenia)：

白細(xì)胞減低主要是中性粒細(xì)胞減低。粒細(xì)胞減低癥(granulocytopenia)：中性粒細(xì)胞絕對值成人<

2.0X109／L,

兒童<1.5X109／L粒細(xì)胞缺乏癥(agranulocytosis)：外周血白細(xì)胞<2.0X109／L,

中性粒細(xì)胞絕對值<0.5X109／L(2)中性粒細(xì)胞減低(neutropenia)：

(2)中性粒細(xì)胞減低(neutropenia)：

1)嗜堿性粒細(xì)胞增多(basophilia)：指外周血嗜堿性粒細(xì)胞濃度絕對值超過參考值的上限(>0.05×109／L)的一種征象

(2)嗜堿性粒細(xì)胞減少(basopenia)：多無臨床意義。減少可見于過敏性休克、促腎上腺皮質(zhì)激素或糖皮質(zhì)激素應(yīng)用過量以及應(yīng)激反應(yīng)等。3．淋巴細(xì)胞(lymphocyte，L)(1)淋巴細(xì)胞增多(lymphocytosis)：指外周血淋巴細(xì)胞絕對值增高成人：大于4.0×109／L；兒童：4歲以上大于7.2×109／L、

4歲以下大于9.0×109／L。

(1)淋巴細(xì)胞增多：(2)淋巴細(xì)胞減少(1ymphopenia)：指外周血淋巴細(xì)胞絕對值減低(成人<1.0×109／L)。凡中性粒細(xì)胞顯著增高的各種病因均可導(dǎo)致淋巴細(xì)胞相對減少。(2)淋巴細(xì)胞減少(2)淋巴細(xì)胞減少

4．單核細(xì)胞(monocyte，M)

成人單核細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)3％-8％。正常兒童稍高，平均為9％；2周內(nèi)的嬰兒可達15％或更多；妊娠中、晚期及分娩增多.骨髓釋放入外周血的單核細(xì)胞為成熟的單核細(xì)胞，在血液中停留3—6d，即逸出血管進入組織或體腔內(nèi)，經(jīng)5—9d，發(fā)育為巨噬細(xì)胞，形成單核-巨噬系統(tǒng)，

單核細(xì)胞增多

臨床檢驗基礎(chǔ)第五講白細(xì)胞計數(shù)白細(xì)胞計數(shù)WBC)：指測定單位容積的外周血各種白細(xì)胞的總數(shù)檢測原理（顯微鏡計數(shù)法）用白細(xì)胞計數(shù)稀釋液(稀乙酸)，將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞成熟紅細(xì)胞和固定白細(xì)胞充入改良牛鮑(Neubauer)計數(shù)板，在顯微鏡下計數(shù)一定范圍內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)經(jīng)換算求得每升血液中各種白細(xì)胞的總數(shù)。白細(xì)胞數(shù)=N/4×10×20×106/L【質(zhì)量保證】1．計數(shù)誤差(1)技術(shù)誤差：規(guī)范、熟練的操作，儀器的校正、試劑的標(biāo)準(zhǔn)化和操作人責(zé)任心。1)器材：清潔、干燥，校準(zhǔn)，合格試劑。2)標(biāo)本要求：血液分析儀檢測的標(biāo)本要求及質(zhì)量保證3)加蓋玻片影響：WHO推薦采用“推式”法，此法較“蓋式”法更能保證充液體積的高度為0.10mm。4)充池影響：①充池前充分混勻白細(xì)胞懸液，避免氣泡。②充池應(yīng)避免充液過多、過少、斷續(xù)，避免氣泡及充液后移動蓋玻片。技數(shù)誤差5)計數(shù)原則：計數(shù)壓線細(xì)胞時，數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右。6)計數(shù)室內(nèi)細(xì)胞分布要均勻：白細(xì)胞總數(shù)在正常范圍內(nèi)時，各大方格間的細(xì)胞數(shù)不得相差8個以上。2次重復(fù)計數(shù)誤差不超過l0％。7)有核紅細(xì)胞影響：外周血出現(xiàn)有核紅細(xì)胞，可使白細(xì)胞計數(shù)結(jié)果偏高，須校正。

2.固有誤差：主要是指計數(shù)域誤差(fielderror)。是由于每次充池后血細(xì)胞在計數(shù)室內(nèi)分布不同計數(shù)域誤差變異系數(shù)(CV)可隨計數(shù)的細(xì)胞數(shù)量增多而減小。

白細(xì)胞數(shù)量太少時(<3X109／L)8個大方格或縮小稀釋倍數(shù)白細(xì)胞數(shù)量太多時(>15X109／L)稀釋固有誤差還應(yīng)包括計數(shù)室和吸管的使用次數(shù)，即計數(shù)池誤差(chambererror)和吸管誤差

3)生理狀態(tài)影響：運動、勞動、冷熱水浴、酷熱、嚴(yán)寒等常出現(xiàn)一過性白細(xì)胞增高；一日之內(nèi)白細(xì)胞數(shù)最高值與最低值可相差1倍。另外，吸煙者白細(xì)胞總數(shù)平均較非吸煙者高30％。最好在固定檢查時間。血涂片上WBC密度與WBC數(shù)量關(guān)系血涂片上WBC數(shù)：／HPWBC(×109／L)

2~44~74~67~96~1010~1210~1213~18

①成人：(