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細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性教學(xué)目的與要求:1.細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和人工培養(yǎng)2.細(xì)菌致病性的概念和致病因素2.2.感染的類型
3.細(xì)菌的革蘭氏染色
4.消毒與滅菌2.1.細(xì)菌的毒力2細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性3、PH:一般最適為7.2-7.62、溫度:一般最適溫度為37℃1、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)4、對(duì)氣體要求5、滲透壓:嗜鹽菌需在高濃度的NaCl(3%)生長(zhǎng)一、生長(zhǎng)繁殖的條件①水②碳源③氮源④無(wú)機(jī)鹽⑤生長(zhǎng)因子
①對(duì)O2要求:專性需氧菌微需氧菌兼性厭氧菌專性厭氧菌②對(duì)CO2要求:5%CO23細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性細(xì)菌生長(zhǎng)方式與速度
二分裂法生長(zhǎng)方式:鏈球菌八疊球菌葡萄球菌4細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線
對(duì)數(shù)期遲緩期生長(zhǎng)曲線:以培養(yǎng)時(shí)間為橫座標(biāo),培養(yǎng)物中活菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱座標(biāo),可繪制為生長(zhǎng)曲線,根據(jù)其將細(xì)菌的群體生長(zhǎng)繁殖分為遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰退期。0515202530105.56.08.58.07.57.06.59.0衰退期總菌數(shù)活菌數(shù)細(xì)菌數(shù)的對(duì)數(shù)小時(shí)穩(wěn)定期5細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性
遲緩期:1-4h,菌體增大,代謝活躍,但不分裂繁殖。對(duì)數(shù)期:8-18h又稱指數(shù)期,生長(zhǎng)迅速,此期細(xì)菌的形態(tài)、染色性、生理活動(dòng)等典型,對(duì)外界環(huán)境因素的作用敏感。穩(wěn)定期:有害物增加,死亡數(shù)增加,細(xì)菌的芽胞、外毒素和抗生素等代謝產(chǎn)物在此期產(chǎn)生。衰亡期:死菌數(shù)多于活菌數(shù),形態(tài)明顯改變,生理代謝活動(dòng)趨于停滯。6細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性細(xì)菌人工培養(yǎng)7細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性1、培養(yǎng)細(xì)菌的條件充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)合適的酸堿度合適氣體合適溫度8細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性2、培養(yǎng)基
人工配制而成的,專供微生物生長(zhǎng)繁殖使用的混合營(yíng)養(yǎng)物制品,滅菌后制成9細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性1基礎(chǔ)培養(yǎng)基5553選擇培養(yǎng)基4鑒別培養(yǎng)基2合成培養(yǎng)基5厭氧培養(yǎng)基根據(jù)營(yíng)養(yǎng)和用途分類
10細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性根據(jù)物理性狀分類液體培養(yǎng)基:用于增菌。半固體培養(yǎng)基:檢測(cè)細(xì)菌的動(dòng)力和短期保存菌種。固體培養(yǎng)基:用于分離、純化和保存菌種,做病原學(xué)診斷和產(chǎn)生菌苗用于預(yù)防。11細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性3、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象
固體培養(yǎng)基中菌落R型菌落(S型)
菌苔12細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性
菌落:由一個(gè)細(xì)菌不斷分裂繁殖堆積的肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。分離培養(yǎng):將培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基表面,使原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面散開,形成分離的單個(gè)菌落。
純培養(yǎng):從固體培養(yǎng)基中挑出一菌落,移種到另一培養(yǎng)基中,此時(shí)生長(zhǎng)出來(lái)的細(xì)菌稱純種,這種培養(yǎng)方法為純培養(yǎng)。13細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性表面光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊(新分離細(xì)菌)表面粗糙、干燥、表面皺紋或顆粒狀、邊緣不齊(陳舊菌落)S光滑型菌落R粗糙型菌落粘稠、有光澤、似水珠樣,多見有厚莢膜或豐富粘液層的細(xì)菌M粘液型菌落菌落類型
14細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性液體培養(yǎng)基中
沉淀生長(zhǎng)混濁生長(zhǎng)表面生長(zhǎng)15細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性半固體中
混濁生長(zhǎng)沿穿刺線生長(zhǎng)生長(zhǎng)有鞭毛細(xì)菌無(wú)鞭毛細(xì)菌16細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性二、細(xì)菌的致病性感染:微生物在宿主體內(nèi)的生活中與宿主相互作用并導(dǎo)致不同程度的病理變化的過(guò)程,是微生物與宿主在個(gè)體、細(xì)胞和分子的多層面相互作用的生物學(xué)現(xiàn)象。致病性(病原性):細(xì)菌能引起感染的能力稱為致病性或病原性。細(xì)菌毒力:指細(xì)菌致病能力的強(qiáng)弱程度,是細(xì)菌致病性量的概念。17細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性細(xì)菌的毒力細(xì)菌侵入宿主的數(shù)量細(xì)菌侵入的部位
致病因素侵襲力毒素(一)細(xì)菌的毒力18細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性侵襲力
病原菌突破機(jī)體的皮膚、粘膜生理屏障,在宿主體內(nèi)定居、繁殖和擴(kuò)散蔓延的能力。19細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性黏附與定植侵入繁殖與擴(kuò)散局部擴(kuò)散全身擴(kuò)散20細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性黏附性結(jié)構(gòu)物質(zhì)
包括普通菌毛、莢膜、微莢膜、支原體頂端結(jié)構(gòu),統(tǒng)稱為黏附因子。
黏附素:G—為外膜蛋白(OMP),G+為菌毛和非菌毛黏附素。黏附性結(jié)構(gòu):黏附性物質(zhì):21細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性侵入部位:黏膜上皮細(xì)胞方式:侵襲素——由侵襲基因編碼外膜蛋白22細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性繁殖與擴(kuò)散局部擴(kuò)散全身擴(kuò)散表層擴(kuò)散深層擴(kuò)散23細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性毒素
外毒素釋放:多數(shù)由活菌釋放細(xì)胞外來(lái)源:多見G+菌及某些G-菌
化學(xué)成分:蛋白質(zhì)穩(wěn)定性:不穩(wěn)定,60~80℃30min毒性作用:強(qiáng),表現(xiàn)不一抗原性:強(qiáng),可形成類毒素內(nèi)毒素菌體裂解后釋放多見G-菌
多糖
耐熱,加熱160℃1-2hr弱,表現(xiàn)相似弱,不可形成類毒素24細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性按外毒素對(duì)宿主細(xì)胞的親和性及作用方式分為:
神經(jīng)毒素細(xì)胞毒素腸毒素25細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性內(nèi)毒素引起的臨床表現(xiàn)
發(fā)熱反應(yīng)白細(xì)胞反應(yīng)彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)內(nèi)毒素血癥與內(nèi)毒素休克免疫調(diào)節(jié)作用26細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性細(xì)菌感染的來(lái)源傳播方式與途徑內(nèi)源性感染外源性感染病人、帶菌者、患病與帶菌動(dòng)物條件致病菌、潛伏狀態(tài)存在的致病菌呼吸道感染、消化道感染、創(chuàng)傷感染、血液、人畜共患病的傳播、性傳播(接觸傳播)節(jié)肢動(dòng)物叮咬感染(二)細(xì)菌性感染的方式27細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性感染類型不感染隱性感染
(亞臨床感染)顯性感染毒血癥膿毒血癥內(nèi)毒素血癥敗血癥菌血癥…28細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性
病原體被機(jī)體排除或消滅(機(jī)體免疫力強(qiáng),病原體致病力弱或數(shù)量不足,或侵入部位不當(dāng))。不感染:隱性感染:
機(jī)體不出現(xiàn)或出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀(亞臨床感染)(體內(nèi)可測(cè)到特異性抗體)。顯性感染:
當(dāng)病原菌毒力強(qiáng)、數(shù)量多且宿主機(jī)體免疫功能相對(duì)較弱時(shí),其感染所造成的病理?yè)p傷使宿主出現(xiàn)臨床癥狀或體征。29細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性急性感染:突然發(fā)作,癥狀明顯而急,病程較短(數(shù)日—數(shù)周),病愈后,病原菌從宿主體內(nèi)消失慢性感染:病程緩慢、病程長(zhǎng)(數(shù)月—數(shù)年)、多見于胞內(nèi)寄生菌顯性感染依發(fā)病緩急、病程時(shí)期分:30細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性局部感染:
致病菌侵入宿主體內(nèi)后,局限在一定部位繁殖引起病變的感染類型。全身感染:
感染發(fā)生后,致病菌或其毒性產(chǎn)物向全身播散引起全身性癥狀的感染類型顯性感染依發(fā)病部位性質(zhì)分:
31細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性
致病菌由局部侵入血流,并在其中極少量繁殖,只是短暫的一過(guò)性通過(guò)血循環(huán)到達(dá)體內(nèi)適宜部位再進(jìn)行繁殖而致病。
細(xì)菌不侵入血流,只在局部繁殖,外毒素進(jìn)入血循環(huán),經(jīng)血到達(dá)易感的組織及細(xì)胞,引起特殊的全身癥狀。(白喉、破傷風(fēng))毒血癥:
菌血癥:
32細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性
致病細(xì)菌由局部侵入血流,在其中大量繁殖并產(chǎn)生毒性產(chǎn)物,引起全身性嚴(yán)重中毒的癥狀,如高熱、皮膚和粘膜瘀斑、肝脾腫大等。敗血癥:
膿毒血癥:
化膿性細(xì)菌侵入血流,在其中大量繁殖,并通過(guò)血流擴(kuò)散至宿主體的其他組織或器官,產(chǎn)生新的化膿病灶。33細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性第三節(jié)細(xì)菌染色與消毒滅菌
34細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性一、細(xì)菌染色35細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性[革蘭染色法具體操作]1.標(biāo)本處理:直接涂片取沉渣涂片36細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性[革蘭染色法具體操作]2.涂片制作:直接在玻片上涂布或生理鹽水中涂布自然干燥固定37細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性[革蘭染色法具體操作]3.染色:結(jié)晶紫染色,水洗碘液染色,水洗丙酮酒精脫色,水洗稀釋沙黃復(fù)染,水洗吸干或晾干,鏡檢38細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性G+菌染成紫色,有芽胞的桿菌和絕大多數(shù)的球菌,以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏陽(yáng)性G—
菌染成紅色,弧菌、螺旋體和大多數(shù)致病性的無(wú)芽胞桿菌都呈革蘭氏陰性39細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性①鑒定細(xì)菌②為抗生素的選擇提供依據(jù)③與細(xì)菌的致病性有關(guān),革蘭氏陽(yáng)性菌多以外毒素致病,革蘭氏陰性菌多以內(nèi)毒素致病革蘭染色法臨床意義40細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性二、消毒滅菌41細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性
消毒:殺滅物體上或環(huán)境中病原微生物的方法,并不一定能殺死細(xì)菌芽胞的或非病原微生物。滅菌殺滅物體上所有微生物的方法,包括殺滅細(xì)菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物防腐:體外防止或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。
無(wú)菌:不存在任何活菌的意思。無(wú)菌操作:防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。
抑菌:抑制體內(nèi)、體外細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法42細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性(一)物理消毒滅菌法43細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性消毒滅菌的物理因素?zé)崃椛涑暡V過(guò)干燥低溫44細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性1、熱力滅菌法濕熱80℃經(jīng)5-10min可殺死所有細(xì)菌繁殖體和真菌原理:多數(shù)無(wú)芽胞細(xì)菌經(jīng)55-60℃作用30-60min后死亡分類:干熱滅菌法、濕熱滅菌法45細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性干熱滅菌法焚燒:廢棄物品、動(dòng)物尸體。燒灼:接種環(huán)、試管口滅菌。干烤:160-170℃2h玻璃器皿、瓷器等。紅外線:1-10m波長(zhǎng)最強(qiáng),但只在照射到的物體表面產(chǎn)生熱效,醫(yī)療器械的滅菌。脫水干燥,使大分子變性46細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性濕熱滅菌法巴氏消毒法:殺滅液體中的病原菌或特定微生物,不耐熱成分不被破壞。61.1-62.8℃30min或71.1℃15-30s,一般用于酒類、牛乳等的消毒。煮沸法:100℃5min殺滅繁殖體,1-2h殺滅芽胞,加入2%的碳酸鈉,促進(jìn)芽胞的殺滅,防止金屬器皿生銹,一般用于食具、刀剪、注射器的消毒。47細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性濕熱滅菌比干熱效果好濕熱滅菌時(shí),菌體蛋白質(zhì)較易凝固。濕熱滅菌時(shí),菌體吸收水分,蛋白質(zhì)含水愈多,凝固所需溫度降低。濕熱穿透力比干熱大,可使被滅菌物品內(nèi)部溫度迅速上升。濕熱蒸氣可放出潛熱,這種潛熱迅速提高被滅菌物體的溫度。49細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性2、輻射殺菌法
紫外線殺菌機(jī)理:波長(zhǎng)240~300nm的紫外線具有殺菌作用
干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄紫外線穿透力較弱不耐熱物品的表面消毒特點(diǎn):應(yīng)用范圍:
空氣消毒手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室50細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性殺菌機(jī)理:應(yīng)用范圍:電離輻射包括高速電子、X射線和射線干擾DNA合成,破壞細(xì)胞膜,產(chǎn)生游離基一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品、藥品、生物制品的消毒不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分51細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性微波波長(zhǎng)1-1000mm的電磁波殺菌機(jī)理熱效應(yīng),但不均勻,滅菌效果不可靠應(yīng)用范圍食品、非金屬器械、檢驗(yàn)室用品、無(wú)菌室和病室中食品用具、藥杯及其他物品的消毒。52細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性3、濾過(guò)除菌法
機(jī)制
利用特殊的濾器以去除液體或空氣中的細(xì)菌,以達(dá)到無(wú)菌目的。用途
主要用于不耐高溫?zé)o菌的血清、毒素、抗生素、藥液,以及空氣的除菌。特點(diǎn)僅能除去細(xì)菌,不能去除病毒、支原體、衣原體和有些L型細(xì)菌等。53細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性(二)化學(xué)消毒滅菌法54細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性
常用的化學(xué)消毒劑及防腐劑對(duì)人體組織都有危害,所以只限于外用或環(huán)境消毒。局限于:
1、體表(皮膚、粘膜、傷口的消毒)
2、手術(shù)器械消毒
3、排泄物及周圍環(huán)境的消毒55細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性常用化學(xué)消毒劑殺菌機(jī)理
類別作用機(jī)制
常用種類
酚類蛋白變性,細(xì)胞膜損傷
石炭酸
醇類蛋白變性
乙醇
氧化劑氧化、蛋白沉淀高錳酸鉀
重金屬鹽氧化、蛋白、酶變性
紅汞、硫柳汞
烷化劑蛋白、核酸烷基化
甲醛表面活性劑蛋白變性,細(xì)胞膜損傷
新潔爾滅
染料干擾氧化、抑制繁殖
龍膽紫56細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和致病性消毒劑的應(yīng)用
種類使用濃度
用途石炭酸3~5%地面、器具表面、皮膚消毒乙醇70~75%皮膚、體溫計(jì)消毒高錳酸甲0.1%皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒紅汞2%皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒硫柳汞0.1%皮膚消毒、手術(shù)部位消毒過(guò)氧乙酸0.2~0
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