第三章細菌的生長繁殖與培養(yǎng)課件

第三章細菌的生理7/28/20231第一節(jié)細菌的生長與繁殖

一、細菌的理化性狀（一）細菌的化學組成水：占細胞總重量75%-90%有機物：無機離子：特有成分：碳、氫、氮、氧、磷、硫等鉀、鈉、鐵、鎂、鈣等肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等7/28/20232光學性質

表面積帶電現象半透性滲透壓半透明體積小、表面積大革蘭陽性菌pI2~3革蘭陰性菌pI4~5細胞壁、膜有半透性革蘭陽性菌20~25大氣壓革蘭陰性菌5~6大氣壓中性環(huán)境帶負電荷（二）細菌的物理性狀7/28/20233細菌的營養(yǎng)物質

水：營養(yǎng)物質必須先溶于水，營養(yǎng)的吸收與代謝均需有水才能進行。氮源：來源于氨基酸、蛋白質等，合成菌體成分。碳源：來源于糖類，提供能量。無機鹽：鉀、鈉、鈣、鎂、磷、硫等。生長因子：生長必需但自身不能合成的物質，如維生素、氨基酸等。7/28/20234細菌攝取營養(yǎng)物質的機制被動擴散主動轉運系統(tǒng)

1.依賴于周漿間隙結合蛋白的轉運系統(tǒng)2.化學滲透驅使轉運系統(tǒng)3.基團轉移

7/28/20235營養(yǎng)物質

人工培養(yǎng)酸堿度

多數病原菌最適pH為7.2~7.6溫度

多數病原菌生長最適溫度為37℃氣體

據代謝時對分子氧的需要與否，分專性需氧菌、微需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌滲透壓

一般培養(yǎng)基滲透壓適于大多數細菌。

一影響細菌生長繁殖的條件三、細菌的生長與繁殖7/28/20236

為什么專性厭氧菌在有氧環(huán)境中不能生存？1.缺乏氧化還原電勢高的呼吸酶有氧培養(yǎng)基Eh300mV

無氧培養(yǎng)基Eh＜120mV

厭氧菌呼吸酶Eh120mV2.缺乏分解有毒氧基團（O2-，H2O2)的酶

SOD、過氧化氫酶、過氧化物酶、觸酶7/28/20237細菌的繁殖方式與速度

*1.細菌個體的生長繁殖方式

——二分裂方式

2.細菌的繁殖速度

-----多數細菌20-30分

鐘分裂一次

*

3.細菌群體的繁殖規(guī)律

——生長曲線

7/28/20238①②③④⑤遲緩期：適應階段對數期：對抗生素敏感，細菌鑒定選此期穩(wěn)定期：代謝產物形成（如外毒素、抗生素、芽胞等）衰亡期：菌體細胞呈現多種形態(tài)7/28/20239第二節(jié)細菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)基*概念：由人工方法經滅菌后制成，專供微生物生長使用的混合營養(yǎng)制品。一般PH為7.2-7.6。*分類：基礎培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基7/28/202310二、

細菌在培養(yǎng)基中的生長現象（1）液體培養(yǎng)基中生長現象

混濁生長--大多數細菌

沉淀生長—厭氧菌、鏈狀生長的細菌

菌膜生長--專性需氧菌，如結核桿菌、枯草桿菌7/28/202311液體培養(yǎng)基中沉淀生長混濁生長表面生長7/28/202312（2）在半固體培養(yǎng)基中生長現象

穿刺接種有鞭毛細菌：擴散生長，周圍渾濁

無鞭毛細菌：沿穿刺線生長，周圍透明7/28/202313半固體培養(yǎng)基混濁生長沿穿刺線生長有鞭毛細菌無鞭毛細菌7/28/202314（3）在固體培養(yǎng)基中的生長現象

菌落：細菌在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)一定時間后，由單個細菌生長繁殖形成肉眼可見的細菌集團。

7/28/202315菌落分類

1光滑型

2粗糙型

3粘液型7/28/202316固體培養(yǎng)基用于

純培養(yǎng)菌落計數7/28/202317三.人工培養(yǎng)細菌的意義和應用

（一)醫(yī)學：（1）傳染病的診斷和治療

病原菌的分離鑒定，藥物敏感試驗（2）細菌的鑒定與研究細菌生理、遺傳變異、致病性、耐藥性等（3）生物制品的制備

菌苗、類毒素、抗毒素、診斷血清等

(二)工農業(yè)生產：抗生素、氨基酸、酒（三）基因工程應用：疫苗、胰島素7/28/202318第三節(jié)細菌的代謝及其意義7/28/202319一.分解代謝產物和生化反應

各種細菌有不同的酶，對營養(yǎng)物質分解能力不同代謝產物各異細菌對糖、蛋白質的分解能力的不同，因而代謝產物各異，利用生物化學方法鑒別不同細菌細菌的生化反應7/28/202320

分為：1.對糖的分解

2.對蛋白質的分解細菌的新陳代謝包括分解代謝與合成代謝營養(yǎng)物質分解和轉化為能量的過程-----分解代謝所產生的能量用于細胞組分的合成-----合成代謝（一）細菌對糖和蛋白質的分解7/28/202321

（二）細菌的生化反應（1）糖發(fā)酵試驗大腸埃希菌分解乳糖，產酸；傷寒沙門菌不分解乳糖。7/28/202322(2)吲哚試驗大腸桿菌變形桿菌靛基質

紅色的玫瑰吲哚霍亂弧菌色氨酸靛基質試劑Kovacs試劑陰性陽性7/28/202323(3)甲基紅試驗大腸桿菌丙酮酸PH≤4.5紅色(+)產氣桿菌丙酮酸乙酰甲基甲醇葡萄糖葡萄糖++脫羧甲基紅甲基紅PH＞5.4橘黃色(-)陰性陽性7/28/202324(4)V-P試驗:大腸桿菌丙酮酸終止產氣桿菌丙酮酸乙酰甲基甲醇葡萄糖++脫羧堿性環(huán)境二乙酰紅色化合物胍基化合物葡萄糖陽性陰性7/28/202325

(5)枸櫞酸鹽利用試驗產氣桿菌枸櫞酸鹽銨鹽碳酸鹽氨培養(yǎng)基變堿性溴麝香草酚藍淡綠為深藍陽性陰性7/28/202326（6）尿素分解試驗

變形桿菌有尿素酶，可分解尿素產生氨（7）硫化氫試驗

變形桿菌、乙型副傷寒桿菌分解胱氨酸產生硫化氫7/28/202327IMViC試驗I:吲哚試驗M:甲基紅試驗Vi:VP試驗C:枸櫞酸鹽利用實驗常用于鑒定腸道桿菌，大腸埃希菌：++--產氣腸桿菌：--++7/28/202328二.細菌的合成代謝產物及其意義

（1）熱原質細菌合成的一種注入人體內引起發(fā)熱反應的物質。大多數是G-菌的脂多糖。

首先，熱原質耐高溫，高壓蒸汽滅菌不能破壞（121℃，20min），250℃

高溫干烤才能破壞

其次，使用蒸餾的方法。7/28/202329（2）毒素和侵襲性酶內毒素：G-菌的脂多糖外毒素：G+菌和少數G-菌產生的蛋白質侵襲性酶：血漿凝固酶（金葡菌）透明質酸酶（鏈球菌）損傷機體組織，促進細菌侵襲和擴散7/28/202330（3）色素：金葡菌--金黃色色素（脂溶性）銅綠假單胞菌--綠色