浮游植物定量課件

浮游植物的定量

(10月22日)浮游生物定量的步驟。取水樣1000毫升→加固定液→濃縮至50毫升→取濃縮后的水樣0.1毫升→置于0.1毫升計(jì)數(shù)框內(nèi)→壓上蓋玻片→顯微鏡下→先低倍后高倍→用400倍～600倍觀察→分類記數(shù)（每個(gè)樣本計(jì)數(shù)兩片取其平均值）→推算出原水樣中的生物量（1）采樣點(diǎn)和采樣層次由于水面大小、水深、水流等條件不同，不同水域的采集點(diǎn)的選擇也有差別。采樣點(diǎn)設(shè)置的原則：采樣點(diǎn)在平面上的分布要有代表性。①池塘樣點(diǎn)可設(shè)在距岸邊1米處。水深﹤2米時(shí)采中層水樣或距表層0.5米處；水深﹥2米時(shí)，最好采上、中、下層水樣。亞表層：水下20厘米中層：水體中間部分下層：離底20厘米樣點(diǎn)可設(shè)在上、中、下游上游：設(shè)10個(gè)點(diǎn)（亞表層或中層）中游：水在2-3米深時(shí)設(shè)一個(gè)點(diǎn)，采2個(gè)樣（亞表層、中層）下游：設(shè)2-3個(gè)樣點(diǎn)。中心點(diǎn)3個(gè)樣（上、中、下層），兩側(cè)點(diǎn)各一個(gè)樣②河流

中心區(qū)設(shè)一點(diǎn)，進(jìn)水口和出水口也應(yīng)設(shè)點(diǎn)。水深﹤2米者，可于采樣點(diǎn)水下0.5米處采水，水深2米～10米以內(nèi)，應(yīng)于距底0.5米處另采一個(gè)水樣，水深﹥10米時(shí)，應(yīng)于中層增采一個(gè)水樣。③水庫(kù)及湖泊（2）采水量及采樣次數(shù)卡蓋式采水器不銹鋼采水器有機(jī)玻璃采水器采樣次數(shù)可多可少，有條件時(shí)可逐月采樣一次，一般情況可每季采樣一次，最低限度應(yīng)在春季和夏末秋初各采樣一次。養(yǎng)殖池可隨時(shí)進(jìn)行采樣。每一采樣點(diǎn)應(yīng)采水1000毫升，（1）系一般性調(diào)查，可將各層采水等量混合，取1000毫升混合水樣固定；（2）分層采水，分別計(jì)數(shù)后取平均值。分層采水可以了解每一采樣點(diǎn)各層水中浮游植物的數(shù)量和種類。水樣應(yīng)立即加入15毫升碘液（即魯哥氏液）固定。魯哥氏液6克的碘化鉀溶解于20毫升的水中，完全溶解后加入4克的碘，溶解后，定容至100毫升。（3）沉淀與濃縮凡以碘液固定的水樣瓶塞要擰緊，還要再加入2％～4％的甲醛固定液以利保存。定量水樣應(yīng)放入1000毫升分液漏斗中。沉淀器應(yīng)置于平穩(wěn)處，避免震動(dòng)。水樣傾入2小時(shí)后應(yīng)將沉淀器輕輕旋轉(zhuǎn)一會(huì)，以減少藻類附著在器壁上。靜置24小時(shí)～36小時(shí)。用內(nèi)徑為30毫米的橡皮乳膠管，接上橡皮球，利用虹吸法將沉淀上層清液緩慢吸出（切不可攪動(dòng)底部，萬(wàn)一動(dòng)了應(yīng)重新靜置沉淀）。為不使漂浮水面的某些微小生物等進(jìn)入虹吸管內(nèi)，管口應(yīng)始終低于水面，虹吸時(shí)流速流量不可過(guò)大，吸至澄清液1/3時(shí)，應(yīng)控制流速流量，使其成滴緩慢流下為宜。10月24日剩下30毫升沉淀物，流入50毫升的定量瓶中以備計(jì)數(shù)。再用上述虹吸出來(lái)的“上清液”少許，沖洗三次沉淀器，沖洗液也轉(zhuǎn)移到比色瓶中。（4）計(jì)數(shù)將濃縮沉淀后水樣充分搖均（平搖）后吸出0.1毫升置于0.1毫升計(jì)數(shù)框內(nèi)（表面積最好20×20毫米）在400倍或600倍顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)要求每片大約計(jì)算100個(gè)視野但視野數(shù)可按浮游植物多少，而酌情增減，如果平均每個(gè)視野有十幾個(gè)時(shí)，數(shù)50個(gè)視野就可以了，如果平均每個(gè)視野有5個(gè)～6個(gè)時(shí)就要數(shù)100個(gè)視野，如平均每個(gè)視野不超過(guò)1個(gè)～2個(gè)時(shí)，要數(shù)200個(gè)視野以上。每片計(jì)數(shù)300個(gè)（低密度時(shí)）-500個(gè)（高密度時(shí)）數(shù)橫條，最少不少于5條，具體可自行掌握總之不論數(shù)視野還是數(shù)橫條，每片計(jì)數(shù)300-500個(gè)每瓶標(biāo)本計(jì)數(shù)二片，取其平均值。同一標(biāo)本的兩片計(jì)數(shù)結(jié)果與其均數(shù)之差如果不大于其均數(shù)的10%，這兩個(gè)相近的值的均數(shù)視為計(jì)數(shù)結(jié)果。同一樣品的兩片計(jì)算結(jié)果和平均數(shù)之差如大于其均數(shù)的10%，還必須計(jì)數(shù)第三片，上述三片計(jì)數(shù)值中，兩個(gè)相近的值與其均數(shù)之差距如果不大于其均數(shù)的10%，這兩個(gè)相近的值的均數(shù)即可視為計(jì)數(shù)結(jié)果。計(jì)數(shù)時(shí)優(yōu)勢(shì)種類盡可能鑒別到種，其余鑒別到屬。計(jì)數(shù)中的浮游植物的數(shù)量,最好用細(xì)胞數(shù)表示。對(duì)不易用細(xì)胞數(shù)表示的種類可計(jì)算其群體或絲狀體數(shù)。計(jì)數(shù)具體要求A、校正計(jì)數(shù)框容積，B、定量用的蓋玻片應(yīng)以堿水或肥皂水洗凈備用，用前可浸于70％酒精中，用時(shí)取出以細(xì)絹拭干。C、滴取樣品以后最好用液體石臘封好計(jì)數(shù)框四周，以防計(jì)數(shù)過(guò)程中干燥。D、以目微尺測(cè)所用顯微鏡一定倍數(shù)下的視野直經(jīng)。E、選好與計(jì)數(shù)框同樣容積的吸管備用。F、定量時(shí)應(yīng)將濃縮標(biāo)本水樣充分搖勻，快吸快滴。G、加上蓋玻片后不應(yīng)有氣泡出現(xiàn)。H、計(jì)數(shù)后的定量樣品應(yīng)保存下來(lái)。16×40=640放大倍數(shù)在高倍物鏡下臺(tái)微尺的刻度線顯得很粗，而且目微尺的刻度與它相比是很細(xì)的，故校正時(shí)，目微尺左端的刻線應(yīng)放在臺(tái)微尺左端刻線的左旁邊緣。一升水中的某種浮游植物的數(shù)量(N)可用下列公式計(jì)算：N=Cs×V×Pn

Fs×FnU式中：Cs一一計(jì)數(shù)框面積（毫米2）。

Fs一一每個(gè)視野的面積（毫米2）。

Fn一一計(jì)數(shù)過(guò)的視野數(shù)。

V一一升水樣經(jīng)沉淀濃縮后的體積（毫升）。

U一一計(jì)數(shù)框的體積（毫升）。

Pn一一每片通過(guò)計(jì)數(shù)實(shí)際數(shù)出的某一種浮游植物的個(gè)數(shù)。如果計(jì)數(shù)、顯微鏡固定不變，F(xiàn)n,V,U亦固定不變，公式中：

Cs×V

Fs×FnU用常數(shù)K代替，上述公式可簡(jiǎn)化為：N=K·Pn（5）生物量的換算因?yàn)楦∮沃参镏胁煌N類的個(gè)體大小相差較懸殊，用個(gè)體數(shù)或細(xì)胞數(shù)都不能反映水體豐欠的真實(shí)情況，且浮游植物的個(gè)體極小，除特殊情況外無(wú)法直接稱重，一般按體積來(lái)?yè)Q算。由于浮游植物大都懸浮于水中生活，其比重應(yīng)近于所在水體水的比重即近于1。因此體積可換算為質(zhì)量：1毫升體重相當(dāng)于1克質(zhì)量109微米3≈1毫克濕重（鮮藻重）球形、園盤形、園錐形、帶形等可按求體積公式計(jì)算。纖維形、多角形、新月形以及其他種種形狀可分割為幾個(gè)部分計(jì)算。由于在不同環(huán)境中生長(zhǎng)的同一種藻類的細(xì)胞體積差異很大，套用所謂的《標(biāo)準(zhǔn)生物量表》提供的數(shù)值計(jì)算某一具體水體的生物