微生物30章-其他病毒檢驗(yàn)課件

第三十章其他病毒檢驗(yàn)第三十章其他病毒檢驗(yàn)?zāi)夸浀谝还?jié)流行性乙型腦炎病毒第二節(jié)森林腦炎病毒第三節(jié)登革病毒第四節(jié)出血熱病毒第五節(jié)狂犬病病毒第六節(jié)人乳頭瘤病毒目錄第一節(jié)流行性乙型腦炎病毒第一節(jié)流行性乙型腦炎病毒第一節(jié)流行性乙型腦炎病毒流行性乙型腦炎病毒生物學(xué)特性及傳播途徑流行性乙型腦炎病毒微生物學(xué)檢驗(yàn)方法重點(diǎn)提示流行性乙型腦炎病毒生物學(xué)特性及傳播途徑重點(diǎn)提示（一）傳染源與傳播媒介傳染源：家畜、家禽傳播媒介：三帶喙庫蚊、伊蚊、按蚊傳播環(huán)節(jié)：豬→蚊→豬易感人群：人群對(duì)乙腦病毒普遍易感通常流行區(qū)以10歲以下的兒童發(fā)病較多

一、臨床意義（一）傳染源與傳播媒介一、臨床意義（二）流行特征1．乙腦僅分布在亞洲，80～90%的病例集中在7、8、9三個(gè)月2．乙腦呈高度散發(fā)性一、臨床意義（二）流行特征一、臨床意義（三）致病機(jī)制一、臨床意義（三）致病機(jī)制一、臨床意義1．單正鏈RNA，有包膜，二十面立體對(duì)稱核衣殼2．三種結(jié)構(gòu)蛋白E鑲嵌在包膜上的糖蛋白M位于包膜的內(nèi)面C為衣殼蛋白3．抗原性穩(wěn)定二、生物學(xué)特性1．單正鏈RNA，有包膜，二十面立體對(duì)稱二、生物學(xué)特性流行性乙型腦炎病毒顆粒二、生物學(xué)特性流行性乙型腦炎病毒顆粒二、生物學(xué)特性三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本采集與處理采集發(fā)病早期患者血液、腦脊液或尸檢腦組織，蚊等（二）標(biāo)本直接檢查

1．抗原檢測

2．核酸檢測三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本采集與處理(三）分離培養(yǎng)與鑒定C6/36、Vero及BHK21等易感細(xì)胞，C6/36最常用（四）抗體檢測

免疫熒光技術(shù)、ELISA法等檢測乙腦病毒抗原或IgM和IgG抗體三、微生物學(xué)檢驗(yàn)(三）分離培養(yǎng)與鑒定三、微生物學(xué)檢驗(yàn)第二節(jié)森林腦炎病毒第二節(jié)森林腦炎病毒重點(diǎn)提示森林腦炎病毒生物學(xué)特性森林腦炎病毒臨床意義重點(diǎn)提示森林腦炎病毒生物學(xué)特性1．森林腦炎病毒是森林腦炎的病原體2．蜱是傳播媒介也是儲(chǔ)存宿主3．多數(shù)感染者為隱性感染，少數(shù)經(jīng)10～14d潛伏期后，出現(xiàn)高熱、頭痛、腦膜刺激征、昏迷等癥狀4．病死率約20%～30%5．病后可獲持久免疫力一、臨床意義1．森林腦炎病毒是森林腦炎的病原體一、臨床意義1．森林腦炎病毒呈球形，直徑20～30nm，核心為單正鏈RNA，核衣殼為20面體立體對(duì)稱，有包膜2．動(dòng)物感染范圍較廣，以小鼠最為敏感3．在原代雞胚細(xì)胞和傳代地鼠腎細(xì)胞中生長并引起細(xì)胞病變二、生物學(xué)特性1．森林腦炎病毒呈球形，直徑20～30nm，核心為單正鏈RN三、微生物學(xué)檢驗(yàn)1．森林腦炎病毒檢測方法與乙腦病毒相似2．病毒分離只用于死亡病例的確診3．可用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測病人早期和恢復(fù)期雙份血清抗體，效價(jià)增長4倍或4倍以上有臨床意義三、微生物學(xué)檢驗(yàn)1．森林腦炎病毒檢測方法與乙腦病毒相似第三節(jié)登革病毒第三節(jié)登革病毒重點(diǎn)提示登革病毒微生物學(xué)檢驗(yàn)方法登革病毒的生物學(xué)特性、傳播途徑重點(diǎn)提示登革病毒微生物學(xué)檢驗(yàn)方法一、臨床意義（一）傳染源與傳播媒介傳染源：患者和隱性感染者傳播媒介：伊蚊

一、臨床意義（一）傳染源與傳播媒介一、臨床意義（二）流行特征1．地方性伊蚊孳生條件及人口密度2．季節(jié)性與伊蚊密度、雨量相關(guān)3．突然性流行多突然發(fā)生4．傳播迅速一、臨床意義（二）流行特征一、臨床意義（三）致病機(jī)制一、臨床意義（三）致病機(jī)制一、臨床意義（四）臨床表現(xiàn)潛伏期5～8天，按世界衛(wèi)生組織標(biāo)準(zhǔn)分為：1．登革熱發(fā)熱骨、關(guān)節(jié)疼痛、皮疹、出血、全身中毒樣癥狀（輕型、典型、重型）2．登革出血熱出血傾向嚴(yán)重，常有兩個(gè)以上器官大量出血，出血量大于100ml3．登革休克綜合征在病程中或退熱后，病情突然加重，有明顯出血傾向伴周圍循環(huán)衰竭一、臨床意義（四）臨床表現(xiàn)登革出血熱(Denguehemorrhagicfever)黑斑蚊皮下出血登革出血熱(Denguehemorrhagicfever1．登革病毒呈球形，直徑為37～50nm，核心為單正鏈RNA，核衣殼為20面體立體對(duì)稱，有包膜2．三種結(jié)構(gòu)蛋白：衣殼蛋白（C蛋白）、膜蛋白（M蛋白）和包膜蛋白（E蛋白）3．有4個(gè)血清型，型間抗原有交叉二、生物學(xué)特性1．登革病毒呈球形，直徑為37～50nm，核心為單正鏈RNA三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本采集：病人采集血清、血漿等標(biāo)本；死亡患者采集肝臟、淋巴結(jié)等標(biāo)本（二）標(biāo)本直接檢查

1．抗原檢測

2．核酸檢測

三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本采集：病人采集血清、血漿等標(biāo)本；死三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（三）病毒分離培養(yǎng)與鑒定細(xì)胞培養(yǎng)：常用白紋伊蚊C6/36、Vero細(xì)胞動(dòng)物接種：選用1～3日齡的小白鼠，腦內(nèi)和腹腔聯(lián)合接種（四）抗體檢測常用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、ELISA法、免疫熒光法等方法檢測抗體

三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（三）病毒分離培養(yǎng)與鑒定第四節(jié)出血熱病毒第四節(jié)出血熱病毒重點(diǎn)提示漢坦病毒的分類、臨床意義漢坦病毒的生物學(xué)特性及微生物學(xué)檢驗(yàn)方法重點(diǎn)提示漢坦病毒的分類、臨床意義出血熱病毒（hemorrhagicfevervirus）是由節(jié)肢動(dòng)物或嚙齒類動(dòng)物傳播，引起病毒性出血熱（hemorrhagicfever）的一大類病毒的統(tǒng)稱，分別屬于5個(gè)病毒科。在我國已發(fā)現(xiàn)的有漢坦病毒、新疆出血熱病毒、登革病毒及基孔肯雅熱病毒出血熱病毒（hemorrhagicfevervi一、漢坦病毒病毒種原始宿主人類疾病地理分布漢灘病毒(Hantaanvirus)黑線姬鼠HFRS亞洲東部、歐洲東部多不拉伐-貝爾格萊德病毒(Dobrava-黃頸姬鼠HFRS歐洲東部（巴爾干半島）Belgradevirus)漢城病毒(Seoulvirus)褐家鼠HFRS亞洲東部、世界各地海港普馬拉病毒(Puumalavirus)棕背鼠HFRS歐洲北部、東部辛諾柏病毒(SinNombrevirus)鹿鼠HPS美國西南部、西部希望山病毒(ProspectHillvirus)田鼠不祥美國漢坦病毒屬種型別一、漢坦病毒病毒種原始宿主人類疾病地理分布漢灘病毒(Hant腎綜合征出血熱（HFRS）患者經(jīng)1~3周潛伏期，出現(xiàn)以高熱、出血和腎損害為主的綜合征。典型的HFRS可以分為：發(fā)熱期、低血壓休克期、少尿期、多尿期和恢復(fù)期（一）臨床意義腎綜合征出血熱（HFRS）患者經(jīng)1~3周潛伏期，1．漢坦病毒為分節(jié)段單負(fù)鏈RNA病毒，病毒顆粒呈球形或橢圓形，平均直徑120nm，核衣殼外層有雙層脂質(zhì)包膜2．病毒可在人肺傳代細(xì)胞（A549）、非洲綠猴腎細(xì)胞（VeroE6）、人胚肺二倍體細(xì)胞（2BS）及地鼠腎等細(xì)胞中生長，病毒增殖緩慢，一般不引起明顯的CPE（二）生物學(xué)特性1．漢坦病毒為分節(jié)段單負(fù)鏈RNA病毒，病毒顆粒呈球形或橢圓形3．動(dòng)物以黑線姬鼠、小鼠、乳鼠等易感，實(shí)驗(yàn)感染后在鼠肺、腎等組織中可檢出大量病毒4．病毒對(duì)脂溶劑乙醚、氯仿等敏感，對(duì)酸、熱的抵抗力弱，在60℃經(jīng)1h可被滅活。在4~20℃相對(duì)穩(wěn)定，可較長時(shí)間維持傳染性（二）生物學(xué)特性3．動(dòng)物以黑線姬鼠、小鼠、乳鼠等易感，實(shí)驗(yàn)感染后在鼠肺、腎等（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)1．標(biāo)本采集無菌采集患者血液、尸體標(biāo)本或疫區(qū)鼠肺標(biāo)本2．標(biāo)本直接檢查（1）抗原檢測（2）核酸檢測3．病毒分離培養(yǎng)與鑒定4．抗體檢測是最常用的檢測方法（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)1．標(biāo)本采集無菌采集患者血液、尸體標(biāo)本或二、新疆出血熱病毒在分類上屬于布尼雅病毒科、內(nèi)羅病毒屬的克里米亞-剛果出血熱病毒血清組成員。在我國因是從新疆塔里木盆地出血熱病人的血液、尸體的肝、脾、腎，以及在疫區(qū)捕獲的硬蜱中分離獲得，故得名新疆出血熱病毒二、新疆出血熱病毒在分類上屬于布尼雅病毒科、內(nèi)第五節(jié)狂犬病病毒第五節(jié)狂犬病病毒重點(diǎn)提示狂犬病病毒臨床意義狂犬病病毒的生物學(xué)特性重點(diǎn)提示狂犬病病毒臨床意義屬彈狀病毒科（Rhabdoviridae），狂犬病病毒屬（Lyssavirus）的一種嗜神經(jīng)性病毒，通過動(dòng)物咬傷、抓傷感染而引起狂犬病狂犬病病毒電鏡照片（×200000）

屬彈狀病毒科（Rhabdoviridae），狂犬1．人類狂犬病大多是由病犬咬傷所致，也可因貓、狼、帶毒動(dòng)物咬傷而致感染2．潛伏期一般為1～3個(gè)月，但亦有短至一周或長達(dá)數(shù)年的。潛伏期的長短取決于被咬傷部位距頭部的距離、傷口深淺及感染的病毒數(shù)量，傷口距頭部越近、傷口越深、傷口內(nèi)感染的病毒量越大，潛伏期越短

一、臨床意義1．人類狂犬病大多是由病犬咬傷所致，也可因貓、狼、帶毒動(dòng)物咬3．致病機(jī)制：

沿感覺神經(jīng)神經(jīng)軸索上行首先在傷口局部肌肉細(xì)胞內(nèi)增殖中樞神經(jīng)系統(tǒng)增殖并引起損傷沿傳出神經(jīng)擴(kuò)散至唾液腺及其它組織一、臨床意義3．致病機(jī)制：沿感覺神經(jīng)神經(jīng)軸索上行首先在傷口局部肌肉細(xì)胞內(nèi)

一、臨床意義一、臨床意義1．外形呈子彈狀，一端圓尖，另一端平直而凹進(jìn)，長約100～300nm，直徑為75nm。螺旋對(duì)稱，有包膜及刺突2．編碼五種蛋白核蛋白質(zhì)（nucleoprotein，N蛋白）包膜表面糖蛋白（glycoprotein，G蛋白）病毒衣殼基質(zhì)蛋白(matrixprotein1，M1)包膜基質(zhì)蛋白(matrixprotein2，M2)轉(zhuǎn)錄酶蛋白（largeprotein，L蛋白）二、生物學(xué)特性1．外形呈子彈狀，一端圓尖，另一端平直而凹進(jìn)，長約100～3二、生物學(xué)特性二、生物學(xué)特性人狂犬病根據(jù)咬傷史及典型癥狀即可診斷（一）標(biāo)本采集無菌采集患者唾液、腦脊液、尿沉渣、角膜印片、皮膚切片（含毛束）及血清（二）標(biāo)本直接檢查

1．顯微鏡檢查

2．抗原檢測

3．核酸檢測（三）抗體檢測（四）捕捉動(dòng)物觀察三、微生物學(xué)檢驗(yàn)人狂犬病根據(jù)咬傷史及典型癥狀即可診斷三、微生物學(xué)檢驗(yàn)三、微生物學(xué)檢驗(yàn)

神經(jīng)細(xì)胞中的狂犬病毒（綠色熒光）三、微生物學(xué)檢驗(yàn)神經(jīng)細(xì)胞中的狂犬病毒（綠色熒光）

Negribody三、微生物學(xué)檢驗(yàn)Negribody三、微生物學(xué)檢驗(yàn)第六節(jié)人乳頭瘤病毒第六節(jié)人乳頭瘤病毒重點(diǎn)提示人乳頭瘤病毒臨床意義人乳頭瘤病毒的生物學(xué)特性、微生物學(xué)檢查方法重點(diǎn)提示人乳頭瘤病毒臨床意義人乳頭瘤病毒（humanpapillomavirus,PHV）屬于乳多空病毒科（Papovaviridae）乳頭瘤病毒屬（Papillomavirus）。目前已發(fā)現(xiàn)100多個(gè)型別，各型之間的DNA同源性小于50%人乳頭瘤病毒（humanpapilloma一、臨床意義1．尖銳濕疣(CA)，又稱生殖器疣、性病疣，是由人乳頭瘤病毒（HPV-6、11型等）引起的一種性傳播性疾病，占我國性病第二位2．宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)由高危型HPV(16、18型)感染一、臨床意義1．尖銳濕疣(CA)，又稱生殖器疣、性病疣，是由一、臨床意義HPV型別相關(guān)疾病皮膚1、4跖疣2、4、26、27、29、54尋常疣3、10、28、41扁平疣7、40屠夫?qū)こｐ?、8、9、12、14、15、19~25、36疣狀表皮增生異常黏膜6、11尖銳濕疣6、11喉乳頭瘤、口腔乳頭瘤16、18宮頸上皮內(nèi)瘤及宮頸癌密切相關(guān)31、33、35、45、51、52、56、58宮頸上皮內(nèi)瘤及宮頸癌中度相關(guān)HPV主要型別及所致人類疾病一、臨床意義HPV型別相關(guān)疾病皮膚1、4跖疣2、4、26、21．HPV呈球型，直徑為52~55nm，20面體立體對(duì)稱，無包膜2．HPV的復(fù)制增殖與宿主上皮細(xì)胞分化階段相關(guān)。這種獨(dú)特的增殖方式使HPV的組織培養(yǎng)至今尚未成功二、生物學(xué)特性1．HPV呈球型，直徑為52~55nm，20面體立體對(duì)稱，無三、微生物學(xué)檢驗(yàn)根據(jù)病史及典型臨床表現(xiàn)即可作出診斷。但對(duì)于不典型者，需進(jìn)行微生物學(xué)檢驗(yàn)進(jìn)行確診（一）標(biāo)本采集無菌采集患者局部皮膚黏膜病變組織或血清（二）標(biāo)本直接檢查1．抗原檢測2．核酸檢測（三）抗體檢測三、微生物學(xué)檢驗(yàn)根據(jù)病史及典型臨床表現(xiàn)即可作出診斷。但對(duì)于不本章小結(jié)1．流行性乙型腦炎病毒是流行性乙型腦炎的病原體，主要通過三帶喙庫蚊傳播。C6/36是最常用的病毒分離培養(yǎng)細(xì)胞2．森林腦炎病毒通過森林硬蜱傳播，主要侵犯人和動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引發(fā)