5章-農(nóng)藥、獸藥殘留速測技術(shù)課件

第五章農(nóng)藥、獸藥殘留速測技術(shù)第五章農(nóng)藥中毒事件回顧海南“毒豇豆”事件2010年1月，海南豇豆在武漢白沙洲農(nóng)副產(chǎn)品市場連續(xù)三次被檢測出含有禁用農(nóng)藥水胺硫磷。隨后在武漢、上海、鄭州、合肥、杭州、廣州等11個城市檢測出海南豇豆農(nóng)藥殘留超標(biāo)。僅武漢銷毀毒豇豆3596.9公斤

水胺硫磷，是一種高毒性農(nóng)藥，早在2002年，農(nóng)業(yè)部已將它例如黑名單中，禁止在水果蔬菜、中草藥植物上使用。它能經(jīng)由食道、皮膚和呼吸道，引起人體中毒。農(nóng)藥中毒事件回顧海南“毒豇豆”事件2010年1月，海南豇豆在農(nóng)藥中毒事件回顧青島“毒韭菜”事件2010年4月，青島一些醫(yī)院陸續(xù)接到9名食用韭菜后中毒的患者，他們都是食用韭菜之后出現(xiàn)了頭疼、惡心、腹瀉等癥狀，經(jīng)醫(yī)院檢查屬于有機磷中毒，也就是說韭菜上的殘余農(nóng)藥嚴(yán)重超標(biāo)導(dǎo)致中毒。隨后，檢出農(nóng)藥殘留超標(biāo)韭菜1930公斤。農(nóng)藥中毒事件回顧青島“毒韭菜”事件2010年4月，青島一些醫(yī)農(nóng)藥中毒事件回顧張裕紅酒農(nóng)藥超標(biāo)事件2012年8月7日某媒體報道：記者將三家國內(nèi)葡萄酒上市公司的十款葡萄酒送國家食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心檢測，均檢出多菌靈或甲霜靈農(nóng)藥殘留，而張裕產(chǎn)品殘留值超過另兩家。多菌靈為美國禁用的農(nóng)藥，有導(dǎo)致肝癌的風(fēng)險。張裕A股價直奔跌停，最終大跌9.83%農(nóng)藥中毒事件回顧張裕紅酒農(nóng)藥超標(biāo)事件2012年8月7日某媒體2001年，杭州的空心菜有機磷中毒事件。2003年，南京蔬菜有機磷殘留導(dǎo)致中毒的事件。2007年，福建大田發(fā)生有機磷污染水源導(dǎo)致中毒事件。2008年1月，日本發(fā)生餃子中毒事件，該餃子被化驗出含甲胺磷殘留……2008年1月9日，中國決定停止甲胺磷、對硫磷等五種高毒農(nóng)藥的生產(chǎn)、流通和使用。

2011年3月，河南毒韭菜事件—有機磷中毒(超標(biāo)農(nóng)藥殘留主要是甲拌磷)2001年，杭州的空心菜有機磷中毒事件。6一、前言

隨著人們環(huán)境意識的不斷加強，由農(nóng)藥引起的食品安全問題也越來越受到人們的關(guān)注。為了保障消費者的安全和健康，提高農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全水平，增強農(nóng)業(yè)產(chǎn)品的國際競爭力，我國政府決定加強農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的監(jiān)控，建立健全農(nóng)藥殘留的檢測體系，實施對蔬菜、瓜果、茶葉生產(chǎn)全過程的農(nóng)藥監(jiān)控，從源頭抓起，加強農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)地檢測，把住農(nóng)產(chǎn)品的市場準(zhǔn)入關(guān)。6一、前言隨著人們環(huán)境意識的不斷加強，由農(nóng)藥引起7

（一）農(nóng)藥概念

農(nóng)藥(pesticides)

是指用于預(yù)防、消滅或者控制危害農(nóng)業(yè)、林業(yè)的病、蟲、草及其他有害生物，以及有目的地調(diào)節(jié)植物、昆蟲生長的的化學(xué)合成或者來源于生物、其他天然物質(zhì)的一種物質(zhì)或者幾種物質(zhì)的混合物及其制劑。現(xiàn)在農(nóng)藥不僅應(yīng)用于農(nóng)業(yè)，而且也廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)、林業(yè)和公共衛(wèi)生事業(yè)等方面。一、概述7（一）農(nóng)藥概念一、概述8（二）農(nóng)藥殘留的概念

農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于生物體、食品(農(nóng)副產(chǎn)品)和環(huán)境中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。

8（二）農(nóng)藥殘留的概念農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存

農(nóng)藥殘留幾乎無處不在?。⊥寥浪w空氣農(nóng)藥植物動物人土壤水體空氣農(nóng)植動物10（三）農(nóng)藥的分類

1.按化學(xué)成分可分為有機氯、有機磷、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類及砷、汞、銅、硫磺等制劑。

2.按用途可分為殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、植物生長調(diào)節(jié)劑和糧食熏蒸劑等。10（三）農(nóng)藥的分類1.按化學(xué)成分可分為有機氯、11（四）農(nóng)藥的毒性及種類農(nóng)藥除了可造成人體的急性中毒外，絕大多數(shù)對人體產(chǎn)生的慢性危害，多是通過污染食品的形式造成。

某些農(nóng)藥對人和動物的遺傳和生殖造成影響，產(chǎn)生畸形和引起癌癥等方面的毒素作用。11（四）農(nóng)藥的毒性及種類農(nóng)藥除了可造成人體的急性中毒外，絕

我國農(nóng)藥的發(fā)展20世紀(jì)80年代前，中國生產(chǎn)的農(nóng)藥尚不足80種，大多是進(jìn)口，農(nóng)藥主要是有機氯。1983年禁止生產(chǎn)和使用有機氯農(nóng)藥后，代之以有機磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥，但其中一些品種比有機氯的毒性大10倍甚至100倍。90年代之后，中國逐漸由農(nóng)藥進(jìn)口國變成出口國，近兩年，農(nóng)藥進(jìn)口量只相當(dāng)于產(chǎn)量的2%-3%，出口量已是進(jìn)口量的十幾倍。

我國農(nóng)藥的發(fā)展20世紀(jì)80年代前，中國生產(chǎn)的農(nóng)藥131、有機氯農(nóng)藥品種：DDT、六六六、艾氏劑、狄氏劑等。特點：化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不易分解，易溶于脂肪中，并在脂肪中蓄積，長期使用會嚴(yán)重的環(huán)境污染。131、有機氯農(nóng)藥品種：DDT、六六六、艾氏劑、狄氏劑等。危害：有機氯農(nóng)藥容易積累在人體的脂肪、肝臟、腎臟等部位，并且不容易排除體外。DDT：當(dāng)人體蓄積的濃度20mg/kg時，神經(jīng)系統(tǒng)放生障礙，達(dá)到500mg/Kg時，可以致死。動物實驗證實有致畸、致癌作用目前許多國家都已禁止使用，我國已于1983年全部禁止生產(chǎn)和使用。危害：有機氯農(nóng)藥容易積累在人體的脂肪、肝臟、腎臟等部位，并且15六六六，BHC滴滴涕，DDT15六六六，BHC滴滴涕，DDT16滴滴涕：減少了蛋殼的厚度，從而降低了小鳥的孵出率。二惡英：進(jìn)入機體后幾乎不被排泄、沉積在肝臟和脂肪組織中。屬于劇毒物質(zhì)，毒性比氰化鉀高130倍，致癌毒性比黃曲霉毒素高10倍，會引起基因突變，影響繁殖力和智力發(fā)育。

1617早期的高效高毒品種：對硫磷（1605）、甲拌磷（3911）、內(nèi)吸磷（1059）后期使用得較多的為高效低毒低殘留的品種，如：樂果、敵百蟲、殺螟松、倍硫磷毒性極低的馬拉硫磷、雙硫磷、氯硫磷、鋅硫磷、碘硫磷、地亞農(nóng)、滅蜈松2、有機磷農(nóng)藥17早期的高效高毒品種：對硫磷（1605）、甲拌磷（391118有機磷農(nóng)藥主要品種甲胺磷乙酰甲胺磷18有機磷農(nóng)藥主要品種甲胺磷乙酰甲胺磷19樂果一六0五19樂果一六0五20急性毒性：有機磷農(nóng)藥化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，分解快，在作物中殘留時間短，大多不溶于水、堿性條件下易水解而失效

。危害：有機磷類農(nóng)藥的中毒特征是抑制血液和組織中膽堿酯酶的活性，導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)機能失調(diào),從而使一些受神經(jīng)系統(tǒng)支配的臟器,如心臟、支氣管、腸、胃等發(fā)生功能異常。20急性毒性：有機磷農(nóng)藥化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，分解快，在作物中殘留21主要表現(xiàn)為植物性食物殘留，尤其是含有芳香物質(zhì)的植物如：水果、蔬菜，特別是葉菜類如小白菜、大白菜、雞毛菜、甘藍(lán)、芹菜、韭菜、芥菜、花菜、綠花菜、茼蒿、枸杞菜和黃瓜等21主要表現(xiàn)為植物性食物殘留，尤其是含有芳香物質(zhì)的植物223、氨基甲酸酯類農(nóng)藥是目前使用量較大的殺蟲劑。品種：西維因、殺滅威、速滅威、葉蟬散等在作物上的殘留時間為4d，在動物的肌肉和脂肪中的明顯蓄積時間約為7d特點：分解快、殘留期短、低毒、高效、選擇性強危害：同有機磷農(nóng)藥223、氨基甲酸酯類農(nóng)藥是目前使用量較大的殺蟲劑。23

氨基甲酸酯類農(nóng)藥是農(nóng)藥急性中毒的主要原因，也是時下蔬菜中農(nóng)藥殘留的重點檢測品種。氨基甲酸酯類農(nóng)藥的中毒原因與有機磷農(nóng)藥相同，也是抑制人體內(nèi)膽堿酯酶，從而影響人體內(nèi)神經(jīng)沖動的傳遞。

氨基甲酸酯類殺蟲劑進(jìn)入人體內(nèi)，在胃中酸性條件下可與食物中的亞硝酸鹽和硝酸鹽反應(yīng)生成亞硝基化合物，具有致癌性。23氨基甲酸酯類農(nóng)藥是農(nóng)藥急性中毒的主要原我國農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品的用量居高不下

導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標(biāo)食品安全、影響消費者健康、影響農(nóng)產(chǎn)品的貿(mào)易加強農(nóng)殘檢測不合理使用我國農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品的用量居高不下不合理使用

分析步驟

所需設(shè)備1.采集樣品2.稱取樣品分析天平3.搗碎樣品高速組織搗碎機4.樣品的提取分離漏斗等5.樣品的凈化SPE、SPME等6.樣品的濃縮氮吹儀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等7.樣品的定性、定量測定GC、HPLC、GC-MS等（五）傳統(tǒng)農(nóng)殘分析技術(shù)一般過程分析步驟所需設(shè)備1.采集樣品2.稱取樣品26

優(yōu)點

缺點能夠?qū)γ恳环N農(nóng)藥進(jìn)行準(zhǔn)確的定性和定量檢驗分析周長長檢驗費用高需要消耗大量的有機溶劑、容易造成環(huán)境污染需要使用GC、HPLC等昂貴的大型儀器設(shè)備對檢驗分析人員的化學(xué)分析水平有較高要求檢驗分析過程繁瑣、影響因子復(fù)雜、不易掌控（六）傳統(tǒng)農(nóng)殘分析技術(shù)的優(yōu)缺點26優(yōu)點缺點能夠?qū)γ恳环N農(nóng)藥進(jìn)行準(zhǔn)27

傳統(tǒng)的農(nóng)殘化學(xué)分析主要是氣相或液相色譜等儀器

優(yōu)點：敏感(10－l2

～10－6mol／L)、準(zhǔn)確

缺點：操作復(fù)雜、費時及成本高。難以滿足需求－－怎么辦？－－發(fā)展適合我國的快速檢測技術(shù)2728生化檢測生物檢測化學(xué)比色法

二、適合我國的農(nóng)藥殘留快速檢測方法酶抑制法免疫分析法發(fā)光菌檢測法敏感家蠅檢測法速測卡速測儀主要為酶免疫法28二、適合我國的農(nóng)藥殘留快速檢測方法酶抑制法免疫分析法發(fā)光29酶抑制法

酶抑制技術(shù)是研究比較成熟、應(yīng)用最廣泛快速的農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)，是根據(jù)有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶（AChE)的特異性生化反應(yīng)建立起來的農(nóng)藥殘留的微量和痕量快速檢測技術(shù)。29酶抑制法酶抑制技術(shù)是研究比較成熟、應(yīng)用最廣301、速測卡法1）原理：301、速測卡法1）原理：

速測卡（即紙片，固化有膽堿酯酶和靛酚乙酸酯試劑的紙片）

浸提液（pH7.5緩沖溶液，15.0gNa2HPO4·12H2O+1.59gKH2PO4

，用500mL蒸餾水溶解）儀器（常量天平，有條件時配備37℃±2℃恒溫裝置，專為速測卡法而設(shè)計的“農(nóng)藥殘留速測儀”和超聲波提取器）

2）、試劑及儀器

速測卡（即紙片，固化有膽堿酯酶和靛酚乙酸酯試劑的紙

預(yù)反應(yīng)速測卡反應(yīng)加樣樣本前處理樣本制備采樣白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對照卡相同陽性

陰性空白試驗確證對照

3）、檢測流程

預(yù)反應(yīng)速測卡反應(yīng)加樣樣本前處理樣本制備采樣白色藥片不

整體測定法①選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見方片，取5g放入帶蓋瓶中，加入10ml浸提液，震搖50次，靜置2min以上（超聲波提取中震蕩30秒）。（采樣-樣本制備-樣本前處理）②取一片速測卡，在白色藥片上滴上2～3滴提取液。（加樣）③在37℃溫度中放置10min（有條件時在恒溫裝置中放置），預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤。（預(yù)反應(yīng)）④將速測卡對折，用手捏3min，使紅色藥片和白色藥片疊合反應(yīng)。（速測卡反應(yīng)）⑤每批測定應(yīng)設(shè)一個緩沖液的空白對照。

有條件時，將紙片插入“農(nóng)藥殘留速測儀”自動恒溫、定時觀察。

4)、檢測方法（整體測定法、表面測定法）

4)、檢測方法（整體測定法、表面測定5章-農(nóng)藥、獸藥殘留速測技術(shù)ppt課件表面測定法（粗篩法）

①選取有代表性的蔬菜樣品，擦去蔬菜表面泥土，滴2～3滴浸提液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。②取一片速測卡，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。③、④、⑤步驟同上。

表面測定法（粗篩法）

36速測卡檢測結(jié)果“-”陰性（藍(lán)色）“+”弱陽性（淡藍(lán)）“++”強陽性（白色）36速測卡檢測結(jié)果“-”陰性（藍(lán)色）干擾物質(zhì)的排除

蔥、蒜、蘿卜、芹菜及番茄汁液，含葉綠素較高的蔬菜，不要剪得太碎。測定番茄時，可將提取液放在茄蒂處浸泡2min，取浸泡液測定。測定韭菜或大蒜時，可整根或整粒放入容器中，加入提取液后振搖提取測定。

6)、操作要點

干擾物質(zhì)的排除

6)、操作要點空白對照卡不變色原因：藥片表面浸提液少、表面不夠濕潤，和/或是溫度太低。反應(yīng)時間和溫度的控制當(dāng)T＜37℃，酶反應(yīng)的時間相對延長。樣品放置時間應(yīng)與空白對照卡放置時間一致（可比性）疊合反應(yīng)的時間3min(3min后的藍(lán)色加深，24h后退色）6)、操作要點

空白對照卡不變色原因：藥片表面浸提液少、表面不夠濕潤，和/或速測卡技術(shù)指標(biāo)符合率

據(jù)報道，在檢出的30份以上陽性樣品中，經(jīng)氣相色譜驗證，陽性結(jié)果的符合率在80%以上。檢出限

速測卡法檢測常見農(nóng)藥的檢出限與國家允許蔬菜中最大殘留限量（mg/kg）比較。（附表）

速測卡技術(shù)指標(biāo)附：速測卡對幾種常用農(nóng)藥的最低檢出限與最大殘留限量比較（mg/kg）

農(nóng)藥名稱檢出限（mg/kg）殘留限量（mg/kg）農(nóng)藥名稱檢出限（mg/kg）殘留限量（mg/kg）甲胺磷1.7不得檢出敵敵畏0.30.2對硫磷1.7不得檢出敵百蟲0.50.1水胺硫磷3.1不得檢出樂果1.31.0馬拉硫磷2.0不得檢出西維因2.52.0久效磷2.5不得檢出好年冬1.0不得檢出乙酰甲胺磷3.50.2呋喃丹0.5不得檢出附：速測卡對幾種常用農(nóng)藥的最低檢出限與最大殘留限量比較（m412、速測儀原理:在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。酶催化乙酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)。用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。412、速測儀原理:在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯42農(nóng)藥殘留快速測試儀42農(nóng)藥殘留快速測試儀43速測儀檢測結(jié)果

判定依據(jù)

說明抑制率小于等于50

合格抑制率大于50超標(biāo)，說明含有有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制率與農(nóng)藥殘留量成正相關(guān)，抑制率越高說明殘留量越高43速測儀檢測結(jié)果判定依據(jù)說明抑制率小于等44免疫分析技術(shù)

免疫分析技術(shù)是將免疫反應(yīng)與現(xiàn)代測試手段相結(jié)合而建立的超微量分析技術(shù)，是基于抗原抗體特異性結(jié)合和反應(yīng)為基礎(chǔ)的分析方法。目前應(yīng)用于農(nóng)殘檢測的是酶免疫分析(EIA)和放射性免疫分析(RIA)。其中酶聯(lián)免疫分析技術(shù)應(yīng)用最為普遍。44免疫分析技術(shù)免疫分析技術(shù)是將免疫反應(yīng)與現(xiàn)代測試手453、酶聯(lián)免疫技術(shù)

ELISA是一種以酶作為標(biāo)記物的免疫分析方法，也是目前應(yīng)用最廣泛的免疫分析方法之一，它將酶標(biāo)記在抗體／抗原分子上形成酶標(biāo)抗體／酶標(biāo)抗原，酶作用于能呈現(xiàn)出顏色的底物，通過儀器或肉眼進(jìn)行辨別。453、酶聯(lián)免疫技術(shù)46ELISA法基本原理是預(yù)先結(jié)合在固相載體上的抗體或抗原分子與樣品中的抗原或抗體分子在一定條件下進(jìn)行免疫學(xué)反應(yīng)。該法因不需昂貴儀器設(shè)備，對人體無害等優(yōu)點而被廣泛采用，具有靈敏、特異、快速、穩(wěn)定以及易于自動化操作等特點。46ELISA法基本原理是預(yù)先結(jié)合在固相載體上的抗體或抗原分47

目前，ELISA方法常用的固相載體是96孔聚苯乙烯酶標(biāo)板，常用的酶是辣根過氧化物酶，常用的底物是鄰苯二胺和四甲基聯(lián)苯胺等。酶標(biāo)板u型96孔47目前，ELISA方法常用的固相載體是96孔聚苯乙烯酶484、發(fā)光菌檢測法

農(nóng)藥與細(xì)菌作用后可影響細(xì)菌的發(fā)光程度，通過細(xì)菌發(fā)光情況，可測出農(nóng)藥殘留量。

此方法簡便但是特異性差484、發(fā)光菌檢測法農(nóng)藥與細(xì)菌作用后可影響細(xì)495、敏感家蠅檢測法敏感家蠅對殺蟲劑具有敏感性，記錄家蠅存活情況，根據(jù)家蠅的死亡率可知農(nóng)藥殘留情況。該技術(shù)方法直接、過程簡單、容易掌握，但定性粗糙，只對少數(shù)農(nóng)藥有效，而且由于其他生物對不同農(nóng)藥的毒性反應(yīng)與人畜可能不同，因此影響對農(nóng)藥殘留量的判斷。如家蠅對毒性較低的除蟲菊酯類敏感，遠(yuǎn)超過有機磷和氨基甲酸酯類中毒或高毒的農(nóng)藥。495、敏感家蠅檢測法敏感家蠅對殺蟲劑具有敏感性，記錄家蠅存

目前常用的化學(xué)比色法包括各種檢測試劑和試紙，兩者都是利用迅速產(chǎn)生明顯顏色的化學(xué)反應(yīng)檢測待測物質(zhì)，可通過與標(biāo)準(zhǔn)比色卡比較進(jìn)行目視定性或半定量分析。6、化學(xué)比色法

目前常用的化學(xué)比色法包括各種檢測試劑和試紙，兩者都是利用迅51

化學(xué)比色分析法與一般的儀器分析方法相比，具有價格低，操作相對簡便，結(jié)果顯示直觀，一次性使用，不需檢修維護(hù)，有一定的靈敏度和專一性等優(yōu)點。隨著檢測儀器的不斷發(fā)展，與其相配套的微型檢測儀器也相應(yīng)出現(xiàn)。如與試劑檢測方法相配套的微型光電比色計目前已發(fā)展得比較成熟。51化學(xué)比色分析法與一般的儀器分析方法相比，52三、農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)展望

一些快速速檢測方法與國家標(biāo)準(zhǔn)方法和儀器法相比具有操作簡單、快速的優(yōu)點，但由于大多數(shù)快速檢測方法在食品樣品前處理、操作規(guī)范性方面還有許多待完善之處，目前還只能作為快速篩選的手段而不能作為最終診斷的依據(jù)，兼具快速和準(zhǔn)確兩大優(yōu)點是快速檢測方法追求的目標(biāo)。52三、農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)展望一些快速速檢測方法方法檢測對象國內(nèi)外對比化學(xué)檢測技術(shù)有機磷靈敏度低酶抑制檢測技術(shù)有機磷和氨基甲酸酯國內(nèi)假陽性、假陰性率高，二十余家生產(chǎn)廠商，多種速測卡、速測儀，GB/T5009.199-2003；NY/T448-2001國外測定樣品和農(nóng)藥種類有限，歐美作為普查農(nóng)藥殘留和田間實地檢測的基本手段；AOAC官方方法964.17免疫分析法有機磷類、氨基甲酸酯類、硫代氨基甲酸酯類、有機氯類、三嗪類、擬除蟲菊酯類和酰胺類等幾十種農(nóng)藥國內(nèi)研究活躍，但未有真正推廣使用的商品化產(chǎn)品國外技術(shù)成熟，靈敏度高，F(xiàn)AO推薦方法，美國USDA、EPA、AOAC制定了評定標(biāo)準(zhǔn)，但經(jīng)認(rèn)證的有限，經(jīng)EPA認(rèn)證的免疫試劑盒約有4個廠家的26種試劑盒：EPA方法4010、EPA方法4015EPA方法4040等生物傳感器有機磷、氨基甲酸酯國內(nèi)處于研究階段國外電導(dǎo)型生物傳感器、光尋址電位型傳感器、安培型傳感器，處于研究和應(yīng)用階段，并未廣泛推廣使用農(nóng)藥快速檢測技術(shù)方法檢測對象國內(nèi)外對比化學(xué)檢測技術(shù)有機磷靈敏度低酶抑制檢測第二節(jié)獸藥殘留快速檢測技術(shù)第二節(jié)獸藥殘留快速檢測技術(shù)1、獸藥的概念：獸藥是用于預(yù)防、治療、診斷動物疾病的藥物或者有目的地調(diào)節(jié)動物生理機能的物質(zhì)（含動物保健品和動物飼料添加劑）。獸藥的主要用途是防病治病、促進(jìn)生長、提高生產(chǎn)性能、改善動物性食品的品質(zhì)等一、獸藥殘留與食品安全意義1、獸藥的概念：一、獸藥殘留與食品安全意義2、獸藥的種類種類用途常見品種殘留危害抗生素類防治傳染性疾病、抗菌消炎青霉素類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、螺旋霉素、鏈霉素、土霉素、金霉素等增強細(xì)菌耐藥性，人體腸道菌群失調(diào)、超敏反應(yīng)、損害聽力及腎臟磺胺類抗菌消炎磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺瞇、菌得清、新諾明等呋喃類抗菌消炎呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因等胃腸反應(yīng)、超敏反應(yīng)，長期攝入引起不可逆性末端神經(jīng)損害，有致癌、致突變作用激素類提高生長、發(fā)育、繁殖速度固醇或類固醇類：己烯雌酚、孕酮、皋酮、雌二醇多肽或多肽衍生物等影響正常生理機能，有一定的致癌性；導(dǎo)致兒童性早熟、發(fā)育異常和異性趨向等抗寄生蟲類驅(qū)蟲或殺蟲苯并咪唑（丙硫咪唑、丙氧咪唑、噻苯咪唑、甲苯咪唑和丁苯咪唑）左旋咪唑、克球酚、吡喹酮等持久殘留于肝內(nèi)，對動物有致畸性與致突變性其它血清制品、疫苗、診斷制品、中藥材、生化藥品、放射性藥品等2、獸藥的種類種類用途常見品種殘以下6種獸藥不能長期應(yīng)用，否則易超過動物食品張獸藥限量：呋喃唑酮（痢特靈）磺胺類喹乙醇氯霉素土霉素硫酸慶大霉素以下6種獸藥不能長期應(yīng)用，否則易超過動物食品張獸藥限量：3、獸藥殘留獸藥殘留：根據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織（FAO/WHO）食品中獸藥殘留聯(lián)合立法委員會的定義，獸藥殘留是指動物性產(chǎn)品的任何可食部分含有獸藥母體化合物或其代謝物，以及與獸藥有關(guān)的雜質(zhì)的殘留。獸藥殘留形式：原藥、藥物在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物、共價結(jié)合物3、獸藥殘留獸藥殘留：根據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織（FA獸藥殘留主要是由于不合理使用藥物治療疾病和作為飼料添加劑而引起。在獸藥品應(yīng)用方面，用于飼料添加劑占46%，治療藥品占43%，疫苗等生物藥品占11%。我國濫用和超標(biāo)使用獸藥尤其是抗生素和激素類藥物的狀況是十分嚴(yán)重的。3、獸藥殘留現(xiàn)狀肉蛋奶的安全成問題獸藥殘留主要是由于不合理使用藥物治療疾病和作為飼料添加劑而引5章-農(nóng)藥、獸藥殘留速測技術(shù)ppt課件我國獸藥殘留安全問題“瘦肉精”（鹽酸克倫特羅）中毒事件鮮牛奶中抗生素殘留進(jìn)出口貿(mào)易受挫我國獸藥殘留安全問題全球禁止，不得檢出1、“瘦肉精”中毒在養(yǎng)殖業(yè)中常見使用的激素類，也叫鹽酸克倫特羅2001年央視新聞頭條，屢禁不止全球禁止，不得檢出1、“瘦肉精”中毒在養(yǎng)殖業(yè)中常見使用的激素

瘦肉精中毒的臨床表現(xiàn)為心動過速，面頸、四肢肌肉顫抖，頭暈、頭疼、惡心、嘔吐，特別是對患有高血壓、心臟病的病人，可能會加重病情導(dǎo)致意外。因此，全球禁止將其作為飼料添加劑。瘦肉精中毒的臨床表現(xiàn)為心動過速，面頸、四肢肌肉顫抖，頭2、鮮牛奶中抗生素殘留

國家質(zhì)檢總局的一條消息頻繁見諸媒體：一項對中國北方市場的檢測調(diào)查結(jié)果顯示，在近800份乳品采樣中，抗生素殘留超標(biāo)居不合格項目第一位，其次是汞和鉛超標(biāo)。2、鮮牛奶中抗生素殘留國家質(zhì)檢總局的一條消息頻繁見諸媒奶粉、奶片、冰激凌等奶制品生產(chǎn)原則是一般不用好奶。溫馨提示思考：為什么酸奶都是無抗奶？購買伊利、光明等生產(chǎn)廠家推出的無抗奶。擔(dān)心有抗奶，就喝酸奶。奶粉、奶片、冰激凌等奶制品生產(chǎn)原則是一般不用好奶。溫馨提示2002年，外經(jīng)貿(mào)部收到駐歐使團經(jīng)商處的特級報告：歐盟委員會擬討論通過全面禁止從中國進(jìn)口所有動物源性產(chǎn)品的決議。由于歐盟的禁令，美國、日本等國已高度關(guān)注我國出口水產(chǎn)品的質(zhì)量。3、進(jìn)出口貿(mào)易受挫誰來解決我放心吃魚蝦的問題2002年，外經(jīng)貿(mào)部收到駐歐使團經(jīng)商處的特級報告：3、進(jìn)出口進(jìn)出口貿(mào)易受挫

據(jù)悉，自從一九八六年歐盟嚴(yán)格執(zhí)行肉類食品法規(guī)以來，中國的豬肉就基本上無法進(jìn)入歐盟市場；日本則根據(jù)國際流行病疫情報告，把中國列入“三類地區(qū)”，從此中國的豬、羊、牛肉也基本上無法進(jìn)入日本市場。隨著我國加入WTO，我國畜產(chǎn)品在國際貿(mào)易中將面臨更加激烈的競爭環(huán)境，藥物殘留往往是引發(fā)國際貿(mào)易中非貿(mào)易性技術(shù)壁壘障礙的導(dǎo)火線。進(jìn)出口貿(mào)易受挫據(jù)悉，自從一九八六年歐盟嚴(yán)格執(zhí)行肉類食品法歐盟以氯霉素殘留超標(biāo)為由暫停中國蜂蜜進(jìn)口案我國年產(chǎn)蜂蜜約20萬噸、蜂王漿1000噸，年創(chuàng)匯1億多美元，蜂群數(shù)量和主要蜂產(chǎn)品出口均居世界第一，其中歐洲一直是我國蜂蜜出口的主要市場。由于“抗生素超標(biāo)”，我國蜂蜜在國際市場上的價格和數(shù)量優(yōu)勢喪失殆盡，大批已經(jīng)出口至歐洲國家的蜂蜜慘遭退貨，我國蜂蜜出口由此受到嚴(yán)重影響。據(jù)天津口岸2002年第一季度的數(shù)據(jù)顯示，與2001年3月同期相比，蜂蜜的整體出口總量下降了70％，出口總值下降了65.4％。因氯霉素結(jié)構(gòu)中的硝基苯根能抑制血細(xì)胞線粒體蛋白質(zhì)的合成，導(dǎo)致線粒體的損壞。如果使用氯霉素不當(dāng)，將會引起再生障礙性貧血。

歐盟以氯霉素殘留超標(biāo)為由暫停中國蜂蜜進(jìn)口案我國年產(chǎn)蜂蜜約20飼用含獸藥的飼料及飼料添加劑不恰當(dāng)用藥隨意加大藥物用量用藥錯誤或未做用藥記錄沒有按規(guī)定執(zhí)行應(yīng)有的休藥期使用未經(jīng)批準(zhǔn)的或禁用的獸藥屠宰前使用獸藥（通常屠宰前10天要禁藥）食品加工過程受到污染（如食品保鮮）4、獸藥殘留的來源

（以抗生素殘留為代表）禽畜末次給藥到允許屠宰或它們的產(chǎn)品（乳\蛋等）許可上市的間隔時間，通常4~7天。飼用含獸藥的飼料及飼料添加劑4、獸藥殘留的來源

5、獸藥殘留的危害

（以抗生素殘留為代表）毒性作用過敏反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)細(xì)菌耐藥性菌群失調(diào)“三致”作用激素的副作用造成經(jīng)濟損失5、獸藥殘留的危害

（以抗生素殘留6、獸藥殘留的控制有效的監(jiān)督管理和檢測體系建設(shè)加強藥物的合理使用規(guī)范嚴(yán)厲查處違禁藥物用作飼料添加劑謹(jǐn)慎使用抗生素飼料生產(chǎn)過程中藥物添加劑污染的控制：藥物添加劑型選擇、藥物添加的管理、加工和設(shè)備清洗、標(biāo)簽嚴(yán)格規(guī)定休藥期和指定動物性食品藥物的最高殘留限量（MRL）在消費環(huán)節(jié)沒有很好的辦法去除殘留在動物性食品中的獸藥6、獸藥殘留的控制有效的監(jiān)督管理和檢測體系建設(shè)在消費環(huán)節(jié)沒有獸藥最高殘留限量(MRL)動物用藥后產(chǎn)生的允許存在于食品表面或內(nèi)部的改獸藥殘留的最高量。(單位μg／kg，以鮮重計)。二、食品中獸藥殘留控制及其分析獸藥最高殘留限量(MRL)二、食品中獸藥殘留控制及其分析為有效控制獸藥殘留，各國都制定了獸藥使用的法律與法規(guī)及使用的有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。休藥期：是指動物從停止給藥到許可屠宰或它們的乳、蛋等產(chǎn)品許可上市的間隔時間。奶廢棄期：即奶牛從停止給藥到它們所產(chǎn)的奶許可上市的間隔時間。為有效控制獸藥殘留，各國都制定了獸藥使用的法律與法規(guī)及使用的獸藥殘留分析技術(shù)的特點待測物質(zhì)濃度低樣品基質(zhì)復(fù)雜，干擾物質(zhì)多獸藥殘留代謝產(chǎn)物多樣或不明動物種類多樣，對藥物代謝存在差異獸藥殘留分析技術(shù)的特點

對檢測方法的要求快速高通量(highthroughput)定量準(zhǔn)確度和精確度(accuracy&precision)確證(unequinocalidentification)法定的和QC對檢測方法的要求

食品獸藥殘留的傳統(tǒng)檢測分析方法GC-MSLC-MS耗時長、設(shè)備昂貴、試劑消耗量大，不易推廣。高通量、低成本、快速敏感性好、再現(xiàn)性好、操作容易、不需昂貴的儀器。食品獸藥殘留的傳統(tǒng)檢測分析方法耗時長、設(shè)備昂貴、試劑消耗量篩選方法：微生物法、免疫化學(xué)方法（ELISA）等確證方法：HPLC、GC、GC-MS、LC-MS、LC-MS-MS篩選方法：微生物法、免疫化學(xué)方法（ELISA）等

理想的儀器裝備樣品經(jīng)簡單處理即可上機測定不需萃取和凈化快速、準(zhǔn)確的定量分析自動的資料處理理想的儀器裝備食品中獸藥殘留快速篩選檢測常用方法：微生物法免疫法色譜法食品中獸藥殘留快速篩選檢測常用方法：抗生素種類繁多，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，測定方法各不相同。因而給檢測工作帶來了許多困難。抗生素的測定方法進(jìn)展很快。三、食品中抗生素殘留快速檢測方法微生物法、免疫法、理化儀器法是食品中抗生素殘留檢測常用的3種方法抗生素種類繁多，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，測定方法各不相同。因而給檢測工作帶二、食品中抗生素殘留檢測方法微生物法——如“TTC試驗”基于抗生素對微生物的生理機能、代謝的抑制作用，來定性或定量確定樣品中抗微生物藥物殘留。以擴散過程或渾濁度為基礎(chǔ)?？股貪舛仍礁撸⑸锏纳L受抑制程度越大，菌落越小。微生物法試劑盒：分析樣品數(shù)量、操作便捷、靈敏度高、條件要求低適合：養(yǎng)殖場、食品加工車間二、食品中抗生素殘留檢測方法微生物法——如“TTC試驗”（1）平皿法以抑菌區(qū)域為檢測指標(biāo)（1）平皿法動物源性食品抗生素類藥物殘留檢測用尺子測量從棉試子邊緣到抑菌圈邊緣的距離，樣品周圍有大于2毫米的抑菌區(qū)域證明陽性（含有抗生素）；沒有抑菌區(qū)域表明樣品為陰性。先枯草桿菌懸液放于培養(yǎng)皿中，再將樣品接種到培養(yǎng)皿，在恒溫箱中培養(yǎng)16~24h動物源性食品抗生素類藥物殘留檢測用尺子測量從棉試子邊緣到抑菌培養(yǎng)基I培養(yǎng)基II陰性最低檢測限陽性其他藥物殘留培養(yǎng)基I培養(yǎng)基II陰性最低檢測限陽性其他藥物殘留（2）生化檢測法牛乳等液體樣品主要利用培養(yǎng)基pH等因素改變引起指示劑顏色變化的生物化學(xué)原理來指示檢測結(jié)果.檢測法/試劑盒：TTC、Delvotest、CharmScience等。（2）生化檢測法鮮乳中抗生素殘留量的測定（TTC試驗）

（一）原理

當(dāng)乳中含有抗生素時，標(biāo)準(zhǔn)菌株嗜熱鏈球菌的生長受到抑制，不能將指示劑2,3,5—氯化三苯基四氮唑（TTC）還原為無色。反之，當(dāng)乳中抗生素不存在時，加入的標(biāo)準(zhǔn)菌株，就會大量生長繁殖，而且將TTC還原為紅色化合物。其紅色強度與細(xì)菌數(shù)量成正比。本法對各種抗生素的最低檢出量：青霉素為0.004IU/mL，鏈霉素為0.5IU/mL，慶大霉素為0.4IU/mLTTC法為鮮乳中抗菌藥物殘留檢測的標(biāo)準(zhǔn)方法。鮮乳中抗生素殘留量的測定（TTC試驗）（一）原理T2，3，5—氯化三苯四氮唑試驗（TTC試驗）嗜熱乳酸鏈球菌2，3，5—氯化三苯四氮唑試驗（TTC試驗）嗜熱乳酸鏈球菌（二）注意事項

1.本法的正確性與菌種的活力有密切關(guān)系。如菌種活力減弱時，應(yīng)多次反復(fù)傳代加強活力。

2.每次檢驗每個樣品應(yīng)一式二份，另外要作陰性、陽性對照各2管，陰性對照管作無抗生素乳9mL，陽性對照管用無抗生素乳9mL加抗生素。

3.水浴培養(yǎng)要避光，保持37℃，水面高于被檢樣品，判斷要迅速；檢樣經(jīng)80℃水浴加熱5min，要嚴(yán)格掌握。

4.制備培養(yǎng)基的乳要絕對無抗生素存在；操作所用試管、吸管均須經(jīng)滅菌。（二）注意事項89四環(huán)素類抗生素殘留量的測定

食品中四環(huán)素類抗生素的測定多采用微生物法原理

樣品經(jīng)提取，用離子交換樹脂分離，甲醇溶劑洗脫，經(jīng)濃縮，殘渣用Mcllvaine緩沖液溶解，經(jīng)熒光鑒定，然后用微生物法進(jìn)行定量測定。本方法的最低檢出量為0.05mg/kg。89四環(huán)素類抗生素殘留量的測定食品中四環(huán)素類抗生素的90其它抗生素也可用此法進(jìn)行測定，只是試驗的菌種不同或培養(yǎng)基不同。測定青霉素為金黃色葡萄球菌，鏈霉素或雙氫鏈霉素為枯草桿菌（6633），氯霉素為卵黃色八疊球菌（9341），新生霉素為白色葡萄球菌。90其它抗生素也可用此法進(jìn)行測定，只是試驗的菌種不同2、免疫檢驗法通過檢測食品中的抗抗生素抗體來確定抗生素含量?；诳股兀乖┐碳游锂a(chǎn)生相應(yīng)的應(yīng)急反應(yīng)，從而形成抗體。優(yōu)點：操作簡單，速度快、取樣量小，前處理簡單、容量大，儀器化程度低，靈敏度高，適用于現(xiàn)場監(jiān)控和大量樣品的篩選，具有廣闊的應(yīng)用前景缺點：直接測定存在樣本信息量太少，假陽性和理化分析技術(shù)選擇性低，當(dāng)樣品中含有與某類抗生素結(jié)構(gòu)相似的化合物時，可能出現(xiàn)免疫交叉反應(yīng)而呈現(xiàn)假陽性結(jié)果2、免疫檢驗法通過檢測食品中的抗抗生素抗體來確定抗生素含量。免疫學(xué)方法快速檢測放射免疫分析酶聯(lián)免疫分析熒光免疫分析發(fā)光免疫分析膠體金免疫分析免疫學(xué)方法快速檢測獸藥殘留免疫學(xué)快速檢測方法的建立重要包括：檢測對象的選擇檢測對象結(jié)構(gòu)分析免疫半抗原的合成人工結(jié)合抗原的制備與鑒定抗體的制備檢測方法的確立與方法評價等。獸藥殘留免疫學(xué)快速檢測方法的建立重要包括：1、藥物結(jié)構(gòu)分析和半抗原的合成獸藥多為小分子化合物（分子量小于5000Da），不具備免疫原性，需先和大分子載體偶聯(lián)后方可用于抗體的生產(chǎn)。多數(shù)情況下，檢測對象的結(jié)構(gòu)不適合用于直接和蛋白質(zhì)等載體直接偶聯(lián)，需要進(jìn)行抗原改造。半抗原改造的原則：和載體偶聯(lián)后可以最大限度地暴露原藥物的結(jié)構(gòu)特征。1、藥物結(jié)構(gòu)分析和半抗原的合成2、人工結(jié)合抗原的制備通過選擇小分子半抗原中的活性基團或者改造后加入的活性基團，選擇適當(dāng)?shù)呐悸?lián)試劑、載體蛋白和連接條件進(jìn)行人工結(jié)合抗原的制備。2、人工結(jié)合抗原的制備3、抗體的制備多克隆抗體動物免疫、抗體純化、鑒定高度異質(zhì)性，不同個體產(chǎn)生的抗體成分不同單克隆抗體動物免疫、細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞株的建立、抗體的生產(chǎn)及鑒定永續(xù)性、高度均一性3、抗體的制備4、檢測方法的建立膠體金免疫層析法（速測卡、膠體金試紙條、速測試紙條）酶聯(lián)免疫吸附測定法放射免疫及熒光免疫測定法生物感應(yīng)器主要由兩個元件組成：生物學(xué)識別元件（通常是一個抗體）；信號轉(zhuǎn)換元件連接著數(shù)據(jù)采集和處理系統(tǒng)的精密接觸元件。分析靶標(biāo)與生物受體(抗體）結(jié)合產(chǎn)生信號，該信號被不同原理的傳感器轉(zhuǎn)換成電子信號，然后被計算機等處理成最后的結(jié)果。4、檢測方法的建立主要由兩個元件組成：生物學(xué)識別元件（通常是3、理化儀器分析方法常用高效液相色譜（HPLC）和質(zhì)譜（MS）對抗生素進(jìn)行定量、定性的測定，主要是基于它們測定痕量物質(zhì)的優(yōu)越性。優(yōu)點：分離速度快、效率高和操作可自動化，已成為大多數(shù)抗生素殘留的常規(guī)分析方法。目前，HPLC方法已用于紅霉素、慶大霉素、羧芐青霉素和吩羧青霉素殘留的測定。3、理化儀器分析方法常用高效液相色譜（HPLC）和質(zhì)譜（MS央視《每周質(zhì)量報告》播出3·15特別節(jié)目《“健美豬”真相》鹽酸克倫特羅檢測卡央視《每周質(zhì)量報告》播出3·15特別節(jié)目《“健美豬”真相》鹽克倫特羅為白色結(jié)晶粉末，易溶于水、醇類、微溶于氯仿。作用機理：克倫特羅選擇性作用于動物β-腎上腺素能受體，激活腺甘酸環(huán)化酶，使環(huán)磷酸苷(cAMP)增加，加強脂肪分解，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，實現(xiàn)動物營養(yǎng)再分配，可提高動物的瘦肉率。

克倫特羅β-受體酶ATPcAMP脂肪分解蛋白合成營養(yǎng)再分配提高瘦肉率克倫特羅為白色結(jié)晶粉末，易溶于水、醇類、微溶于氯仿。在畜牧業(yè)生產(chǎn)中一些非法使用者將其作為一種生長促進(jìn)劑添加到動物飼料中，用以改善胴體的品質(zhì)；同時也造成動物性食品中鹽酸克倫特羅（瘦肉精）的殘留。當(dāng)人們食用含有鹽酸克倫特羅（瘦肉精）殘留的產(chǎn)品后會產(chǎn)生一定的中毒癥狀。在畜牧業(yè)生產(chǎn)中一些非法使用者將其作為一種生長促進(jìn)劑添加到動物克倫特羅的毒性心血管系統(tǒng)：

心悸、心慌、頭暈頭痛等臨床癥狀

神經(jīng)系統(tǒng)

惡心、嘔吐、肌肉疼痛、肌肉顫抖、興奮、不自主地顫抖、運動障礙禁忌癥

心臟病、糖尿病、高血壓、青光眼、甲亢

克倫特羅的毒性心血管系統(tǒng)：

心悸、心慌、頭暈頭痛等臨床癥狀中毒劑量人醫(yī)用藥量：

0.02~0.5μg/kg中毒一般含量：肝臟100~500μg/kg中毒極端含量：肝臟19~5395μg/kg

中毒劑量人醫(yī)用藥量：以克倫特羅快速檢測★

金標(biāo)（膠體金）快速檢測試紙★金標(biāo)（膠體金）快速檢測卡金標(biāo)試紙金標(biāo)檢測卡以克倫特羅快速檢測★金標(biāo)（膠體金）快速檢測試紙金標(biāo)試紙金金標(biāo)檢測技術(shù)的基本原理金標(biāo)免疫檢測試紙條系統(tǒng)使用一種特殊的多孔膜（NC膜）作為固相載體。該膜具有很強的蛋白吸附功能，抗體抗原吸附于NC膜并經(jīng)干燥處理后即作為固相，可與液相中的相應(yīng)標(biāo)記了膠體金的抗原抗體快速結(jié)合。

在濕潤狀態(tài)下，液相中的抗原抗體免疫金可因“燈芯引流現(xiàn)象”作快速定向泳動并與固相另一抗原決定簇單抗結(jié)合，形成特異的金標(biāo)記抗體－抗原－抗體紅色沉積線，表現(xiàn)出抗原抗體的特征反應(yīng)。金標(biāo)檢測技術(shù)的基本原理金標(biāo)免疫檢測試紙條系統(tǒng)使用一種特殊的多BSA偶聯(lián)的克倫特羅分子與膠體金顆粒結(jié)合，包被在玻纖上標(biāo)記抗原的金顆粒在纖維素膜上分別將克倫特羅抗體和BSA抗體分別包被在檢測區(qū)（T）和質(zhì)控區(qū)（C）抗體試劑條組裝被標(biāo)記的金顆粒樣品墊濾紙抗體加入樣品樣品流動試劑條檢測BSA偶聯(lián)的克倫特羅分子與膠體金顆粒結(jié)合，包被在玻纖上標(biāo)記抗樣品中沒有克倫特羅時：

金顆粒上的克倫特羅抗原和纖維素膜上抗體的結(jié)合，檢測區(qū)T線顯示紅色。樣品中有高濃度的克倫特羅（>3ppb

）時：

由于樣品中克倫特羅的分子與金顆粒上克倫特羅抗原競爭與纖維素膜上的抗體結(jié)合，當(dāng)樣本中克倫特羅濃度較高，膠體金偶聯(lián)物不能與克倫特羅抗體結(jié)合，T線不顯色；當(dāng)樣本中克倫特羅低于一定值，T線紫紅色線條。樣品中沒有克倫特羅時：金顆粒上的克倫特羅抗原T線C線

這樣，在高濃度的情況下，即使T線不出現(xiàn)，只要C線出現(xiàn)，就知道試劑沒有問題。而如果連C線都沒有，則可知道是試劑有問題，該包裝的試劑應(yīng)該棄用。這樣就避免了假陽性的結(jié)果。>3ppb1ppb0.5ppb0ppb陽性陰性T線C線這樣，在高濃度的情況下，即使T線不出現(xiàn)，金標(biāo)卡檢測操作與注意事項1）.

檢測準(zhǔn)備（1）準(zhǔn)備：

試劑盒尿樣記錄本記號筆計時器操作步驟

（2）打開試劑盒

（3）閱讀說明書金標(biāo)卡檢測操作與注意事項1）.

檢測準(zhǔn)備操作步驟（2）打開

（1）取出檢測卡：根據(jù)檢測樣品數(shù)量確定需要的檢測卡數(shù)量2）.

操作

（2）檢測卡放置：在平坦的臺面上

（3）檢測卡標(biāo)記（必要時）：標(biāo)記上尿樣編號（1）取出檢測卡：根據(jù)檢測樣品數(shù)量確定需要的檢測卡數(shù)量2）2）.

操作

（4）吸取尿樣：用試劑盒帶的滴管吸取尿樣

（5）滴加尿樣：滴管垂直滴加2滴尿樣于加樣孔（S）中2）.

操作（4）吸取尿樣：用試劑盒帶的滴管吸取尿樣（5

（6）觀察結(jié)果：肉眼觀察紫紅條帶的出現(xiàn)，測試結(jié)果應(yīng)在5min時讀取2）.

操作（6）觀察結(jié)果：肉眼觀察紫紅條帶的出現(xiàn)，測試結(jié)果應(yīng)在5mi3）.

結(jié)果判定陽性（+）：僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色帶，在測試區(qū)（T）內(nèi)無紫紅色條帶出現(xiàn)。表明尿液中的克倫特羅殘留物大于3ppb。

陰性（-）：兩條紫紅色條出現(xiàn)。一條位于測試區(qū)（T）內(nèi)，另一條位于質(zhì)控區(qū)內(nèi)（C）。表明尿液中不含克倫特羅殘留物或小于3ppb。

無效：質(zhì)控區(qū)（C）未出現(xiàn)紫紅色條帶，表明不正確的操作過程或檢測卡已變質(zhì)損壞。在此情況下，應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書，并用新的檢測卡重新測試。如果問題仍然存在，應(yīng)立即停止使用此批號產(chǎn)品，并與當(dāng)?shù)毓?yīng)商聯(lián)系。未加樣前陰性陽性無效3）.

結(jié)果判定陽性（+）：僅質(zhì)控區(qū)（C）出現(xiàn)一條紫紅色帶，2.2.注意事項1）.存儲與使用（1）儲存：室溫（2-40℃）陰涼干燥處，忌冷凍。（2）使用：室溫（2-40℃）使用，檢測卡取出20min內(nèi)使用，避免受潮失效。（3）反應(yīng)：檢測卡避免陽光直射、空調(diào)或風(fēng)扇直吹。2.2.注意事項1）.存儲與使用注意事項2）.操作過程（1）檢測卡放置：放置于水平的臺面上，忌傾斜。（2）加樣：①尿樣加入加樣孔中，不要加入檢測區(qū)；②垂直滴加2滴尿樣，不要整管加入（3）結(jié)果判讀：測試結(jié)果在5min時判讀注意事項2）.操作過程注意事項3）.樣品準(zhǔn)備一般澄清尿樣可直接用于檢測，較為渾濁尿樣建議離心或過濾后用于檢測4）.包裝袋使用未用完檢測卡的包裝袋要確認(rèn)封口密封，以免產(chǎn)品受潮注意事項3）.樣品準(zhǔn)備無效結(jié)果與可能原因無效結(jié)果正常結(jié)果陽性陰性白板無C線出線淡不跑板可能原因1.包裝袋密封不好，產(chǎn)品受潮2.檢測卡未水平放置3.尿樣加入檢測區(qū)4.尿樣加樣量太多或太少5.不潔凈尿樣，如含有漂白粉、明礬，或渾濁尿樣6.檢測環(huán)境溫度過低7.產(chǎn)品過期8.其他原因無效結(jié)果與可能原因無效結(jié)果正常結(jié)果陽性陰性鹽酸克倫特羅檢測卡適用于豬肉、內(nèi)臟、豬尿液中國鹽酸克倫特羅含量的檢測；靈敏度（閾值）：不同規(guī)格3ng/ml(kg)、5ng/ml(kg)、6ng/ml(kg)等針對豬組織和尿液采樣不同類型的檢測卡，使用時應(yīng)區(qū)別使用；肉及內(nèi)臟中脂肪會導(dǎo)致假陽性結(jié)果，取樣時需剔除肉眼可見的脂肪；檢測卡應(yīng)在在常溫下使用，不用對剛屠宰或冷凍豬肉直接進(jìn)行檢測；自來水、蒸餾水或去離子水不能作為陰性對照，可用閾值接近的幾個濃度階梯來校驗檢測卡的靈敏度。鹽酸克倫特羅檢測卡適用于豬肉、內(nèi)臟、豬尿液中國鹽酸克倫特羅含萊克多巴胺檢測卡氯霉素檢測卡萊克多巴胺檢測卡氯霉素檢測卡5章-農(nóng)藥、獸藥殘留速測技術(shù)ppt課件牛乳中青霉素酶活檢測試劑盒適用范圍：檢測牛乳中殘留的青霉素酶檢測原理：采用間接競爭法，利用青霉素酶可分解牛奶樣品中的β-內(nèi)酰胺類抗生素的原理，通過配體-受體識別法快速測定與青霉素酶反應(yīng)后殘留的青霉素G的含量，從而檢測牛奶樣品中殘留的青霉素酶。

本試劑盒一個小時內(nèi)便可檢測到牛奶樣品中殘留的青霉素酶，在40℃±3℃溫育45分鐘后，極低濃度的青霉素酶便可以催化水解4ppb的青霉素G。牛乳中青霉素酶活檢測試劑盒適用范圍：檢測牛乳中殘留的青霉素酶試劑盒組成：

青霉素酶活性檢測試劑盒所含有的試劑：

含有特定濃度青霉素G的玻璃試劑瓶；

試劑筒（包括8孔微孔試劑和8條測試條）

微量移液器配套吸頭96支

陰性質(zhì)控（不含抗生素和酶的原奶干粉），淺綠