大腸埃希菌課件

腸桿菌科

是一大群生物學(xué)性狀相似的革蘭氏陰性短小桿菌，有的為致病菌，多為腸道內(nèi)正常菌群，可引起醫(yī)院感染。致病菌：傷寒沙門(mén)菌機(jī)會(huì)致病菌：大腸埃希菌正常菌株轉(zhuǎn)變來(lái)的致病菌：如獲得質(zhì)粒的大腸埃希菌與醫(yī)學(xué)的關(guān)系腸桿菌科是一大群生物學(xué)性狀相似的革蘭氏陰性短1腸道桿菌共同特點(diǎn)形態(tài)結(jié)構(gòu)

G—中小桿菌，無(wú)芽孢，多數(shù)有鞭毛及菌毛腸道桿菌共同特點(diǎn)形態(tài)結(jié)構(gòu)2培養(yǎng)特性

需氧或兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基可生長(zhǎng)，菌落相似，形成灰白色中等大小S型菌落。生化反應(yīng)活躍，常用于鑒別腸道桿菌培養(yǎng)特性3EMB（伊紅——美蘭培養(yǎng)基），乳糖、伊紅、美蘭選擇作用（弱選）大腸埃希菌（非致病菌）乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸伊紅結(jié)合美蘭形成紫黑色金屬光澤化合物有色的乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門(mén)菌等（致病菌）乳糖不發(fā)酵伊紅美蘭不能結(jié)合無(wú)色的乳糖不發(fā)酵菌落EMB（伊紅——美蘭培養(yǎng)基），乳糖、伊紅、美蘭選擇作用大腸埃4EMB平板上的E.coliEMB平板上的E.coli5SS培養(yǎng)基（沙門(mén)志賀培養(yǎng)基）乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠等抑制劑選擇抑制作用（強(qiáng)選）大腸埃希菌產(chǎn)酸桃紅色乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門(mén)菌無(wú)色乳糖不發(fā)酵菌落膽鹽、煌綠：抑制大腸埃希菌及G+菌，提高腸道致病菌檢出率乳糖發(fā)酵中性紅呈紅色乳糖不發(fā)酵SS培養(yǎng)基（沙門(mén)志賀培養(yǎng)基）選擇抑制作用大腸埃希菌6抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜菌體（O）抗原鞭毛（H）抗原表面（K、Vi）抗原抵抗力不強(qiáng)，60℃30min即可滅活易出現(xiàn)各種變異

抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜7第一節(jié)大腸桿菌（埃希菌屬）

第一節(jié)大腸桿菌（埃希菌屬）8大腸埃希菌課件9大腸埃希菌課件10生物學(xué)性狀形態(tài)染色符合腸桿菌特點(diǎn)，周毛菌，有菌毛培養(yǎng)特性符合腸桿菌特點(diǎn)EMB——紫黑色有金屬光澤乳糖發(fā)酵菌落S-S——桃紅色生化反應(yīng)IMViC（++--）抗原O抗原（O1---O173）H抗原（H1---H56）K抗原（K1---K100）血清型表示法：O：K：H生物學(xué)性狀形態(tài)染色符合腸桿菌特點(diǎn)，周毛菌，有菌毛11致病性一、致病物質(zhì)除內(nèi)毒素、莢膜腸桿菌科共有的毒力因子外，大腸埃希菌具有獨(dú)特的毒力因子有：黏附素——吸附，包括定植因子抗原、菌毛等。致病性一、致病物質(zhì)12外毒素（由ETEC產(chǎn)生的腸毒素）（1）不耐熱腸毒素（LT），分LT-I和LT-Ⅱ兩型蛋白質(zhì)對(duì)熱不穩(wěn)定，與霍亂腸毒素相似

A亞單位——毒素活性成分機(jī)制

B亞單位——與腸上皮細(xì)胞受體（GM1神經(jīng)節(jié)苷脂） 結(jié)合B單位與受體結(jié)合→導(dǎo)致A進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)→激活腺苷酸環(huán)化酶ATPCAMP↑小腸液過(guò)度分泌腸腔積液、腹瀉外毒素（由ETEC產(chǎn)生的腸毒素）ATPCA13（2）耐熱腸毒素（ST），分STa、STb兩型為低分子多肽，對(duì)熱穩(wěn)定機(jī)制為激活細(xì)胞鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶，使cGMP↑導(dǎo)致腹瀉LT和ST同時(shí)存在，致病性更強(qiáng)（2）耐熱腸毒素（ST），分STa、STb兩型14所致疾?。耗c道外感染（多為內(nèi)源性感染）化膿性感染——定位轉(zhuǎn)移腹膜炎、闌尾炎、創(chuàng)傷感染、手術(shù)刀口感染、肺炎、敗血癥、新生兒腦膜炎等泌尿道感染——病原菌來(lái)自病人腸道（上行性）占泌尿道感染首位、女性多見(jiàn)（尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎等）所致疾?。?5腸道感染——胃腸炎（外源性感染)腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌（ETEC）：嬰幼兒、旅游者腹瀉，與霍亂功能相似A亞單位——毒素活性成分機(jī)制

B亞單位——與腸上皮細(xì)胞受體（GM1神經(jīng)節(jié)苷脂）結(jié)合

B單位與受體結(jié)合→導(dǎo)致A進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)→激活腺苷酸環(huán)化酶

ATPCAMP↑小腸液過(guò)度分泌腸腔積液、腹瀉腸道感染——胃腸炎（外源性感染)ATP16腸侵襲性大腸埃希菌（EIEC）：成人腹瀉，與菌痢相似腸致病性大腸埃希菌（EPEC）：嬰兒腹瀉（水樣腹瀉）腸出血性大腸埃希菌（EHEC，O157）：出血性結(jié)腸炎，溶血性尿毒綜合征（HUS）腸集聚性大腸埃希菌（EAEC）：嬰兒腹瀉（持續(xù)性）腸侵襲性大腸埃希菌（EIEC）：17微生物學(xué)檢查與防治腸道外感染標(biāo)本→涂片、染色→分離培養(yǎng)→鑒定尿路感染時(shí)每ml尿含菌≥10萬(wàn)，有診斷價(jià)值腸道內(nèi)感染鑒別培養(yǎng)基鑒定為大腸埃希菌腸毒素、毒力因子和血清型鑒定衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查

每1000ml水中大腸桿菌≤3個(gè)，每100ml瓶裝汽水、果汁中，大腸桿菌≤5個(gè)微生物學(xué)檢查與防治腸道外感染18第二節(jié)志賀菌屬生物學(xué)性狀形態(tài)染色符合腸桿菌特征，有菌毛，無(wú)鞭毛，無(wú)動(dòng)力是本菌與其它腸道致病菌主要區(qū)別點(diǎn)培養(yǎng)特性腸道鑒別培養(yǎng)基上的無(wú)色透明、乳糖不發(fā)酵菌落第二節(jié)志賀菌屬生物學(xué)性狀19生化反應(yīng)葡萄糖（+）、乳糖（-）（宋內(nèi)志賀菌遲緩發(fā)酵乳糖）、H2S-、尿素-抗原分類(lèi)——根據(jù)O抗原分4群，40余型A群——痢疾志賀菌（10）B群——福氏志賀菌（13）C群——鮑氏志賀菌（18）D群——宋氏志賀菌（1）抵抗力比其它腸桿菌弱，尤其對(duì)酸敏感生化反應(yīng)20致病性與免疫性致病物質(zhì)侵襲力——黏附腸黏膜上皮細(xì)胞——Ⅲ型分泌系統(tǒng)—穿透上皮細(xì)胞并擴(kuò)散、傳播內(nèi)毒素——強(qiáng)烈內(nèi)毒素，作用于局部并可吸附入血引起全 身癥狀外毒素——A群（Ⅰ、Ⅱ型）產(chǎn)生志賀毒素（ST）,阻斷蛋白質(zhì)的合成 致病性與免疫性致病物質(zhì)21細(xì)菌（菌毛）吸附腸黏膜上皮細(xì)胞穿入細(xì)胞并擴(kuò)散周?chē)吧钊腽つは聦俞尫艃?nèi)毒素、外毒素腸局部黏膜炎癥（變性、壞死、脫落）出血、壞死、潰瘍膿血便/黏液血便刺激腸壁植物神經(jīng)腸蠕動(dòng)↑腸肌痙攣腺體分泌↑水分吸收↓腹痛、腹瀉刺激直腸肛門(mén)括約肌里急后重便數(shù)增加吸收入血發(fā)熱、白細(xì)胞↑高熱、休克中毒性腦病DIC死亡毒血癥中毒性菌痢細(xì)菌（菌毛）吸附腸黏膜上皮細(xì)胞穿入細(xì)胞并擴(kuò)散周?chē)吧钊腽つは?2所致疾病——細(xì)菌性痢疾傳染源：病人、帶菌者傳播途徑：經(jīng)口臨床類(lèi)型急性菌痢中毒性菌痢慢性菌痢免疫力不牢固，易再感染所致疾病——細(xì)菌性痢疾23微生物學(xué)檢查與防治微生物學(xué)檢查分離鑒定毒力實(shí)驗(yàn)快速診斷防治更有效的疫苗還在研制中，此菌極易出現(xiàn)耐藥性，依藥株。微生物學(xué)檢查與防治微生物學(xué)檢查24第三節(jié)沙門(mén)菌屬

是腸桿菌科中最復(fù)雜的菌屬，有2000種以上血清型對(duì)人類(lèi)有致病性腸熱癥——傷寒沙門(mén)菌，甲型副傷寒沙門(mén)菌、肖氏沙門(mén)菌、希氏沙門(mén)菌食物中毒——鼠傷寒沙門(mén)菌、豬霍亂沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌敗血癥——豬霍亂沙門(mén)菌最常見(jiàn)第三節(jié)沙門(mén)菌屬是腸桿菌科中最25生物學(xué)性狀形態(tài)染色符合腸桿菌特點(diǎn)，多為周毛菌，有菌毛傷寒桿菌的周身鞭毛生物學(xué)性狀形態(tài)染色傷寒桿菌的周身鞭毛26大腸埃希菌課件27培養(yǎng)特性EMB、SS上呈無(wú)色透明乳糖不發(fā)酵菌落麥康凱培養(yǎng)基上的傷寒桿菌菌落培養(yǎng)特性麥康凱培養(yǎng)基上的傷寒桿菌菌落28

EMB培養(yǎng)基，上為E.coli，下為傷寒桿菌 EMB培養(yǎng)基，上為E.coli，下為傷寒桿菌29生化反應(yīng)乳糖（-），葡萄糖（+），多數(shù)H2S+，動(dòng)力+，尿素（-）抗原結(jié)構(gòu)O抗原——特異性低、穩(wěn)定、分群（組）H抗原——特異性高，不穩(wěn)定，分型Vi抗原（毒力抗原）——不穩(wěn)定，可阻止“O”凝集抵抗力不強(qiáng)生化反應(yīng)30致病性與免疫性致病物質(zhì)侵襲力菌毛——吸附Ⅲ型分泌系統(tǒng)——穿入細(xì)胞，擴(kuò)散Vi抗原——微莢膜（抗吞噬）內(nèi)毒素外毒素——個(gè)別（鼠傷寒沙門(mén)菌）產(chǎn)生，與ETEC腸毒素相似致病性與免疫性致病物質(zhì)31所致疾病菌毛穿入淋巴液胸導(dǎo)管第二次菌血癥遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)腸壁壞死、潰瘍高熱、肝脾腫大、玫瑰疹、白細(xì)胞↓等全身中毒癥狀肝脾腎淋巴結(jié)膽囊尿排菌糞便排菌發(fā)病期（1-4W）潛伏期2W腸熱癥傷寒沙門(mén)菌等經(jīng)口吸附小腸黏膜細(xì)胞上在腸壁、腸系膜淋巴組織中繁殖（致敏）血流（第一次菌血癥）腸出血、腸穿孔所致疾病菌毛穿入淋巴液胸導(dǎo)管第二次菌血癥遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)高熱、321、腸熱癥臨床過(guò)程潛伏期2W發(fā)病期：高熱、肝脾腫大、皮疹、WBC↓等全身中毒癥狀，此期血液（80%）、骨髓（90%（+）有大量細(xì)菌。隨著病情的發(fā)展，全身癥狀持續(xù)加重，此期血、骨髓中仍有菌，但糞便（60%）、尿（20%）、皮疹液中可查到細(xì)菌，由于Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)——并發(fā)癥發(fā)生，血液抗體達(dá)到陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)——肥達(dá)反應(yīng)恢復(fù)期：第四周末，體溫下降，癥狀消失，恢復(fù)期帶菌1年（糞便仍陽(yáng)性），血液抗體仍高。1、腸熱癥332、胃腸炎（食物中毒）

潛伏期短，6-24h，起病急，病程短2-4天，發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉3、敗血癥

經(jīng)口感染，經(jīng)腸道入血，敗血癥癥狀明顯而腸道癥狀不明顯4、帶菌者

健康帶菌者，恢復(fù)期帶菌者免疫性

腸熱癥，病后有一定免疫力，可重復(fù)感染2、胃腸炎（食物中毒）34傷寒桿菌感染示意圖傷寒桿菌感染示意圖35微生物學(xué)檢查與防治分離培養(yǎng)與鑒定標(biāo)本采取腸熱癥：1W取血，2W取糞便，3W取尿液，1－3W取骨髓液食物中毒：糞便、嘔吐物、可疑食物敗血癥：血帶菌者：糞便分離鑒定：增菌（血、骨髓）→EMB、SS→生化反應(yīng)→血清鑒定微生物學(xué)檢查與防治分離培養(yǎng)與鑒定36血清學(xué)診斷——肥達(dá)反應(yīng)（Widal）原理用已知傷寒沙門(mén)氏菌O抗原及H抗原，以及引起副傷寒的沙門(mén)氏菌H抗原與待檢血清作凝集試驗(yàn)，測(cè)定待檢血清中有無(wú)相應(yīng)抗體及其效價(jià)。（TO、TH、PA、PB）方法：試管凝集法（定量）TO≥1：80，TH≥1：160，PA、PB均≥1：80才有意義動(dòng)態(tài)觀察：雙份血清抗體四倍升高有診斷意義血清學(xué)診斷——肥達(dá)反應(yīng)（Widal）原理37臨床意義

O抗體（IgM），H抗體（IgG）O、H抗體均升高，患傷寒的可能性大O、H抗體不升高，患傷寒的可能性小只有H升高，則可能是預(yù)防接種過(guò)或非特異性回憶反應(yīng)，只有O升高而H不高，則可能是感染早期或其他沙門(mén)菌的交叉反應(yīng)。臨床意義38第四節(jié)其他菌屬克雷伯菌屬（7個(gè)種）肺炎克氏菌（3個(gè)亞種）的肺炎亞種，俗稱(chēng)肺炎桿菌，與人類(lèi)感染有關(guān)

G-球桿菌，無(wú)動(dòng)力，有較厚的莢膜，多有菌毛抵抗力低下者易感，常引起醫(yī)院內(nèi)感染，如肺炎、支氣管炎、泌尿道感染等第四節(jié)其他菌屬克雷伯菌屬（7個(gè)種）39變形桿菌G-桿菌，有多形性，周身鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，在普通培養(yǎng)基上呈擴(kuò)散性生長(zhǎng)，稱(chēng)為遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象變形桿菌的周身鞭毛遷徙生長(zhǎng)