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滬科版高中第三冊(cè)《果蠅唾液腺細(xì)胞染色體觀察》教學(xué)設(shè)計(jì)1.教學(xué)目標(biāo)1.1知識(shí)目標(biāo):了解染色體的結(jié)構(gòu)與功能,掌握果蠅唾液腺細(xì)胞的染色體特點(diǎn),并能觀察和描述染色體在不同生殖細(xì)胞中的變化。1.2能力目標(biāo):能夠使用相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)儀器和試劑,熟練進(jìn)行細(xì)胞固定、染色及顯微鏡下的觀察操作。能夠運(yùn)用所學(xué)科學(xué)知識(shí)和方法,分析觀察結(jié)果,提出相應(yīng)的結(jié)論和解釋。1.3情感目標(biāo):增強(qiáng)班級(jí)合作意識(shí),激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)科學(xué)的興趣;激發(fā)學(xué)生探究未知的勇氣和興趣,形成能夠合作探究問(wèn)題的自主學(xué)習(xí)能力。2.教學(xué)內(nèi)容2.1學(xué)科知識(shí):細(xì)胞學(xué):染色體結(jié)構(gòu)、細(xì)胞分裂過(guò)程等。2.2實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:對(duì)果蠅唾液腺細(xì)胞進(jìn)行觀察,掌握染色體的特點(diǎn)和不同生殖細(xì)胞中染色體的變化。3.教學(xué)重難點(diǎn)3.1教學(xué)重點(diǎn):掌握果蠅唾液腺細(xì)胞的染色體特點(diǎn),并能觀察和描述染色體在不同生殖細(xì)胞中的變化。3.2教學(xué)難點(diǎn):理解染色體的復(fù)雜結(jié)構(gòu)、對(duì)染色體變異的觀察和解釋。4.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)4.1實(shí)驗(yàn)原理對(duì)產(chǎn)生果蠅唾液腺細(xì)胞進(jìn)行固定處理,使其表現(xiàn)出捕獲到的瞬間形態(tài)。在免疫組化試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行染色,觀察染色體的形態(tài)特征。4.2實(shí)驗(yàn)儀器和試劑儀器名稱數(shù)量試劑名稱數(shù)量滴定管31×磷酸鹽緩沖液pH7.350mL10mL試管51×PBS-放射性20mL觀察鏡片53%均二甲基三聚氧硅凝膠50mL熱水槽1鹽酸1mLNOTEBOOK電腦1甲醛1mL顯微鏡3甲酸1mL錄像設(shè)備1乙醛1mL冰盒1Tween-205mL冰袋1DTT1g天平1Triton-X10010mL測(cè)微計(jì)1LysisBuffer5mL電泳槽1Proteaseinhibitor5mL成像設(shè)備1PMSF100mg離心機(jī)1Phenylmethylsulfonylfluoride1mL細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)器材4.3實(shí)驗(yàn)步驟4.3.1細(xì)胞標(biāo)本固定1.1選擇飽滿新鮮的果蠅,取下其頭部,擠出唾液腺,將唾液腺直接放入含有50%甲醛的PBS中,即將唾液腺上清液排出,完全浸泡在甲醛上。1.2在4°C的冰箱內(nèi)固定18小時(shí)(或在20°C室溫下固定1-2小時(shí),然后放到4°C冰箱固定),要使固定充分,防止開(kāi)裂,取出后漂洗1×PBS,用PBS淬火2分鐘,然后吸去PBS,加入甲酸,18°C變異28分鐘,熱水浴2-4秒鐘,然后用兩次三夫氏藍(lán)染色1分鐘,洗1×PBS,掛在去離子水上晾干。4.3.2細(xì)胞核糖體DNA染色2.1在玻片上滴上少量3%均二甲基三聚氧硅凝膠,將細(xì)胞標(biāo)本置于均二甲基三聚氧硅凝膠上,使其浸潤(rùn)5分鐘。2.2涂上10μg/mL的熒光素反應(yīng)劑,放置40分鐘,適當(dāng)用PBS淬火,漂洗酒精和倍性油,在顯微鏡下觀察并記錄染色體觀察結(jié)果。4.4實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)制備甲醛溶液時(shí)一定要使用銅、鐵及鎳等活潑金屬等材料。制備均二甲基三聚氧硅凝膠時(shí),注意不要受熱。熒光素反應(yīng)劑應(yīng)放置于25°C以下,以避免異化。5.教學(xué)評(píng)估5.1實(shí)驗(yàn)考核考核內(nèi)容:設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程,觀察分析結(jié)果,撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。5.2課堂考核針對(duì)染色體相關(guān)知識(shí)進(jìn)行測(cè)試,包括染色體結(jié)構(gòu)、染色體變異、細(xì)胞分裂等方面。5.3實(shí)驗(yàn)報(bào)告撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告,詳細(xì)描述實(shí)驗(yàn)過(guò)程和結(jié)果,有重點(diǎn)闡述在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的觀察和發(fā)現(xiàn)。6.教學(xué)建議本教學(xué)設(shè)計(jì)難度較大,需要學(xué)生掌握不少實(shí)驗(yàn)操作技能,需要較多的實(shí)踐時(shí)間來(lái)練習(xí)和掌握。建議實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,教師要給予指導(dǎo)、講解和提示,確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)
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