控制菌及螨類(lèi)檢查技術(shù)-控制菌檢查方法驗(yàn)證

項(xiàng)目九控制菌檢查及螨類(lèi)檢查技術(shù)任務(wù)3控制菌檢查方法驗(yàn)證知識(shí)點(diǎn)3控制菌檢查方法驗(yàn)證步驟3控制菌檢查方法驗(yàn)證當(dāng)建立藥品的控制菌檢查方法時(shí)，應(yīng)進(jìn)行控制菌檢查方法的驗(yàn)證，以確認(rèn)所采用的方法是用于藥品的控制菌檢查。若藥品的組分或原檢查條件發(fā)生改變可能影響檢查結(jié)果時(shí)，檢查方法應(yīng)重新驗(yàn)證。驗(yàn)證時(shí)，各品種向下控制菌檢查標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的菌種進(jìn)行選擇，驗(yàn)證大腸桿菌檢查法時(shí)，采用大腸埃希菌作為驗(yàn)證菌株。

控制菌檢查方法驗(yàn)證步驟3.1方法驗(yàn)證用標(biāo)準(zhǔn)菌株控制菌檢查要進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照，其陽(yáng)性對(duì)照菌種如下。菌種的選擇以《中國(guó)藥典》附錄為準(zhǔn)，具體如下。3.1.1大腸埃希菌(

Escherichia

coli)3.1.2金黃色葡萄球菌(

Staphylococcus

aureu)3.1.3乙型副傷寒沙門(mén)菌(

Salmonella

paratyphi)3.1.4銅綠假單孢菌(

Pseudomonas

aeruginosa)3.1.5生孢梭菌(

Clostridium

sporogenes)3.1.6白色念珠菌(

Candida

albicans)控制菌檢查方法驗(yàn)證步驟3.2方法驗(yàn)證用菌液制備接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型副傷寒沙門(mén)菌、銅綠假單胞的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)18-24h;接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁養(yǎng)基中或改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)18-24h。用0.9％無(wú)菌氯化鈉溶液制成1ml含菌數(shù)為10-100cfu的菌懸液。菌懸液在室溫下放置應(yīng)在2h內(nèi)使用，若保存在2～8℃可在24h內(nèi)使用?？刂凭鷻z查方法驗(yàn)證步驟3.3方法驗(yàn)證用供試液的制備根據(jù)被檢藥品的理化特性與生物學(xué)特性，采取適宣的方法制備供試液。所用乳化劑、分散劑、中和劑或滅活劑及其用量應(yīng)證明是有效的，并對(duì)微生物無(wú)毒性。供試液的制備若需用水溶加溫時(shí)，溫度不應(yīng)超過(guò)45℃，時(shí)間不得超過(guò)30min。除另有規(guī)定外,常用的供試品制備方法如下。3.3.1一般供試品溶液的制備

3.3.1.1.液體供試品

取供試品10ml，加pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，混勻，作為供試液。油劑可加入適量的無(wú)菌聚山梨酯80使供試品分散均勻。水溶性液體制劑可用混合的供試品原液作為供試液?？刂凭鷻z查方法驗(yàn)證步驟3.3.1.2固體、半固體或黏稠液供試品

取供試品10g，加pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，用勻漿儀或其他適宜的方法，混勻，作為供試液。必要時(shí)加適量的無(wú)菌聚山梨酯80，并置水浴中適當(dāng)加溫使供試品分散均勻。3.4驗(yàn)證方法3.4.1試驗(yàn)組：取規(guī)定量供試液及10～100cfu試驗(yàn)菌加入增菌培養(yǎng)基中，按相應(yīng)的控制菌檢查法進(jìn)行檢查，當(dāng)采用薄膜過(guò)濾法時(shí)，試驗(yàn)菌應(yīng)加在最后一次沖洗液中，沖洗后，取出濾膜接至增菌培養(yǎng)基中?？刂凭鷻z查方法驗(yàn)證步驟3.4.2陽(yáng)性對(duì)照組：取10～100cfu試驗(yàn)菌加入增菌培養(yǎng)基中，按相應(yīng)的控制菌檢查法進(jìn)行檢查3.4.3陰性對(duì)照組：取相應(yīng)的稀釋液替代供試品，按相應(yīng)的控制菌檢查法進(jìn)行檢查。3.5結(jié)果判斷陽(yáng)性對(duì)照組應(yīng)檢出試驗(yàn)菌，陰性對(duì)照組應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。若試驗(yàn)組檢出試驗(yàn)菌，按