除草劑生物測定

第三章除草劑生物測定第一節(jié)除草劑的生物測定評估第二節(jié)除草劑的常用生物測定方法第三節(jié)除草劑的生物測定技術(shù)應用第一節(jié)除草劑生物測定的評估一除草劑評估的復雜性同一藥劑對植物器官的非專一性不同藥劑對植物器官的同一性不同劑量對植物作用效應不一樣第一節(jié)除草劑的生物測定評估二除草劑生物測定的評估標準1種子萌發(fā)以試驗植物的種子是否萌發(fā)作為評定除草劑活性的指標。黃瓜、高梁及燕麥均為種子萌發(fā)試驗的常用植物材料。2植株反應2.1植株的局部反應主要選取反應特征比較明顯的植株部位，如根長、莖長是否受到了明顯的抑抑制。第一節(jié)除草劑的生物測定評估1種子萌發(fā)2植株反應

2.1植株的局部反應2.2整株植物的反應植株是否完全死亡，如未死亡則取植株的地上部或地下部的量取長度、或稱取整株植物的鮮重或干重等。如果條件能作到相對一致，用鮮重表示較干重表示更能說明問題。第一節(jié)除草劑的生物測定評估二除草劑生物測定的評估標準1種子萌發(fā)2植株反應

3生理、生化反應根據(jù)植物進行光合作用時有CO2吸收和O2釋放，可作為生物測定時的評價指標，尤其是在進行作用機制的研究時，更為準確。

如：利用測氧儀可觀察的莎樸隆和樸草凈對多變魚腥藻的影響，通過觀察每小時每mg葉綠素放出的毫摩爾氧量來評估光合活性的大?。╱molO2/mg.h）第一節(jié)除草劑的生物測定評估二除草劑生物測定的評估標準1種子萌發(fā)2植株反應

3生理、生化反應4反應等級無論觀察的是植株什么類型的反應，都可以用反應等級進行評估。具體的級別標準，則要根據(jù)試驗目的擬定。

如對具生長抑制作用的除草劑實行反應等級評價時，就可以采用6級標準制：0級：同對照；1級：抑制生長25%以下；2級：抑制生長50%以下；3級：抑制生長75%以下；4級：抑制生長75%以上；5級：全部死亡；第三章除草劑生物測定第一節(jié)除草劑的生物測定評估第二節(jié)除草劑常用生物測定方法

一實驗室測定二溫室測定三田間測定第二節(jié)除草劑常用生物測定方法一實驗室測定1種子萌發(fā)法10稗草胚軸法2小杯法11番茄水培法3高梁法12燕麥法4蘿卜子葉法13浮萍法5黃瓜幼苗法14玉米法6黃瓜子葉園片法15園葉片漂浮法7小球藻法16再生苗測重法8小麥根長法17葉鞘滴注法9去胚乳小麥幼苗法一實驗室測定1種子萌發(fā)法1.1（BTB法）溴麝香草酚藍法

BTB為一種酸性呈黃色、中性（7.1）呈綠色、堿性呈藍色的批示劑。種子發(fā)芽時會因呼吸作用而使CO2溶于水而生成H2CO3，而H2CO3又會進一步離解成H+

和HCO3-，使種子周圍的環(huán)境pH下降，如果除草劑具有抑制呼吸的作用，那么，通過對BTB的顏色變化即可判斷種子是否為活的。1種子萌發(fā)法1.1（BTB法）溴麝香草酚藍法1.2(TTC法)氯化三苯四氮唑法

TTC能滲透進入種胚的活細胞內(nèi)，并作為受體被脫氫輔酶（NADH2或NADPH2）上的氫還原，本來無色的TTC會變?yōu)榧t色的三苯基甲酯（TTF）。

NNC6H5NNHC6H5C6H5CC6H5CNN+C6H5

NNC6H5

TTC（無色）TTF(紅色)1種子萌發(fā)法

2小杯法

以小杯作為測試工具，杯底放一園形濾紙片，加入一定量的除草劑溶液，再將稗草、油菜、水稻、小麥等敏感植物，蓋上蓋在生長箱內(nèi)培養(yǎng)4-7d，其間要補足蒸餾水以減少蒸發(fā)。待癥狀明顯時測量根長或鮮重。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法

以高梁種子為試材，選取規(guī)格一致的磨口培養(yǎng)皿，裝入洗凈的黃沙、刮平使之與皿邊相齊，每皿漫漫加入一定量的除草劑藥液，以全皿黃沙正好浸透為宜，再將剛剛萌發(fā)出現(xiàn)幼根的高梁種子排列于沙表面（胚芽向上，幼根朝下），蓋緊皿蓋并將培養(yǎng)皿斜靠使之與平面成15℃角，以使根沿著皿蓋生長。培養(yǎng)皿置于暗室（28±2℃）36-42h后取出，測量高梁幼根的長度。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法本法測定具觸殺性的除草劑較為合適。取紅蘿卜子種子洗凈播種在墊有兩層濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，暗室培養(yǎng)24-30h，從幼苗上切下子葉，再放入盛有以0.2M磷酸緩沖液配制的不同濃度除草劑藥液的培養(yǎng)皿內(nèi)，加蓋后置于25±1℃

的恒溫培養(yǎng)室內(nèi)，輔以3000勒克斯的日光燈連續(xù)照光3天，然后按不同處理提取葉綠素A、B，與標準葉綠素A、B相比較求出抑制葉綠素含量50%的除草劑濃度。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法

精選黃瓜種子，直接放入含有待測除草劑藥液的培養(yǎng)皿中，以蒸餾水為CK，放入26℃恒溫暗室中培養(yǎng)96h，移出暗室測黃瓜幼苗的初生根和地上部長度。（適于丁酰胺類、2.4-滴、咪唑啉酮和磺酰脲類等除草劑活性）1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法

此法用于測定光合作用抑制劑的活性較適宜。非光合作用抑制劑不敏感。以10微摩爾的克蕪蹤為對照，測定黃瓜子葉園片的電介質(zhì)泄漏量（導電系數(shù)）來計算除草劑的活性。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法7小球藻法此法也是以測葉綠素含量來計算具光合作用和呼吸作用抑制特性的除草劑活性。小球藻易于進行室內(nèi)人工培養(yǎng)，操作簡便，測定周期短，比較靈敏、精確。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法7小球藻法8小麥根長法在培養(yǎng)皿內(nèi)鋪滿一層小玻璃球，移入一定量的除草劑藥液，放入露白的小麥種子，在20-25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5-7d，測量根長。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法7小球藻法工8小麥根長法9去胚乳小麥幼苗法

將飽滿均勻的小麥種子浸泡2h，鋪在放有濕濾紙的瓷盤中，于20

℃左右的恒溫箱中催芽，待芽長2-3cm時，選高度一致的幼苗，輕輕取出，不要傷根，摘除胚乳，在清水中漂洗后，放入燒杯中，加入待測除草劑的不同濃度溶液，于21-26℃下培養(yǎng)7d，測株高、稱鮮重。如將去胚乳小麥種在含有系列濃度的除草劑土壤中，可測定土壤中的除草劑含量、移動性及殘效期。1種子萌發(fā)法2小杯法3高梁法4蘿卜子葉法5黃瓜幼苗法6黃瓜子葉園片法7小球藻法工8小麥根長法9去胚乳小麥幼苗法

10稗草胚軸法此法適于測定氯乙酰胺類除草劑如甲草胺等。在燒杯中加入不同濃度的除草劑溶液，放入發(fā)芽整齊的稗草種子，再在種子同圍撒些石英砂以防幼苗浮起，在28-30℃的恒溫箱中培養(yǎng)，4天后測稗草胚軸長度。11番茄水栽法12燕麥法13浮萍法14玉米法15園葉片漂浮法16再生苗測重法17葉鞘滴注法取代脲類如綠麥??；三氮苯類如阿特拉津；浮萍法、園葉片漂浮法均是對光合作用抑制劑的快速測定方法；玉米法測定嗪草