廣東省江門(mén)2006-2007年廣州管圓線蟲(chóng)病流行病學(xué)調(diào)查

廣東省江門(mén)2006-2007年廣州管圓線蟲(chóng)病流行病學(xué)調(diào)查

廣州紅絲蟲(chóng)位于廣東?。ㄊ?、區(qū)）天然感染區(qū)和廣州紅絲蟲(chóng)流行區(qū)的廣東、福建、浙江、廣東、海南、云南、湖南、江西、貴州、江西和重慶等省（市、區(qū)）。自1984年廣東省報(bào)道我國(guó)大陸首例廣州管圓線蟲(chóng)病后,近十余年發(fā)病人數(shù)迅速增多,分布范圍廣,浙江、福建、北京及廣東等省(市)還發(fā)生廣州管圓線蟲(chóng)病的暴發(fā)試驗(yàn)對(duì)象和方法1健康入院時(shí)問(wèn)卷的基本特征廣東省江門(mén)市位于珠江三角洲西部,面積為9541km問(wèn)卷調(diào)查、血清免疫學(xué)調(diào)查及外周血嗜酸粒細(xì)胞檢查對(duì)象為健康體檢者,他們分別來(lái)自江門(mén)市區(qū)、新會(huì)區(qū)、臺(tái)山縣、鶴山縣及開(kāi)平市。2廣州管圓線蟲(chóng)期幼蟲(chóng)感染度檢測(cè)在江門(mén)市禮樂(lè)鎮(zhèn)、棠下鎮(zhèn)、深呂村和五邑大學(xué)竹林、菜地、花圃、池塘和水渠等處,采集褐云瑪瑙螺695只及福壽螺720只。去殼取其軟組織,參照文獻(xiàn)[7]的消化法檢測(cè)廣州管圓線蟲(chóng)Ⅲ期幼蟲(chóng)感染率及感染度。在江門(mén)市新會(huì)區(qū)三江鎮(zhèn)和雙水鎮(zhèn),以及江門(mén)市棠下鎮(zhèn)和深呂村的房舍周?chē)?、田間、雞舍、豬圈旁等多個(gè)點(diǎn)放置鼠夾或鼠籠等,捕獲褐家鼠、板齒鼠和黃胸鼠共229只。參照文獻(xiàn)[8]的水淹法將其處死,剖開(kāi)胸腹腔,取心、肺組織,撕碎,檢測(cè)心、肺血管廣州管圓線蟲(chóng)成蟲(chóng)的感染率及感染度。3問(wèn)卷、血清免疫分析與嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)3.1鄂氏縣的性別、年齡分布在江門(mén)市中心醫(yī)院對(duì)健康體檢300人進(jìn)行廣州管圓線蟲(chóng)的相關(guān)問(wèn)卷調(diào)查,其中江門(mén)市區(qū)102人、江門(mén)新會(huì)區(qū)76人、臺(tái)山縣65人、鶴山縣51人、開(kāi)平市6人。男性135人,女性165人。年齡1~88歲。其中≤20歲16人(占5.3%),21~50歲189人(占63.0%),51~70歲71人(占23.7%),≥70歲24人(占8.0%)。問(wèn)卷調(diào)查內(nèi)容包括:與廣州管圓線蟲(chóng)中間宿主的接觸史,食生或半生螺肉、蝸牛、蟹及青蛙等不良飲食習(xí)慣等。3.2血清免疫分析3.2.1采用/二氧化合物pelenderlus調(diào)查300份居民血清廣州管圓線蟲(chóng)特異性IgG和IgM抗體陽(yáng)性率。采集外周血10ml,計(jì)數(shù)嗜酸粒細(xì)胞。參照文獻(xiàn)[9]方法制備廣州管圓線蟲(chóng)成蟲(chóng)可溶性抗原(所用超聲破碎儀型號(hào)為UP200s,購(gòu)自德國(guó)Dr.HielscherGmbH公司,核酸蛋白定量?jī)x型號(hào)為BioPhotometerPlus,購(gòu)自德國(guó)Eppendorf公司)。于4℃781×g離心10min,分離血清,ELISA檢測(cè)廣州管圓線蟲(chóng)特異性IgG和IgM抗體。用包被緩沖液將上述廣州管圓線蟲(chóng)成蟲(chóng)抗原稀釋為20μg/ml,以100μl/孔包被酶標(biāo)板(96孔聚苯乙烯酶標(biāo)板購(gòu)自廣州合達(dá)生物科技有限公司),4℃過(guò)夜,甩去孔內(nèi)抗原溶液,洗滌3次,1%脫脂奶粉37℃封閉2h。洗滌,分別加入1∶20稀釋的待測(cè)血清,混勻,37℃孵育30min,洗滌5次。加1∶4000稀釋的辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的羊抗人IgM抗體(購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司)100μl/孔,37℃孵育30min,洗滌5次。加底物3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)顯色10min,用2mol/LHELISA檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn):樣品A3.2.2igm檢測(cè)方法的特異性試驗(yàn)上述方法同時(shí)檢測(cè)健康人血清30份、并殖吸蟲(chóng)病患者血清8份、弓形蟲(chóng)病患者血清8份、華支睪吸蟲(chóng)病患者血清7份和豬囊尾蚴病患者血清7份。3.2.3出現(xiàn)5倍包板量的抗原廣州管圓線蟲(chóng)病患者陽(yáng)性血清,經(jīng)1∶20稀釋后與5倍包板量的抗原混合,置37℃30min。ELISA檢測(cè)并比較其反應(yīng)前、后吸光度(A3.2.42-基乙醇處理試驗(yàn)廣州管圓線蟲(chóng)病患者陽(yáng)性血清,經(jīng)1∶20稀釋后與等量的0.2mol/L2-巰基乙醇混合,于37℃作用1h,進(jìn)行ELISA檢測(cè)。3.2.5重復(fù)實(shí)驗(yàn)分別取上述廣州管圓線蟲(chóng)IgM抗體陽(yáng)性和陰性血清各10份,檢測(cè)3次(每次檢測(cè)間隔3d)。3.3igg抗體陽(yáng)性與igm抗體陽(yáng)性小鼠嗜酸注射液對(duì)健康體檢者300人用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(型號(hào)為L(zhǎng)H750,購(gòu)自美國(guó)Beckmancoulter公司)檢測(cè)嗜酸粒細(xì)胞,統(tǒng)計(jì)IgG抗體陽(yáng)性或IgG及IgM抗體均為陽(yáng)性者嗜酸粒細(xì)胞數(shù)。4算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù),計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。問(wèn)卷調(diào)查結(jié)果用EpiData3.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,將結(jié)果導(dǎo)入MicrosoftExcel系統(tǒng)進(jìn)行分析。結(jié)果1感染情況及感染度檢查褐云瑪瑙螺695只、福壽螺720只,廣州管圓線蟲(chóng)Ⅲ期幼蟲(chóng)感染率分別為45.0%和1.8%;平均感染度分別為(53.74±147.30)條/只和(5.23±8.51)條/只。螺感染幼蟲(chóng)的分布范圍分別為1~1025條/只和1~29條/只。2只褐家鼠感染廣州管圓線蟲(chóng)成蟲(chóng)的感染情況檢查褐家鼠、板齒鼠和黃胸鼠共229只。10只褐家鼠感染廣州管圓線蟲(chóng)成蟲(chóng),感染率為4.4%。平均感染度為(2.00±1.70)條/只,蟲(chóng)數(shù)分布范圍1~6條/只。3.1問(wèn)卷IgM特異性試驗(yàn)結(jié)果均為陰性。特異性阻斷試驗(yàn)其阻斷率為76.9%。2-巰基乙醇處理試驗(yàn)ELISA檢測(cè)結(jié)果均轉(zhuǎn)陰,A3.3提議的柱狀位異常人群廣州管圓線蟲(chóng)感染情況與以往的調(diào)查結(jié)果廣州管圓線蟲(chóng)病屬于食源性寄生蟲(chóng)病,人類(lèi)的感染雖受當(dāng)?shù)刂虚g宿主螺類(lèi)、終宿主鼠類(lèi)感染水平的影響,但起決定作用的是人的飲食習(xí)慣和生活方式。問(wèn)卷調(diào)查結(jié)果顯示,江門(mén)市有少數(shù)人曾食生或半生螺肉或蝸牛、蟹、青蛙等,有部分人從事福壽螺的加工和銷(xiāo)售工作,或以該螺肉作為動(dòng)物飼料。超過(guò)半數(shù)的受訪者家中廚具生熟食物不分,面臨較高的被感染風(fēng)險(xiǎn)。目前我國(guó)關(guān)于人群廣州管圓線蟲(chóng)感染調(diào)查資料較少。賀聯(lián)印等IgM抗體陽(yáng)性能反映近期感染,具有早期診斷價(jià)值此次調(diào)查,被調(diào)查人群的居住地點(diǎn)與螺和鼠的調(diào)查地點(diǎn)不完全一致,主要是采集人血標(biāo)本較困難。考慮到江門(mén)市地理范圍有限,自然條件和人們飲食習(xí)慣相似,螺、鼠和人的感染情況不致于有較大的差異,故本調(diào)查結(jié)果基本能反映當(dāng)?shù)厮拗鞯母腥厩闆r,且相互間存在一定的關(guān)聯(lián)性。總之,廣東省江門(mén)市具備廣州管圓線蟲(chóng)病流行要素。當(dāng)?shù)刂虚g宿主褐云瑪瑙螺、福壽螺和終宿主鼠類(lèi)分布廣、感染率高,并在居民生活環(huán)境周?chē)?jīng)常出沒(méi),該地區(qū)是廣州管圓線蟲(chóng)的良好自然疫源地。居民一旦生食這些螺類(lèi),或在生活中與其接觸,則有可能造成感染,應(yīng)引起重視。共調(diào)查300人,其中11.3%有食生或半生魚(yú)、蝦史,83.7%否認(rèn),5.0%不能確定。此外,有5.3%被調(diào)查者在勞動(dòng)中直接或間接接觸過(guò)褐云瑪瑙螺、福壽