苯磺酸氨氯地平片的分離

苯磺酸氨氯地平片的分離

氨基丙烯酸酯是一種雙羥吡啶鈣通道阻滯劑。它通常用于治療高血壓和冠狀動脈粥樣硬化。由于生產(chǎn)工藝及相關(guān)合成反應(yīng)等因素,目前上市的氨氯地平制劑多為苯磺酸氨氯地平消旋體,也有部分產(chǎn)品為左旋氨氯地平高效毛細(xì)管電泳法(HPCE)采用高壓電場使待測物分離,相較傳統(tǒng)壓力和分配-吸附機(jī)理的液相色譜,對部分結(jié)構(gòu)相似化合物的分離效率較高;此外,HPCE在電壓驅(qū)動下產(chǎn)生的液流為平面型,較高效液相色譜(HPLC)法的拋物面型更為均一,因此柱效更高,分析時間更短,適宜于手性對映體的分離1儀器和試劑盒1.1航天co等公司的紡粘設(shè)備MDQ毛細(xì)管電泳儀,配備PDA檢測器,美國BeckmanCoulter公司;硅膠毛細(xì)管,河北永年瑞灃色譜器件有限公司;Mettler-Toledo精密分析天平,瑞士Mettler-Toledo公司。1.2苯磺酸氨氯地平的合成氨氯地平對照品(苯磺酸左旋氨氯地平,批號:140135-201504;苯磺酸氨氯地平,批號:110319-201208),中國食品藥品檢定研究院。電泳緩沖液用磷酸二氫鈉、β-環(huán)糊精,Merck公司。苯磺酸氨氯地平片,購自本地藥店。2方法和結(jié)果2.1對照溶液的制備取氨氯地平消旋體對照品適量,精密稱定,置10mL量瓶中,加20%甲醇溶解并定容至刻度,即得二者濃度均為1mg·mL2.2壓力測量取苯磺酸氨氯地平片適量,研細(xì),取粉末約1g,精密稱定,置50mL錐形瓶中,精密加入20%甲醇20mL,密塞,精密稱定重量;超聲20min,取出,放冷,加20%甲醇補(bǔ)足減失重量,以0.45μm微孔濾膜濾過,即得供試品溶液。2.3條件1取0.1mmol·L2.4方法研究2.4.1對浮體含量的測定精密吸取對照品溶液適量,分別置于不同10mL量瓶中,加20%甲醇稀釋并定容至刻度,即得氨氯地平兩種對映體含量均為5,10,20,50,100,200μg·mL2.4.2平衡峰面積的計(jì)算取供試品溶液,按“2.3”項(xiàng)下方法連續(xù)進(jìn)樣6次,記錄氨氯地平消旋體的峰面積,計(jì)算RSD。結(jié)果顯示,左旋氨氯地平峰面積的RSD為0.72%,右旋氨氯地平峰面積的RSD為2.32%,表明方法精密度良好。2.4.3加樣回收率試驗(yàn)和精密度試驗(yàn)取苯磺酸氨氯地平片適量,研細(xì),取粉末約0.5g,精密稱定,置50mL錐形瓶中,按表1～2所述濃度精密加入對照品溶液適量,按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,按“2.3”項(xiàng)下方法進(jìn)行分析,測定氨氯地平消旋體峰面積,計(jì)算含量、回收率和RSD,結(jié)果顯示,左旋氨氯地平的平均回收率為98.69%,RSD為3.50%;右旋氨氯地平的平均回收率為98.93%,RSD為2.56%;表明方法準(zhǔn)確度良好。2.4.4氨氯地平消旋體峰面積測定取供試品溶液,置于自動進(jìn)樣器中,分別于0,2,4,6,12,24h按“2.3”項(xiàng)下方法進(jìn)行測定,記錄氨氯地平消旋體峰面積,計(jì)算含量和RSD。結(jié)果顯示,左旋氨氯地平含量的RSD為0.69%,右旋氨氯地平含量的RSD為1.79%,表明方法所制備供試品穩(wěn)定性良好。2.5消旋體峰面積測定取10批苯磺酸氨氯地平片(批號見表3),按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,按“2.3”項(xiàng)下方法進(jìn)行測定,記錄氨氯地平消旋體峰面積,計(jì)算二者含量和RSD。結(jié)果顯示,10批苯磺酸氨氯地平片中,左旋氨氯地平的平均含量為每片4.55mg,RSD為3.50%;右旋氨氯地平的平均含量為每片0.66mg,RSD為1.74%。3采用-環(huán)糊精進(jìn)行基線分離預(yù)試驗(yàn)中流動相僅含磷酸二氫鈉的緩沖溶液進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,氨氯地平消旋體的分離度并不理想,且難以通過調(diào)整pH、分離電壓、加入有機(jī)相等方法改善分離。分析產(chǎn)生上述結(jié)果的原因,可能是氨氯地平消旋體電性差異較小,導(dǎo)致遷移速率區(qū)別不大,分離度不理想。引入β-環(huán)糊精后,待測物分子與β-環(huán)糊精形成絡(luò)合物,由于后者結(jié)構(gòu)差異導(dǎo)致結(jié)合位點(diǎn)的差異,進(jìn)而導(dǎo)致絡(luò)合物帶電性差異擴(kuò)大,因此可實(shí)現(xiàn)基線分離。含量測定結(jié)果方面,根據(jù)“2.5”項(xiàng)下內(nèi)容可知,本研究所測定苯磺酸氨氯地平片中氨氯地平消旋體的總含量RSD在5%以內(nèi),顯示該制劑制備工藝較為穩(wěn)定。分別對各消旋體的含量進(jìn)行分析,結(jié)果表明,二者的含量RSD也均在5%以內(nèi),