仙人掌多糖降血糖作用的研究

仙人掌多糖降血糖作用的研究

糖尿病是一種常見的代謝性疾病。到目前為止，世界上有1億名患者，他們的死亡率低于腫瘤和心血管。糖尿病患者容易出現(xiàn)免疫功能紊亂，干擾胰島素和受體之間的正常結(jié)合，從而降低身體對(duì)胰島素的敏感性。仙人掌(OpuntiadilleniiHaw.)屬仙人掌科石竹目,有抗炎、免疫、降血糖、抗?jié)兊茸饔?國外關(guān)于仙人掌屬植物降血糖作用的報(bào)道1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與飼料仙人掌多糖(OpuntiadilleniiHaw.polysaccharidesODP),多糖含量48.98%,由湛江師范學(xué)院應(yīng)用植物學(xué)研究室制備.試驗(yàn)動(dòng)物為5周齡昆明種小鼠(廣東醫(yī)學(xué)院動(dòng)物試驗(yàn)研究中心提供),體重為(37.1±1.8)g,雄性,在動(dòng)物房內(nèi)溫度為22℃和相對(duì)濕度為60%的條件下飼養(yǎng).飼以廣東省醫(yī)學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物中心提供的專用飼料.鏈脲佐菌素(streptozotocinSTZ)為美國Sigma公司制品,血糖檢測試劑盒為柏定生物工程(北京)有限公司制品.1.2方法1.2.1無水乙醇、丙酮、多糖的提取稱取新鮮仙人掌,去皮,去刺,100℃水浸提3次,過濾,濾液減壓濃縮,95%乙醇沉淀,熱水溶解,離心去沉淀,再依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌,揮發(fā)溶劑并真空干燥,得多糖.按文獻(xiàn)報(bào)道1.2.2stz分次注射成模動(dòng)物STZ用0.05mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(pH4.5)新鮮配制,經(jīng)0.2μm微孔濾膜過濾后,往小鼠腹腔注射(ip)120mg/kg,一周后,再次ipSTZ40mg/kg.于試驗(yàn)前及STZ注射停止后第5天在小鼠尾部采血,用葡萄糖氧化酶法依血糖試劑盒說明操作,以注射STZ后血糖濃度為10～30mmol/L的小鼠作為成模動(dòng)物.1.2.3仙人掌多糖ig試驗(yàn)動(dòng)物共隨機(jī)分為5組,同批未處理動(dòng)物為第1組:作正常對(duì)照組,灌胃(ig)10mL/kg生理鹽水;第2～5組為成模小鼠,即第2組:STZ糖尿病模型對(duì)照組,ig10mL/kg生理鹽水;第3組:仙人掌多糖ig150mg/kg;第4組:仙人掌多糖ig200mg/kg;第5組:仙人掌多糖ig250mg/kg.每天給藥1次,持續(xù)給藥3周,每天測定小鼠飲水、飲食量,每周測定小鼠體重.試驗(yàn)第1周,測定單次給藥效果:給藥后4h,小鼠尾部取血測血糖,與給藥前比較.試驗(yàn)第3周,糖耐量試驗(yàn):試驗(yàn)小鼠禁食8h左右,測定空腹血糖值,ig20%葡萄糖溶液2g/kg(即10mL/kg)后,測定60,150,240,330min后的血糖變化情況.1.2.4數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析給藥后第3周,各小鼠稱重后,脫頸處死,取其胸腺、脾臟稱重,根據(jù)公式給藥后第3周,首先向小鼠ip5%可溶性淀粉1mL/只,3d后經(jīng)ip5%雞紅細(xì)胞混懸液1.5mL/只,注后3h脫頸處死,并即向腹腔內(nèi)注射Hanks液2mL/只,然后輕揉腹部數(shù)次,5min后取腹腔內(nèi)液于試管里,置于37℃水浴中孵育30min.然后從試管里取一滴于載玻片上,涂片,自然干燥,用Wright’s液染色6min,再用自來水漂洗,晾干后,即可進(jìn)行鏡下觀察,每個(gè)樣品做5個(gè)平行樣.在油鏡下,每一張玻片觀察100個(gè)巨噬細(xì)胞,計(jì)算吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)和被吞噬的雞紅細(xì)胞個(gè)數(shù),以吞噬百分率和吞噬指數(shù)表示數(shù)據(jù)處理采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行基本統(tǒng)計(jì)、t檢驗(yàn)、方差分析等.2結(jié)果2.1仙人掌多糖對(duì)小鼠攝食的影響試驗(yàn)期間,與正常對(duì)照組比較,試驗(yàn)組小鼠體重在±2g左右變化,體重沒有持續(xù)下降,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)上意義.在開始給藥前,各試驗(yàn)組小鼠與正常對(duì)照組比較有顯著差異(p<0.05),建模成功(圖1).試驗(yàn)期間,從第2周開始,各試驗(yàn)組與STZ模型對(duì)照組比較,小鼠攝食量明顯減少,尤其是第4組,第5組,與STZ模型對(duì)照組比較有極顯著差異(p<0.01),但各組之間不存在顯著差異.對(duì)第3組試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行組內(nèi)統(tǒng)計(jì),發(fā)現(xiàn)第1周和第2周攝食量有顯著差異(p<0.05)(圖2).綜上所述,灌胃仙人掌多糖能緩解糖尿病小鼠多食的癥狀.灌胃仙人掌多糖還能緩解糖尿病小鼠多飲的癥狀(圖3).2.2仙人掌多糖降糖效果結(jié)果表明,建模前,正常對(duì)照組血糖與各試驗(yàn)組比較無明顯差異;開始給藥時(shí),正常對(duì)照組血糖與各試驗(yàn)組比較有極顯著差異(p<0.01),建模成功;給藥第2周起,灌胃仙人掌多糖各試驗(yàn)組血糖值明顯降低,但并不是所有數(shù)據(jù)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上都有顯著差異(圖4).給藥第1周,測定各試驗(yàn)組的單次給藥效果.試驗(yàn)前,各試驗(yàn)組與正常對(duì)照組比較有極顯著差異(p<0.01),4h后,各試驗(yàn)組血糖降低幅度明顯高于STZ模型對(duì)照組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異.對(duì)試驗(yàn)前后數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn),第4組和第5組都有顯著差異(p<0.05).說明仙人掌多糖單次給藥有一定的降糖效果(圖5).在糖耐量試驗(yàn)中,灌胃仙人掌多糖各劑量組糖耐量曲線下面積明顯低于STZ模型對(duì)照組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異.說明仙人掌多糖能改善糖尿病小鼠的糖耐量(如圖6).2.3小鼠臟器功能與STZ模型對(duì)照組比較,各試驗(yàn)組胸腺指數(shù)、脾指數(shù)明顯增加,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異.在脾臟質(zhì)量和脾指數(shù)方面,第3組和第4組與正常對(duì)照組比較有顯著差異(p<0.05).灌胃多糖能增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能,其吞噬百分比和吞噬指數(shù)明顯高于STZ模型對(duì)照組,但在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著差異(如表1).3仙人掌多糖對(duì)小鼠的降血糖作用本試驗(yàn)采用一種公認(rèn)的化學(xué)損傷性藥物鏈脲佐菌素建立糖尿病動(dòng)物模型進(jìn)行研究分析.結(jié)果表明,無論是各周對(duì)血糖水平的測定,還是單次給藥試驗(yàn)、糖耐量試驗(yàn),仙人掌多糖都對(duì)鏈脲佐菌素糖尿病小鼠有明顯的降血糖作用,而且仙人掌多糖能改善糖尿病動(dòng)物的煩渴、多飲、多食癥狀.林曉明等本試驗(yàn)還從免疫學(xué)角度考察了仙人掌多糖的降糖機(jī)理.試驗(yàn)