《生物實驗技術(shù)》STED顯微鏡_第1頁
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受激發(fā)射損耗(STED)熒

光顯微術(shù)StimulatedEmissionDepletion受激輻射光淬火衍射極限?突破光學(xué)衍射極限的辦法之?是近場光學(xué)顯微鏡,它是利用探針探測樣品表面的隱失場而獲得樣品表面信息.?在?些領(lǐng)域,比如生物上觀察活細(xì)胞,僅有農(nóng)面信息是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的,迄今為止遠(yuǎn)場光學(xué)顯微術(shù)仍是顯示細(xì)胞內(nèi)部三維結(jié)構(gòu)的重要方法.?STED熒光顯微鏡是一種可以突破光學(xué)衍射極限的遠(yuǎn)場光學(xué)顯微術(shù).熒光物質(zhì)?有機(jī)熒光物質(zhì)是一類具有特殊光學(xué)性能的化合物,它們能吸收特定頻率的光,并發(fā)射出低頻率(較長波長)的熒光來釋放所吸收的能量。某些有機(jī)化合物在紫外和短波長的可見光的激發(fā)(這種用來激發(fā)的光叫激發(fā)光)下能發(fā)出熒光,產(chǎn)生可見光譜中鮮艷的顏色,這類物質(zhì)稱為日光型熒光染、顏料。?熒光物質(zhì)分子一般都含有發(fā)射熒光的基團(tuán)(稱為熒光團(tuán))以及能使吸收波長改變并伴隨熒光增強(qiáng)的助色團(tuán)某種染料的光譜.圖中藍(lán)色曲線為激發(fā)光譜,紅色曲線為發(fā)射光譜.62onm-8sonm均有可能Qonm最人?這是自發(fā)輻射.STED的發(fā)明STED受激發(fā)射損耗顯微術(shù)是在1994年被施特芬?赫爾開發(fā)出來的,當(dāng)時赫爾世躺在研究生公寓的床上看一本有關(guān)光學(xué)量子理論的書,突然靈光一閃,就發(fā)明Tsted.StefanW.Hell(生于1962年)物理學(xué)博士學(xué)位,1990出開始在海德堡大學(xué)學(xué)習(xí),后留在海德堡歐洲分子生物學(xué)實驗室研究?1993年到1996年,他曾作為高級研究員,在芬蘭土爾庫大學(xué)開發(fā)受激發(fā)射損耗顯微鏡.1996年,他在哥廷根的馬克斯普朗克生物物理化學(xué)研究所,在那里他建立了他冃前的研究小組,致力于高分辨率顯微鏡的研究。衍射極限?18世紀(jì)70年代,德國物理學(xué)家恩斯特?阿貝(ErnstAbbe)發(fā)現(xiàn),可見光由于英波動特性會發(fā)生衍射,因而光朿不能無限聚焦?后經(jīng)瑞利歸納為瑞利判據(jù).?以前人們認(rèn)為傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的極限為2

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