克氏原螯蝦幼蝦養(yǎng)殖密度與生物力學(xué)的關(guān)系

克氏原螯蝦幼蝦養(yǎng)殖密度與生物力學(xué)的關(guān)系

水產(chǎn)養(yǎng)殖密度是影響水生產(chǎn)力的重要因素。養(yǎng)殖者為了充分利用水體資源去獲得更大的產(chǎn)量,往往進(jìn)行高密度養(yǎng)殖。然而,養(yǎng)殖密度不僅是影響?zhàn)B殖容量的主要因素,還與水生生物的生長(zhǎng)和存活率有密切聯(lián)系。鄧夢(mèng)穎等1材料和方法1.1金川細(xì)菌實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室克氏原螯蝦幼蝦購(gòu)自南京高淳縣水產(chǎn)養(yǎng)殖公司;試驗(yàn)飼料原料購(gòu)自南京水產(chǎn)研究所養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)基地。金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)來(lái)自南京曉莊學(xué)院食品科學(xué)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室。酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)檢測(cè)試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程研究所。1.2測(cè)試方法1.2.1水產(chǎn)動(dòng)物生理生態(tài)試驗(yàn)是在南京曉莊學(xué)院生態(tài)學(xué)省級(jí)重點(diǎn)建設(shè)學(xué)科水產(chǎn)動(dòng)物生理生態(tài)研究室內(nèi)的18個(gè)水族箱中進(jìn)行的。試驗(yàn)設(shè)置6個(gè)飼養(yǎng)密度處理組,在相同(底面積0.25m1.2.2試驗(yàn)1:魚(yú)、豆餅、沸石等5.0%綠色平臺(tái),5.5%氧化鎂水解調(diào)劑見(jiàn)圖1試驗(yàn)用克氏原螯蝦先馴養(yǎng)7d,待供試蝦適應(yīng)環(huán)境、生活正常后,挑選健康狀況良好、附肢齊全、大小基本相同的克氏原螯蝦稱重后隨機(jī)放入18個(gè)水族箱中。各箱隨機(jī)排列,并放置適量水草、假山石或帶孔的磚塊供克氏螯原蝦躲避和休息。試驗(yàn)期間及馴養(yǎng)期所用飼料為依據(jù)克氏原螯蝦幼蝦營(yíng)養(yǎng)需要而制備的硬顆粒配合飼料(粒徑為1.2mm)。配方質(zhì)量分?jǐn)?shù)為魚(yú)粉5.00%、豆餅35.00%、菜餅5.00%、棉餅5.00%、次粉35.00%、麥麩5.00%、皮糠5.00%、磷酸氫鈣1.50%,沸石粉2.00%、鹽0.50%和預(yù)混料1.00%。試驗(yàn)用水為曝氣后的自來(lái)水。試驗(yàn)期間水溫為室內(nèi)自然溫度(21~26℃),全天24h充氣增氧。各處理組分別在每天清晨和傍晚分2次投喂等量的飼料并做記錄,投喂量為每箱蝦體重的5%,每周調(diào)整1次。每次投喂前1h吸凈前次糞便后再投喂。每3d換水1次,每次換水三分之一,連續(xù)飼養(yǎng)2個(gè)月。飼養(yǎng)期結(jié)束前一天禁食,飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)每箱蝦計(jì)數(shù),對(duì)每個(gè)個(gè)體進(jìn)行量體長(zhǎng)、稱體重,并觀察和記錄附肢是否完整。計(jì)算相對(duì)增長(zhǎng)率、相對(duì)增重率、成活率和殘肢率指標(biāo)。相對(duì)增長(zhǎng)率(%)=100×[(終均體長(zhǎng)-初均體長(zhǎng))/初均體長(zhǎng)]相對(duì)增重率(%)=100×[(終均體重-初均體重)/初均體重]成活率(%)=100×成活尾數(shù)/投放尾數(shù)殘肢率(%)=100×附肢不完整尾數(shù)/成活尾數(shù)1.2.3一、抗凝劑的制備(1)吞噬菌株的制備。將金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)在肉湯培養(yǎng)基中37℃振蕩培養(yǎng)24h后,離心集菌。用0.15mol·L(2)吞噬活性的測(cè)定。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后從每個(gè)試驗(yàn)組取蝦3尾(每個(gè)重復(fù)組1尾),用經(jīng)抗凝劑潤(rùn)洗過(guò)的1mL一次性注射器自蝦頭胸甲后部血竇插入心臟取血,用于測(cè)定血細(xì)胞的吞噬活性。測(cè)定方法參照陳孝煊等吞噬率(PP)=吞噬了細(xì)菌的血細(xì)胞數(shù)/被觀察血細(xì)胞總數(shù)×100%;吞噬指數(shù)(PI)=被吞噬的細(xì)菌總數(shù)/參與吞噬的血細(xì)胞數(shù)。(3)免疫酶的測(cè)定。另從每個(gè)試驗(yàn)組取蝦6尾(每個(gè)重復(fù)組2尾),用經(jīng)抗凝劑潤(rùn)洗過(guò)的1mL一次性注射器自蝦頭胸甲后部血竇插入心臟取血,置于1.5mL無(wú)菌離心管中,于4℃冰箱中過(guò)夜后,以3500r·min1.2.4統(tǒng)計(jì)方法試驗(yàn)數(shù)據(jù)用ANOVA進(jìn)行方差分析,Duncan’s進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。2結(jié)果與分析2.1飼養(yǎng)密度對(duì)克氏原螯蝦生長(zhǎng)的影響試驗(yàn)結(jié)果表明,飼養(yǎng)密度對(duì)克氏原螯蝦生長(zhǎng)、成活率和殘肢率有顯著影響,具體結(jié)果見(jiàn)表2。由表2看出,隨著克氏原螯蝦飼養(yǎng)密度的增大,平均每尾蝦的相對(duì)增長(zhǎng)、相對(duì)增重和成活率均成下降趨勢(shì)。在飼養(yǎng)密度為12尾·m2.2飼養(yǎng)密度對(duì)克氏原螯蝦外周血一表現(xiàn)的影響試驗(yàn)結(jié)果同時(shí)表明,飼養(yǎng)密度對(duì)克氏原螯蝦的血細(xì)胞吞噬活性和血清中4種免疫酶活性有顯著影響,結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可以看出,隨著克氏原螯蝦飼養(yǎng)密度的增大,克氏原螯蝦血細(xì)胞吞噬活性(吞噬率和吞噬指數(shù))和血清中ACP、LZM活性均呈顯著下降趨勢(shì),而血清中SOD、CAT活性呈現(xiàn)先顯著增高而后又顯著下降趨勢(shì)。在飼養(yǎng)密度為12和20尾·m3討論3.1食物密度對(duì)克氏原蝦生長(zhǎng)的影響本研究表明,隨著克氏原螯蝦飼養(yǎng)密度增大,其相對(duì)生長(zhǎng)率(相對(duì)增長(zhǎng)率、相對(duì)增重率)成顯著下降趨勢(shì)。這和嚴(yán)維輝等3.2飼養(yǎng)動(dòng)物體內(nèi)自由基克氏原螯蝦是一種領(lǐng)地意識(shí)極強(qiáng)的蝦類。本研究結(jié)果表明:當(dāng)飼養(yǎng)密度達(dá)到及超過(guò)40尾·m甲殼動(dòng)物機(jī)體的免疫防御體系缺乏特異性免疫系統(tǒng),以天然的免疫反應(yīng)為主,主要依賴于血細(xì)胞的吞噬、包掩等細(xì)胞免疫反應(yīng),其體液中不具有免疫球蛋白,缺乏抗體介導(dǎo)的免疫反應(yīng),體液免疫主要是指血淋巴中的一些免疫酶和調(diào)節(jié)因子,如酚氧化酶原激活系統(tǒng)、溶血素、凝集素、溶菌酶和蛋白酶抑制劑等超氧化物歧化酶(SOD)作為反映動(dòng)物機(jī)體非特異性免疫功能的重要生理指標(biāo),該酶可催化超氧陰離子發(fā)生歧化反應(yīng)生成H在正常的生命過(guò)程中,自由基為維持生命所必需,但自由基也是生物大分子、細(xì)胞和生物組織的危險(xiǎn)殺手。在正常生理狀態(tài)下,體內(nèi)自由基不斷產(chǎn)生,但也不斷地被清除。細(xì)胞會(huì)嚴(yán)格控制自由基產(chǎn)生數(shù)量,保持體內(nèi)自由基適當(dāng)濃度,維持自由基產(chǎn)生與消除動(dòng)態(tài)平衡(“自由基穩(wěn)衡性動(dòng)態(tài)”)。使之維持在一個(gè)正常的生理水平上。一些特殊情況下(如病理狀態(tài)下),自由基可能會(huì)產(chǎn)生過(guò)量或不足,或者是機(jī)體清除自由基的能力減弱,使自由基濃度會(huì)發(fā)生一定的改變,導(dǎo)致產(chǎn)生和消除之間的動(dòng)態(tài)平衡被打破,進(jìn)一步導(dǎo)致自由基水平過(guò)高或過(guò)低。如若自由基濃度過(guò)高,則稱之為氧化應(yīng)激4acp和lmm活性在本試驗(yàn)設(shè)置的密度梯度范圍內(nèi)的研究結(jié)果表明: