球菌化膿性感染專家講座

第六章球菌

球菌引發(fā)化膿性感染，故又稱化膿性球菌。本章介紹臨床最常見(jiàn)兼性厭氧球菌、即葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬、奈瑟菌屬和布蘭漢菌屬。球菌化膿性感染第1頁(yè)第一節(jié)葡萄球菌屬

一、分類(lèi)

主要菌種有金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，頭狀葡萄球菌，人葡萄球菌和腐生葡萄球菌。人體分離葡萄球菌還有溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌和中間葡萄球菌。球菌化膿性感染第2頁(yè)二、臨床意義

凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌是主要致病菌，以急性化膿性感染為特征，感染還可擴(kuò)散或轉(zhuǎn)移。常見(jiàn)感染有癤癰、切口創(chuàng)傷等局部感染和骨髓炎等全身性感染。致病性與侵襲性酶類(lèi)(如血漿凝固酶)和各種毒素相關(guān)。一些菌株還能產(chǎn)生腸毒素引發(fā)食物中毒；產(chǎn)生剝脫毒素可引發(fā)人類(lèi)燙傷樣皮膚綜合征；產(chǎn)生毒性休克綜合征毒素引發(fā)毒性休克綜合征(TSS)。球菌化膿性感染第3頁(yè)凝固酶陰性葡萄球菌是人體皮膚粘膜正常菌群，是醫(yī)院感染主要病原菌，其中表皮葡萄球菌引發(fā)人工瓣膜性心內(nèi)膜炎、靜脈導(dǎo)管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染和人工關(guān)節(jié)感染等；腐生葡萄球菌則是女性尿路感染主要病原菌，成為主要條件致病菌和免疫受損患者感染菌。球菌化膿性感染第4頁(yè)感染發(fā)生常和細(xì)菌產(chǎn)生夾膜多糖或糖萼相關(guān)，它能增強(qiáng)細(xì)菌與生物性瓣膜、導(dǎo)管等物質(zhì)表面粘附或在其表面形成一層生物膜而保護(hù)細(xì)菌反抗殺菌物質(zhì)作用。葡萄球菌耐藥性已演變?yōu)獒t(yī)院感染和臨床治療棘手問(wèn)題。球菌化膿性感染第5頁(yè)三、微生物特征

直徑0.5～1.5μm、革蘭陽(yáng)性球菌，排列呈葡萄串樣，無(wú)鞭毛和芽胞。能形成莢膜。

球菌化膿性感染第6頁(yè)兼性厭氧菌，營(yíng)養(yǎng)要求不高，最適生長(zhǎng)溫度35℃～37℃，最適pH7.4～7.6。普通培養(yǎng)基上形成2～3mm呈金黃色、白色、檸檬色等不透明圓形凸起菌落，血瓊脂平板上有透明溶血環(huán)。能在10％～15％NaCl瓊脂中生長(zhǎng)，接種于高鹽瓊脂平板上，有利于菌種檢出。

球菌化膿性感染第7頁(yè)抵抗力最強(qiáng)，耐干燥，對(duì)各種抗生素和消毒劑不敏感。生化反應(yīng)活潑、能分解各種糖類(lèi)和蛋白質(zhì)，觸酶陽(yáng)性。G+Cmol％為30～39，攜帶青霉素酶和乙?；D(zhuǎn)移酶質(zhì)粒，能經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)移耐藥性。球菌化膿性感染第8頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)（一）采取標(biāo)本應(yīng)防止正常菌群污染。（二）直接顯微鏡檢驗(yàn)無(wú)菌體液如腦脊液和關(guān)節(jié)穿刺液涂片革蘭染色，查見(jiàn)細(xì)菌含有主要臨床價(jià)值；其它體液標(biāo)本如同時(shí)伴有炎性細(xì)胞也含有參考價(jià)值，可向臨床初步匯報(bào)“查見(jiàn)屬革蘭陽(yáng)性葡萄球菌”。

球菌化膿性感染第9頁(yè)其它體液標(biāo)本如同時(shí)伴有炎性細(xì)胞也含有參考價(jià)值，可向臨床初步匯報(bào)“查見(jiàn)屬革蘭陽(yáng)性葡萄球菌”。球菌化膿性感染第10頁(yè)（三）分離培養(yǎng)與判定臨床標(biāo)本可接種血平板，污染標(biāo)本接種在選擇平板上，如甘露醇高鹽平板，血液標(biāo)本則用肉湯增菌培養(yǎng)基。

球菌化膿性感染第11頁(yè)孵育過(guò)夜平板上可見(jiàn)直徑約為2-3mm，呈金黃色、白色或檸檬色光滑、不透明、凸起圓形菌落，有時(shí)可見(jiàn)β-溶血環(huán)，挑取菌落作判定試驗(yàn)。球菌化膿性感染第12頁(yè)判定病原性葡萄球菌方法

1．凝固酶試驗(yàn)試驗(yàn)所用血漿為EDTA抗凝兔血漿。金黃色葡萄球菌、中間型葡萄球菌展現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)。球菌化膿性感染第13頁(yè)(1)玻片凝固酶試驗(yàn)：金黃色葡萄球菌表面有結(jié)合凝固酶(聚集因子)，與血漿中纖維蛋白原交聯(lián)使菌體快速凝聚。球菌化膿性感染第14頁(yè)(2)試管凝固酶試驗(yàn)：細(xì)菌分泌到菌體外凝固酶被血漿中協(xié)同因子激活形成復(fù)合物，再使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白。球菌化膿性感染第15頁(yè)2.耐熱核酸酶試驗(yàn)大多數(shù)金黃色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中間葡萄球菌、豬葡萄球菌能產(chǎn)生耐熱核酸酶。

球菌化膿性感染第16頁(yè)將待測(cè)菌過(guò)夜肉湯培養(yǎng)物置沸水浴15min后，滴加于含甲苯胺藍(lán)核酸瓊脂上已打好直徑為2～5mm小孔內(nèi)，置35％孵育，1h后觀察結(jié)果，繞孔周?chē){(lán)色瓊脂轉(zhuǎn)變?yōu)榉奂t環(huán)為陽(yáng)性。球菌化膿性感染第17頁(yè)大多數(shù)表皮葡萄球菌和金黃色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中間葡萄球菌和豬葡萄球菌為陽(yáng)性。

３．磷酸酶試驗(yàn)

球菌化膿性感染第18頁(yè)將待測(cè)菌種點(diǎn)種在加有硝基酚磷酸鹽pH5.6～6.8MH瓊脂上，孵育18～24h，菌落周?chē)霈F(xiàn)黃色為陽(yáng)性。球菌化膿性感染第19頁(yè)溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌和中間葡萄球菌為試驗(yàn)陽(yáng)性。將孵育24h斜面培養(yǎng)物接種在含吡咯烷酮-β萘基酰胺肉湯中,35℃孵育2h，加入試劑后2分鐘內(nèi)展現(xiàn)深紫紅色為陽(yáng)性。４．吡咯烷酮芳基酰胺酶試驗(yàn)球菌化膿性感染第20頁(yè)(四)藥品敏感性試驗(yàn)

葡萄球菌屬細(xì)菌藥敏試驗(yàn)選擇抗生素：A組(常規(guī)首選藥品)為苯唑西林、青霉素；B組(臨床使用主要藥品)阿齊霉素、克林霉素、甲氨芐啶／磺胺甲嗯唑、萬(wàn)古霉素；球菌化膿性感染第21頁(yè)C組(對(duì)A組耐受、過(guò)敏或無(wú)反應(yīng)者)用環(huán)丙沙星、慶大霉素、氯霉素；U組(尿道中分離細(xì)菌)用諾氟沙星、呋喃妥因。球菌化膿性感染第22頁(yè)耐甲氧西林葡萄球菌經(jīng)過(guò)藥敏試驗(yàn)可篩選出耐甲氧西林葡萄球菌(methecillinresistantStaphylococcus，MRS)，它是攜帶mecA基因、編碼低親和力青霉素結(jié)合蛋白造成耐甲氧西林、全部頭孢菌素、碳青霉烯類(lèi)、青霉素類(lèi)+青霉素酶抑制劑抗生素葡萄球菌，該菌是醫(yī)院內(nèi)感染主要病原菌，感染多發(fā)生于免疫缺點(diǎn)患者、老弱患者及手術(shù)、燒傷后患者、極易造成感染暴發(fā)流行，治療困難、病死率高。球菌化膿性感染第23頁(yè)(六)檢驗(yàn)結(jié)果分析與匯報(bào)葡萄球菌是臨床上常見(jiàn)細(xì)菌，經(jīng)涂片染色鏡檢觀察革蘭陽(yáng)性球菌和經(jīng)典菌落形態(tài)，若觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性者，應(yīng)先用凝固酶試驗(yàn)檢驗(yàn)，將其分成凝固酶陽(yáng)性和凝固酶陰性細(xì)菌。球菌化膿性感染第24頁(yè)前者大多為金黃色葡萄球菌，應(yīng)及時(shí)快速判定和進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，盡快匯報(bào)臨床。后者大多是從輸液導(dǎo)管、人工植入組織中分離出細(xì)菌，應(yīng)視為病原菌，須判定到菌種。球菌化膿性感染第25頁(yè)對(duì)凝固酶陰性葡萄球菌，可先用呋喃唑酮紙片（100μg/片)，桿菌肽紙片(0.04u／片)作藥敏試驗(yàn)和氧化酶試驗(yàn)，以此與微球菌屬細(xì)菌判別，微球菌對(duì)桿菌肽敏感而對(duì)呋喃唑酮耐藥、氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，與葡萄球菌屬恰好相反。球菌化膿性感染第26頁(yè)若藥品敏感性試驗(yàn)是甲氧西林耐藥菌株，則匯報(bào)該菌株耐全部青霉素、頭孢菌素、碳青霉烯類(lèi)和β-內(nèi)酰胺藥β-內(nèi)酰胺酶抑制劑類(lèi)抗生素，同時(shí)對(duì)氨基糖苷類(lèi)，大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)和四環(huán)素類(lèi)抗生素也耐藥。球菌化膿性感染第27頁(yè)第二節(jié)鏈球菌屬

一、分類(lèi)

分類(lèi)發(fā)生改變，D群鏈球菌獨(dú)立為腸球菌屬,N群鏈球菌為乳球菌屬。判定仍用傳統(tǒng)分類(lèi)方法，分為：1.含有A、C、G抗原群β溶血性鏈球菌。包含:①菌落直徑大于0.5mmA群化膿性鏈球菌,C群、G群馬鏈球菌和似馬鏈球菌；②菌落直徑小于0.5mm具A、C、G抗原，稱米勒鏈球菌，主要包含咽喉炎鏈球菌、中間型鏈球菌和星座鏈球菌3種。還有溶血和不溶血細(xì)菌。球菌化膿性感染第28頁(yè)2.含有B抗原群β溶血性鏈球菌又稱無(wú)乳菌。3.α溶血或草綠色溶血包含肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌群。4.不溶血D群抗原鏈球菌稱牛鏈球菌。球菌化膿性感染第29頁(yè)二、臨床意義

化膿性鏈球菌是致病力最強(qiáng)鏈球菌,能產(chǎn)生各種毒素、M蛋白、脂磷壁酸和鏈激酶、鏈道酶、透明質(zhì)酸酶等致病因子，可引發(fā)咽炎、呼吸道感染、丹毒、心內(nèi)膜炎和腦膜炎等，產(chǎn)毒株還可引發(fā)猩紅熱。該群細(xì)菌可致變態(tài)反應(yīng)性疾病如急性腎小球腎炎，風(fēng)濕熱等。球菌化膿性感染第30頁(yè)無(wú)乳鏈球菌是新生兒腦膜炎常見(jiàn)菌，該菌定居于婦女生殖道，故感染多發(fā)于出生后24h，以肺炎為主。晚發(fā)型為產(chǎn)后7天至3月,以腦膜炎和菌血癥為主。B群鏈球菌對(duì)成人侵襲力較弱，主要有腎盂腎炎、子宮內(nèi)膜炎;糖尿病泌尿生殖道功效失調(diào)，腫瘤和免疫功效低下者易受B群鏈球菌感染。球菌化膿性感染第31頁(yè)C、G群β溶血性鏈球菌可引發(fā)上述相同感染。米勒鏈球菌是口腔、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道正常菌群，引發(fā)手術(shù)和創(chuàng)傷等內(nèi)源性感染。球菌化膿性感染第32頁(yè)肺炎鏈球菌是大葉性肺炎、支氣管炎病原菌，還可引發(fā)中耳炎、乳突炎、鼻竇炎、腦膜菌血癥。莢膜侵襲力起主要作用，溶血素、神經(jīng)胺酸酶也是其主要致病物質(zhì)。球菌化膿性感染第33頁(yè)草綠色鏈球菌是人體正常菌群，從血液中分離出該菌常被認(rèn)為是污染細(xì)菌。然而它可引發(fā)瓣膜異?；颊邅喖毙约?xì)菌性心內(nèi)膜炎。血液鏈球菌、溫和鏈球菌、格氏鏈球菌、口腔鏈球菌、中間型鏈球菌、常分離自深部膿腫、尤其是肝和腦膿腫。球菌化膿性感染第34頁(yè)三、微生物特征直徑小于2μm革蘭陽(yáng)性球菌，呈鏈狀排列，無(wú)芽胞和動(dòng)力，形成莢膜。肺炎鏈球菌呈矛尖狀，寬端相對(duì)尖端向外。兼性厭氧菌，肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌一些菌種需要CO2：促進(jìn)其生長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)要求高，須在培養(yǎng)基中加入血液、血清。最適生長(zhǎng)溫度35～37℃，pH7.4～7.6，血平板上形成灰白色，透明表面光滑小菌落，圍繞菌落形成α、β、γ三種特征性溶血現(xiàn)象，液體培養(yǎng)形成絮狀和顆粒沉淀。球菌化膿性感染第35頁(yè)發(fā)酵葡萄糖和各種糖，不產(chǎn)氣，乳酸為代謝終末產(chǎn)物，觸酶陰性。鏈球菌基因DNA中G+Cmol％為31～34?？乖Y(jié)構(gòu)復(fù)雜，主要有多糖抗原和蛋白抗原，前者位于細(xì)胞壁以此可將鏈球菌分類(lèi)為A、D、C、D、F、G等13群。本菌屬對(duì)干燥和消毒劑敏感，除肺炎鏈球菌外，較少引發(fā)細(xì)菌耐藥性。球菌化膿性感染第36頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)1.主要采咽拭標(biāo)本、痰液、膿汁和血液等標(biāo)本，采集后在2h內(nèi)送驗(yàn)，對(duì)B群溶血鏈球菌檢驗(yàn)，第35～37周妊娠婦女陰道分泌物，置于含多粘菌素(10μg／m1)和萘啶酸(15μgg／m1)選擇性培養(yǎng)肉湯中孵育18～24h，再作分離培養(yǎng)。球菌化膿性感染第37頁(yè)2.直接顯微鏡檢驗(yàn)標(biāo)本涂片革蘭染色鏡檢，見(jiàn)鏈狀排列革蘭陽(yáng)性球菌有助于無(wú)正常菌群污染標(biāo)本，莢膜腫脹試驗(yàn)用于檢驗(yàn)肺炎鏈球菌。3.直接檢測(cè)抗原咽拭標(biāo)本A群和陰道標(biāo)本D群鏈球菌可用抗原檢測(cè)，先將標(biāo)本放于含亞硝酸液中孵育片刻，用ELISA方法檢測(cè)。標(biāo)本含菌數(shù)少可出現(xiàn)假陰性。球菌化膿性感染第38頁(yè)4.分離培養(yǎng)與判定用血平板培養(yǎng)有利于識(shí)別溶血特征和深入判定。初代分離需用5％CO２環(huán)境,35℃—37℃孵育24h,觀察菌落性狀：β溶血A、C、G群菌落較大，直徑大于0.5mm，而米勒鏈球菌則小于0.5mm。B群鏈球菌菌較大，溶血環(huán)較A、C、G群含糊，α溶血菌落呈草綠色，肺炎鏈球菌因莢膜多糖使菌落呈粘性。牛型鏈球菌則為無(wú)溶血環(huán)呈灰色。球菌化膿性感染第39頁(yè)鏈球菌屬判定方法1.β-溶血鏈球菌判定(1)Lancefield群特異性抗原判定：B群為無(wú)乳鏈球菌，F(xiàn)群為米勒鏈球菌。(2)PYR試驗(yàn)：化膿性鏈球菌產(chǎn)生吡咯烷酮芳基酰胺酶水解吡咯烷酮B-萘基酰胺，加入N、N-二甲氧基肉桂醛試劑后產(chǎn)生桃紅色。球菌化膿性感染第40頁(yè)(3)桿菌肽敏感試驗(yàn)：可作為篩選試驗(yàn)。0.04U桿菌肽藥敏紙片貼在待測(cè)菌血平板上，35℃孵育過(guò)液后，觀察抑菌環(huán),化膿性鏈球菌敏感為陽(yáng)性。(4)VP試驗(yàn)：挑取平板上孵育過(guò)夜菌落置于2mlVP肉湯中，孵育6h后加入VP試劑，搖勻30秒，出現(xiàn)桃紅色者為陽(yáng)性。球菌化膿性感染第41頁(yè)(5)CAMP試驗(yàn)：無(wú)乳鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子促進(jìn)金葡菌溶血能力，可作為初步判定試驗(yàn)。先將金葡菌(ATCC25923)沿直徑劃線接種，再沿垂直方向接種無(wú)乳鏈球菌，兩線不得相接，間隔約3～4mm。35℃孵育過(guò)夜，劃線交界處出現(xiàn)箭頭狀溶血為陽(yáng)性。球菌化膿性感染第42頁(yè)2.非β－溶血鏈球菌判定(1)optochin試驗(yàn)：含5μｇoptochin紙片貼于涂布有待測(cè)菌平板上,35℃孵育過(guò)夜，抑菌圈大于14mm即為敏感。肺炎鏈球菌敏感。球菌化膿性感染第43頁(yè)(2)膽汁溶菌試驗(yàn)：將O．5ml麥?zhǔn)蠞舛燃?xì)菌懸液和等量2％去氧膽鹽置于試管內(nèi)，35℃孵育2小時(shí)后,菌液變清為陽(yáng)性。肺炎鏈球菌為陽(yáng)性。(3)膽汁七葉苷試驗(yàn)：將待測(cè)菌落接種于膽汁七葉苷斜面，35℃孵育48小時(shí)，斜面黑色為陽(yáng)性。牛鏈球菌試驗(yàn)陽(yáng)性。球菌化膿性感染第44頁(yè)3．草綠色鏈球菌判定

鏈球菌群VP脲酶精氨酸七葉苷甘露醇山梨醇溫和鏈球菌群------變異鏈球菌群+--+++唾液鏈球菌群+/-+/--+--米勒鏈球菌群+-++/-+/--球菌化膿性感染第45頁(yè)(五)抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn)慣用于風(fēng)濕熱輔助診療，活動(dòng)性風(fēng)濕熱患者抗體效價(jià)普通超出400單位。球菌化膿性感染第46頁(yè)(六)藥品敏感性試驗(yàn)A組為紅霉素、青霉素、甲氨芐啶／磺胺甲嗯唑等；B組為頭孢吡肟、頭孢噻肟、氧氟沙星、培南類(lèi)等；C組為阿莫西林、頭孢呋辛、氯霉素、利福平等。青霉素是抗鏈球菌首選藥物，另外頭孢菌素、紅霉素、萬(wàn)古霉素也是治療鏈球菌感染藥品。

球菌化膿性感染第47頁(yè)有報(bào)道A群鏈球菌紅霉素耐藥株和牛鏈球菌萬(wàn)古霉素耐藥株，耐青霉素肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌。若起源于血和腦脊液，對(duì)該菌株應(yīng)檢測(cè)對(duì)頭孢曲松、頭孢噻肟和美洛培南MIC以判斷敏感、中介或耐藥。球菌化膿性感染第48頁(yè)(七)檢驗(yàn)結(jié)果分析與匯報(bào)β-溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌系毒力強(qiáng)致病菌，均應(yīng)及時(shí)報(bào)告，及時(shí)使用抗生素以降低發(fā)生并發(fā)癥。

球菌化膿性感染第49頁(yè)C、G群大菌落β-溶血性鏈球菌是咽喉炎病原體，而米勒鏈球菌群是正常菌群，但在膿腫或傷口中分離應(yīng)視為致病菌而非污染菌。牛鏈球菌生物型1和心內(nèi)膜炎及胃腸道癌癥相關(guān)。球菌化膿性感染第50頁(yè)第三節(jié)腸球菌屬

一、分類(lèi)腸球菌屬歸類(lèi)鏈球菌科，但種系分類(lèi)法證實(shí)糞腸球菌和屎腸球菌不一樣于鏈球菌屬細(xì)菌，將其命名為腸球菌屬。有19種腸球菌，分成5群，臨床分離腸球菌多屬于2群。球菌化膿性感染第51頁(yè)二、臨床意義腸球菌所致感染最多見(jiàn)于尿路感染，多與尿路器械操作、留置導(dǎo)尿、尿路結(jié)構(gòu)異常相關(guān)，是主要醫(yī)院感染病原菌。腹腔和盆腔創(chuàng)傷時(shí)也常見(jiàn)腸球菌感染。近年來(lái)用抗生素而出現(xiàn)耐藥性，使腸球菌感染率不停上升。球菌化膿性感染第52頁(yè)腸球菌引發(fā)菌血癥常發(fā)生于有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾患老年人、長(zhǎng)久住院免疫功效低下患者。偶然可見(jiàn)呼吸道或中樞神經(jīng)系統(tǒng)腸球菌感染，在臨床診療前應(yīng)認(rèn)真評(píng)定分離菌臨床意義。

球菌化膿性感染第53頁(yè)三、微生物特征

革蘭陽(yáng)性球菌、卵圓形、鏈狀排列。無(wú)芽胞和莢膜，個(gè)別菌種有稀疏鞭毛。兼性厭氧菌，最適生長(zhǎng)溫度35℃；大多數(shù)菌株在10℃～45℃均能生長(zhǎng)。在含6.5％NaCl肉湯中能生長(zhǎng)，在40％膽汁培養(yǎng)基中能分解七葉苷，多數(shù)菌種含有吡咯烷酮芳基酰胺酶，能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺(PYR)，不含細(xì)胞色素氧化酶和觸酶。糞腸球菌培養(yǎng)于血培養(yǎng)基中，可合成細(xì)胞色素或觸酶。含D群鏈球菌D抗原。G+Cmol％為37～45。球菌化膿性感染第54頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)1.常規(guī)采集血、尿、創(chuàng)傷標(biāo)本和其它拭子，標(biāo)本于1小時(shí)內(nèi)接種完成。2.直接涂片染色鏡檢可見(jiàn)成短鏈排列,卵圓形革蘭陽(yáng)性球菌。球菌化膿性感染第55頁(yè)3.接種于含血平板，若含革蘭陰性桿菌可選取選擇判別培養(yǎng)基，慣用疊氮膽汁七葉苷瓊脂，可抑制革蘭陰性菌生長(zhǎng)，而腸球菌分解七葉苷為黑色菌落；35℃～37℃孵育24h后，形成灰白不透明、表面光滑、直徑0.5～1ｍｍ大小圓形菌落，血平板上為α溶血或不溶血。球菌化膿性感染第56頁(yè)細(xì)菌判定方法

菌屬萬(wàn)古霉素分解葡萄糖PYR膽汁七葉苷NaCL10℃45℃腸球菌屬敏感-+++++乳球菌屬敏感-++可變+可變鏈球菌屬敏感-----可變明串珠菌屬耐藥+-可變可變-可變球菌化膿性感染第57頁(yè)(五)藥品敏感試驗(yàn)

A組為青霉素或氨芐青霉素，

B組為萬(wàn)古霉素；

C組為四環(huán)素類(lèi)和紅霉素、氯霉素、

利福平；

U組為環(huán)丙沙星、諾氟沙星等。

球菌化膿性感染第58頁(yè)腸球菌耐藥性對(duì)普通劑量或中劑量氨基糖苷類(lèi)耐藥和對(duì)萬(wàn)古霉素低度耐藥。臨床上聯(lián)合使用青霉素G、氨芐青霉素與氨基糖苷類(lèi)抗生素成為治療腸球菌首選方法。球菌化膿性感染第59頁(yè)對(duì)重癥感染患者分離腸球菌應(yīng)判定到種，因?yàn)獒t(yī)院內(nèi)感染腸球菌呈上升趨勢(shì)，故對(duì)腸球菌分型流行病學(xué)調(diào)查顯得越來(lái)越重要，傳統(tǒng)分型可用生物分型、抗生素耐藥譜、噬菌體、細(xì)菌素等分型方法，但費(fèi)時(shí)費(fèi)力，較為先進(jìn)分子生物學(xué)方法分型，尤其是在耐藥株暴發(fā)流行時(shí)，顯示其主要價(jià)值。(六)檢驗(yàn)結(jié)果分析與匯報(bào)球菌化膿性感染第60頁(yè)第四節(jié)奈瑟菌屬和布蘭漢菌屬一、分類(lèi)奈瑟菌科包含奈瑟菌屬、卡他布蘭漢菌屬、莫拉菌屬、金氏菌屬和不動(dòng)桿菌屬。奈瑟菌屬包含淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌及卡他布蘭漢菌。

球菌化膿性感染第61頁(yè)二、臨床意義1.淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌是性病病原菌，臨床表現(xiàn)為：①淋病；②盆腔炎；③口咽部和肛門(mén)直腸??；④淋菌性結(jié)膜炎；⑤播散性淋病。淋病奈瑟菌致病物質(zhì)包含菌毛、外膜蛋白、IgA蛋白酶、脂多糖和鐵調(diào)整蛋白。球菌化膿性感染第62頁(yè)2.腦膜炎奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌是流行性腦脊髓膜炎病原體,經(jīng)過(guò)呼吸道感染后多數(shù)為隱性感染或表現(xiàn)為上呼吸道癥狀，少數(shù)可發(fā)展為敗血癥，進(jìn)而形成化膿性腦膜炎。3.卡他布蘭漢菌卡他布蘭漢菌是造成中耳炎，鼻竇炎，慢性阻塞性肺炎病原體。球菌化膿性感染第63頁(yè)三、微生物特征為革蘭陰性雙腎樣，坦面相鄰雙球菌,直徑約為0.6～1.5μm，無(wú)動(dòng)力無(wú)芽胞,一些菌種形成莢膜，孵育24h后在培養(yǎng)基上發(fā)生自溶。需要豐富營(yíng)養(yǎng)，對(duì)脂肪酸敏感,在培養(yǎng)基中需加入淀粉。球菌化膿性感染第64頁(yè)需氧生長(zhǎng)，CO2和濕度刺激奈瑟菌生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度為35℃～37℃。氧化酶陽(yáng)性，觸酶陽(yáng)性，對(duì)糖分解能力、硝酸鹽還原能力和DNA合成酶不同，常作為判別依據(jù)。抵抗力弱，對(duì)化學(xué)消毒劑敏感。Ｇ+Ｃmol％奈瑟菌屬為46～54，布蘭漢菌屬為40～48。球菌化膿性感染第65頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)1.采集腦脊液、血液、瘀點(diǎn)穿刺液等標(biāo)本后,馬上送檢，或用血平板床邊接種后馬上孵育。2.直接鏡檢涂片固定革蘭染色，顯微鏡觀察可見(jiàn)革蘭陰性雙球菌和胞內(nèi)含球菌多形核白細(xì)胞，有利于男性淋病早期診療。女性宮頸拭子標(biāo)本涂片可見(jiàn)胞內(nèi)、胞外大量革蘭陰性雙球菌,由于女性陰道有正常菌群借居，故必須由培養(yǎng)結(jié)果得以證實(shí)方可匯報(bào)。球菌化膿性感染第66頁(yè)腦脊液或皮膚瘀點(diǎn)滲出液涂片所見(jiàn)革陰性雙球菌和白細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌，有利于流行性腦脊髓膜炎早期診療。3.抗原檢測(cè)和核酸檢測(cè)利用ELISA檢測(cè)淋病奈瑟菌抗原，該法在檢測(cè)男性尿道分泌物標(biāo)本和涂片染色含有相同敏感度和特異度，但在宮頸和直腸拭子中，由于奈瑟菌屬存在共同抗原，其特異性較革蘭染色涂片鏡檢低。4.分離培養(yǎng)與判定。球菌化膿性感染第67頁(yè)奈瑟菌屬判定1.推測(cè)性判定G-雙球菌和氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性是兩個(gè)推測(cè)性判定指標(biāo)。區(qū)分G-雙球菌和G-球桿菌方法是將待檢菌接種于巧克力平板上,貼10U青霉素紙片，35℃孵育18—24小時(shí)，挑取紙片邊緣生長(zhǎng)菌落，涂片染色觀察，若菌體延長(zhǎng)成長(zhǎng)索狀則為G-球桿菌，而G-

雙球菌則仍保持雙球菌形態(tài)，一些菌體出現(xiàn)腫脹。球菌化膿性感染第68頁(yè)2.確證性判定

利用生化反應(yīng)，如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌葡萄糖試驗(yàn)產(chǎn)酸，而卡他布蘭漢奈瑟菌為陰性；腦膜炎奈瑟菌麥芽糖試驗(yàn)產(chǎn)酸，而淋病奈瑟菌為陰性。球菌化膿性感染第69頁(yè)(五)藥品敏感性試驗(yàn)藥品敏感試驗(yàn)選擇藥品為青霉素、頭孢菌素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星和壯觀霉素。治療首選藥品為青霉素。近年來(lái)，因?yàn)榱懿∧紊退庂|(zhì)粒轉(zhuǎn)移，由其介導(dǎo)耐青霉素酶淋病奈瑟菌臨床上多見(jiàn)，該菌表現(xiàn)對(duì)青霉素和四環(huán)素耐藥，對(duì)壯觀霉素和三代頭孢菌素、喹諾酮類(lèi)敏感，強(qiáng)調(diào)臨床試驗(yàn)室藥敏試驗(yàn)結(jié)果，以有利于合理用藥。球菌化膿性感染第70頁(yè)對(duì)引發(fā)下呼吸道感染卡他布蘭漢菌，既往對(duì)青霉素敏感，近年來(lái)匯報(bào)耐藥菌株日漸增多，可用廣譜青霉素與青霉素酶抑制劑合劑進(jìn)行治療。球菌化膿性感染第71頁(yè)(六)檢驗(yàn)結(jié)果分析與匯報(bào)淋病早期和正確診療，含有醫(yī)學(xué)和社會(huì)主要意義，診療匯報(bào)必須慎重，對(duì)各種試驗(yàn)室診療試驗(yàn)需掌握其敏感性和特異性程度，必須綜合分析各種試驗(yàn)結(jié)果，最終確實(shí)證還依賴于分離培養(yǎng)和判定。球菌化膿性感染第72頁(yè)腦膜炎奈瑟菌快速診療能為治療提供時(shí)機(jī)，故瘀點(diǎn)及腦脊液染色，涂片鏡檢是快速簡(jiǎn)便方法。球菌化膿性感染第73頁(yè)第七章腸桿菌科第一節(jié)概述

腸桿菌科包含24個(gè)與醫(yī)學(xué)相關(guān)菌屬,G+Cmol％39-59。1.四類(lèi)引發(fā)人類(lèi)腹瀉和腸道感染細(xì)菌：埃希菌屬、志賀菌屬、沙門(mén)菌屬、耶爾森菌屬。2.八種與醫(yī)院感染相關(guān)條件致病菌：枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、多源菌屬、沙雷菌屬、變形桿菌屬、普羅威登菌屬和摩根菌屬；球菌化膿性感染第74頁(yè)3.其中鼠疫耶爾森菌、傷寒沙門(mén)菌對(duì)人致病性較強(qiáng)。另外，許多細(xì)菌既是正常菌群，也是條件致病菌。在機(jī)體抵抗力下降，借居部位改變或菌群失調(diào)時(shí)能引發(fā)機(jī)會(huì)感染。

球菌化膿性感染第75頁(yè)二、臨床意義占臨床分離菌總數(shù)50％和Ｇ-總數(shù)80％,快要50％敗血癥70％以上泌尿道感染和大量腸道感染是由腸桿菌科細(xì)菌引發(fā)。1.人類(lèi)腸道外感染除志賀菌較少引發(fā)腸外感染，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、奇異變形桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、陰溝腸桿菌、粘質(zhì)沙雷菌等均可引起泌尿道、呼吸道、傷口和中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染;球菌化膿性感染第76頁(yè)且往往為醫(yī)院感染。鼠疫耶爾森菌可引發(fā)烈性傳染病鼠疫。2.人類(lèi)腸道感染埃希菌屬、志賀菌屬、沙門(mén)菌屬和耶爾森菌屬。主要引發(fā)各種急、慢性腸道感染、食物中毒、旅行者腹瀉及腸熱癥等。球菌化膿性感染第77頁(yè)三、共同特征(1)1.形態(tài)結(jié)構(gòu)Ｇ-桿狀或球桿狀、無(wú)芽孢、多數(shù)有鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。致病性菌株有菌毛。2.抗原成份⑴Ｏ抗原是細(xì)胞壁成份脂多糖。以核心多糖為中心三層結(jié)構(gòu)，內(nèi)側(cè)是脂類(lèi)A,為內(nèi)毒素毒性成份。外側(cè)是由重復(fù)特異多糖，決定Ｏ抗原特異性。球菌化膿性感染第78頁(yè)⑵H抗原是不耐熱蛋白質(zhì)抗原，氨基酸序列和空間構(gòu)型決定H抗原特異性。⑶表面抗原是包繞在Ｏ抗原外側(cè)多糖抗原，由多糖結(jié)構(gòu)決定抗原特異性。大腸埃希菌稱K抗原、傷寒沙門(mén)菌稱Vi抗原和志賀菌稱B抗原等。O抗原和H抗原是腸桿菌科血清學(xué)分群和分型依據(jù)。表面抗原存在時(shí)可阻斷?？乖c對(duì)應(yīng)抗體之間反應(yīng)，加熱處理能消除表面抗原阻斷作用。球菌化膿性感染第79頁(yè)共同特征(2)3.變異性⑴S-R變異是首次分離細(xì)菌，菌體抗原上都有特異性多糖鏈，菌落為光滑型。在人工培養(yǎng)基中重復(fù)傳代時(shí)，細(xì)胞壁上特異性多糖鏈消失而關(guān)鍵多糖仍保留，菌落變?yōu)榇植谛?。⑵H-O變異是有鞭毛細(xì)菌,失去鞭毛，動(dòng)力也隨之消失，稱H-O變異,有時(shí)見(jiàn)于新分離菌株中。球菌化膿性感染第80頁(yè)4.培養(yǎng)和生化特征營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好；兼性厭氧，主要生化特征包含發(fā)酵葡萄糖(產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣)，觸酶陽(yáng)性,氧化酶陰性，可將硝酸鹽還原至亞硝酸鹽。5.抵抗力抵抗力不強(qiáng)，加熱60℃30min即被殺死，不耐干燥，對(duì)普通化學(xué)消毒劑均敏感。對(duì)低溫有耐受力。能耐膽鹽，能抵抗染料抑菌作用。球菌化膿性感染第81頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)1.標(biāo)本采集①腸外標(biāo)本:采自不一樣感染部位如血液、體液、呼吸道、傷口、尿液及其它各種標(biāo)本。②腸道標(biāo)本:疾病早期留取新鮮糞便，挑取粘液膿血部分進(jìn)行培養(yǎng)。應(yīng)在2h內(nèi)進(jìn)行，以利志賀菌等檢出。如不能及時(shí)培養(yǎng)應(yīng)冷藏待檢。2.直接鏡檢Ｇ-桿菌，形態(tài)及染色性無(wú)判別意義。球菌化膿性感染第82頁(yè)3．分離培養(yǎng)判定(1)腸外標(biāo)本:采自無(wú)菌部位標(biāo)本用血瓊脂，血培養(yǎng)時(shí)可用肉湯增菌。其它標(biāo)本中含有雜菌，需用選擇性培養(yǎng)基以增加分離率，慣用伊紅美藍(lán)(EMB)瓊脂，因?yàn)镋MB能促進(jìn)腸桿菌科細(xì)菌生長(zhǎng)并抑制其它Ｇ-菌。

球菌化膿性感染第83頁(yè)(2)腸道標(biāo)本：慣用選擇判別培養(yǎng)基(如EMB)和針對(duì)沙門(mén)菌和志賀菌強(qiáng)選擇判別培養(yǎng)基，(如SS瓊脂)。如疑耶爾森菌感染可用耶爾森菌選擇瓊脂(CIN)。球菌化膿性感染第84頁(yè)腸桿菌科細(xì)菌判定1)常規(guī)生化判定:為試驗(yàn)室最慣用方法。各菌屬(種)主要生化特征有助于判定細(xì)菌。2)判定試劑盒:選取標(biāo)準(zhǔn)化和商品化微生物判定試劑盒，特點(diǎn)是質(zhì)量可靠穩(wěn)定判定能力強(qiáng)，并與編碼技術(shù)結(jié)合，可用儀器讀取結(jié)果，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，并提升了工作效率。球菌化膿性感染第85頁(yè)3)血清學(xué)判定：用特異性抗血清進(jìn)行血清學(xué)分型判定后才能作出最終匯報(bào)。4)分子生物學(xué)判定：可判定至科、屬、種、血清型和腸毒素基因等。甚至可區(qū)分致病菌株和非致病菌株。球菌化膿性感染第86頁(yè)耐藥性問(wèn)題日趨嚴(yán)重。粘質(zhì)沙雷菌對(duì)青霉素G等抗生素天然耐藥，而大多數(shù)是形成取得性耐藥。有染色體或質(zhì)粒介導(dǎo)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶或AmpC酶而產(chǎn)生耐藥性。已出現(xiàn)了耐各種抗菌藥品多重耐藥菌株，因此必須依據(jù)抗菌藥品敏感試驗(yàn)選取抗生素，并作好耐藥性監(jiān)控工作。同時(shí)細(xì)菌耐藥譜還可成為醫(yī)院感染流行病學(xué)調(diào)查中標(biāo)志。(五)抗菌藥品敏感試驗(yàn)球菌化膿性感染第87頁(yè)一、分類(lèi)埃希菌屬包含5個(gè)種：①大腸埃希菌是腸道中G-桿菌主要組員，常引發(fā)腸內(nèi)外感染，是腹瀉和泌尿道感染主要病原菌。②蟑螂埃希菌偶而檢出并有潛在致病性。第二節(jié)埃希菌屬球菌化膿性感染第88頁(yè)③弗格森埃希菌；④赫爾曼埃希菌；⑤傷口埃希菌。最近還發(fā)覺(jué)稱為不脫胺／凝聚埃希菌G+Cmol％為48～52。球菌化膿性感染第89頁(yè)二、臨床意義⑴1.致病原因⑴侵襲力K抗原能抗吞噬，并有抵抗抗體和補(bǔ)體作用。菌毛能幫助細(xì)菌粘附于粘膜表面稱定殖因子，能使細(xì)菌定殖產(chǎn)生毒素而引發(fā)對(duì)應(yīng)癥狀，直接侵犯粘膜引發(fā)炎癥。球菌化膿性感染第90頁(yè)⑵內(nèi)毒素含有發(fā)燒、休克、DIC等病理作用。⑶腸毒素產(chǎn)生不耐熱和耐熱腸毒素兩種腸毒素：均可使腸道細(xì)胞中cAMP水平升高，引發(fā)腸液大量分泌而造成腹瀉。球菌化膿性感染第91頁(yè)二、臨床意義⑵2.所致疾病⑴腸道外感染是臨床分離G-桿菌中最常見(jiàn)菌種，可引發(fā)泌尿系等各種類(lèi)型感染。引發(fā)泌尿系感染菌株以血清型01、2、6為多見(jiàn)，本菌還可引發(fā)菌血癥、膽囊炎、肺炎及新生兒腦膜炎等。常見(jiàn)于腹腔內(nèi)膿腫、腸穿孔繼發(fā)腹膜炎、腸道手術(shù)后繼發(fā)感染或大面積灼傷創(chuàng)面感染。球菌化膿性感染第92頁(yè)有時(shí)與類(lèi)桿菌、糞腸球菌混合感染。產(chǎn)生膿液粘稠，有糞臭味。該菌對(duì)普通抗生素敏感，易產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶，而造成對(duì)第三代頭孢菌素耐藥。⑵腸道內(nèi)感染其中有些菌株能引發(fā)輕微腹瀉至霍亂樣嚴(yán)重腹瀉，并能引發(fā)致死性并發(fā)癥如溶血性尿毒綜合征。球菌化膿性感染第93頁(yè)(1)腸毒素型大腸埃希菌(ETEC)：引發(fā)兒童腹瀉和旅行者腹瀉，類(lèi)似輕型霍亂樣腹瀉。該菌產(chǎn)生耐熱腸毒素(ST)和不耐熱腸毒素(LT)。(2)腸致病性大腸埃希菌(EPEC)：引發(fā)嬰幼兒腸道感染,血清型是055、0111等,是嬰兒腹瀉主要病原菌。(3)腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC)：類(lèi)似于志賀菌，侵犯腸粘膜細(xì)胞，引發(fā)菌痢樣癥狀，出現(xiàn)膿血粘液便。引發(fā)腸道感染大腸埃希菌球菌化膿性感染第94頁(yè)(4)腸出血型大腸埃希菌(EHEC)，多為食源性感染，經(jīng)過(guò)糞-口路徑傳輸。致病因子是菌毛和Vero毒素，血清型是0157：H7，可引發(fā)出血性結(jié)腸炎，有2％～7％發(fā)展成溶血性尿毒綜合征，出現(xiàn)溶血性貧血，血小板降低性紫癜和急性腎衰竭，死亡率為3％～10％。(5)腸凝聚型大腸埃希菌(EaggEC)：代表一群不產(chǎn)生LT或ST，不能用O：H血清分型，可粘附于Hep-2細(xì)胞菌株。與世界各地慢性腹瀉相關(guān)。球菌化膿性感染第95頁(yè)三、微生物特征1.形態(tài)結(jié)構(gòu)G-直短桿狀，大小為1.0～1.5μm，多數(shù)有鞭毛能運(yùn)動(dòng)，引發(fā)腸外感染菌株有莢膜(微莢膜)和周身菌毛。球菌化膿性感染第96頁(yè)2.抗原成份⑴O抗原是多糖磷脂復(fù)合物(LPS)，耐熱加熱100℃不能滅活，已經(jīng)有171種是血清學(xué)分型基礎(chǔ)。⑵H抗原是不耐熱蛋白質(zhì)，已知有56種，均為單相菌株。⑶K抗原是多糖莢膜抗原，對(duì)熱穩(wěn)定，能阻止O凝集。血清型別按O：K：H次序以數(shù)字表示。球菌化膿性感染第97頁(yè)3.培養(yǎng)特征兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通瓊脂上生長(zhǎng)良好，形成圓形光滑、濕潤(rùn)菌落，在選擇培養(yǎng)基上可發(fā)酵乳糖形成有色菌落。IMViC試驗(yàn)結(jié)果為++--。球菌化膿性感染第98頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)(1)腸道外感染標(biāo)本1.標(biāo)本采集血液標(biāo)本以無(wú)菌操作技術(shù)采集靜脈血5ml注入血液培養(yǎng)瓶。痰標(biāo)本取清晨口腔清潔后從深部咳出痰液。膿、分泌物等標(biāo)本用無(wú)菌棉拭子直接采取。2.直接涂片染色檢驗(yàn)除血液標(biāo)本外，膿、痰、分泌物等標(biāo)本均作涂片染色檢驗(yàn)。尿液和各種體液離心后取沉淀物作涂片,可見(jiàn)G-短桿菌。球菌化膿性感染第99頁(yè)3.分離培養(yǎng)判定(1)血液標(biāo)本接種肉湯增菌培養(yǎng)，待生長(zhǎng)后移種血平板。體液標(biāo)本取離心沉淀物接種于血平板。尿液標(biāo)本應(yīng)同時(shí)作菌落計(jì)數(shù)。膿、痰和分泌物標(biāo)本可直接接種于血平板。35℃孵育18～24h后觀察菌落形態(tài)。球菌化膿性感染第100頁(yè)(2)判別培養(yǎng)基上挑選有色菌落，用生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗(yàn)判定到屬和種。經(jīng)典生化反應(yīng)特征：TSIA(雙糖鐵)產(chǎn)酸／產(chǎn)酸產(chǎn)氣，CIT(枸櫞酸鹽)陰性,URE(脲酶)陰性,IND(吲哚)陽(yáng)性,MOT(動(dòng)力)+／-,ORN(鳥(niǎo)氨酸)+／-。球菌化膿性感染第101頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)(2)腸道內(nèi)感染標(biāo)本引發(fā)腹瀉ETEC、EPEC、EIEC和EHEC含有與腸道外感染大腸埃希菌相同生物學(xué)特征，但分別含有特殊血清型、腸毒素或毒力因子。檢驗(yàn)程序同腸道外標(biāo)本。采集腹瀉和食物中毒患者糞便和殘留食物，肛拭標(biāo)本，接種腸道選擇判別培養(yǎng)基分離培養(yǎng)和判定。球菌化膿性感染第102頁(yè)腸道感染大腸埃希菌判定1)ETEC生化反應(yīng)、血清分型加腸毒素測(cè)定：生化反應(yīng)符合大腸埃希菌，但血清型別與致病沒(méi)有一定聯(lián)絡(luò)。主要依賴ST和LT腸毒素檢測(cè)。2)EPEC生化反應(yīng)加血清分型：用多價(jià)抗血清檢測(cè)O抗原，進(jìn)行特異性抗血清凝集試驗(yàn)，陽(yáng)性菌株測(cè)定凝集滴度以排除交叉反應(yīng)，同時(shí)做H抗原測(cè)定(O：H分型)。球菌化膿性感染第103頁(yè)3)EIEC生化反應(yīng)、血清分型加腸毒素測(cè)定：用O：H血清分型，賴氨酸脫羧酶陰性，無(wú)動(dòng)力，常見(jiàn)血清型0152和0124，與志賀菌相同，主要判別試驗(yàn)是醋酸鈉、葡萄糖銨利用試驗(yàn)和粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸試驗(yàn)，大腸埃希菌三者均陽(yáng)性，而志賀菌三者均陰性。4)EHEC血清分型加生化反應(yīng)：應(yīng)常規(guī)作0157：H7培養(yǎng)，必須經(jīng)生化反應(yīng)證實(shí)為大腸埃希菌。凡山梨醇陰性大腸埃希菌0157：H7分離株無(wú)須再做毒素檢測(cè)，因?yàn)榫a(chǎn)生Vero毒素。5)EaggEC用液體培養(yǎng)-凝集試驗(yàn)，檢測(cè)細(xì)菌對(duì)細(xì)胞粘附性或用DNA探針技術(shù)。球菌化膿性感染第104頁(yè)可致各種感染，輕者為自愈性胃腸炎，重者可引發(fā)致死性傷寒。傷寒和副傷寒A、B引發(fā)胃腸炎、菌血癥和腸熱癥；豬霍亂沙門(mén)菌引發(fā)胃腸炎和敗血癥，兒童多見(jiàn)。第三節(jié)沙門(mén)菌球菌化膿性感染第105頁(yè)一、分類(lèi)沙門(mén)菌屬是腸桿菌科中最復(fù)雜菌屬。依據(jù)O抗原分群，再依據(jù)H抗原分血清型，將沙門(mén)菌屬分為6個(gè)亞屬(亞屬1-6，其中亞屬3再分為3a和3b,見(jiàn)表7。8)，絕大多數(shù)(99％)沙門(mén)菌臨床分離株是亞群1中菌種。本屬細(xì)菌DNAG+C含量為50％-53％。球菌化膿性感染第106頁(yè)二、臨床意義(一)致病原因1.侵襲力有Vi抗原含有侵襲力，穿過(guò)小腸上皮被吞噬后，因?yàn)閂i抗原保護(hù),反而在細(xì)胞內(nèi)繁殖，并隨吞噬細(xì)胞至機(jī)體其它部位，故稱細(xì)胞內(nèi)寄生菌。球菌化膿性感染第107頁(yè)2.內(nèi)毒素有較強(qiáng)內(nèi)毒素，可引發(fā)發(fā)燒，白細(xì)胞改變，中毒性休克，并能激活補(bǔ)體，造成一系列病理生理改變。3.腸毒素一些沙門(mén)菌(如鼠傷寒沙門(mén)菌)能產(chǎn)生類(lèi)似大腸埃希菌腸毒素。球菌化膿性感染第108頁(yè)(二)所致疾病1.胃腸炎最常見(jiàn)，引發(fā)腹瀉，伴有低熱，惡心和嘔吐。2.菌血癥或敗血癥以豬霍亂沙門(mén)菌感染為多，表現(xiàn)為高熱寒戰(zhàn)。常伴有膽囊炎、骨髓炎。血培養(yǎng)陽(yáng)性而便培養(yǎng)陰性。3.腸熱癥由傷寒沙門(mén)菌引發(fā)。血培養(yǎng)或肥達(dá)反應(yīng)陽(yáng)性。經(jīng)口感染，穿過(guò)小腸上皮抵達(dá)淋巴結(jié)，進(jìn)入血流，第一次菌血癥。出現(xiàn)發(fā)燒等癥狀。球菌化膿性感染第109頁(yè)隨血流播散至肝、脾等器官中繼續(xù)繁殖，再次進(jìn)入血流擴(kuò)散，第二次菌血癥，出現(xiàn)連續(xù)高熱、肝脾腫大、皮疹和全身中毒癥狀。細(xì)菌隨膽汁進(jìn)入腸腔，經(jīng)糞便排出。潛伏期7—20天，經(jīng)典病程3-4周，發(fā)病2周后機(jī)體出現(xiàn)免疫反應(yīng)，使疾病好轉(zhuǎn)，但同時(shí)也引發(fā)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)，造成腸壁淋巴結(jié)壞死潰瘍，可造成腸穿孔而危及生命。4.攜帶者約3％患者成為攜帶者，糞便連續(xù)排菌達(dá)1年以上。球菌化膿性感染第110頁(yè)三、微生物特征1.形態(tài)染色G-桿菌細(xì)長(zhǎng)，1.0～3.0μm,有鞭毛，無(wú)芽胞和莢膜。2.抗原結(jié)構(gòu)有3種:⑴O抗原為多糖·類(lèi)脂·蛋白質(zhì)復(fù)合物，能耐受100℃2.5h。共有58種，是分群依據(jù),凡含共同抗原血清型歸為一個(gè)群，沙門(mén)菌含一個(gè)或數(shù)種O抗原,每群以O(shè)加上數(shù)字及括號(hào)大寫(xiě)英文字母次序編排，如02群(A)，Z以后直接加數(shù)字表示，如051群。刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM抗體,與對(duì)應(yīng)抗血清反應(yīng)呈顆粒狀凝集。球菌化膿性感染第111頁(yè)⑵H抗原為蛋白質(zhì)抗原，加熱被破壞。有兩個(gè)相,第一相當(dāng)特異相，用a、b、c表示,是定型依據(jù)。刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG抗體,與對(duì)應(yīng)抗血清呈絮狀反應(yīng)。⑶表面抗原為Vi抗原有保護(hù)作用?？勺柚筄抗原與對(duì)應(yīng)抗體發(fā)生凝集，故在沙門(mén)菌血清學(xué)判定時(shí)應(yīng)加以注意。球菌化膿性感染第112頁(yè)三、微生物特征⑵3.培養(yǎng)特征兼性厭氧，生長(zhǎng)溫度35℃～37℃，最適生長(zhǎng)pH為6.8～7.8;營(yíng)養(yǎng)要求不高，在腸道選擇性培養(yǎng)基上因不發(fā)酵乳糖形成透明菌落，在SS瓊脂上形成黑色菌落。4.抵抗力不強(qiáng)，加熱60℃1h或65℃20min，在水中能活2～3周，糞便中呵存活1～2個(gè)月5.變異性有S-R變異、H-O變異和位相變異等具有雙相H抗原菌變成單相菌。球菌化膿性感染第113頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)1.采集標(biāo)本傷寒沙門(mén)菌發(fā)病第l周取血。第2、3周取糞便、尿液做培養(yǎng)分離率高。2.直接鏡檢革蘭陰性桿菌。直接用膠乳凝集試驗(yàn)檢測(cè)病人標(biāo)本或增菌培養(yǎng)物沙門(mén)菌抗原，可快速診療。

球菌化膿性感染第114頁(yè)3.分離培養(yǎng)與判定慣用腸道判別培養(yǎng)基或選擇培養(yǎng)基。在菌最較少時(shí)，血液和骨髓液分離培養(yǎng)用增菌肉湯。35℃-37℃孵育，選擇透明可疑菌落做判定。球菌化膿性感染第115頁(yè)沙門(mén)菌判定1.用生化試驗(yàn)將可疑菌落判定到屬和種,基本生化反應(yīng)特征：TSIA(雙糖鐵)產(chǎn)堿／產(chǎn)酸或產(chǎn)堿／產(chǎn)酸產(chǎn)氣，H2S陽(yáng)性、CIT(枸櫞酸鹽)陽(yáng)或陰性、URE(脲酶)陰性、IND(吲哚)陰性、MOT(動(dòng)力)陽(yáng)性、VP陰性、ORN(鳥(niǎo)氨酸)陽(yáng)性。凡臨床分離菌乳糖、吲哚陽(yáng)性，或脲酶陽(yáng)性者，均不考慮為沙門(mén)菌。球菌化膿性感染第116頁(yè)2.血清學(xué)分型：用抗血清對(duì)所分離菌種O抗原、Vi抗原、第一、二相H抗原進(jìn)行凝集試驗(yàn)。先用多價(jià)O抗血清(A-F)進(jìn)行分群，95％以上都屬A-F群，對(duì)早期診療有主要意義。再分別用單價(jià)因子血清定群，用H因子血清檢驗(yàn)H抗原。綜合O、H及Vi因子血清檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判斷。球菌化膿性感染第117頁(yè)(五)抗體檢測(cè)(肥達(dá)反應(yīng))用已知傷寒、副傷寒沙門(mén)菌O、H抗原，檢測(cè)受檢血清中有沒(méi)有對(duì)應(yīng)抗體半定量試管內(nèi)凝集試驗(yàn)，稱為肥達(dá)反應(yīng)。能輔助診療傷寒，甲、乙、丙型副傷寒沙門(mén)菌引發(fā)腸熱癥。球菌化膿性感染第118頁(yè)1.方法將受檢血清用生理鹽水作倍比稀釋，分別加入等量傷寒沙門(mén)菌O、H抗原及副傷寒沙門(mén)菌甲、乙、丙H抗原，進(jìn)行試管內(nèi)凝集試驗(yàn)，凡血清最高稀釋度出現(xiàn)顯著凝集者為凝集效價(jià)。球菌化膿性感染第119頁(yè)2.結(jié)果解釋(1)正常值：各地域有所不一樣，O>80×,H>1：160×，A、B，C>l：80×；或第二份血清效價(jià)增高4倍以上含有診療意義。(2)O抗原抗體為IgM，出現(xiàn)較早，H抗體為IgG，出現(xiàn)較遲。①O高H不高,可能為疾病早期；—周后復(fù)查如升高為腸熱癥。②H高O不高，可能以往患過(guò)傷寒或接收過(guò)預(yù)防接種，為回想反應(yīng)。球菌化膿性感染第120頁(yè)—、分類(lèi)將志賀菌屬分為4個(gè)血清群(種)：A群為痢疾志賀菌；B群為福氏志賀菌；C群為鮑特志賀菌；D群為宋內(nèi)志賀菌。最近將生化性狀相近A、B，C群歸為一群，統(tǒng)稱志賀菌A、B、C血清群；而將生化特征與之相異，鳥(niǎo)氨酸脫羧酶和β-半乳糖苷酶均陽(yáng)性宋內(nèi)志賀菌單列出來(lái)。DNAG+Cmol％為49～53。第四節(jié)志賀菌屬球菌化膿性感染第121頁(yè)二、臨床意義(一)致病原因1.侵襲力因菌毛作用，細(xì)菌粘附在腸粘膜表面;2.內(nèi)毒素造成粘膜細(xì)胞死亡發(fā)炎，并形成毛細(xì)血管血栓，造成壞死脫落和潰瘍，臨床出現(xiàn)膿血便；并引發(fā)全身中毒癥狀，造成發(fā)燒、意識(shí)障礙，甚至中毒性休克；3.外毒素A群志賀菌Ⅰ和Ⅱ型產(chǎn)生志賀毒素，有細(xì)胞毒、腸毒素和神經(jīng)毒等生物學(xué)活性。球菌化膿性感染第122頁(yè)(二)所致疾病有以下3種臨床類(lèi)型：1．急性細(xì)菌性痢疾表現(xiàn)為腹痛發(fā)燒，有里急后重現(xiàn)象,便中含有粘液和血。極少進(jìn)血流，中毒性菌痢見(jiàn)于小兒，常無(wú)消化道癥狀而表現(xiàn)為全身中毒癥狀，往往造成死亡。球菌化膿性感染第123頁(yè)2.慢性細(xì)菌性痢疾菌痢治療不徹底，造成重復(fù)發(fā)作遷延不愈，超出2個(gè)月視為慢性菌??；3.攜帶者有恢復(fù)期帶菌、慢性帶菌和健康帶菌等3種，是主要傳染源。球菌化膿性感染第124頁(yè)三、微生物特征1.G-桿菌，菌體短小，無(wú)芽胞莢膜和鞭毛，有菌毛2.抗原成份有群和型特異性兩種O抗原，是分類(lèi)依據(jù)依據(jù)生化反應(yīng)和O抗原不一樣，分為A、B、C、D4個(gè)血清群和40余個(gè)血清型。O抗原耐熱，加熱100℃、60min不被破壞。K抗原能阻斷O凝集。球菌化膿性感染第125頁(yè)3.變異性有S-R變異、耐藥性變異。多重耐藥性問(wèn)題己成為嚴(yán)重醫(yī)學(xué)問(wèn)題。4.培養(yǎng)特征兼性厭氧，生長(zhǎng)溫度37℃，pH7.2～7.4。營(yíng)養(yǎng)要求不高，能在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。在判別培養(yǎng)基上形成無(wú)色半透明菌落。5.抵抗力比其它腸道細(xì)菌抵抗力低，在1％石炭酸中15-30min和加熱60℃10min即被殺死球菌化膿性感染第126頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)1.標(biāo)本采集在治療前采集粘液膿血便作床邊接種，不能及時(shí)接種可置甘油保留液送檢;2.直接鏡檢G-桿菌。膠乳凝集試驗(yàn)和免疫熒光技術(shù)檢測(cè)抗原。球菌化膿性感染第127頁(yè)3.核酸檢測(cè)志賀菌攜帶一個(gè)非結(jié)合型大質(zhì)粒,能編碼與侵襲性相關(guān)外膜蛋白,是產(chǎn)生痢疾綜合征主要致病因子,從中2.5kb侵襲相關(guān)區(qū)段中設(shè)計(jì)出ipaH引物,可用于檢測(cè)志賀菌序列。4.分離培養(yǎng)用判別培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基,取可疑菌落判定。球菌化膿性感染第128頁(yè)志賀菌判定（1）1.生化試驗(yàn)判定到屬和種基本生化反應(yīng)特征:TSIA(雙糖鐵)產(chǎn)堿／產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣,CIT(枸櫞酸鹽)陰性,URE(脲酶)陰性,MOT(動(dòng)力)陰性,YP陰性。球菌化膿性感染第129頁(yè)志賀菌判定（2）2.血清學(xué)判定先用志賀菌屬4種多價(jià)(A群1，2型、B群1～6型、C群l～6型及D群)作玻片凝集試驗(yàn)，凝集者再深入作定型。A群：即痢疾志賀菌，為一群甘露醇陰性菌株，共有10個(gè)血清型(1～)0)，其O抗原從1～X共10種．均為獨(dú)立血清理，球菌化膿性感染第130頁(yè)Ｂ群：即福氏志賀菌，有6個(gè)血清型和X、Y2個(gè)變型。6型菌株缺乏共同群抗原，故多價(jià)血清中應(yīng)包含6型因子血清，不然將會(huì)造成漏檢。C群：即鮑特志賀菌。本菌共有15個(gè)血清群，D群：即宋內(nèi)志賀菌：僅有—個(gè)血清型，但有光滑型(S)和粗糙型(R)兩種茵落;R型菌不被S型血清所凝集；所以診斷血清應(yīng)含有S及R兩種因子血清球菌化膿性感染第131頁(yè)包含3種人類(lèi)致病菌：鼠疫耶爾森菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌和假結(jié)核耶爾森菌。還可從臨床標(biāo)本中分離到弗氏、中間、克氏、輿氏、伯氏、莫氏、羅氏和魯氏等8種耶爾森菌。第五節(jié)耶爾森菌屬球菌化膿性感染第132頁(yè)一、鼠疫耶爾森菌(一)臨床意義是烈性自然疫源性傳染病鼠疫病原菌。1．致病原因有內(nèi)毒素和鼠毒素兩種毒素。鼠毒素與毒力相關(guān)，作用于心血管系統(tǒng)，引發(fā)不可逆性休克與死亡，該毒素存在于細(xì)胞內(nèi)，菌細(xì)胞裂解或白溶后釋放。球菌化膿性感染第133頁(yè)2．臨床類(lèi)型

1)腺鼠疫：局部淋巴結(jié)(多為腹股溝淋巴結(jié))腫脹、壞死和膿腫；2)敗血型鼠疫：由細(xì)菌侵入血流大量繁殖所致?？稍?-3天內(nèi)死亡；3)肺鼠疫：由腺鼠疫、敗血型鼠疫繼發(fā)而成，可經(jīng)過(guò)呼吸道在人與人之間直接傳輸，引發(fā)原發(fā)性肺鼠疫，死亡率極高。球菌化膿性感染第134頁(yè)(二)微生物特征1.G-桿狀，0.5～1.0μm，兩極濃染，有莢膜，無(wú)芽胞和鞭毛。2.抗原結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，主要有(1)F1抗原:是封套抗原。特異性高，抗原性強(qiáng)，產(chǎn)生抗體有良好保護(hù)作用;(2)V／W抗原：是菌體表面抗原，與本菌毒力和侵襲力相關(guān)。(3)T抗原：為為鼠毒素,有良好抗原性和免疫原性，可脫毒成類(lèi)毒素制成抗毒素。球菌化膿性感染第135頁(yè)3.兼性厭氧，生長(zhǎng)溫度為27℃～30℃，最適pH為6.9～7.2,血瓊脂培養(yǎng)48h后形成粗糙菌落，肉湯培養(yǎng)48h后形成菌膜，稍加搖動(dòng)后菌膜鐘乳石狀下垂；本菌動(dòng)力為陰性；IMViC試驗(yàn)反應(yīng)模式為—+—、苯丙氨酸脫氨酶、脲酶、硫化氫均為陰性；不液化明膠，當(dāng)穿刺培養(yǎng)時(shí)菌沿穿刺線縱樹(shù)狀發(fā)育；分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，對(duì)多數(shù)糖不分解：球菌化膿性感染第136頁(yè)(三)微生物檢驗(yàn)鼠疫耶爾森菌傳染性極強(qiáng)，故應(yīng)嚴(yán)格恪守操作規(guī)程，一旦疑為本菌，應(yīng)馬上向省市疾病控制中心等部門(mén)匯報(bào)，并將菌種送檢驗(yàn)中心或?qū)I(yè)試驗(yàn)室作深入判定。鼠疫確實(shí)診主要依賴病原學(xué)診療，須經(jīng)全方面生化反應(yīng)、噬菌體裂解試驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn)才得以作出最終判定。診療確立后除對(duì)患者進(jìn)行隔離治療外，對(duì)疫區(qū)及有關(guān)人員須采取有效預(yù)防隔離辦法，預(yù)防疫情擴(kuò)散。

球菌化膿性感染第137頁(yè)二、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌

天然借居在各種動(dòng)物體內(nèi)，如豬、鼠、家畜和兔等。經(jīng)過(guò)污染食物(牛奶、豬肉等)和水，經(jīng)糞—口路徑或因接觸染疫動(dòng)物而感染。本菌含有侵襲性及腸毒素為人獸共患病原菌,經(jīng)過(guò)污染食物和水源經(jīng)消化道傳輸，或因接觸帶菌動(dòng)物而感染。臨床表現(xiàn)以小腸、結(jié)腸炎為多見(jiàn),還可引發(fā)結(jié)節(jié)性紅斑、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病。球菌化膿性感染第138頁(yè)(一)微生物特征1．G-球桿菌，偶有兩極濃染，無(wú)芽胞莢膜，35℃無(wú)動(dòng)力，22—25℃有動(dòng)力。2．依據(jù)O抗原可分為血清型，我國(guó)主要為O9、O8、O5、O3等幾個(gè)血清型與致病性相關(guān)。3．培養(yǎng)特征兼性厭氧,耐低溫，在4℃～40℃均能生長(zhǎng)，最適溫度為20℃～28℃。在普通瓊脂上生長(zhǎng)良好。不發(fā)酵乳糖，能分解葡萄糖和蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，硫化氫陰性，脲酶陽(yáng)性，VP試驗(yàn)22℃-25℃陽(yáng)性，35℃-37℃陰性，鳥(niǎo)氨酸脫羧酶陽(yáng)性。球菌化膿性感染第139頁(yè)(三)微生物檢驗(yàn)與判定1.采集糞便、食物，也取血液，尿液等標(biāo)本。2.直接涂片鏡檢G-球桿菌。3.冷增菌糞便標(biāo)本可用7mlM／15Ph7.4PBS4℃增菌2-3周。4.耶爾森菌專用選擇培養(yǎng)基(CIN)分離,培養(yǎng)48h后,菌落為粉紅色。球菌化膿性感染第140頁(yè)生化反應(yīng)特征：TSIA(三糖鐵)產(chǎn)酸／產(chǎn)酸，不產(chǎn)氣，H2S陰性，CIT(枸櫞酸鹽)陰性，URE(脲酶)陽(yáng)性，PHE(苯丙氨酸)陰性，OXI(氧化酶)陰性，IND(吲哚)陰性／陽(yáng)性，ORN(烏氨酸)陽(yáng)性MOT(動(dòng)力)，V-P，β-半乳糖苷酶)等結(jié)果與培養(yǎng)溫度相關(guān)(22℃-25℃陽(yáng)性，35℃陰性)。5.血清定型。球菌化膿性感染第141頁(yè)四、假結(jié)核耶爾森菌

鼠和鳥(niǎo)類(lèi)是天然宿主，人類(lèi)感染少見(jiàn)。多數(shù)病例為腸道感染，有時(shí)可引起腸系膜淋巴結(jié)炎，癥狀類(lèi)似闌尾炎。標(biāo)本接種選擇判別培養(yǎng)基,孵育24h后為無(wú)色(乳糖陰性)小菌落;球菌化膿性感染第142頁(yè)生化反應(yīng)特征：TSIA(三糖鐵)產(chǎn)堿／產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣，H2S陰性，CIT(枸櫞酸鹽)陰性，URE(脲酶)陽(yáng)性，PHE(苯丙氨酸)陰性，OXI(氧化陰性，V-P陰性，IND(吲哚)陰性，MOT(動(dòng)力)22℃-25℃陽(yáng)性；35℃陰性；可與鼠疫耶爾森菌區(qū)分。球菌化膿性感染第143頁(yè)五、其它耶爾森菌弗氏、中間、克氏、奧氏、伯氏、莫氏、羅氏和魯氏耶爾森菌亦可從腸道內(nèi)外標(biāo)本分離到，生化性狀相同，均能在4℃以及在CIN上生長(zhǎng),在冷凍食品中增殖，含有潛在致病性。球菌化膿性感染第144頁(yè)—、分類(lèi)包含4個(gè)種：弗勞地拘櫞酸桿菌,異型拘櫞酸桿菌,無(wú)丙二酸鹽枸櫞酸桿菌和無(wú)丙二酸鹽拘櫞酸桿菌生物群1群。第六節(jié)枸櫞酸桿菌屬球菌化膿性感染第145頁(yè)二、臨床意義為條件致病菌，與腹瀉和腸道外感染相關(guān)。1.異型枸櫞酸桿菌引發(fā)新生兒腦炎、敗血癥；2.弗勞地枸櫞酸桿菌引發(fā)胃腸道感染，也可致菌血癥及許多感染；3.無(wú)丙二酸鹽拘櫞酸桿菌極少在腸道外部位分離到；有時(shí)與G-無(wú)芽胞厭氧菌(產(chǎn)黑色素類(lèi)桿菌等)合并感染。球菌化膿性感染第146頁(yè)三、微生物特征1.為G-桿菌，有動(dòng)力(周身鞭毛)、無(wú)芽孢、無(wú)莢膜。2.兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，能在普通瓊脂上生長(zhǎng)。在血平板形成邊緣整齊，直徑2-4mm不溶血菌落。在腸道選擇培養(yǎng)基上為乳糖發(fā)酵菌落。3.弗勞地枸櫞酸桿菌可產(chǎn)生硫化氫，生化特征和抗原結(jié)構(gòu)與沙門(mén)菌屬相同，應(yīng)注意判別。

球菌化膿性感染第147頁(yè)四、微生物檢驗(yàn)1.直接鏡檢G-桿菌；2.分離培養(yǎng)與判定取可疑菌落乳糖發(fā)酵菌株產(chǎn)生綠色金屬光澤；SS上菌落中央黑色，周?chē)该鳎?.將可疑菌落用生化、血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)—步判定到屬和種。符合腸桿菌科和拘櫞酸桿菌屬基本特征。球菌化膿性感染第148頁(yè)五、枸櫞酸桿菌屬判定1.屬判別生化反應(yīng)與沙門(mén)菌屬(亞屬1和3)及愛(ài)德華菌屬相同,主要判別點(diǎn)是賴氨酸脫羧酶陰性。球菌化膿性感染第149頁(yè)2.種間判別：弗勞地枸櫞酸桿菌大部分菌株吲哚陰性，硫化氫多數(shù)陽(yáng)性(80％)而其它幾個(gè)菌種相反，異型拘櫞酸桿菌生化特征為丙二酸鹽和側(cè)金盞花醇陽(yáng)性，無(wú)丙二酸鹽枸椽酸桿菌及生物l群之間區(qū)分是后者棉子糖和蜜二糖陽(yáng)性。球菌化膿性感染第150頁(yè)六、基本生化反應(yīng)特征TSI(三糖鐵)產(chǎn)酸／產(chǎn)酸產(chǎn)氣或產(chǎn)堿／產(chǎn)酸產(chǎn)氣，產(chǎn)生硫化氫，CIT(枸櫞酸鹽)陽(yáng)性，URE(脲酶)陰性／陽(yáng)性，IND(吲哚)陽(yáng)性／陰性，MOT(動(dòng)力)陽(yáng)性，V-P陰性，ORN(烏氨酸)陽(yáng)性／陰性，ARG(精氨酸)陽(yáng)性，LYS(賴氨酸)陰性。球菌化膿性感染第151頁(yè)一、分類(lèi)克雷伯菌屬共有7個(gè)種：肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸(催娩)克雷伯菌、解鳥(niǎo)氨酸克雷伯菌、植生克雷伯菌、臭鼻克雷伯菌、鼻硬結(jié)克雷伯菌和土生克雷伯菌。第七節(jié)克雷伯菌屬球菌化膿性感染第152頁(yè)二、臨床意義（1）肺炎克雷伯菌可引發(fā)經(jīng)典原發(fā)性肺炎；該菌在口咽帶菌率為1％—6％，住院病人中高達(dá)20％，是酒精中毒者，糖尿病人和慢性阻塞性肺部疾病患者并發(fā)肺部感染潛在危險(xiǎn)原因。球菌化膿性感染第153頁(yè)也能引發(fā)肺外感染，包含腸炎和腦膜炎(嬰兒)，泌尿道感染(兒童和成人)及菌血癥：由該菌引發(fā)免疫低下患者感染或醫(yī)院感染不停增多，本菌對(duì)氨芐西林天然耐藥，對(duì)頭孢菌素、妥布霉素、阿米卡早和多粘菌素B等敏感，易產(chǎn)生對(duì)第三代頭孢菌素耐藥。球菌化膿性感染第154頁(yè)二、臨床意義（2）本菌屬存在于人和動(dòng)物胃腸道內(nèi),快要半數(shù)產(chǎn)酸克雷伯菌分離自糞便,其次是血液：土生和植生克雷伯菌也存在于自然界中，攜帶耐藥質(zhì)粒，能引發(fā)多重耐藥菌感染。球菌化膿性感染第155頁(yè)臭鼻克雷伯菌經(jīng)常從萎縮性鼻炎和鼻粘膜化膿性感染中分離到，亦有引發(fā)角膜潰瘍報(bào)道，以及從血、尿和其它組織中分離出該菌匯報(bào)，致病范圍比以往所認(rèn)識(shí)更為廣泛。鼻硬結(jié)克雷伯菌引發(fā)呼吸道粘膜、口咽部鼻和鼻旁竇感染，造成肉芽腫性病變和硬結(jié)形成球菌化膿性感染第156頁(yè)三、微生物特征1.形態(tài)結(jié)構(gòu)G-桿菌無(wú)鞭毛無(wú)芽胞,有顯著莢膜。2.兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，形成較大、凸起灰白色粘液菌落，易發(fā)生融合，用接種針沾取時(shí)可挑出長(zhǎng)絲狀細(xì)絲。發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸在MAC培養(yǎng)基形成紅色菌落，紅色可擴(kuò)散至菌落周?chē)囵B(yǎng)中。球菌化膿性感染第157頁(yè)3.基本生化反應(yīng)特征：TSI(三糖鐵)產(chǎn)酸／產(chǎn)酸產(chǎn)氣或產(chǎn)酸／產(chǎn)酸，CIT(枸櫞酸鹽)陽(yáng)性，URE(脲酶)陽(yáng)性／陰性,IND(吲哚)陰性，V-P陽(yáng)性，MOT(動(dòng)力)陰性，ORN(鳥(niǎo)氨酸)陰性，丙二酸鹽陽(yáng)性，DNA酶陰性。球菌化膿性感染第158頁(yè)1.標(biāo)本直接鏡檢G-桿菌,有顯著莢膜。2.標(biāo)本接種在血瓊脂或腸道選樣判別培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)挑選粘稠粉紅色易融合可疑菌落,深入判定到屬和種。3.判定氧化酶陰性，葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,動(dòng)力陰性，吲哚陰性(產(chǎn)酸克雷伯菌和解鳥(niǎo)氨酸克雷伯菌陽(yáng)性)，脲酶陽(yáng)性。球菌化膿性感染第159頁(yè)克雷伯菌判定1.屬判定：動(dòng)力陰性，鳥(niǎo)氨酸脫羧酶陰性(解鳥(niǎo)氨酸克雷伯菌陽(yáng)性)。2.種判定：肺炎克雷伯菌吲哚陰性,不能在5℃和10℃生長(zhǎng)，能在41℃生長(zhǎng)。而產(chǎn)酸克雷伯菌吲哚陽(yáng)性,能在10℃和4l℃生長(zhǎng)，不能在5℃生長(zhǎng)。球菌化膿性感染第160頁(yè)3.血清學(xué)判定莢膜腫脹試驗(yàn)，可用特異性抗血清進(jìn)行莢膜腫脹試驗(yàn)加以確認(rèn)。方法是將待檢菌接種于華