多指標(biāo)正交實(shí)驗(yàn)法研制九味羌活揮發(fā)油β

多指標(biāo)正交實(shí)驗(yàn)法研制九味羌活揮發(fā)油β【摘要】目的為增加九味羌活顆粒中揮發(fā)油的穩(wěn)定性和研制九味羌活其他的固體劑型，而對(duì)九味羌活中揮發(fā)油β環(huán)糊精包合的最佳工藝進(jìn)行研究。方法采取L9正交實(shí)驗(yàn)，以包合率、收得率和含油率為指標(biāo)，篩選出飽和水溶液包合法的最佳工藝條件，并用薄層層析法和顯微成像法驗(yàn)證包合物的形成。結(jié)果最佳包合條件為：β環(huán)糊精和油的比例為8∶1，β環(huán)糊精和水的比例為1∶15，包合溫度為35℃，攪拌時(shí)間為2h。結(jié)論包合方法簡(jiǎn)單且易于控制，所得包合物包合率較高。

【關(guān)鍵詞】九味羌活；揮發(fā)油；β環(huán)糊精；包合物

StudyonPreparingInclusionCompoundofβ-cyclodextrinwithVolatileOilofJiuweiqianghuobyOrthogonalTestwithMulti-indexes

Abstract：ObjectiveTostudytheoptimuminclusionprocessconditionforoilinordertoincreasethestabilityofvolatileoilinJiuweiqianghuoparticleandprepareothersoliddosagesaturatedwatersolutionmethod,theoptimumpreparationconditionwasstudiedbyorthogonaltestwithencapsulationrate,yieldrateandoil-containingrateastheindexofqualityofinclusioncompoundwascheckedbyTLCandmicro-imagingoptimuminclusionprocessconditionwasasfollows:theproportionofβ-cyclodextrintooilis8:1(g:ml),theproportionofβ-cyclodextrintowater(g:ml)is1:15,inclusiontemperatureat35℃andinclusionfor2inclusionconditioniseasilyencapsulationrateoftheinclusioncompoundishigh.

Keywords：Jiuweiqianghuo;Oil;β-cyclodextrin;Inclusioncompound

九味羌活顆粒收載于《中國(guó)藥典》2005年版，為中藥成方制劑。本方由羌活、防風(fēng)、蒼術(shù)、黃芩、川芎、地黃、細(xì)辛、白芷、甘草等九味藥材組成，具有疏風(fēng)解表、散寒除濕的功效。其中羌活、防風(fēng)、蒼術(shù)、川芎、細(xì)辛中所含揮發(fā)油是該方主要有效成分，需單獨(dú)提取。采用β-環(huán)糊精包合技術(shù)，將其制成揮發(fā)油包合物，可以減少揮發(fā)油在生產(chǎn)、儲(chǔ)存過(guò)程中揮散或氧化變質(zhì)，提高制劑穩(wěn)定性［1］。

1材料與儀器

儀器79－1型磁力加熱攪拌器。

藥材均購(gòu)于山東濟(jì)南建聯(lián)藥材供應(yīng)站，經(jīng)鑒別均符合《中國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)之正品；β環(huán)糊精(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，含量≥98％)。

2方法與結(jié)果

包合物的制備方法取一定量βCD，加入相應(yīng)比例的蒸餾水，加熱溶解并降至規(guī)定溫度后，置磁力加熱攪拌器上恒溫?cái)嚢?，緩緩加入含?份揮發(fā)油和2份無(wú)水乙醇的溶液，繼續(xù)恒溫?cái)嚢柚烈?guī)定時(shí)間，放冷，0～4℃放置12h，抽濾，沉淀于40℃干燥即得。

包合物的質(zhì)量評(píng)價(jià)

包合物中揮發(fā)油的含量測(cè)定將制得的包合物用50ml石油醚洗滌2次，濾過(guò)，揮去石油醚，置500ml圓底燒瓶中，加蒸餾水300ml,按2005年版《中國(guó)藥典》Ⅰ部附錄XD方法提取揮發(fā)油［2］，至油量不再增加時(shí)停止加熱，冷至室溫，讀數(shù)。

揮發(fā)油空白回收率實(shí)驗(yàn)取揮發(fā)油1ml至500ml圓底燒瓶中，加蒸餾水300ml，余同項(xiàng)下操作，計(jì)算回收率。結(jié)果得油量平均值為ml，計(jì)算揮發(fā)油空白回收率為78％。

揮發(fā)油空白回收率(%)＝揮發(fā)油測(cè)定量/ml實(shí)際加入的揮發(fā)油量/ml×100％

包合物的包合率、收得率和包合物含油率的計(jì)算公式

包合率(%)＝包合物中揮發(fā)油的回收量/ml揮發(fā)油加入量/ml×空白回收率×100％

收得率(%)＝包合物重量/gβ環(huán)糊精/g+揮發(fā)油加入量/g×100％

含油率＝包合物含油量/g包合物總重量/g×100％

正交設(shè)計(jì)優(yōu)選工藝研究根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)與參考有關(guān)文獻(xiàn)資料［3，4］，選用L9(34)正交表，以βCD與水的比例，β-CD與油的比例，包合溫度，包合時(shí)間為考察因素，并以揮發(fā)油利用率、包合物收得率和包合物含油率為考察指標(biāo)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，其因素水平表見表1。

表1因素水平

正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果包合率為衡量包合效果的重要指標(biāo)，揮發(fā)油利用率越高，包合效果越好，可作為包合工藝篩選的主要指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)定為，包合物收得率和含油率作為篩選的次要指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)各為。綜合評(píng)分＝包合率/×60＋收得率/×20＋含油率/×20。結(jié)果見表2～3。

由直觀分析和方差分析結(jié)果表明：影響揮發(fā)油包合效果的主次因素為ABDC，根據(jù)表2結(jié)果，以A2B3C2D2條件為最優(yōu)，由于溫度對(duì)包合效果影響最小，可以認(rèn)為是誤差項(xiàng)，考慮到大生產(chǎn)的易于操作和節(jié)約能源，選擇正交實(shí)驗(yàn)6號(hào)為最佳工藝，即1ml揮發(fā)油加8gβ環(huán)糊精,加120ml水，35℃下包合2h，放冷，0～4℃放置12h，抽濾，沉淀于40℃干燥即得。

包合工藝驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)按最佳工藝A2B3C1D2，制得3批揮發(fā)油包合物，按項(xiàng)下操作提取揮發(fā)油，測(cè)得3批包合物的揮發(fā)油利用率平均值為%，RSD為％，證明工藝穩(wěn)定可行。

表2正交實(shí)驗(yàn)及結(jié)果

表3方差分析

包合物的物相鑒別

TLC驗(yàn)證將揮發(fā)油和回收后的揮發(fā)油加乙醇溶液，β環(huán)糊精及β環(huán)糊精揮發(fā)油包合物制成飽和溶液，吸取上述4種溶液各2μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷醋酸乙酯為展開劑展開，在365nm紫外光燈下觀察，揮發(fā)油和回收后的揮發(fā)油在相應(yīng)位置上均顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，然后噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰，揮發(fā)油和回收后的揮發(fā)油各顯色斑點(diǎn)均能一一對(duì)應(yīng)，β環(huán)糊精揮發(fā)油包合物和β環(huán)糊精都在原點(diǎn)未展開，表明揮發(fā)油包合后確已形成包合物而非混合物。

顯微成像法取含揮發(fā)油的包合物和按制備方法制備的不加揮發(fā)油的空白包合物各少許，用水裝片置光學(xué)顯微鏡下觀察，空白包合物為規(guī)則的半透明板狀結(jié)晶，含揮發(fā)油的包合物為不規(guī)則的粉末狀或內(nèi)含黑色物質(zhì)的不透明的塊狀物。認(rèn)為是揮發(fā)油進(jìn)入β環(huán)糊精結(jié)構(gòu)中，破壞了β環(huán)糊精原有的空間結(jié)構(gòu)，使晶格排列發(fā)生變化所致，這證明揮發(fā)油與β環(huán)糊精確已形成包合物。

3討論

包合物經(jīng)過(guò)薄層層析法和顯微成像法檢查，證明包合前后揮發(fā)油成分無(wú)變化，包合物已形成新的物相而非混和物。薄層層析曾采用正己烷氯仿,石油醚醋酸乙酯(50∶1)為展開劑，結(jié)果均不如展開劑正己烷醋酸乙酯的效果理想。顯微成像中制得的含揮發(fā)油的包合物和按制備方法制備的不加任何藥物的空白包合物，兩者單從外觀上看也可區(qū)別開，空白包合物為透明的小塊狀物，而包合物為白色不透明的粉末或塊狀物。

本工藝制備的九味羌活揮發(fā)油β環(huán)糊精包合物，采用飽和水溶液法制備，具有操作簡(jiǎn)單、包合率高等優(yōu)點(diǎn)，可應(yīng)用于大規(guī)模生產(chǎn)，為增加九味羌活顆粒及其它新開發(fā)劑型中揮發(fā)油的穩(wěn)定性，提供了可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

【參考文獻(xiàn)】

［1］李軍,彭向前,張鑒.β環(huán)糊精在中藥制劑中的應(yīng)用［J］.中國(guó)藥業(yè)，2005,14(6):26.