充血性心力衰竭中醫(yī)證候與中醫(yī)證候動(dòng)物模型的制備思路

充血性心力衰竭中醫(yī)證候與中醫(yī)證候動(dòng)物模型的制備思路

動(dòng)脈粥樣硬化（chf）通常發(fā)生在各種心血管疾病的末階段。這是臨床上常見(jiàn)的疾病之一。發(fā)病率和死亡率逐年增加。如何積極有效地管理和控制引起了臨床研究者的關(guān)注。中醫(yī)藥在CHF的防治方面發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用目前有關(guān)CHF疾病的動(dòng)物模型制備方法研究較多，亦有研究者對(duì)中醫(yī)證候的動(dòng)物模型制備進(jìn)行探索。近年來(lái)，隨著中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究的發(fā)展與深入，制備符合中醫(yī)證候特征的病證結(jié)合的動(dòng)物模型，對(duì)于進(jìn)一步揭示證候的物質(zhì)基礎(chǔ)、探求中藥藥物的靶向療效機(jī)制具有較重要的理論指導(dǎo)以及臨床實(shí)際意義。1動(dòng)物模型的研究建立符合人類CHF病理生理過(guò)程且穩(wěn)定的動(dòng)物模型，有助于更好地開展本病機(jī)制及藥效的研究。對(duì)于目前本病的防治及新的治療手段的研發(fā)而言，選擇合適的動(dòng)物模型亦極為關(guān)鍵?？傮w而言，CHF的動(dòng)物模型包括心肌缺血型、壓力負(fù)荷型、容量負(fù)荷型和心肌病變型等，能夠較好的復(fù)制本病的病理生理改變1.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析對(duì)于每一個(gè)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的模型制備而言，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇都十分重要，亦將直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度及科學(xué)性。一般而言，選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的原則主要根據(jù)相似性、經(jīng)濟(jì)性、標(biāo)準(zhǔn)化、特殊性、模型化和可重復(fù)性等總體來(lái)講，較大動(dòng)物的心臟解剖結(jié)構(gòu)雖然更接近人類，但是存在造模成本較高、操作難度較大等問(wèn)題，實(shí)際應(yīng)用較少1.2chf模型制備藥物法制備模型即通過(guò)藥物誘導(dǎo)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物CHF發(fā)生，常用藥物包括阿霉素、異丙腎上腺素、乙醇等。阿霉素(ADR)是一種廣譜抗腫瘤化療藥物，靜脈注射數(shù)小時(shí)或數(shù)日即可能造成劑量依賴性且不可逆轉(zhuǎn)的慢性的心肌損害作用，進(jìn)而導(dǎo)致CHF異丙腎上腺素(ISO)屬于β受體激動(dòng)劑，臨床應(yīng)用能提高心率、增加心肌收縮力，如果長(zhǎng)期大量的應(yīng)用可能會(huì)導(dǎo)致心肌細(xì)胞的纖維化、心肌重構(gòu)，導(dǎo)致CHF的發(fā)生。目前應(yīng)用ISO制備CHF模型有皮下注射和腹腔注射兩種方式，無(wú)創(chuàng)傷，易于重復(fù)且誘導(dǎo)時(shí)間較短，但是，動(dòng)物的批次、給藥途徑的變化以及藥量的差異都會(huì)影響模型制備的效果，所以實(shí)際制備的時(shí)候必須進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，最終確定實(shí)際的實(shí)驗(yàn)方案。ISO誘導(dǎo)CHF的模型主要是模擬交感神經(jīng)興奮進(jìn)而引發(fā)CHF的病理過(guò)程，實(shí)際經(jīng)常用于治療藥物的篩選以及藥效發(fā)揮和交感神經(jīng)興奮或抑制的相關(guān)性等實(shí)驗(yàn)中。羅時(shí)珂等此外，還有研究者應(yīng)用乙醇誘導(dǎo)制備CHF模型。乙醇中毒會(huì)導(dǎo)致乙醇及其代謝物沉積在血中，致心肌細(xì)胞凋亡、使心肌收縮力減弱，左心房靜息后的增強(qiáng)效應(yīng)受到抑制，損傷心血管，最終導(dǎo)致CHF。乙醇誘導(dǎo)CHF模型的作用機(jī)制可能與興奮交感神經(jīng)系統(tǒng)、腎素-血管緊張素-醛固酮(RAAS)系統(tǒng)、損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞以及加劇細(xì)胞凋亡等有關(guān)1.3壓力負(fù)荷chf的左前降支心肌梗死結(jié)扎術(shù)目前常用于CHF動(dòng)物模型制備的手術(shù)方法包括腹主動(dòng)脈縮窄法與左前降支冠狀動(dòng)脈結(jié)扎法等。應(yīng)用腹主動(dòng)脈縮窄法來(lái)建立CHF模型，是應(yīng)用注射針頭或者縮窄環(huán)類等工具，結(jié)扎部分腹主動(dòng)脈，促使主動(dòng)脈縮窄，進(jìn)而使外周循環(huán)阻力增加，最終導(dǎo)致壓力超負(fù)荷CHF的方法左前降支冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)是通過(guò)手術(shù)，結(jié)扎動(dòng)物的左冠狀動(dòng)脈或左前降支及左旋支，導(dǎo)致心肌缺血，誘發(fā)心肌重構(gòu)，最終導(dǎo)致左心衰竭。這種造模方法的操作難度比較大，需要經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)人員才能熟練掌握。此外，采用這種方法制備CHF模型時(shí)，需結(jié)合彩超檢測(cè)心功能指標(biāo)、心肌組織病理學(xué)分析，進(jìn)而觀察動(dòng)物心室重構(gòu)、心肌纖維化甚或心肌梗死的程度。辛偉等2chf中醫(yī)證候動(dòng)物模型的制備隨著中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究的不斷深入，單純的疾病動(dòng)物模型遠(yuǎn)不能滿足基礎(chǔ)研究的需要。中醫(yī)證候的動(dòng)物模型研究是從糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的陽(yáng)虛證動(dòng)物模型開始，模型的評(píng)價(jià)可由動(dòng)物的四診表征即癥狀和體征反映。比如根據(jù)模型動(dòng)物毛發(fā)缺少色澤、蜷縮弓背、活動(dòng)力差、懶動(dòng)喜臥、行動(dòng)緩慢等評(píng)價(jià)為腎陽(yáng)虛證此外，中醫(yī)證候的動(dòng)物模型研究至今雖已達(dá)幾十年之久，但是從中醫(yī)學(xué)研究的趨勢(shì)來(lái)看，單純的證候模型缺乏對(duì)疾病完整性的反映，且證候的致病因素較易消減，而病證結(jié)合的思路則可以較好地彌補(bǔ)這一不足，有研究人員從病證結(jié)合角度提出綜合評(píng)價(jià)復(fù)合模型的中醫(yī)證候指標(biāo)及微觀免疫學(xué)指標(biāo)，制備免疫力低下復(fù)合證候動(dòng)物模型用于現(xiàn)代免疫學(xué)及中醫(yī)學(xué)的相關(guān)研究有關(guān)CHF中醫(yī)證候的動(dòng)物模型研究，蔡虎志等可見(jiàn)，有關(guān)CHF中醫(yī)動(dòng)物模型的制備研究不多，可復(fù)制性與推廣性更是少之又少，研究人員提出較多思路，為更深入、更適宜的制備方法探索提供參考。3chf病證結(jié)合的動(dòng)物模型的制備CHF的病因與發(fā)病機(jī)制紛繁復(fù)雜，動(dòng)物模型的制備方式亦是多種多樣。隨著人們對(duì)中醫(yī)藥防治CHF機(jī)制研究的關(guān)注與深入，符合中醫(yī)學(xué)特色和臨床實(shí)際要求的，CHF病證結(jié)合動(dòng)物模型亟待全面建立與發(fā)展。病證結(jié)合是中醫(yī)證候研究的指導(dǎo)原則，是故建立具有臨床中醫(yī)證候特征的病證結(jié)合的動(dòng)物模型，對(duì)探究中醫(yī)證候的物質(zhì)基礎(chǔ)、深入了解中醫(yī)藥療效發(fā)揮機(jī)制等均有重要的意義。本課題組長(zhǎng)期致力于CHF的基礎(chǔ)與臨床研究，較早地建立了兔氣虛血瘀型CHF動(dòng)物模型我們認(rèn)為，病證結(jié)合動(dòng)物模型應(yīng)該能夠較好地體現(xiàn)中醫(yī)對(duì)疾病發(fā)展規(guī)律的認(rèn)識(shí)以及中醫(yī)證候的階段性特征，即西醫(yī)的病和中醫(yī)的證相結(jié)合或一體化共存的模型。無(wú)論是西醫(yī)的疾病抑或是中醫(yī)的證候，對(duì)于一個(gè)患者而言，出現(xiàn)的是同一種病理表現(xiàn)，雖然西醫(yī)與中醫(yī)的辨病、辨證理論體系大相徑庭，但由于研究?jī)?nèi)容與目的相同，必然存在相通之處。基于此，筆者認(rèn)為首先要建立確切的CHF動(dòng)物模型，通過(guò)四診信息的判定、對(duì)標(biāo)病因病機(jī)、客觀指標(biāo)協(xié)同、治法方藥的反證等，同時(shí)結(jié)合動(dòng)物實(shí)際表現(xiàn)等評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，共同來(lái)證明疾病模型確立后所表現(xiàn)出的中醫(yī)證候類型，即為CHF病證結(jié)合的動(dòng)物模型。這種動(dòng)物模型的干預(yù)因素相對(duì)較少，病理機(jī)制較單一，用之開展實(shí)驗(yàn)研究可保證研究結(jié)果的可靠性，而且結(jié)合中醫(yī)學(xué)特色，證明為與該疾病模型聯(lián)系最為直接的證候。在這個(gè)思路指導(dǎo)下，課題組在帕金森病(PD)病證結(jié)合動(dòng)物模型的制備方面持續(xù)深入探究，通過(guò)模擬病因(6-羥基多巴胺立體注射于大鼠右側(cè)紋狀體)、模擬癥狀(對(duì)照震顫、肌強(qiáng)直、二便、舌象等臨床癥狀，推斷PD模型大鼠的證候?qū)傩?、客觀指標(biāo)驗(yàn)證(氧化應(yīng)激狀態(tài))、藥物反證(天麻鉤藤飲、桃紅四物湯、滌痰湯等)，較早制備了陰虛動(dòng)風(fēng)證PD病證結(jié)合大鼠模型，證實(shí)模型具有疾病和證候的雙重特征，并從不同時(shí)間點(diǎn)，從功能、細(xì)胞、蛋白、分子生物學(xué)角度持續(xù)進(jìn)行深入的生物學(xué)基礎(chǔ)與藥效研究總而言之，CHF病證結(jié)合的動(dòng)物模型是本病中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)研究的重要前提與保障。眾所周知，動(dòng)物模型用于實(shí)驗(yàn)研究，不能完全復(fù)制出疾病的自然發(fā)生發(fā)展進(jìn)程，且每種方法制備的模型都具有各自的優(yōu)勢(shì)和局限性。我們應(yīng)該不脫離中醫(yī)學(xué)的理論指導(dǎo)以及研究思路，同時(shí)結(jié)合自身研究項(xiàng)目的需求，權(quán)衡利弊，選擇較適宜的