共研磨技術(shù)對難溶性藥物的增溶作用

共研磨技術(shù)對難溶性藥物的增溶作用

近年來，聯(lián)合研磨技術(shù)是一種將超細(xì)粉碎技術(shù)與包狀技術(shù)或固體分散技術(shù)結(jié)合起來的新技術(shù)。青黛(NaturalIndigo)是一種良好的傳統(tǒng)中藥材,具有清熱解毒、涼血定驚作用。用于瘟病、發(fā)斑、胸痛咳血、口瘡、喉痹、小兒驚癇1藥品、試劑與標(biāo)準(zhǔn)品LC-1500高效液相色譜儀(日本JΛSCO公司);行星式磨機(jī)(美國Fritsch公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(日本BūCHI公司);恒溫真空干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器設(shè)備廠)。青黛(鎮(zhèn)江存仁堂藥業(yè),批號(hào)020801);靛玉紅標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所,批號(hào)717-200204);聚維酮(PVP,規(guī)格K30,上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);聚乙二醇(PEG,規(guī)格4000,上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);羥丙甲纖維素(HPMC,規(guī)格E6-Lv,型號(hào)2910,黏度6cp;規(guī)格E-4M,型號(hào)2910,黏度4000cp上?？房倒举?zèng)送);乙醇(色譜純江蘇漢邦科技);聚乙烯醇(PVA,規(guī)格17-88,美國COOK公司);所有試劑均采用分析純。22.1乙醇提取稱取青黛50.0g,先用水滲漉法提去水溶性成分,剩余物干燥后置圓底燒瓶中,以10倍量95%乙醇回流提取3次,4h/次,合并提取液1500ml,減壓濃縮至黏稠膏狀液體,70℃水浴上揮去乙醇,40℃真空干燥24h即得。2.2親水性載體的制備將青黛醇提物(0.5g)分散于PEG4000(0.5g)中,溫度70℃,自然冷卻至室溫,等量分為3份,分別與PVP,PVA,HPMC等親水性載體(4g)混合均勻,選用行星式磨機(jī)超細(xì)粉碎2h,過80目篩即得。2.3vpk30的制備稱取青黛醇提物(0.5g)無水乙醇復(fù)溶后,加入PVPK30(4.5g),減壓濃縮至溶液呈半固體狀,取出在約70℃水浴上揮去乙醇,黏稠物置真空恒溫干燥箱中24h,脆化后取出,粉碎,過80目篩即得。2.4研磨eg4000將青黛醇提物(0.5g)70℃分散于PEG4000(0.5g)中,自然冷卻后,置于研缽中,加入HPMC(4g)混合,強(qiáng)烈研磨2h后,過80目篩即得。2.5紅玉紅測定采用HPLC法測定。色譜條件:色譜柱HanbangC2.6含量測定法稱取分散體約1.0g(含過量的靛玉紅),放置于裝有500ml蒸餾水的玻璃瓶中,100r/min恒速攪拌,溫度(37±0.5)℃,定時(shí)取樣5ml溶出液經(jīng)4.5μm微孔濾膜過濾,精密吸取濾液1.0ml,甲醇定容至5.0ml,用HPLC法測定含量。33.1hplc測量的建立3.1.1進(jìn)樣測定精密稱取25mg的對照品,配制成10μg/ml的甲醇對照品貯備液,精密吸取對照液0.1,0.5,1.5,2.5,3.5,5ml置于50ml量瓶中,加甲醇稀釋成靛玉紅濃度分別為0.02,0.1,0.3,0.5,0.7,1μg/ml的溶液,分別進(jìn)樣測定,記錄峰面積。以峰面積3.1.2準(zhǔn)確度和精密度日內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn):取1μg/ml對照品溶液,日內(nèi)連續(xù)測定5次,計(jì)算得峰面積日間精密度實(shí)驗(yàn):取1μg/ml對照品溶液,進(jìn)樣1次/d,共進(jìn)樣5次測定,計(jì)算得峰面積3.1.3濃度為不同濃度的溶液精密量取對照品貯備液5.0,1.0,0.5ml,置10ml量瓶中,按處方比例分別加入相應(yīng)量的PVP,PEG4000,HPMC(E-6lv和E-4M)以及已知含量的提取液,加甲醇定容后,振搖5min,配成高、中、低(5.0,1.0,0.5μg/ml)3種不同的濃度的溶液。分別進(jìn)樣測定,記錄色譜圖,計(jì)算得載體中的平均回收率分別為100.3%,99.8%,101.69%,100.7%,101.2%3.2配方的結(jié)構(gòu)性和穩(wěn)定性見圖1。從圖1可以看出,與普通研磨混合物比,共研磨技術(shù)和共沉淀法均能顯著地提高靛玉紅在去離子水中的溶解度。但二者改善難溶性藥物溶出的機(jī)理有所差別。PVP共沉淀法原理是PVP在溶液中成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),藥物分子進(jìn)入PVP分子網(wǎng)狀骨架中而呈分子狀態(tài)分散,共蒸發(fā)過程中不易形成分子結(jié)晶,使藥物形成高能量的非結(jié)晶型無定形物,從而增加了藥物的溶出HPMC通常有60%以上的羥基未被取代,HPMC通過羥基在分子內(nèi)和分子間形成氫鍵,所以它具有較高的結(jié)晶性和難溶性。一般情況下藥物與HPMC作用只能在纖維素表面進(jìn)行,只要其結(jié)晶結(jié)構(gòu)保持不變,藥物就很難進(jìn)入結(jié)晶結(jié)構(gòu)的內(nèi)部。但在超細(xì)粉碎條件下,纖維素原料在這種強(qiáng)烈持久的磨碎、擠壓的機(jī)械力作用下,產(chǎn)生比氧化、水解的纖維素更具有強(qiáng)大反應(yīng)能力的機(jī)械降解產(chǎn)物,分子內(nèi)與分子間的氫鍵部分?jǐn)嗔训逵窦t整個(gè)分子基本是由一個(gè)大的π共軛體系構(gòu)成,整個(gè)分子比較穩(wěn)定,它的分子內(nèi)部O12與O22與相鄰兩側(cè)的H之間存在著較強(qiáng)的氫鍵。氫鍵對于這兩種分子的穩(wěn)定性起著非常重要的作用。它以分子內(nèi)氫鍵可形成一個(gè)六元環(huán)和一個(gè)七元環(huán),降低了分子內(nèi)環(huán)的張力,這些促使分子體系總能量降低,在水中的溶解度非常低從圖1還可以發(fā)現(xiàn),共沉淀物中的靛玉紅在水中迅速溶解,隨后其溶解度逐漸下降。實(shí)驗(yàn)中我們也觀察到共沉淀物加入水中迅速形成澄清的紅色溶液,但隨著時(shí)間的增加,溶液逐漸渾濁,在瓶壁上附有細(xì)小的暗紅色粒狀物質(zhì),主要由于藥物溶解瞬間以亞穩(wěn)態(tài)的小顆粒分散,而隨著粒子間的聚集,粒度增加而逐漸從溶液中析出,在水中的溶解度也逐漸下降,而共研物曲線隨時(shí)間逐漸上升,實(shí)驗(yàn)中觀察到共研物加入水后緩慢溶解,在70min左右完全溶解成澄清的紅色溶液并保持到實(shí)驗(yàn)結(jié)束,現(xiàn)象與結(jié)果吻合。據(jù)Hasegawa等3.3不同載體的共研物對線性共研磨體的促溶作用超細(xì)共研磨物中親水載體的取代基對藥物溶出起重要影響,羥基是其中重要因素,為了考察羥基對增溶能力的影響,作者選用了具有不同羥基數(shù)目的親水載體,分別是PVP,PVA,HPMC。根據(jù)表1,HPMC制備的共研磨物對靛玉紅在去離子水中的溶出有較好的效果,而PVPK30效果較差。主要是在超細(xì)共研磨物中,羥基對藥物與親水載體的相互作用有重要影響此外,作者考察了載體的黏度對共研物促溶特性影響,選用了具有相同取代度的HPMCE-4M和E-6Lv制備超細(xì)共研磨物,進(jìn)行溶解度實(shí)驗(yàn),測定去離子水中靛玉紅的溶解度。見圖6。結(jié)果顯示低黏度的E-6LV的共研物對靛玉紅的促溶作用要優(yōu)于高黏度的E-4M。親水性載體的適當(dāng)黏度具有阻礙分子的聚集、抑制晶核的形成以及微晶的長大等作用,但黏度較高則阻滯了藥物的釋放,因而LIE-PEG4000-E-4M共研物未能顯示出理想的增溶效果。3.4其他因素Nozaw