第三十六章微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制課件

微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制韓立中/微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制韓立中http://www.shsmu.1微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制，包括室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量控制評價(jià)。室內(nèi)質(zhì)量控制是由實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部制定并實(shí)施的，是質(zhì)量保證的核心和基礎(chǔ)。室間質(zhì)量控制評價(jià)是由實(shí)驗(yàn)室外部的組織或機(jī)構(gòu)對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的質(zhì)量評價(jià)。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制，包括室上海交通大第一節(jié)室內(nèi)質(zhì)量控制

（一）人員與組織管理經(jīng)過廣泛的基礎(chǔ)訓(xùn)練教育，包括微生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)臨床醫(yī)學(xué)知識的學(xué)習(xí)，專業(yè)化的實(shí)驗(yàn)技能培訓(xùn)。參加醫(yī)務(wù)人員的繼續(xù)教育。配有一名經(jīng)嚴(yán)格訓(xùn)練并長期從事于微生物檢驗(yàn)的技術(shù)人員，全面負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室的工作。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一節(jié)室內(nèi)質(zhì)量控制（一）人員與組織管理上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)（二）操作手冊包括：①各級人員的職責(zé)和權(quán)限；②實(shí)驗(yàn)室安全措施；③標(biāo)本采集和處理指南；④本室開展的檢驗(yàn)項(xiàng)目及最低鑒定要求；⑤培養(yǎng)基和試劑的配制方法；⑥質(zhì)量控制方案；⑦常用參考數(shù)據(jù)；⑧其他制度。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（二）操作手冊包括：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（三）培養(yǎng)基的質(zhì)量控制培養(yǎng)基是分離培養(yǎng)微生物的必需品。培養(yǎng)基質(zhì)量的好壞，直接關(guān)系到分離培養(yǎng)的成敗。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都使用干粉培養(yǎng)基配制或使用成品培養(yǎng)基。對來自著名的微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)公司的培養(yǎng)基，質(zhì)量比較穩(wěn)定。只要按照說明書的要求貯存，在有效期內(nèi)使用可獲得滿意效果。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（三）培養(yǎng)基的質(zhì)量控制培養(yǎng)基是分離培養(yǎng)微生物的必需品。培上海測定羊血瓊脂平板的性能

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院測定羊血瓊脂平板的性能上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（四）試劑、抗血清和染色液質(zhì)量控制1．試劑及染色液注明配制日期，有效日期及貯存條件。測試同時(shí)進(jìn)行陽性和陰性對照試驗(yàn)。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（四）試劑、抗血清和染色液質(zhì)量控制1．試劑及染色液注明配制日2．抗血清的質(zhì)量控制來源可靠，根據(jù)使用說明使用與保存。凍干制品還應(yīng)注明配成水溶液的日期?？寡鍛?yīng)澄清。第一次使用時(shí)，應(yīng)用已知菌效價(jià)和特異性進(jìn)行測定。合格者方可使用。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2．抗血清的質(zhì)量控制來源可靠，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院

（五）抗生素與抗生素紙片

抗菌藥物敏感試驗(yàn)是臨床進(jìn)行抗菌治療的指導(dǎo)性實(shí)驗(yàn)，其結(jié)果的正確性直接關(guān)系到抗菌治療的成敗。常用有紙片法和稀釋法，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性極為重要。

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院

（五）抗生素與抗生素紙片抗菌藥物敏感試驗(yàn)是臨床進(jìn)行抗上海舉例：紙片法質(zhì)量控制①培養(yǎng)基：應(yīng)使用合格的MH瓊脂，應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)菌株、已知藥敏紙片和標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行測試，符合要求才可使用。②菌懸液濃度標(biāo)準(zhǔn)：為1.5×108CFU／ml。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院舉例：紙片法質(zhì)量控制①培養(yǎng)基：應(yīng)使用合格的MH瓊脂，上海交通③含藥紙片應(yīng)冷凍保存，－20℃可保存一年。新購紙片用標(biāo)準(zhǔn)菌株和培養(yǎng)基，用標(biāo)準(zhǔn)方法測定，符合要求方可使用。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院③含藥紙片應(yīng)冷凍保存，－20℃上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院④實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)果測量：菌懸液應(yīng)在15min內(nèi)接種至平板，平放3min，然后將藥物紙片貼到平板上，100mm的平皿不超過5張，置35℃孵育18h，測量精確度1／10mm。⑤質(zhì)控菌株有：金黃色葡萄球菌ATCC25923；大腸埃希菌ATCC25922等。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院④實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)果測量：菌懸液應(yīng)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院⑥抑菌環(huán)的質(zhì)控范圍：在20個(gè)試驗(yàn)結(jié)果中只能有1個(gè)結(jié)果超出所列的范圍。⑦質(zhì)控測定次數(shù)：每批新的MH瓊脂和含藥紙片必須用質(zhì)控菌株進(jìn)行檢測30日，30個(gè)抑菌環(huán)直徑只有少于3個(gè)結(jié)果超出范圍。達(dá)到要求后，每周檢測一次。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院⑥抑菌環(huán)的質(zhì)控范圍：在20個(gè)試驗(yàn)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（六）儀器

1．高壓滅菌器和干熱滅菌器最好在滅菌器裝上溫度記錄裝置，以保證整個(gè)滅菌過程中保持合適的溫度。為了保證滅菌的徹底，可用生物指示劑嗜熱脂肪芽胞桿菌ATCC7953監(jiān)視滅菌效果。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（六）儀器1．高壓滅菌器和干熱滅菌器最好上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2．培養(yǎng)箱、冰箱、水浴箱應(yīng)在每日工作開始和結(jié)束時(shí)記錄溫度。3．二氧化碳培養(yǎng)箱每天檢查CO2含量。4．厭氧罐或厭氧箱美籃為指示劑，無氧時(shí)應(yīng)無色。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2．培養(yǎng)箱、冰箱、水浴箱應(yīng)在每上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院5．生物安全柜更換濾網(wǎng)由專門技術(shù)人員進(jìn)行。6．細(xì)菌培養(yǎng)儀對每批培養(yǎng)瓶進(jìn)行生長試驗(yàn)。保證在有效期內(nèi)使用。7．微生物鑒定儀應(yīng)及時(shí)更新系統(tǒng)操作軟件，使之能識別最新認(rèn)識的微生物。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院5．生物安全柜更換濾網(wǎng)由專門上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（七）標(biāo)本檢驗(yàn)過程的質(zhì)量控制微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室除了上述儀器、試劑、人員等進(jìn)行質(zhì)量控制外，還應(yīng)對標(biāo)本檢驗(yàn)過程中涉及的每個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行全程質(zhì)量控制。包括從標(biāo)本采集，直接涂片檢查，分離培養(yǎng)到鑒定的全過程。使用自動化鑒定儀或編碼方式鑒定，必須進(jìn)行核對以防錯(cuò)誤。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（七）標(biāo)本檢驗(yàn)過程的質(zhì)量控制微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室除了上述儀器、試上（八）室內(nèi)全面質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室人員要對以上各項(xiàng)的質(zhì)量控制內(nèi)容進(jìn)行全面實(shí)施。由個(gè)人負(fù)責(zé)全面的質(zhì)量控制，自我核對，定期與參考實(shí)驗(yàn)室核對并接受考評。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（八）室內(nèi)全面質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室人員要對以上各項(xiàng)的質(zhì)量上海交通大（九）標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存l．標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源標(biāo)準(zhǔn)菌株是指具有典型的、穩(wěn)定的生理生化特征，并被國際社會所認(rèn)可的菌株。來源于專門的機(jī)構(gòu)，如衛(wèi)生部藥物生物制品鑒定所菌種保藏中心。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（九）標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源和保存l．標(biāo)準(zhǔn)菌株的來源標(biāo)準(zhǔn)菌株是上海2．標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存（l）一般保存法：將菌種于半固體培養(yǎng)基中，35℃培養(yǎng)18h時(shí)后封蓋無菌石蠟油，置4℃保存。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2．標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存（l）一般保存法：將菌種于半固體培上海交通（2）冷凍干燥法：是最可靠的菌種保藏方法，它具有不改變菌種性狀和保存時(shí)間長等優(yōu)點(diǎn)，但需有專門的冷凍干燥設(shè)備。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（2）冷凍干燥法：是最可靠的菌種上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院

第二節(jié)空間質(zhì)量控制（一）機(jī)構(gòu)

我國負(fù)責(zé)臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的部門是各級臨床檢驗(yàn)中心和參考實(shí)驗(yàn)室，負(fù)責(zé)定期或不定期地通過各項(xiàng)熟練程度考核和盲點(diǎn)試驗(yàn)檢查各實(shí)驗(yàn)室的工作質(zhì)量和水平，進(jìn)行總結(jié)和評估。各級實(shí)驗(yàn)室可同時(shí)接受國內(nèi)、國際多個(gè)質(zhì)量控制機(jī)構(gòu)或參考實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量評價(jià)。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二節(jié)空間質(zhì)量控制（一）機(jī)構(gòu)（二）一般性檢查項(xiàng)目

包括有否制定各種制度及其執(zhí)行情況。1．培養(yǎng)基和試劑的配制記錄、培養(yǎng)基的保存方法、滅菌質(zhì)量、有效期。2．室內(nèi)全面質(zhì)量控制的建立，室內(nèi)工作人員的熟練程度的考核和盲點(diǎn)試驗(yàn)的進(jìn)行情況，細(xì)菌檢驗(yàn)的操作手冊及操作的規(guī)范性。3．設(shè)備的操作卡，操作人員的操作水平，設(shè)備的使用保養(yǎng)、維修記錄。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（二）一般性檢查項(xiàng)目包括有否制定各種制度及其執(zhí)行情（三）熟練程度的考核由質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)（檢驗(yàn)中心或參考實(shí)驗(yàn)室）發(fā)放模擬標(biāo)本或菌種，接收的實(shí)驗(yàn)室知道菌株的來源、檢驗(yàn)的內(nèi)容和時(shí)間。實(shí)驗(yàn)室完成鑒定后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)將結(jié)果反饋至檢驗(yàn)中心或參考實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行評價(jià)。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（三）熟練程度的考核由質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)（檢驗(yàn)中心或參考實(shí)上海交通分析結(jié)果錯(cuò)誤的原因，提供有關(guān)的教育資料或舉辦學(xué)習(xí)班，不斷培養(yǎng)和訓(xùn)練技術(shù)人員，提高了解決類似問題的技術(shù)水平。但受試實(shí)驗(yàn)室通常對這些菌株特別重視，采用超過常規(guī)操作標(biāo)準(zhǔn)的方法進(jìn)行鑒定，使上報(bào)結(jié)果不能準(zhǔn)確反映實(shí)驗(yàn)室的真實(shí)水平。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院分析結(jié)果錯(cuò)誤的原因，提供有關(guān)的上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（四）盲點(diǎn)試驗(yàn)為了準(zhǔn)確反映受控實(shí)驗(yàn)室日常處理臨床標(biāo)本的實(shí)際水平及能力，較好的方法是進(jìn)行未知標(biāo)本的盲點(diǎn)質(zhì)量控制。由質(zhì)控管理機(jī)構(gòu)將模擬標(biāo)本混入臨床普通標(biāo)本，送人實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)測定。上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（四）盲點(diǎn)試驗(yàn)為了準(zhǔn)確反映受控實(shí)驗(yàn)室日常處理上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室主管及實(shí)驗(yàn)操作者不知道哪一個(gè)標(biāo)本是來自質(zhì)控機(jī)構(gòu)的