赤芍總苷的提取純化與質(zhì)量檢查設(shè)計方案

IIISS3.3.3驗證試驗以優(yōu)化工藝條件重復(fù)試驗3次，驗證試驗結(jié)果見表4表4驗證試驗結(jié)果試驗試驗號投料量固形物固形物RSD芍藥苷芍藥苷RSD方案（kg）得率平均得率含量平均含量（%）（%）（%）（%）（%）（%）1234赤芍總苷（TPG）的純化工藝的優(yōu)化4.1上樣液預(yù)處理赤芍醇提液減壓濃縮至無醇味，加水適量分散溶解、過濾定容，制成每毫升含0.2g生藥(0.2g·ml-1)的溶液，備用。4.2大孔吸附樹脂型號篩選取AB-8型和D-101型大孔吸附樹脂各20ml，裝于樹脂柱中(徑高比為1:8)，取樣液40ml上樣。先用3BV蒸餾水，再用5BV20%乙醇洗脫，合并乙醇洗脫液，測定，結(jié)果見表5。從芍藥苷吸附解析率和殘液中芍藥苷含量綜合考慮，選擇樹脂種類。表5樹脂動態(tài)吸附實驗結(jié)果樹脂型號上樣液含量(mg)吸附-解吸率(%)殘液中含量(%)D101207.31AB-8207.314.3上樣濃度考察取AB-8型大孔吸附樹脂3份，每份20ml，裝柱(徑高比為1:8)，分別取含生藥濃度為0.1g·ml-1、0.2g·ml-1、0.3g·ml-1樣品液上樣，吸附流速為1.0ml·min-1。然后用3BV水洗脫，再以5BV20%乙醇洗脫，按4.3色譜條件進行測定醇洗脫液中芍藥苷含量，結(jié)果見表6。表6上樣濃度考察結(jié)果上樣濃度(g·ml-1)0.10.20.3芍藥苷洗脫量(mg)洗脫率(%)4.4泄漏曲線考察取AB-8型大孔吸附樹脂20ml，裝于樹脂柱中(徑高比1:8)，取樣品液60ml上樣，吸附流速為1.0ml·min-1。收集流出液，每5ml為一流分。按如下色譜條件測定，繪制泄漏曲線，確定最大上樣量。色譜條件：DiamonsilC18色譜柱(250mm×4.6mm,5μm)；乙腈為流動相A，水為流動相B，按表7進行梯度洗脫；流速1.0ml·min-1；柱溫25℃；檢測波長230nm。表7流動相梯度洗脫時間表時間/min流動相A/%流動相B/%0~148620~95525~14864.5吸附流速的考察取AB-8型大孔吸附樹脂3份，每份20ml，裝柱(徑高比為1:8)，取樣液60ml上樣，吸附流速分別為1.0ml·min-1、2.0ml·min-1、3.0ml·min-1。進行動態(tài)吸附后，先用3BV水洗脫，再用5BV20%乙醇洗脫，按4.3色譜條件進行測定，結(jié)果見表8表8吸附流速考察結(jié)果吸附流速(ml·min-1)123芍藥苷洗脫量(mg)洗脫率(%)4.6樹脂徑高比考察取直徑依次為1.4cm、1.5cm、1.6cm的樹脂柱3根，分別加入AB-8型大孔吸附樹脂各20ml，裝柱(徑高比為1:6、1:8、1:10)，取樣液60ml上樣，吸附流速為1.0ml·min-1。然后用3BV水洗脫，再以5BV20%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，按4.3色譜條件進行測定，結(jié)果見表9。表9樹脂徑高比考察結(jié)果樹脂徑高比1:61:81:10芍藥苷洗脫量(mg)洗脫率(%)4.7水洗除雜體積考察取AB-8型大孔吸附樹脂四份，每份20ml，裝柱(徑高比1:8)，取樣品液60ml上樣，吸附流速分別為1.0ml·min-1，進行動態(tài)吸附后，分別用1BV、2BV、3BV和4BV水洗，測定水洗脫液中芍藥苷的含量，計算損失率，結(jié)果見表10。表10水洗除雜體積考察結(jié)果·水洗脫體積(BV)1234水洗液中芍藥苷累積含量(mg)芍藥苷累積損失率(%)4.8洗脫溶劑考察取AB-8型大孔吸附樹脂4份，每份20ml，裝于樹脂柱中(徑高比為1∶8)，60ml樣品液上樣，吸附流速分別為1.0ml·min-1。然后先以3BV水洗脫，再分別用20%、40%、60%和80%乙醇洗脫，按4.3色譜條件進行測定醇洗脫液中芍藥苷含量，結(jié)果見表11。表11洗脫溶劑考察結(jié)果洗脫劑乙醇(%)20406080芍藥苷洗脫量(mg)洗脫率(%)4.9洗脫曲線取AB-8型大孔吸附樹脂20ml，裝于樹脂柱中(徑高比為1:8)，60ml樣品液上樣，吸附流速分別為1.0ml·min-1。然后先以3BV水洗脫，再用20%乙醇洗脫，每10ml收集一份，洗脫液減壓至干，以10ml甲醇復(fù)溶，按4.3色譜條件進行測定醇洗脫液中芍藥苷含量，繪制洗脫曲線，確定洗脫劑用量。5赤芍中赤芍苷提取物的質(zhì)量控制5.1性狀：棕褐色粉末，氣微香，味微苦、酸澀。5.2鑒別：取本品粉末0.2g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取上述兩種溶液各4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍紫色斑點。5.3含量測定：照高效液相色譜法（通則0512）測定。5.3.1色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（40:65）為流動相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計算應(yīng)不低于3000。5.3.2對照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥器中干燥36小時的芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。5.3.3供試品溶液的制備取本品粉末約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，浸泡4小時，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。5.3.4測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。將提取物中芍藥苷含量換算成藥材中芍藥苷含量，對比藥典，檢查提取純化工藝是否合適。2015版《中國藥典》中規(guī)定赤芍藥材中含芍藥苷（C23H28O11）不得少于1.8%。5.3.5系統(tǒng)適用性試驗線性關(guān)系考察吸取上述對照品溶液1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml，分別置25ml量瓶內(nèi)，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取10μl注入液相色譜儀分析。以進樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并進行線性回歸，結(jié)果見表12：表12線性關(guān)系考察結(jié)果芍藥苷對照品（ug)峰面積12345精密度試驗精密量取已知濃度的芍藥苷對照品溶液10μl，按液相色譜條件，進樣測定6次，結(jié)果見表13：表13精密度試驗結(jié)果峰面積值平均值RSD(%)123456穩(wěn)定性試驗取本品，制備供試品溶液，測定芍藥苷于0、2、4、6、8、10小時內(nèi)峰面積，結(jié)果見表14：表14穩(wěn)定性試驗結(jié)果時間（小時）峰面積值平均峰面積值RSD(%)0246810重復(fù)性試驗取本品，一式6份，制備供試品溶液，測定樣品中芍藥苷含量，結(jié)果見表15：表15重復(fù)性試驗結(jié)果樣品量（g）芍藥苷含量（mg/g）平均含量（mg/g）RSD(%)123456加樣回收率試驗取已知含量芍藥苷的本品6份，每份約10mg，精密稱定，分別按樣品中芍藥苷含量精密加入芍藥苷對照品，按供試品溶液制備方法制得供試品溶液，精密量取續(xù)濾液10μl，經(jīng)HPLC分析，測定芍藥苷含量，計算回收率，結(jié)果見表16：表16加樣回收率試驗結(jié)果取樣量（g）樣品中芍藥苷量（mg）芍藥苷對照品加入量（mg）芍藥苷測得量（mg）回收率（%）平均回收率RSD(%)5.4水分按《中國藥典》2015年版四部通則0832的第二法項下操作，取本品粉末約1g，平鋪于恒重的扁形稱量瓶中，厚度＜5mm，精密稱定，打開瓶蓋100～105℃，烘5小時，蓋好，移至干燥器中冷卻30分鐘，精密稱定，同樣溫度下在烘1小時移至干燥器中冷卻30分鐘，精密稱定。直至連續(xù)兩次稱定重量之差＜5mg為止。按減失重量和稱樣量計算供試樣品中水分含量（%）見表17。表17水分含量樣品編號水分含量/%平均含量/%123熾灼殘渣按《中國藥典》2015年版四部通則0841進行熾灼殘渣的檢測，取本品粉末約1g，置已熾灼至恒重的坩堝中，精密稱定，緩緩織灼至完全炭化，放冷至室溫；加硫酸0.5ml使?jié)駶?，低溫加熱至硫酸蒸汽除盡后，在500～600℃熾灼使完全灰化，移置干燥器內(nèi)，放冷至室溫，精密稱定后，再在500～600℃熾灼至恒重。表18熾灼殘渣樣品編號熾灼殘渣/%平均值/%1235.6重金屬檢查取本品1.0g，按《中國藥典》2015年版四部通則0821重金屬檢查法二法熾灼破壞，檢查3批樣品，并同時做空白試驗，標(biāo)準(zhǔn)管含Pb10ppm。表19重金屬限量樣品編號重金屬限量1236工藝流程赤芍藥材(50g)根據(jù)藥典方法檢查藥材質(zhì)量70%乙醇加熱回流提取，設(shè)計正交試驗確定最佳提取工藝參數(shù)提取藥材，得到提取液減壓濃縮，回收乙醇濃縮液加水溶解，過濾定容藥液采用單因素試驗篩選純化工藝參數(shù)確定最佳純化工藝參數(shù)最佳工藝醇洗脫液減壓濃縮赤芍總苷對赤芍總苷進行質(zhì)量檢查實驗進度及安排日期實驗進度安排12月11日藥材薄層鑒別藥材含量測定提取工藝試驗1-7試驗8-912月18日純化工藝12月25日赤芍苷薄層鑒別赤芍苷含量測定參考文獻：[1]阮金蘭,趙鐘祥,曾慶忠,等.赤芍化學(xué)成分和藥理作用的研究進展[J].中國藥理學(xué)通報,2003,19(9):965-970.[2]徐紅梅,劉青云,戴敏,等.赤芍總苷對大鼠血液流變學(xué)的影響[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2002,9(11):17-19.[3]邱燦華,陳健文,藍秀健,等.赤芍總苷抗血栓作用的研究[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志,2007,7(1):1077-1078,1090.[4]莫玉蘭.赤芍總苷藥理作用研究概況[J].光明中醫(yī),2009,24(4):782-784.[5]王文祥,顧明,周巧霞,等.正交試驗法優(yōu)選赤芍總甙提取工藝[J].中國野生植物資源,2000,(03).[6]周洪偉,許文博,王玉蓉.赤芍總苷提取與大孔樹脂純化工藝研究[C]//世界中聯(lián)中藥藥劑專業(yè)委員會第五屆學(xué)術(shù)年會暨中華中醫(yī)藥學(xué)會制劑分會2010年學(xué)術(shù)年會.2010:48-51.物業(yè)安保培訓(xùn)方案為規(guī)范保安工作，使保安工作系統(tǒng)化/規(guī)范化,最終使保安具備滿足工作需要的知識和技能，特制定本教學(xué)教材大綱。一、課程設(shè)置及內(nèi)容全部課程分為專業(yè)理論知識和技能訓(xùn)練兩大科目。其中專業(yè)理論知識內(nèi)容包括：保安理論知識、消防業(yè)務(wù)知識、職業(yè)道德、法律常識、保安禮儀、救護知識。作技能訓(xùn)練內(nèi)容包括：崗位操作指引、勤務(wù)技能、消防技能、軍事技能。二．培訓(xùn)的及要求培訓(xùn)目的1）保安人員培訓(xùn)應(yīng)以保安理論知識、消防知識、法律常識教學(xué)為主，在教學(xué)過程中，應(yīng)要求學(xué)員全面熟知保安理論知識及消防專業(yè)知識，在工作中的操作與運用，并基本掌握現(xiàn)場保護及處理知識2）職業(yè)道德課程的教學(xué)應(yīng)根據(jù)不同的崗位元而予以不同的內(nèi)容，使保安在各自不同的工作崗位上都能養(yǎng)成具有本職業(yè)特點的良好職業(yè)道德和行為規(guī)范）法律常識教學(xué)是理論課的主要內(nèi)容之一，要求所有保安都應(yīng)熟知國家有關(guān)法律、法規(guī)，成為懂法、知法、守法的公民，運用法律這一有力武器與違法犯罪分子作斗爭。工作入口門衛(wèi)守護，定點守衛(wèi)及區(qū)域巡邏為主要內(nèi)容，在日常管理和發(fā)生突發(fā)事件時能夠運用所學(xué)的技能保護公司財產(chǎn)以及自身安全。2、培訓(xùn)要求1）保安理論培訓(xùn)通過培訓(xùn)使保安熟知保安工作性質(zhì)、地位、任務(wù)、及工作職責(zé)權(quán)限，同時全面掌握保安專業(yè)知識以及在具體工作中應(yīng)注意的事項及一般情況處置的原則和方法。2）消防知識及消防器材的使用通過培訓(xùn)使保安熟知掌握消防工作的方針任務(wù)和意義，熟知各種防火的措施和消防器材設(shè)施的操作及使用方法，做到防患于未燃，保護公司財產(chǎn)和員工生命財產(chǎn)的安全。3)法律常識及職業(yè)道德教育通過法律常識及職業(yè)道德教育，使保安樹立法律意識和良好的職業(yè)道德觀念，能夠運用法律知識正確處理工作中發(fā)生的各種問題；增強保安人員愛崗敬業(yè)、無私奉獻更好的為公司服務(wù)的精神。4)工作技能培訓(xùn)物業(yè)安保培訓(xùn)方案為規(guī)范保安工作，使保安工作系統(tǒng)化/規(guī)范化,最終使保安具備滿足工作需要的知識和技能，特制定本教學(xué)教材大綱。一、課程設(shè)置及內(nèi)容全部課程分為專業(yè)理論知識和技能訓(xùn)練兩大科目。其中專業(yè)理論知識內(nèi)容包括：保安理論知識、消防業(yè)務(wù)知識、職業(yè)道德、法律常識、保安禮儀、救護知識。作技能訓(xùn)練內(nèi)容包括：崗位操作指引、勤務(wù)技能、消防技能、軍事技能。二．培訓(xùn)的及要求培訓(xùn)目的1）保安人員培訓(xùn)應(yīng)以保安理論知識、消防知識、法律常識教學(xué)為主，在教學(xué)過程中，應(yīng)要求學(xué)員全面熟知保安理論知識及消防專業(yè)知識，在工作中的操作與運用，并基本掌握現(xiàn)場保護及處理知識2）職業(yè)道德課程的教學(xué)應(yīng)根據(jù)不同的崗位元而予以不同的內(nèi)容，使保安在各自不同的工作崗位上都能養(yǎng)成具有本職業(yè)特點的良好職業(yè)道德和行為規(guī)范）法律常識教學(xué)是理論課的主要內(nèi)容之一，要求所有保安都應(yīng)熟知國家有關(guān)法律、法規(guī)，成為懂法、知法、守法的公民，運用法律這一有力武器與違法犯罪分子作斗爭。工作入口門衛(wèi)守護，定點守衛(wèi)及區(qū)域巡邏為主要內(nèi)容，在日常管理和發(fā)生突發(fā)事件時能夠運用所學(xué)的技能保護公司財產(chǎn)以及自身安全。2、培訓(xùn)要求1）保安理論培訓(xùn)通過培訓(xùn)使保安熟知保安工作性質(zhì)、地位、任務(wù)、及工作職責(zé)權(quán)限，同時全面掌握保安專業(yè)知識以及在具體工作中應(yīng)注意的事項及一般情況處置的原則和方法。2）消防知識及消防器材的使用通過培訓(xùn)使保安熟知掌握消防工作的方針任務(wù)和意義，熟知各種防火的措施和消防器材設(shè)施的操作及使用方法，做到防患于未燃，保護公司財產(chǎn)和員工生命財產(chǎn)的安全。3)法律常識及職業(yè)道德教育通過法律常識及職業(yè)道德教育，使保安樹立法律意識和良好的職業(yè)道德觀念，能夠運用法律知識正確處理工作中發(fā)生的各種問題；增強保安人員愛崗敬業(yè)、無私奉獻更好的為公司服務(wù)的精神。4)工作技能培訓(xùn)其中專業(yè)理論知識內(nèi)容包括：保安理論知識、消防業(yè)務(wù)知識、職業(yè)道德、法律常識、保安禮儀、救護知識。作技能訓(xùn)練內(nèi)容包括：崗位操作指引、勤務(wù)技能、消防技能、軍事技能。二．培訓(xùn)的及要求培訓(xùn)目的安全生產(chǎn)目標(biāo)責(zé)任書為了進一步落實安全生產(chǎn)責(zé)任制，做到“責(zé)、權(quán)、利”相結(jié)合，根據(jù)我公司2015年度安全生產(chǎn)目標(biāo)的內(nèi)容，現(xiàn)與財務(wù)部簽訂如下安全生產(chǎn)目標(biāo)：一、目標(biāo)值：1、全年人身死亡事故為零，重傷事故為零，輕傷人數(shù)為零。2、現(xiàn)金安全保管，不發(fā)生盜竊