上海市臨檢中心 臨床實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)業(yè)組長(zhǎng)培訓(xùn)班 2-張建－檢驗(yàn)項(xiàng)目分析性能評(píng)估

檢驗(yàn)項(xiàng)目分析性能評(píng)估－－－思考與探討上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory上海市臨床檢驗(yàn)中心張健上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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for

Clinical

Laboratory上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryISO15189對(duì)方法確認(rèn)的要求上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory問(wèn)題上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory什么是分析方法的分析性能？檢驗(yàn)質(zhì)量與分析性能的關(guān)系？如何做分析性能評(píng)估？如何判斷分析性能評(píng)估的結(jié)果？如何應(yīng)用分析性能評(píng)估的數(shù)據(jù)？醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法第三章醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理第三十條醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)將尚未開(kāi)展室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目與其他臨床實(shí)驗(yàn)室的同類(lèi)項(xiàng)目進(jìn)行比對(duì)，或者用其他方法驗(yàn)證其結(jié)果的可靠性。臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目比對(duì)有困難時(shí)，醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)對(duì)方法學(xué)進(jìn)行評(píng)價(jià)，包括準(zhǔn)確性、精密度、特異性、線性范圍、

穩(wěn)定性、抗干擾性、參考范圍等，并有質(zhì)量保證措施。上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory臨床檢驗(yàn)測(cè)定方法的分析性能上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory衛(wèi)生部《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》對(duì)檢驗(yàn)方法性能參數(shù)的規(guī)定：準(zhǔn)確度分析范圍分析靈敏度分析特異性空白測(cè)定檢測(cè)限干擾精密度回收臨床檢驗(yàn)測(cè)定方法的分析性能上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory血清葡萄糖方法性能評(píng)價(jià)：分析范圍批內(nèi)精密度回收實(shí)驗(yàn)檢測(cè)限干擾日間精密度方法比較分析性能包括那些評(píng)估實(shí)驗(yàn)？上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory《體外診斷試劑分析性能評(píng)估系列指導(dǎo)原則（征求意見(jiàn)稿）》體外診斷試劑產(chǎn)品性能評(píng)估包括檢測(cè)限、線性范圍、可報(bào)告范圍、準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）、準(zhǔn)確度（方法學(xué)

比較）、精密度、干擾實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性、參考區(qū)間共九

個(gè)項(xiàng)目。CLSI標(biāo)準(zhǔn)Shanghai

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Clinical

LaboratoryShanghai

Centre

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Clinical

LaboratoryISO15189

各專(zhuān)業(yè)應(yīng)用說(shuō)明上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryISO15189對(duì)方法確認(rèn)的要求上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory方法確認(rèn)與方法驗(yàn)證上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory方法確認(rèn)與方法驗(yàn)證上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryCLIA’88

final

rule

（2003）上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory《Basic

Method

Validation》3rd

Edition（westgard）上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryThis

would

generally

mean

performingfour

experiment:Comparison

of

method

to

inaccuracyReplication

experiment

to

impercisionLineaity

experiment

to

reportable

rangeVerify

the

reference

rangeCAP對(duì)方法驗(yàn)證的要求上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory2007

CAP

chechlist:accuracy

and

precision(GEN42020)Reportable

range

(GEN42085)Sensitivity

or

lower

detection(GEN42162)(GEN42030)limit

Reference

rangeCNAS

ISO15189

評(píng)審員培訓(xùn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory有關(guān)臨床生化方法評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室需定期評(píng)估或驗(yàn)證所使用的方法。驗(yàn)證內(nèi)容包括但不限于以下內(nèi)容：準(zhǔn)確

度、精密度、可報(bào)告（或線性）范圍、

檢測(cè)限、參考區(qū)間、等。（5.5.2）CNAS

ISO15189

評(píng)審員培訓(xùn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory有關(guān)臨床免疫方法評(píng)價(jià)定量項(xiàng)目參照臨床生化的要求定性項(xiàng)目的性能評(píng)價(jià)內(nèi)容包括：靈敏度、特異性、符合率和總精密度以及檢測(cè)限或CUT

OFF值的確認(rèn)及驗(yàn)證前三項(xiàng)可以采用：1、廠商提供的權(quán)威部門(mén)的檢定報(bào)告、廠商實(shí)驗(yàn)室使用公認(rèn)的PANEL的檢測(cè)結(jié)果，得出一年內(nèi)所用批號(hào)的均值；2、實(shí)驗(yàn)室與參考（公認(rèn)）的方法比對(duì)的結(jié)果，每相關(guān)人群至少120人份；3、實(shí)驗(yàn)室用公認(rèn)的PANEL的檢測(cè)結(jié)果，每批試劑均有評(píng)價(jià)總精密度可以采用室內(nèi)質(zhì)控的RCV來(lái)自制造商的定量項(xiàng)目分析性能評(píng)估來(lái)自制造商的定性項(xiàng)目分析性能評(píng)估上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory不同文件對(duì)分析性能評(píng)估或方法確認(rèn)的共性要求上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory定量：精密度可報(bào)告范圍

準(zhǔn)確度參考區(qū)間驗(yàn)證定性：精密度靈敏度（檢測(cè)限）準(zhǔn)確度（符合率）Cutoff值驗(yàn)證？？？誰(shuí)做方法評(píng)估？上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory制造商？建立方法－全面評(píng)估臨床實(shí)驗(yàn)室？使用方法－重要性能驗(yàn)證方法變動(dòng)－全面評(píng)估方法變動(dòng)（modified）上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

LaboratoryCLIA’88-493,1253(b)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory分析性能與質(zhì)量控制的關(guān)系上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory分析性能的優(yōu)劣是檢驗(yàn)質(zhì)量的前提分析性能參數(shù)是質(zhì)量控制的量化基礎(chǔ)Six

Sigma

of

Total

QualityManagementSix

Sigma

of

Total

QualityManagement上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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for

Clinical

LaboratorySix

Sigma的計(jì)算方法

1、確定允許總誤差TaE2、計(jì)算常規(guī)實(shí)驗(yàn)室RCV3、室內(nèi)質(zhì)控暫不考慮Bias4、XSigma

=TaE/RCVSix

Sigma

of

Total

QualityManagement上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryWWW.WSix

Sigma

of

Total

QualityManagement上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory6-sigma:

use

N=2

with

3.0s

or

3.5s5

-sigma:

use

N=2

with

2.5s

or

3.0s4-sigma:

use

N=4

with

multirules

or2.5sLess

4-sigma:

use

maximum

QCaffordable;

also

maximizepreventive

mainteance,

individualinstrument

and

function

checks

anddeploy

most

experenced

analysts

toperform

these

teste如何完成分析性能評(píng)估上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory完善的計(jì)劃質(zhì)量目標(biāo)方法選擇熟悉測(cè)量程序質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)及數(shù)據(jù)分析必須的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory精密度準(zhǔn)確度可報(bào)告范圍參考區(qū)間驗(yàn)證精密度實(shí)驗(yàn)（CLSI

EP5-A2）上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory精密度評(píng)估的基本原則操作者必須熟悉方法和/或儀器工作原理，了解并掌握 儀器的操作步驟和各項(xiàng)注意事項(xiàng)，能在評(píng)估階段維持 儀器的可靠和穩(wěn)定。用于評(píng)估試驗(yàn)的樣品一般常采用臨床實(shí)驗(yàn)室收集的穩(wěn) 定和冷凍貯存的血清(漿)庫(kù)；當(dāng)實(shí)驗(yàn)室收集的樣品不 穩(wěn)定或不易得到時(shí)，也可考慮使用穩(wěn)定的、以蛋白質(zhì) 為基質(zhì)的商品物質(zhì)，如校準(zhǔn)品或質(zhì)控品。評(píng)估精密度時(shí)，應(yīng)至少評(píng)估二個(gè)濃度水平樣本的精密 度，至少有一個(gè)濃度在醫(yī)學(xué)決定水平左右。精密度實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory評(píng)估方法：每天做2個(gè)批次的測(cè)試，每批測(cè)試時(shí)，對(duì)同一樣品作雙份測(cè)量，共做20天。評(píng)估結(jié)束時(shí)共有40對(duì)，即80個(gè)測(cè)試結(jié)果。從40批次測(cè)量中雙份結(jié)果的差值求出批內(nèi)精密度。從所有80個(gè)數(shù)據(jù)計(jì)算出批間精密度。計(jì)算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，檢查數(shù)據(jù)的離群值，剔除值不能超過(guò)總測(cè)量數(shù)的2.5%。當(dāng)超過(guò)時(shí)，應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。精密度實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory離群值剔出的標(biāo)準(zhǔn)：任何一對(duì)均值和總均值的差超過(guò)4倍標(biāo)準(zhǔn)差任何一對(duì)中二個(gè)結(jié)果的絕對(duì)差值超過(guò)4倍標(biāo)準(zhǔn)差離群值不用于精密度的計(jì)算。在剔除后應(yīng)再增加檢驗(yàn)次數(shù)，以保證至少有40批次，80個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算。批內(nèi)精密度上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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for

Clinical

Laboratory批間精密度上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

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Clinical

Laboratory精密度可接受標(biāo)準(zhǔn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

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Clinical

Laboratory批內(nèi)不精密度：Sw-run＜0.25TEa批間不精密度：Stot＜0.33TEa《Basic

Method

Validation》3rd

Edition（westgard）北京市部分臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目不精密度建議上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory室內(nèi)不精密度CV%檢驗(yàn)項(xiàng)目3.61.91.82.96.44.35.33.54.34.58.17.36.04.3鉀鈉氯鈣磷血糖尿素肌酐尿酸膽固醇甘油三酯丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶乳酸脫氫酶室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)靶值±0.4mmol/L靶值±4mmol/L靶值±5%靶值±0.25mmol/L靶值±10.7%靶值±10%靶值±9%靶值±15%靶值±17%靶值±9%靶值±18.8%靶值±18%靶值±20%靶值±20%北京市部分臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目不精密度建議上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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for

Clinical

Laboratory6.64.86.43.92.42.12.16.8NA

NA

NA

NA

NA

NA靶值±21%靶值±27%靶值±20%

靶值±10%靶值±4%

靶值±4.5%靶值±5%靶值±14%3份樣本定性均符合3份樣本定性均符合3份樣本定性均符合3份樣本定性均符合3份樣本定性均符合3份樣本定性均符合肌酸激酶堿性磷酸酶γ‐谷氨?；D(zhuǎn)移酶白細(xì)胞紅細(xì)胞

血紅蛋白紅細(xì)胞壓積血小板乙肝表面抗原乙肝表面抗體乙肝e抗原

乙肝e抗體乙肝核心抗體丙肝抗體準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory回收實(shí)驗(yàn)方法學(xué)比對(duì)方法學(xué)比對(duì)實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory方法學(xué)比對(duì)的基本原則1.熟悉待評(píng)價(jià)系統(tǒng)。編寫(xiě)儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，其中包括校準(zhǔn)程序和室內(nèi)質(zhì)控程序。比對(duì)方法的選擇：對(duì)于比較、對(duì)方法，采用符合生產(chǎn)廠家要求的實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)行方法，或采用公認(rèn)的參考方法。比對(duì)方法應(yīng)具有以下條件：具有比實(shí)驗(yàn)樣品方法更好的精密度。沒(méi)有已知的干擾物。同實(shí)驗(yàn)樣品方法具有相同單位。比較方法應(yīng)該選擇正確性經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的方法，根據(jù)實(shí)際條件，選擇的順序如下：參考方法、原裝系統(tǒng)、配套系統(tǒng)、經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的非配套系統(tǒng)。方法學(xué)比對(duì)實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求按照實(shí)驗(yàn)對(duì)樣品的要求收集處理病人樣品，樣本貯存時(shí)間及條件由被測(cè)組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用貯存的樣品。樣品應(yīng)來(lái)自于許多病人，并且此病人的疾病對(duì)于被測(cè)組成的影響應(yīng)該是知道的，不要使用含有干擾此方法的組分或條件(如溶血)樣品。在具有臨床意義范圍內(nèi)即醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)，評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)樣品方法，通常基本從低于參考范圍的低限到高于參考范圍的高限。分析濃度盡可能在報(bào)告的濃度范圍內(nèi)均勻分布。商品質(zhì)控物或者校準(zhǔn)物可能存在基質(zhì)效應(yīng)，應(yīng)避免使用。方法學(xué)比對(duì)實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory實(shí)驗(yàn)過(guò)程每天選擇8個(gè)臨床病人樣本，按1到8的順序編號(hào)。用兩種方法同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，按照1，2，3，4，5，6，7，8，8，7，6，5，4，3，2，1的樣本順序進(jìn)行測(cè)定。以上實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)5天，即至少分析40個(gè)不同的臨床病人樣本。每天實(shí)驗(yàn)必須進(jìn)行校準(zhǔn)和室內(nèi)質(zhì)控。只有在室內(nèi)質(zhì)控合格的情況下，當(dāng)天的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)才有效方法學(xué)比對(duì)實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報(bào)告記錄測(cè)定結(jié)果（Xii和Yjj）。計(jì)算每個(gè)樣本測(cè)定的均值（和），樣本重復(fù)測(cè)定間差 值的絕對(duì)值（DXi和DYi）及兩種方法測(cè)定結(jié)果間的差 值（-）。檢查批內(nèi)離群點(diǎn)：計(jì)算樣本重復(fù)測(cè)定間差值（DXi和

DYi）的平均數(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果差值超出平均數(shù)4倍時(shí)，則 判斷為離群點(diǎn)。檢查批間離群點(diǎn)：計(jì)算兩種方法測(cè)定結(jié)果間均值差值

(-)的平均數(shù)，超出該平均數(shù)4倍時(shí)，則判斷該樣本為 離群點(diǎn)。方法學(xué)比對(duì)實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory相關(guān)系數(shù)計(jì)算：利用所有樣本雙份測(cè)定值進(jìn)行相關(guān)系數(shù)計(jì)算，如果r≥0.975(或r2≥0.95)，則認(rèn)為X范圍適合，數(shù)據(jù)滿(mǎn)足要求。如果r2<0.95，那么必須通過(guò)分析另外一些樣品以擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍，然后再檢查全部數(shù)據(jù)系列。方法學(xué)比對(duì)實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory回歸計(jì)算：利所有樣本雙份測(cè)定的有效

數(shù)據(jù)，計(jì)算兩個(gè)方法間的線性回歸方程：

Y=a+bX.偏差估計(jì)：在醫(yī)學(xué)決定水平，利用回歸方程計(jì)算預(yù)期偏差,預(yù)期偏差Bx=a+(b-1)X,相對(duì)偏差=Bx/X一般以CLIA’88的允許總誤差的1/2判定預(yù)期偏差、相對(duì)偏差是否在規(guī)定范圍內(nèi)。回收實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求和制備方法

選擇合適濃度的常規(guī)檢測(cè)樣本，分為體積相同的3-4份。

在其中2-3份樣本中加入不同量的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)，制成2-3個(gè)不同加入濃度的回收樣本，計(jì)算加入的待測(cè)物的濃度。

在另一份樣本中加入同樣量的無(wú)被測(cè)物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。回收實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory實(shí)驗(yàn)過(guò)程用待評(píng)價(jià)方法對(duì)回收樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行測(cè)定，通常對(duì)樣本進(jìn)行2-3次重復(fù)分析，取其均值進(jìn)行計(jì)算。回收實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報(bào)告計(jì)算回收率：回收率1=計(jì)算平均回收率： 平均回收率=計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=100%-平均回收率

可接受判斷：比例系統(tǒng)誤差不大于

CLIA

88允許總誤差的1/2?；厥諏?shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory范例——某法測(cè)定血清葡萄糖回收率5.1樣本制備：基礎(chǔ)血清：血清1ml（濃度5.5mmol/L）+蒸餾水0.1ml;回收樣本1：血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液（濃度22mmol/L）;回收樣本2：血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液（濃度55mmol/L）；5.2采用待評(píng)價(jià)方法，按照從低到高的濃度順序，每個(gè)樣本測(cè)定3次，取平均值?？蓤?bào)告范圍實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

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Clinical

Laboratory可報(bào)告范圍評(píng)估的基本原則實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)熟悉測(cè)定方法與儀器操作。采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持儀器處于正常狀態(tài)。用于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的試劑應(yīng)為同一批號(hào)，并在有效期內(nèi)。可報(bào)告范圍實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory樣本制備方法低值樣本：將待測(cè)樣本（含被分析物）用混合人血清（含被分析物濃度水平較低）或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行稀釋?zhuān)a(chǎn)生接近于方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為5個(gè)濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。高值樣本：選取含被測(cè)物的高值樣本，必要時(shí)可添加被分析物的純品，并計(jì)算出理論值。使用混合血清

或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液或測(cè)定方法要求的稀

釋液對(duì)高值待測(cè)樣本進(jìn)行稀釋?zhuān)蛊浣咏诰€性范圍

的上1/3區(qū)域內(nèi)，并記錄稀釋倍數(shù)。至少選用三個(gè)高濃度樣本，稀釋倍數(shù)應(yīng)為方法性能標(biāo)明的最大稀釋倍數(shù)、并適當(dāng)增加或減小稀釋比例?？蓤?bào)告范圍實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory實(shí)驗(yàn)過(guò)程在一次運(yùn)行中將低值樣本重復(fù)測(cè)定10次，高值稀釋樣本重復(fù)測(cè)定3次。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分別計(jì)算均值、SD、CV值。對(duì)于可報(bào)告范圍高限還應(yīng)計(jì)算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對(duì)偏差?？蓤?bào)告范圍實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory結(jié)果報(bào)告可報(bào)告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平做為可報(bào)告范圍低限。可報(bào)告范圍高限：選取還原濃度與理論濃度的偏差（%）等于或小于方法標(biāo)示CV值時(shí)的最大稀釋倍數(shù)為方法推薦的最大稀釋倍數(shù)，方法線性范圍的上限與最大稀釋倍數(shù)的乘積為該方法可報(bào)告范圍的高限。生物參考區(qū)間驗(yàn)證上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory使用20個(gè)樣本驗(yàn)證（verification）使用60個(gè)樣本評(píng)估（estimation）參考值轉(zhuǎn)換（基于方法學(xué)比對(duì)數(shù)據(jù)）參考區(qū)間驗(yàn)證實(shí)例上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryXXXX醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室Beckman

CX5測(cè)定項(xiàng)目生物參考區(qū)間評(píng)估報(bào)告報(bào)告編號(hào)：XXXXXXXXXXXXXX1對(duì)象：定量檢測(cè)程序ALT，AST，ALP，GGT，CK，LDH，GLU，CREA，UREA，UA，CA，P，TG，TCHO，K，NA，CL共17項(xiàng)儀器：Beckman

CX5（BDYYJYK-SBSYS-SH-01）2．評(píng)估材料：表觀健康志愿者血清樣本3．方法：分析50例健康成年自愿者（無(wú)已知疾病、表觀健康、未服

藥、BMI≤25）的標(biāo)本，其中男性22例，女性28例，年齡范

圍22-74，平均48歲。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果的頻數(shù)分布，選擇合適

的統(tǒng)計(jì)方法確定95%的參考范圍，若在推薦的參考范圍內(nèi)，

或僅有5%的數(shù)據(jù)超出推薦的參考范圍，該參考范圍可接受。結(jié)果：見(jiàn)下表結(jié)論：目前本室采用的各個(gè)項(xiàng)目的生物參考區(qū)間經(jīng)評(píng)估，判定為適合，可繼續(xù)采用。上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory參考值使用的問(wèn)題上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory用哪個(gè)參考值？制造商提供的還是教科書(shū)提供的？參考值和方法是什么關(guān)系？參考值轉(zhuǎn)換的前提是什么？參考區(qū)間的系統(tǒng)差異上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory項(xiàng)目參考區(qū)間（ng/ml）Abbott

Bekman

Roche操作規(guī)程≤7

≤20≤5

≤3≤10

≤5AFP

≤15

≤9CEA

≤5

≤5CEA吸煙≤10

≤10驗(yàn)證生物參考區(qū)間上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryAm

J

clin

Pathol

2006;125:921-927.

Automated

CA

125Assays.Performance

Characteristics

ofSeven

Automated

CA

15-3

Methods上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryKorean

J

Lab

Med

2008;28:179-84上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory檢測(cè)限實(shí)驗(yàn)（分析靈敏度）上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory實(shí)驗(yàn)材料和基本要求空白樣本的制備：空白樣本應(yīng)不含被測(cè)物，但其基質(zhì)應(yīng)與待測(cè)定常規(guī)樣本相同。如空白樣本難以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液?；蚋鶕?jù)測(cè)定項(xiàng)目選用相應(yīng)基質(zhì)的樣本，但應(yīng)注意將基質(zhì)效應(yīng)減至最小。實(shí)驗(yàn)方法在一次運(yùn)行中將空白樣本重復(fù)測(cè)定20次。檢測(cè)限實(shí)驗(yàn)（分析靈敏度）上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)記錄：將測(cè)定結(jié)果記錄于表格中。

如果檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)于低于零的結(jié)果報(bào)告為

零，應(yīng)記錄初始響應(yīng)值，如吸光度值等。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：計(jì)算20次結(jié)果的均值與標(biāo)準(zhǔn)差SD。結(jié)果報(bào)告：以空白均值加兩倍標(biāo)準(zhǔn)差報(bào)告方法的檢測(cè)限。（+2SD）線性范圍評(píng)估上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求和制備方法1.1基本要求樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實(shí)驗(yàn)樣本相似，但不可采用含有對(duì)測(cè)定方法具有明確干擾作用物質(zhì)的樣本，如溶血、脂血、黃疸或含有某些特定藥物的樣本。進(jìn)行血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)時(shí)，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測(cè)定上限的混合人血清。建立一種定量測(cè)定方法的線性范圍時(shí)，需在預(yù)期測(cè)定范圍內(nèi)選擇7-11個(gè)濃度水平。如將預(yù)期測(cè)定范圍加寬至130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。當(dāng)對(duì)標(biāo)稱(chēng)線性參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證時(shí)，需在已知線性范圍內(nèi)選擇5-

7個(gè)濃度水平。無(wú)論是建立或驗(yàn)證線性范圍，所選用的濃度水平應(yīng)可覆蓋整個(gè)預(yù)期測(cè)定范圍并包括與臨床有關(guān)的重要評(píng)價(jià)濃度，如最小測(cè)定濃度或線性范圍的最低限、不同的醫(yī)學(xué)決定水平、最大測(cè)定濃度或線性范圍的高限等。線性范圍評(píng)估上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求和制備方法1.2制備方法不同濃度水平的樣本可通過(guò)將高濃度樣本與低濃度樣本進(jìn)行倍比稀釋得到，注意在進(jìn)行液體吸取時(shí)應(yīng)選擇精密度與準(zhǔn)確性好的移液裝置。制備時(shí)應(yīng)將樣本完全混合并避免蒸發(fā)或其他使樣本變質(zhì)的情況。每份樣本的濃度與體積單位應(yīng)統(tǒng)一。如果高/低濃度血清的值未知，可將每種血清編碼，用編碼代表每個(gè)血清的相對(duì)濃度。對(duì)于等濃度間隔樣本，可用連續(xù)整數(shù)（如1、2、3、4、5）代表連續(xù)樣本。進(jìn)行數(shù)據(jù)處理時(shí)可用樣本號(hào)代替X值。表1和表2中描述的樣本制備過(guò)程是按照等濃度間隔的設(shè)計(jì)進(jìn)行的，每個(gè)濃度水平的樣本量為1.00ml。制備非等濃度間隔的樣本時(shí)應(yīng)明確各樣本間的濃度關(guān)系，測(cè)定時(shí)可以這些樣本間的相對(duì)濃度比值做為X值。上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory線性范圍評(píng)估上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory實(shí)驗(yàn)過(guò)程建立線性范圍：需測(cè)定9-11個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測(cè)定3-4次。所有樣本應(yīng)在一次運(yùn)行中或幾次間隔很短的運(yùn)行中隨機(jī)測(cè)定，最好在一天之內(nèi)完成。線性范圍評(píng)估上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

Laboratory數(shù)據(jù)處理

剔除離群值離群值可由散點(diǎn)圖初步判斷，采用格拉布斯（GRUBBS）法進(jìn)行離群值檢驗(yàn)。進(jìn)行多項(xiàng)回歸分析對(duì)數(shù)據(jù)組進(jìn)行多項(xiàng)回歸分析，得到一級(jí)、二級(jí)與三級(jí)多項(xiàng)式。一級(jí)多項(xiàng)式為直線，二級(jí)多項(xiàng)式表示上升曲線或下降曲線，三級(jí)多項(xiàng)式表示S形曲線（在測(cè)量范圍兩端具有明顯的非線性）。如何進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證？-------文獻(xiàn)所采用的方法上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryAm

J

clin

Pathol

2006;125:921-927.Performance

characteristics

ofseven

Automated

CA

125

Assays.Am

J

clin

Pathol

2007;127:436-440.Performance

characteristics

of

fiveAutomated

CA

19-9

Assays..

Am

J

clin

Pathol

2006;127:752-757.Performance

characteristics

of

seven

Automated

CA

15-3

Assays.檢測(cè)靈敏度、可報(bào)告范圍實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratorySensitivity:

analyzing

10replicatesof

zero

calibrator

and

4

replicatesof

the

nonzero

calibratorDilution

linearity

validation:Making

serial

dilutions(1:2

to1:32),analyzing

each

sample

intriplicate精密度、準(zhǔn)確性及參考區(qū)間驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心Shanghai

Centre

for

Clinical

LaboratoryImprecision

studies:2

controls

wereanalyzed

in

replicates

of

2

per

run.

Tworuns

per

day

were

conducted

on

each

of

5day

with

a

minimum

of

2

hour.(20replicates)Meth