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第三章細(xì)菌的生長(zhǎng)和遺傳變異第1頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
細(xì)菌吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以后,在酶的催化下進(jìn)行各種新陳代射反應(yīng),如果同化作用大于異化作用,則細(xì)胞質(zhì)的量不斷增加,表現(xiàn)在細(xì)胞自身就是體積或重量的不斷增加。這種現(xiàn)象叫生長(zhǎng)。生長(zhǎng)到一定階段,細(xì)菌以二分裂的方式形成兩個(gè)子細(xì)胞,這就是繁殖,其特征是細(xì)菌個(gè)體數(shù)增加。細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖很快,適宜的環(huán)境下每隔20~30min分裂一次。第2頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
細(xì)菌有沒(méi)有年輕、年老之分?
回答:有,但是細(xì)菌的所謂菌齡和人的老年、中年、幼年的概念不同。人是按出生之時(shí)算起,年紀(jì)越小越年輕,越大就越老。細(xì)菌則不然,細(xì)菌是以分裂法進(jìn)行繁殖的,一般繁殖一代的時(shí)間,只要20~30min,而且在一大群細(xì)菌中也無(wú)法區(qū)分每個(gè)細(xì)菌的年老年輕。因此細(xì)菌的所謂年齡是指一群細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下生長(zhǎng)而表現(xiàn)出來(lái)的待征。換句話說(shuō),描述細(xì)菌的生長(zhǎng)往往用群體繁殖和生長(zhǎng)所表現(xiàn)出來(lái)的待征來(lái)代表。第3頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、細(xì)菌生長(zhǎng)測(cè)定方法(一)直接測(cè)定1、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法又稱全數(shù)法。它又分成下述幾種:(1)涂片染色法將已知體積的待測(cè)樣品,均勻地涂布在載玻片的已知面積內(nèi),經(jīng)固定染色后計(jì)數(shù)菌數(shù)。一般藉助目測(cè)微尺的直徑標(biāo)準(zhǔn)來(lái)計(jì)算細(xì)菌的數(shù)量。(2)計(jì)數(shù)器測(cè)定法采用特殊的細(xì)菌或血球計(jì)數(shù)器進(jìn)行測(cè)定。操作過(guò)程是取一定體積的待測(cè)細(xì)菌樣品放于計(jì)數(shù)器的測(cè)定小室與載玻片之間,由于測(cè)定小室的體積是已知的,因此根據(jù)得到的計(jì)數(shù)值就可以計(jì)算出細(xì)菌含量。(3)比例計(jì)數(shù)法將待測(cè)樣品溶液與等體積的血液混合,然后涂片,在顯微鏡下測(cè)定細(xì)菌與紅血球數(shù)的比例,因血液中的紅血球數(shù)已知(男性400~500萬(wàn)個(gè)/mL,女性350~450萬(wàn)個(gè)/mL),由此可以測(cè)得細(xì)菌數(shù)量。第4頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月血球計(jì)數(shù)板法第5頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2、比濁計(jì)數(shù)法
這是測(cè)定懸浮細(xì)胞的快速方法。其原理是細(xì)菌細(xì)胞是不透光的,光束通過(guò)懸浮液時(shí)會(huì)引起光的散射或吸收,降低透光度,在一定范圍內(nèi)透光度與溶液的混濁度即細(xì)胞濃度成正比,籍此可以測(cè)定細(xì)菌濃度。采用這種方法時(shí),為了得到實(shí)際的細(xì)胞絕對(duì)含量,通常須將已知細(xì)胞濃度的樣品按上述測(cè)定程序制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后根據(jù)透光度或光密度值從標(biāo)準(zhǔn)曲線中直接查得細(xì)菌含量。第6頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(1)制標(biāo)準(zhǔn)曲線(OD600)(2)測(cè)菌液濁度,查圖表得出細(xì)菌數(shù)量濁度儀或721分光光度儀第7頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(二)間接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法又稱活菌計(jì)數(shù)法。它是通過(guò)測(cè)定樣品中活的細(xì)菌數(shù)量來(lái)間接地表示細(xì)菌的含量。因此,這種方法不含死的細(xì)菌細(xì)胞,而且測(cè)定所需的時(shí)間也較長(zhǎng)。它分下述幾種方法:1、平板計(jì)數(shù)法將待測(cè)細(xì)菌樣品先作10倍梯度稀釋,然后取相應(yīng)稀釋度的樣品涂布到平板中,或與未經(jīng)融化的固體培養(yǎng)基混合、搖勻,培養(yǎng)一定時(shí)間后觀察并計(jì)數(shù)生長(zhǎng)的細(xì)菌數(shù),最終根據(jù)細(xì)菌數(shù)和取樣量計(jì)算出細(xì)菌濃度。一般計(jì)數(shù)平板的細(xì)菌生長(zhǎng)菌落數(shù)以30~300個(gè)為宜。菌落數(shù)太多,計(jì)數(shù)時(shí)費(fèi)時(shí)費(fèi)力;菌落數(shù)太少,則計(jì)數(shù)結(jié)果誤差太大。平板計(jì)數(shù)法是采用最廣的一種活菌計(jì)數(shù)法。第8頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月提問(wèn):前述方法中計(jì)數(shù)的不都是活菌,如何分辨菌死活?繁殖提問(wèn):細(xì)菌繁殖的可見(jiàn)現(xiàn)象是什么?產(chǎn)生菌落(固體培養(yǎng)基培養(yǎng))、菌液混濁(液體培養(yǎng)基培養(yǎng))計(jì)數(shù)原理:一個(gè)細(xì)菌可繁殖成一個(gè)菌落或一群細(xì)菌.缺點(diǎn):慢
分固體培養(yǎng)法和液體培養(yǎng)法第9頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月無(wú)菌水平板計(jì)數(shù)法—固體培養(yǎng)法第一步:菌樣巧妙稀釋得到不同稀釋度(10-x)菌液第10頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月菌樣被無(wú)菌水不同稀釋倍率后平板培養(yǎng)圖第11頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
10-210-3
10-410-5
各取1ml,均勻涂布于冷固體培養(yǎng)基平板上或與溫?zé)嵋簯B(tài)固體培養(yǎng)基混合冷卻。第三步:培養(yǎng)稀釋度過(guò)低,菌落密集無(wú)法計(jì)數(shù)可以計(jì)數(shù),但數(shù)量過(guò)多,費(fèi)時(shí)費(fèi)力數(shù)量合適,統(tǒng)計(jì)計(jì)算,作為結(jié)果數(shù)量太少,誤差因素太大,不做計(jì)數(shù)第二步:接種平板每一個(gè)細(xì)菌會(huì)生成一個(gè)菌落第12頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一般計(jì)數(shù)平板的細(xì)菌生長(zhǎng)菌落數(shù)以30~300個(gè)為宜。第四步:計(jì)數(shù)細(xì)菌數(shù)量=?細(xì)菌數(shù)量=數(shù)出的菌落數(shù)/稀釋度例如:10-5稀釋度時(shí)菌落數(shù)為125個(gè)細(xì)菌數(shù)量=125/10-5=1.25×107個(gè)/mL
平板計(jì)數(shù)法是采用最廣的一種活菌計(jì)數(shù)法如國(guó)標(biāo)法水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定。注意:作空白,取平行樣(2~3組)均值,減小誤差平均第13頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2、液體計(jì)數(shù)法液體計(jì)數(shù)法是根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)原理設(shè)計(jì)的一種方法。具體做法是;先將待測(cè)細(xì)菌樣品作10倍梯度稀釋,然后取相應(yīng)稀釋度的樣品分別接鐘到3管或5管—組的數(shù)組液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一定時(shí)間后.觀察各管及各組中細(xì)菌是否生長(zhǎng),記錄結(jié)果,再查已專門(mén)處理好的最可能數(shù)(mostprobablenumber,MPN)表,得出細(xì)菌的最終含量。因此,這種方法又叫最可能數(shù)法或MPN法。第14頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
稀釋液體計(jì)數(shù)法特點(diǎn):液體培養(yǎng)、統(tǒng)計(jì)學(xué)查表計(jì)數(shù)又稱MPN法(或最可能數(shù)法)MostProbableNumber例如測(cè)定SRB(硫酸鹽還原菌,厭氧)的數(shù)量提問(wèn):能用稀釋平板法計(jì)數(shù)嗎?為什么?一般不能,厭氧菌暴露在空氣中不能生長(zhǎng)(除非厭氧培養(yǎng)箱)對(duì)這類菌可以利用它們生長(zhǎng)時(shí)產(chǎn)生的硫化亞鐵黑色特征進(jìn)行深層隔氧液體培養(yǎng),按MPN法進(jìn)行計(jì)數(shù)。第15頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
332010-4
10-5
10-63
10-
10-210-3
10-410-5(1)稀釋(2)稀釋接種樣品在液體表面加一層無(wú)菌液體石蠟隔絕氧氣,恒溫37℃培養(yǎng)14天記錄變黑的試管情況(3)培養(yǎng)1ml+9ml培養(yǎng)基提問(wèn):為什么有些試管變黑有些沒(méi)有?稀釋程度、取樣概率第16頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(4)統(tǒng)計(jì)-查表-計(jì)算
根據(jù)不同稀釋度變黑試管①統(tǒng)計(jì)出數(shù)量指標(biāo)三位數(shù)及其中最低稀釋度(取變黑的管數(shù)最多、稀釋度又最低的生長(zhǎng)管數(shù),為第一位數(shù)字,后面兩個(gè)稀釋度的生長(zhǎng)管數(shù)后兩位數(shù))提問(wèn):上例情況而言統(tǒng)計(jì)數(shù)量是幾?②查表表——MPN表32010-4第17頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月MPN三管法測(cè)數(shù)統(tǒng)計(jì)表水中大腸菌群、鐵細(xì)菌、硝化菌、亞硝化菌也用這種方法進(jìn)行數(shù)量統(tǒng)計(jì)。個(gè)菌/毫升細(xì)菌最可能數(shù)——通過(guò)其他精確的計(jì)數(shù)法,確定的各種數(shù)量指標(biāo)時(shí)細(xì)菌數(shù)量的最可能值上面例子中數(shù)量指標(biāo)“320”對(duì)應(yīng)的細(xì)菌最可能數(shù)為9.5個(gè)菌/毫升,最低稀釋度為10-4,折算出樣品中菌濃度為
?個(gè)菌/毫升。第18頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月3、薄膜計(jì)數(shù)法對(duì)于某些細(xì)菌含量較低的測(cè)定樣品(如空氣或飲用水),可采用薄膜計(jì)數(shù)法。將待測(cè)樣品通過(guò)帶有許多小孔但又不讓細(xì)菌流出的微孔濾膜,藉助膜的作用將細(xì)菌截留和濃縮,再將膜放于固體培養(yǎng)基表面培養(yǎng),然后類似于板計(jì)數(shù)那樣計(jì)算結(jié)果。這種方法的要求是樣品中不得含有過(guò)多的懸浮性固體或小顆粒。原理:膜抽濾(細(xì)菌濃縮)+膜平板培養(yǎng)
+
計(jì)數(shù)第19頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(1)抽濾(濾器及膜事先滅菌)薄膜計(jì)數(shù)法第20頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(2)濾膜培養(yǎng)膜有菌面沖上薄膜——微孔濾膜(φ0.45um)要求:樣品潔凈如空氣或飲用水。?堵孔、菌太多難以分散第21頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(3)統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)提問(wèn):假如測(cè)出250個(gè)菌落,抽濾了50ml自來(lái)水,自來(lái)水中菌濃度是多少呢?
250÷50ml=5個(gè)/ml自來(lái)水樣品中的細(xì)菌數(shù)量=菌落數(shù)÷抽濾樣品的體積數(shù)提問(wèn):如何用活菌計(jì)數(shù)法測(cè)定較臟的水樣?減少濾液體積、無(wú)菌水稀釋第22頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(三)重量法細(xì)菌細(xì)胞盡管很微小,但是仍然具有一定的體積和重量,因此藉助群體生長(zhǎng)后的細(xì)胞重量,可以采用測(cè)定重量的方法直接來(lái)表示細(xì)菌生長(zhǎng)的多少或快慢。1、測(cè)定細(xì)胞干重2、細(xì)胞含氮量3、DNA含量第23頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月已知單個(gè)細(xì)菌的平均重量除法計(jì)算細(xì)菌的濕重量=10-15~10-11g/個(gè)細(xì)胞干重約為濕重的10%~20%。1.干重法方法:含菌水樣在105~110℃下進(jìn)行干燥恒重(本質(zhì)測(cè)水中懸浮物重量MLSS或MLVSS)。提問(wèn):已知什么條件通過(guò)測(cè)定細(xì)菌群體
重量知道其數(shù)量?第24頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月懸浮物=無(wú)機(jī)物+有機(jī)物(包括細(xì)菌)提問(wèn):如何確定懸浮物中有機(jī)物與無(wú)機(jī)物的量?高溫(550℃)灼燒
無(wú)機(jī)物化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,高溫下不會(huì)分解提問(wèn):什么情況下可以直接用懸浮物的重量表示細(xì)菌的重量?懸浮物中絕大多數(shù)是細(xì)菌。第25頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
(1)懸浮物中絕大多數(shù)為細(xì)菌時(shí)細(xì)胞數(shù)目=MLSS÷個(gè)體細(xì)菌的平均干重量離心沉淀濾膜過(guò)濾計(jì)算105~110℃下進(jìn)行干燥恒重稱重或MLSS懸浮物第26頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(2)除細(xì)菌外還有大量無(wú)機(jī)懸浮物時(shí)
W無(wú)MLVSS揮發(fā)性懸浮物=MLSS
-W無(wú)
=細(xì)菌群體的干重量細(xì)胞數(shù)目=
MLVSS÷個(gè)體細(xì)菌的平均干重量
550℃下灼燒2h稱重105~110℃下進(jìn)行干燥恒重稱重MLSS第27頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(3)有大量非細(xì)菌有機(jī)懸浮物時(shí)提問(wèn):如何測(cè)定呢?不能用重量法,應(yīng)改用其他方法??傮w來(lái)說(shuō)重量法方法誤差較大,一般只作為菌數(shù)粗略估算如活性污泥測(cè)定(以重量MLSS、MLVSS間接表示細(xì)菌數(shù)量)第28頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2.細(xì)胞含N量法大多數(shù)生物包括細(xì)菌,細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)氮含量比較穩(wěn)定,一般為蛋白質(zhì)干重15%~16%,平均為16%。*還需要測(cè)定哪些條件可以由以上比例確定菌樣中細(xì)菌濃度?如何試驗(yàn)操作及計(jì)算呢?
第29頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月3.DNA含量法同種細(xì)菌的DNA含量一致,可通過(guò)測(cè)定DNA的含量來(lái)表示細(xì)菌的生長(zhǎng)量少量純細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)細(xì)菌數(shù)量的測(cè)定。精確性非常高,對(duì)樣品純度以及儀器和人員的要求較高,第30頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月總污染物影響酶促反應(yīng)的方程表達(dá)式——v——總污染物微生物利用速度;V—(KX)—最大速度;X—微生物濃度
Ks-飽和常數(shù)
Ks勞倫斯方程忽略KX
KX(四)其它生理生化指標(biāo)法提問(wèn):v指什么?COD降解vO2消耗v&&產(chǎn)物產(chǎn)生v?求作試驗(yàn)!第31頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月提問(wèn):當(dāng)你需要測(cè)定某水樣中細(xì)菌數(shù)量時(shí),你該如何選擇方法?視要求、水樣菌量、測(cè)試條件等等靈活選取第32頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月“生、老、病、死”(根據(jù)投食方式)分間歇式培養(yǎng)(分批培養(yǎng))、連續(xù)式培養(yǎng)兩種情況1、間歇培養(yǎng)和生長(zhǎng)曲線
提問(wèn):如何人工進(jìn)行細(xì)菌間歇培養(yǎng)?只有開(kāi)始時(shí)的一次性投料和接種細(xì)菌(其余時(shí)間細(xì)菌根據(jù)環(huán)境變化自行生滅)二、細(xì)菌的生長(zhǎng)特性(“坐吃山空型”)應(yīng)用:生理特性研究、生物發(fā)酵和生物治污第33頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第34頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(1)按細(xì)菌重量繪制的生長(zhǎng)曲線
曲線:群體重量W(mg/l)——時(shí)間t
細(xì)菌內(nèi)源呼吸生長(zhǎng)率上升階段
及細(xì)菌大量死亡階段
mg/L
活細(xì)菌重量t0時(shí)間曲線t`點(diǎn)切線斜率值=?
t`重量增長(zhǎng)速率t`
生長(zhǎng)率下降階段如以活細(xì)菌個(gè)數(shù)或細(xì)菌重量為縱坐標(biāo),培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),即可畫(huà)得一曲線,此曲線稱為細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線。第35頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月①生長(zhǎng)速率上升階段提問(wèn):為什么培養(yǎng)初期細(xì)菌群體重量增長(zhǎng)速率隨時(shí)間不斷增大?A.營(yíng)養(yǎng)物豐富,細(xì)菌增殖;B.細(xì)菌在細(xì)胞內(nèi)以糖原、油滴等形式儲(chǔ)存營(yíng)養(yǎng)物,細(xì)菌個(gè)體重量增大
增長(zhǎng)率
生上升階段
mg/mL
0時(shí)間t活細(xì)胞重量第36頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月②生長(zhǎng)速率下降階段提問(wèn):為什么生長(zhǎng)速率較前下降了?
生長(zhǎng)率下
降階段
mg/mL
0時(shí)間t活細(xì)胞重量營(yíng)養(yǎng)物濃度(好氧細(xì)菌還包括氧氣)下降
這些限制性因素還不是十分嚴(yán)重,細(xì)菌的代謝速度變慢,沒(méi)有停止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)菌的某些酶產(chǎn)生抑制第37頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月③內(nèi)源呼吸及死亡階段———內(nèi)源呼吸+毒物濃度更高(個(gè)體)瘦→死(群體)死亡率大于出生率從曲線上反映為活細(xì)菌重量的進(jìn)一步持續(xù)下降。提問(wèn):此時(shí)細(xì)菌的出生率是否為零呢?為什么?不是,利用死亡細(xì)菌的殘?bào)w營(yíng)養(yǎng)(“化做紅泥更護(hù)花或人吃人”)各種生物具有類似的規(guī)律實(shí)驗(yàn)室通常采用細(xì)菌的數(shù)量變化繪制生長(zhǎng)曲線,雖然兩種曲線在本質(zhì)上是相同的,但數(shù)量曲線也有它自身的特點(diǎn)和用途。第38頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
(2)按細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)繪制的生長(zhǎng)曲線圖
生
長(zhǎng)
速
率
穩(wěn)定期
衰老期
細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)值
0時(shí)間t細(xì)菌的數(shù)量很大,都是10的n次方,取對(duì)數(shù)作圖時(shí)方便,0~10代表1~1010總菌數(shù)活菌數(shù)
緩
慢
期對(duì)數(shù)期0+_第39頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月緩慢期-“萬(wàn)事開(kāi)頭難”特征:細(xì)菌
緩數(shù)
慢目
期的
對(duì)
數(shù)
值0時(shí)間t提問(wèn):為什么會(huì)出現(xiàn)遲緩期呢?細(xì)胞不分裂(不生長(zhǎng)),但細(xì)胞變大,細(xì)胞內(nèi)RNA含量增高,原生質(zhì)呈堿性,合成代謝活躍,易合成新的誘導(dǎo)酶,對(duì)外界環(huán)境變化敏感。接種物中死細(xì)胞較多或培養(yǎng)基不豐富時(shí)延滯期較長(zhǎng)。個(gè)體體積、重量增高.不立即進(jìn)行細(xì)胞分裂、增殖,數(shù)量不變甚至減少適應(yīng)環(huán)境(合成相應(yīng)的酶),營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)備(用于復(fù)制合成)第40頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月提問(wèn):根據(jù)上述原因選擇接種何種狀態(tài)的細(xì)菌遲緩期會(huì)較長(zhǎng)?對(duì)數(shù)期的細(xì)菌、穩(wěn)定期或衰亡期、受損細(xì)胞、富集培養(yǎng)基的細(xì)菌后三種穩(wěn)定期細(xì)胞基本耗盡了各種輔酶或其他細(xì)胞成分受損細(xì)胞養(yǎng)傷修復(fù)富集培養(yǎng)基細(xì)菌需要合成“自力更生”酶菌種本身的遺傳特性(如轉(zhuǎn)基因高效菌)和接種數(shù)量也會(huì)影響遲緩期的長(zhǎng)短。第41頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月在實(shí)際工作中如接種菌種以啟動(dòng)新的水處理設(shè)施,投加新鮮污泥時(shí),接種的細(xì)菌不習(xí)慣于新環(huán)境,會(huì)出現(xiàn)或長(zhǎng)或短的遲緩期,遲緩期的出現(xiàn)會(huì)增加操作時(shí)間,降低工作效率采用處于高效菌群對(duì)數(shù)期的菌種、增大接種量、盡量保持接種前后所處的培養(yǎng)介質(zhì)和條件一致等方法來(lái)縮短或消除遲緩期提問(wèn):我們可以通過(guò)哪些手段縮短遲緩期呢?第42頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
對(duì)數(shù)期(青年)所有細(xì)菌均繁殖故稱對(duì)數(shù)期。(相當(dāng)于重量法細(xì)菌曲線的增長(zhǎng)率上升階段)細(xì)菌數(shù)目X增長(zhǎng)率倍率的對(duì)數(shù)與時(shí)間成正比。第43頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
特點(diǎn)平均代時(shí)(繁殖一代的時(shí)間)最短提問(wèn):細(xì)菌的代時(shí)與哪些因素有關(guān)?細(xì)菌
數(shù)
目
的
對(duì)
對(duì)
數(shù)
數(shù)
期值0時(shí)間t如大腸桿菌在20℃時(shí)其代時(shí)是35℃條件下的2倍;傷寒桿菌在含0.125%的蛋白胨培養(yǎng)基中的代時(shí)為800min,而在含1.0%時(shí)僅為40min。四個(gè)時(shí)期繁殖速度最快種類遺傳、個(gè)體健康情況(營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境條件)第44頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月提問(wèn):哪個(gè)時(shí)期(遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期)代時(shí)最具有種屬代表性?為什么?最短值→無(wú)限長(zhǎng)(休眠)對(duì)數(shù)期代時(shí)——最短值細(xì)菌代時(shí)通常指最適條件下的對(duì)數(shù)期代時(shí)第45頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
穩(wěn)定期(中年)出生率=死亡率細(xì)菌
緩數(shù)
慢目
期的
對(duì)
穩(wěn)定期對(duì)
數(shù)
衰老期數(shù)
期值0t時(shí)間死亡原因—營(yíng)養(yǎng)短缺、代謝毒物增多(相當(dāng)于重量變化曲線中的增長(zhǎng)率下降階段)新繁殖的細(xì)胞與死亡細(xì)胞數(shù)目相等,菌體產(chǎn)量達(dá)到最高,細(xì)胞開(kāi)始儲(chǔ)藏糖原、脂肪等儲(chǔ)藏物,產(chǎn)芽孢的開(kāi)始形成芽孢,開(kāi)始合成次生代謝產(chǎn)物??赡苡捎跔I(yíng)養(yǎng)物的消耗或抑制生長(zhǎng)的代謝產(chǎn)物積累,細(xì)胞停止增殖,但仍存活。
第46頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
死亡期(老年)死亡率>出生率(相當(dāng)于重量法的內(nèi)源呼吸階段)提問(wèn):如何給細(xì)菌延年益壽呢?補(bǔ)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)保(去除環(huán)境毒物)人類群體有類似規(guī)律嗎?如果把地球看作是封閉的間歇式培養(yǎng)基,人類看作是細(xì)菌,人口若不加控制,必將經(jīng)歷由于資源枯竭,污染物遍地而引發(fā)的大滅絕。自救——節(jié)約、節(jié)育防止“營(yíng)養(yǎng)物消耗過(guò)快”,環(huán)保防止“有害代謝物毒性抑制”。第47頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線和廢水生物處理的關(guān)系第48頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2、連續(xù)培養(yǎng)
連續(xù)培養(yǎng)與間歇培養(yǎng)不同,它的特點(diǎn)是一方面連續(xù)進(jìn)料,另一方面又連續(xù)出料的培養(yǎng)方式。它又分為兩種:恒濁連續(xù)培養(yǎng)和恒化連續(xù)培養(yǎng)。第49頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(1)恒濁連續(xù)培養(yǎng)
培養(yǎng)基提供足夠量的營(yíng)養(yǎng)元素,細(xì)菌保持最大速率生長(zhǎng)。通過(guò)控制進(jìn)料流速使裝置內(nèi)細(xì)菌濁度保持一定,保持理論上的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,可獲得大量菌體或與菌體代謝相平衡的代謝產(chǎn)物。這種方式往往用于細(xì)菌的生理生化研究。第50頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
恒濁連續(xù)培養(yǎng)
恒濁——培養(yǎng)基濁度恒定(實(shí)質(zhì)是細(xì)菌數(shù)量恒定)新鮮培養(yǎng)基光電池光源流速控制閥出水很少應(yīng)用反饋控制第51頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(2)恒化連續(xù)培養(yǎng)
這種方式與水處理裝置的運(yùn)行方式比較相似。固定恒定的進(jìn)料流速,又以同樣的速率排出,進(jìn)水組分及反應(yīng)器中營(yíng)養(yǎng)物濃度基本不變。這種方式往往有一種限制性營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)因子控制生長(zhǎng)。第52頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
恒化連續(xù)培養(yǎng)
恒化——?新鮮培養(yǎng)基流速控制閥出水應(yīng)用:環(huán)境工程、生物工程、實(shí)驗(yàn)室研究(細(xì)菌生理特性研究、細(xì)菌的快速篩選等)。
流速恒定進(jìn)料營(yíng)養(yǎng)物總量第53頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第54頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
目前,污水連續(xù)生物處理法均類似于恒化連續(xù)培養(yǎng);(流速不完全恒定)第55頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月污(廢)水連續(xù)處理中的細(xì)菌生長(zhǎng)狀態(tài)不同的生物反應(yīng)器,
細(xì)菌的生長(zhǎng)狀態(tài)可能不同!乃至同一反應(yīng)器內(nèi)不同位置處第56頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月連續(xù)生物處理中的細(xì)菌狀態(tài)表
細(xì)菌的生長(zhǎng)階段應(yīng)用舉例特點(diǎn)遲緩期無(wú)連續(xù)化穩(wěn)定操作中沒(méi)有這一階段對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期高負(fù)荷活性污泥法(大部分區(qū)域)穩(wěn)定期生物膜法常規(guī)活性污泥法(大部分區(qū)域)生長(zhǎng)繁殖快,代謝活力強(qiáng),能大量去除廢水中有機(jī)物。(缺點(diǎn)是細(xì)菌表面的粘液層和莢膜尚未形成,運(yùn)動(dòng)很活躍,不易自行凝聚成菌膠團(tuán),沉淀性能差,致使出水水質(zhì)有機(jī)物濃度相對(duì)較高)衰老期低濃度污水延時(shí)曝氣法污泥的厭氧消化營(yíng)養(yǎng)物濃度過(guò)低,難以滿足其他階段細(xì)菌的生長(zhǎng)需要雖然比對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的差,但仍有相當(dāng)?shù)拇x活力,細(xì)菌體內(nèi)積累了大量貯存物,如異染粒、聚β—羥基丁酸等,體表的粘液層和莢膜強(qiáng)化了細(xì)菌的生物吸附能力,自我絮凝、聚合能力強(qiáng),在二沉池中泥水分離效果好,出水水質(zhì)好。1:0.4~0.8BOD.d-細(xì)菌與降解BOD重量比1:0.4以下第57頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月進(jìn)水對(duì)數(shù)期穩(wěn)定期衰老期平推流式活性污泥法占優(yōu)勢(shì)第58頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)細(xì)菌的遺傳與變異
所謂細(xì)菌的遺傳性是指每種細(xì)菌所具備的親代性狀在子代重現(xiàn),其子代的性狀與親代基本上一致的現(xiàn)象。
一種生物的親代和子代以及個(gè)體之間,在形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理機(jī)能方面都有所差異,這一現(xiàn)象叫做變異。
第59頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、細(xì)菌的遺傳
(一)細(xì)菌遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)遺傳學(xué)的研究表明,一切生物遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)是核酸。含有DNA的微生物中遺傳物質(zhì)是DNA。不含有DNA,只含有RNA(核糖核酸)的微生物中,遺傳物質(zhì)是RNA。第60頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(二)核酸的結(jié)構(gòu)核酸是一種多聚核苷酸(polynucleotide),水解過(guò)程如下:核苷的戊糖和堿基的差異又分為DNA及RNA.如表3—1。核苷的戊糖和堿基的差異又分為DNA及RNA.如表3—1。(二)核酸的結(jié)構(gòu)
核酸是一種多聚核苷酸(polynucleotide),水解過(guò)程如下:第61頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月1、DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)1953年華生(Watson)和克里克(Crick)通過(guò)X射線衍射法觀察DN
核苷的戊糖和堿基的差異又分為DNA及RNA.如下表:第62頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月JamesDeweyWatson(1928~)
FrancisHarryComptonCrick
(1916~)
1953年,DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型被提出來(lái)了,兩位創(chuàng)立者是美國(guó)生物化學(xué)家沃森(JamesDeweyWatson,1928~)和英國(guó)生物物理學(xué)家克里克(FrancisHarryComptonCrick,1916~)。獲1962年的諾貝爾生理學(xué)醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。
第63頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月富蘭克林拍攝的DNA晶體的X射線衍射照片,這張照片正是發(fā)現(xiàn)DNA結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵
第64頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月1、DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)1953年華生(Watson)和克里克(Crick)通過(guò)X射線衍射法觀察DNA結(jié)構(gòu),提出了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型:(1)兩條走向相反的多核苷酸鏈,以右手方向沿同一軸心平行盤(pán)繞成雙螺旋,螺旋直徑為2nm。(2)兩條鏈間借堿基對(duì)的氫鍵相連。A與T之間有2個(gè)氫鍵,G與C之間有3個(gè)氫鍵(RNA鏈中4與U之間為2個(gè)氫鍵,G與C之間為3個(gè)氫鍵)。這種堿基相配的關(guān)系稱為堿基互補(bǔ)或堿基配對(duì)。(3)一個(gè)DNA分子可含幾十萬(wàn)或幾百萬(wàn)個(gè)堿基對(duì),兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間的距離為0.34nm,每個(gè)螺旋的距離為3.4nm。第65頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月DNA雙螺旋模型第66頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第67頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的發(fā)現(xiàn),是生物學(xué)史上的一座里程碑:●為DNA復(fù)制提供了構(gòu)型上的解釋,使人們對(duì)DNA作為基因的物質(zhì)基礎(chǔ)不再懷疑●奠定了分子遺傳學(xué)的基礎(chǔ)。DNA雙螺旋模型在科學(xué)上的影響是深遠(yuǎn)的第68頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2、RNA在細(xì)胞里的三種類型(1)信使RNA(mRNA)它是以DNA的一條單鏈為模扳.在RNA聚合酶的催比下,按堿基互補(bǔ)原則合成的(見(jiàn)圖3—6)。由于傳達(dá)了DNA的遺傳信息,故稱信使RNA。(從細(xì)胞核——細(xì)胞質(zhì))第69頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(2)轉(zhuǎn)移RNA(tRNA)它存在于細(xì)胞質(zhì)里,在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中起轉(zhuǎn)移氨基酸的作用(圖3—7和圖3—8)。根據(jù)mRNA的遺傳密碼依次準(zhǔn)確地將合成多肽的原料—氨基酸運(yùn)送到工廠,是氨基酸的特異運(yùn)輸車。第70頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu):
三葉草形狀
RNA三葉草型的二級(jí)結(jié)構(gòu)可分為:氨基酸接受區(qū)、反密碼區(qū)、二氫尿嘧啶區(qū)、TΨC區(qū)和可變區(qū)。除氨基酸接受區(qū)外,其余每個(gè)區(qū)都含有一個(gè)突環(huán)和一個(gè)臂。如圖所示:第71頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月tRNA的
三級(jí)結(jié)構(gòu):倒“L”形,所有的tRNA折疊后形成大小相似及三維構(gòu)象相似的三級(jí)結(jié)構(gòu),這有利于攜帶的氨基酸的tRNA進(jìn)入核糖體的特定部位。如圖所示:第72頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(3)核糖體RNA約占細(xì)胞總RNA的80%,它的主要成分是核糖體核酸(rRNA)和蛋白質(zhì)。一個(gè)核糖體包含有大小兩個(gè)亞基,它是蛋白質(zhì)合成的主要場(chǎng)所,即提供一個(gè)環(huán)境能使tRNA對(duì)應(yīng)到mRNA上的密碼子,而合成蛋白質(zhì)。rRNA:是組成核糖體的主要成分,核糖體是合成蛋白質(zhì)的中心。第73頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(三)DNA的復(fù)制
DNA的復(fù)制過(guò)程包括解旋和復(fù)制。首先DNA雙螺旋分子在解旋酶的作用下,兩條多核苷酸鏈的堿基對(duì)之間的氫鍵斷裂,分離成兩條單鏈,然后各自以原有的多核苷酸鏈,按照堿基排列順序,合成一條互補(bǔ)的新鏈,復(fù)制后的DNA雙鏈,由一條新鏈和一條舊鏈構(gòu)成。新鏈的堿基與舊鏈的堿基以氫鍵相連接成新的雙螺旋結(jié)構(gòu),稱為半保留復(fù)制,整個(gè)復(fù)制過(guò)程是邊解旋邊復(fù)制的,如圖3—9。第74頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第75頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(四)微生物中的DNA
1、原核微生物中的DNA原核微生物中的DNA不與蛋白質(zhì)結(jié)合,也沒(méi)有核膜,而是以單獨(dú)裸露狀態(tài)存在,通常也稱染色體,絕大多數(shù)微生物的DNA是雙鏈的(有的呈環(huán)狀、有的呈線狀),只有少數(shù)微生物的DNA是單鏈的。細(xì)菌的DNA拉直時(shí)比細(xì)胞長(zhǎng)許多倍,如大腸桿菌的長(zhǎng)度為2μm,其DNA長(zhǎng)度為1100μm至1400μm,它在細(xì)胞中央,高度折疊形成具有空間結(jié)構(gòu)的一個(gè)核區(qū)。由于含有磷酸根,而帶有很高的負(fù)電荷。此外,還有少量的DNA(約占細(xì)胞中總DNAl%)存在于細(xì)胞質(zhì)中,稱為質(zhì)粒(plasmid)。
第76頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
DNA幾乎全部集中在染色體上,每種生物的染色體數(shù)目是一定的,如細(xì)菌只有一個(gè)環(huán)狀染色體。染色體上含有大量不同的基因,基因數(shù)目為幾個(gè)到幾百甚至幾千個(gè)不等,染色體是遺傳信息主要貯藏場(chǎng)所。除染色體外另有一類較小環(huán)狀DNA分子獨(dú)立存在于染色體外,也攜帶少數(shù)基因,這就是質(zhì)粒,在細(xì)胞分裂中也能進(jìn)行復(fù)制,傳給后代,并具有一套與細(xì)胞核染色體相對(duì)獨(dú)立的遺傳信息,表現(xiàn)一定的遺傳特性。質(zhì)粒一般只存在于細(xì)菌。質(zhì)粒存在與否不影響微生物細(xì)胞的生存,只有當(dāng)宿主細(xì)胞表現(xiàn)某種特性時(shí)才能被檢出。喪失質(zhì)粒僅喪失由其決定的某些持性。常見(jiàn)的質(zhì)粒有F因子,R因子,產(chǎn)細(xì)菌素因子及降解質(zhì)粒等等。有的質(zhì)粒能通過(guò)細(xì)胞和細(xì)胞的接觸而轉(zhuǎn)移,使受體細(xì)胞獲得該質(zhì)粒決定的遺傳性狀。最近發(fā)現(xiàn)某些酵母菌也有質(zhì)粒。
第77頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月大腸桿菌質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)示意圖質(zhì)粒能夠“友好”地“借居”在宿主細(xì)胞中。一般來(lái)說(shuō),質(zhì)粒的存在與否對(duì)宿主細(xì)胞生存沒(méi)有決定性的作用,但是,質(zhì)粒的復(fù)制則只能在宿主細(xì)胞內(nèi)完成。
質(zhì)粒是基因工程最常用的運(yùn)載體,它存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物中,是細(xì)胞染色體外能夠自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子,最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒。大腸桿菌的質(zhì)粒中常含有抗藥基因,如抗四環(huán)素的標(biāo)記基因。細(xì)菌質(zhì)粒的大小只有普通細(xì)菌染色體DNA的百分之一左右。第78頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月質(zhì)粒的特點(diǎn)細(xì)胞染色體外能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌及酵母菌等生物中質(zhì)粒的存在對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)影響質(zhì)粒的復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)完成第79頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
2、真核微生物中的DNA真核微生物的DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合,主要存在于細(xì)胞核的染色體上,在普通顯微鏡下可看到真核微生物染色體,外面包有核膜,構(gòu)成真正的細(xì)胞核,真核微生物細(xì)胞核中DNA的量大于原核微生物核區(qū)中DNA的量,DNA也存在于真核微生物的葉綠體、線粒體等細(xì)胞器中,但是量很少。一般不超過(guò)細(xì)胞核DNA的1%,并且不與蛋白質(zhì)相結(jié)合。第80頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(五)遺傳信息的傳遞和表達(dá)
第81頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
生物體的遺傳信息大多都貯存在DNA上,只有少數(shù)病毒的遺傳信息貯存在RNA上。遺傳信息的傳遞和表達(dá)可概括為3個(gè)步驟,以DNA為例說(shuō)明如下:1、將攜帶遺傳信息的DNA復(fù)制;2、將DNA攜帶的遺傳信息轉(zhuǎn)錄到RNA上;3、將RNA獲得的信息翻譯成蛋白質(zhì)。這3個(gè)步驟在分子遺傳學(xué)中稱為中心法則。
第82頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月DNA貯存的信息通過(guò)堿基排列的序列傳給后代,以DNA一條鏈為模板以堿基互補(bǔ)原則合成mRNA的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)錄必須忠實(shí)無(wú)誤。mRNA包括四種堿基A、G、C、U,而蛋白質(zhì)中含有20種氨基酸,根據(jù)實(shí)驗(yàn)證明3個(gè)堿基序列決定一個(gè)氨基酸的遺傳密碼,共有64個(gè)密碼。編碼字典見(jiàn)表3—2。其中61個(gè)密碼分別代表20種氨基酸。每一種氨基酸有1個(gè)到6個(gè)密碼不等,另外3個(gè)密碼UAA、UAG、UGA為肽鏈終止信號(hào),不代表任何氨基酸。密碼AUG代表蛋氨酸,也是肽鏈合成的起動(dòng)信號(hào)。第83頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第84頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
mRNA攜帶著由DNA轉(zhuǎn)錄來(lái)的遺傳信息。這些信息蘊(yùn)藏在mRNA的3字密碼上,密碼的序列決定了蛋白質(zhì)中氨基酸的序列。在蛋白質(zhì)合成中,核糖體的小亞基主要識(shí)別mRNA的起動(dòng)密碼子AUG,并搭到mRNA的鏈上移動(dòng),直到遇到mRNA的終止信號(hào)UAA、UAG、UGA時(shí),合成工作終止。tRNA按mRNA密碼的指示,依賴一種強(qiáng)特異性的氨基酰tRNA合成酶,將不同的氨基酸活化,活化后的氨基酸被特異的tRNA攜帶,按排列順序結(jié)合到核糖體的大亞基上,縮合成肽鏈,如圖3—11。蛋白質(zhì)或者多肽鏈?zhǔn)歉鞣N遺傳性狀的物質(zhì)基礎(chǔ)。
第85頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第86頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(六)基因表達(dá)的調(diào)控基因是具有遺傳功能的DNA分子上的片段,平均含有1000個(gè)堿基對(duì)。一個(gè)DNA分子中含有許多基因,不同基因分子含堿基對(duì)的數(shù)量和排列序列不同,并具有自我復(fù)制能力。各種基因在染色體上均有其特定的位置稱為位點(diǎn),如果染色體上基因缺失、重復(fù)、或在新的位置上和別的基因相鄰,改變了原有的排列序列,都會(huì)引起某些性狀的變異。由于基因的功能差異,又可分為結(jié)構(gòu)基因、調(diào)節(jié)基因和操縱基因。
第87頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
結(jié)構(gòu)基因決定某一種蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)相應(yīng)的一段DNA,可將攜帶的特定遺傳信息轉(zhuǎn)錄給mRNA,再以mRNA為模板合成特定氨基酸序列的蛋白質(zhì)。
調(diào)節(jié)基因調(diào)節(jié)基因帶有阻遏蛋白,控制結(jié)構(gòu)基因的活性。平時(shí)阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合,結(jié)構(gòu)基因無(wú)活性,不能合成酶或蛋白質(zhì),當(dāng)有誘導(dǎo)物與阻遏蛋白結(jié)合時(shí),操縱基因負(fù)責(zé)打開(kāi)控制結(jié)構(gòu)基因的開(kāi)關(guān),于是結(jié)構(gòu)基因就能合成相應(yīng)的酶或蛋白質(zhì)。
操縱基因操縱基因O位于結(jié)構(gòu)基因的一端,與—系列結(jié)構(gòu)基因合起來(lái)形成一個(gè)操縱子。第88頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月基因表達(dá)是基因經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄、翻譯、
產(chǎn)生有生物活性的蛋白質(zhì)的整個(gè)過(guò)程第89頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月例如大腸桿菌中降解乳糖的酶由3個(gè)蛋白質(zhì)Z、Y和A所組成。受結(jié)構(gòu)基因z、y及a控制,當(dāng)培養(yǎng)基中不存在乳糖時(shí),調(diào)節(jié)基因I的阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合,結(jié)構(gòu)基因就不能表達(dá)出來(lái),當(dāng)培養(yǎng)基中除乳糖外無(wú)其它碳源時(shí),乳糖是誘導(dǎo)物,與調(diào)節(jié)基因I的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白喪失與操縱基因結(jié)合的能力,此時(shí)操縱基因“開(kāi)動(dòng)”,結(jié)構(gòu)基因z、y及a合成蛋白質(zhì)Z、Y和A,從而形成分解乳糖的酶(如圖3—12所示),培養(yǎng)基中乳糖就被大腸桿菌分解利用,當(dāng)乳糖全部被利用后,阻遏蛋白就與操縱基因結(jié)合,操縱基因“關(guān)閉”,酶的合成停止。遺傳性狀的表現(xiàn)是在基因控制下個(gè)體發(fā)育的結(jié)果,即從基因到表現(xiàn)型必需通過(guò)酶催化的代謝活力來(lái)實(shí)現(xiàn),而酶的合成直接受基因控制,一個(gè)基因控制一種酶,或者說(shuō)一種蛋白質(zhì)的合成控制一個(gè)生化步驟,從而控制新陳代謝決定遺傳性狀的表現(xiàn)。第90頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第91頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、細(xì)菌的變異
細(xì)菌的遺傳性狀發(fā)生變化稱為細(xì)菌的變異,主要是由基因突變和基因重組造成的(圖3-14)。
第92頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第93頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(一)基因突變
微生物群體中偶而會(huì)出現(xiàn)個(gè)別在形態(tài)或生理方面有所不同的個(gè)體,個(gè)體的變異性能夠遺傳,產(chǎn)生變株。這是由于某些原因,引起生物體內(nèi)的DNA鏈上堿基的缺乏、置換或插入,改變了基因內(nèi)部原有的堿基排列順序(基因型的改變),引起表現(xiàn)型突然發(fā)生了可遺傳的變化。當(dāng)后代突然表現(xiàn)和親代顯然不同的遺傳的表現(xiàn)型時(shí),這樣的變異稱為突變。第94頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
突變的主要特點(diǎn)有:(1)突變的發(fā)生是無(wú)定向的(2)突變發(fā)生的頻率很低,即稀有性。突變率是指每一細(xì)胞在每一世代中發(fā)生某一性狀突變的機(jī)率,通常為10-5~10-10(3)自發(fā)性(4)獨(dú)立性(5)穩(wěn)定性(6)可逆性(7)誘變性。通過(guò)人為施加誘變劑處理后突變率可大大提高,一般可提高10~105倍。第95頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月根據(jù)突變發(fā)生機(jī)理,突變可分為點(diǎn)突變和染色體畸變兩大類。根據(jù)突變發(fā)生過(guò)程是否受人為誘變劑影響可分為自發(fā)突變和誘發(fā)突變兩大類。第96頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(二)基因重組兩個(gè)不同性狀的個(gè)體細(xì)胞,其中一個(gè)細(xì)胞(供體細(xì)胞)的DNA與另一個(gè)細(xì)胞(受體細(xì)胞)的DNA融合,使基因重新排列,遺傳給后代,產(chǎn)生新品種或表達(dá)新的遺傳性狀,稱為基因重組。第97頁(yè),課件共116頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
在基因重組時(shí),不發(fā)生任何堿基對(duì)結(jié)構(gòu)上的變比。重組后的生物體表現(xiàn)出重組后的新的遺傳性狀。微生物中基因重組的形式很多。在真核微生物中,基因重組是通過(guò)二個(gè)配子相互融合的有性繁殖的過(guò)程中發(fā)生的,故稱為雜交。在原核微生物中通常只是部分遺傳物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和重組,如轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合等都是基因重組在細(xì)胞水平上
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