藥物分析第13章 抗生素類藥物的分析

第十三章抗生素類藥物的分析TheAnalysisofAntibioticdrugs一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（化學(xué)性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系）二、鑒別試驗(yàn)三、特殊雜質(zhì)檢查四、含量測(cè)定學(xué)習(xí)內(nèi)容

1.掌握β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類抗生素的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)；氨基糖苷類抗生素的化學(xué)鑒別法；三類抗生素的特殊雜質(zhì)檢查項(xiàng)目與方法；

2.熟悉三類藥物的含量測(cè)定方法；

3.了解抗生素類藥物的其他分析項(xiàng)目與方法。目的要求第一節(jié)概述抗生素的定義:

抗生素是細(xì)菌、放線菌和真菌等微生物的代謝產(chǎn)物，對(duì)各種病原微生物有強(qiáng)大的抑制或殺滅作用。抗生素的來源:1.生物合成（發(fā)酵）2.化學(xué)合成或半合成抗生素質(zhì)量的復(fù)雜性：

產(chǎn)品穩(wěn)定性差：分子結(jié)構(gòu)大多不穩(wěn)定，降解后療效下降、失效或增加毒副作用發(fā)酵液中雜質(zhì):

無機(jī)鹽、脂肪、各種蛋白質(zhì)、各種降解產(chǎn)物、色素、熱原、毒性物質(zhì)。

第一節(jié)概述增加:細(xì)菌內(nèi)毒素、熱原、降壓物質(zhì)、無菌。[檢查]

化學(xué)純度低：“三多”

活性組分易發(fā)生變異：菌株、發(fā)酵條件變化第一節(jié)概述含量測(cè)定方法（二）生物學(xué)方法（測(cè)定抗生素抑菌或殺菌的能力）優(yōu)點(diǎn)：1、與臨床效果一致；2、靈敏度高；3、干擾物質(zhì)少。缺點(diǎn)：1、操作繁瑣；2、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)；3、測(cè)定誤差大。（一）化學(xué)及物理化學(xué)方法（以理化方法測(cè)定主藥含量）優(yōu)點(diǎn)：1.準(zhǔn)確度高；2.簡(jiǎn)單、快速缺點(diǎn)：1.不一定代表生物效價(jià)；2.易受雜質(zhì)干擾第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)性質(zhì)：

1.酸性與溶解度能與無機(jī)堿或某些有機(jī)堿形成鹽；堿金屬鹽易溶于水，遇酸析出白色沉淀；有機(jī)堿鹽難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；

2.旋光性

3.紫外吸收

4.β-內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素不穩(wěn)定性因素四元環(huán)張力大酰胺鍵易水解水溶液不穩(wěn)定

干燥純凈穩(wěn)定

青霉素的降解反應(yīng)第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素性質(zhì)：

4.β-內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性1.

羥肟酸鐵反應(yīng)（β-內(nèi)酰胺類）（一）化學(xué)鑒別法★第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素二、鑒別試驗(yàn)

2.

茚三酮反應(yīng)

具有氨芐基結(jié)構(gòu)，一些取代基有α-氨基酸結(jié)構(gòu)，可與茚三酮反應(yīng)顯藍(lán)紫色。（一）化學(xué)鑒別法★第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素3.酚羥基的呈色反應(yīng)取代基上的酚羥基，可與三氯化鐵反應(yīng)呈色。4.鈉、鉀鹽的焰色反應(yīng)（二）色譜法（三）光譜法（一）聚合物的檢查第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素三、特殊雜質(zhì)檢查

中國(guó)藥典對(duì)頭孢他啶、頭孢曲松鈉、頭孢哌酮鈉、頭孢噻肟鈉等規(guī)定了各自聚合物的檢查。

Ch.P.采用分子排阻色譜法

填充劑：葡聚糖凝膠G-10第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素三、特殊雜質(zhì)檢查

（二）有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素三、特殊雜質(zhì)檢查

（三）殘留溶劑（四）吸光度青霉素鈉(鉀)測(cè)定波長(zhǎng)：280nm

要求A不得大于0.10在264nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，吸收度應(yīng)為0.80-0.88。（五）水分（穩(wěn)定性的影響因素）（六）結(jié)晶性（偏光顯微鏡、X粉末衍射法）（七）其它特殊雜質(zhì)四、含量測(cè)定（一）酸堿滴定法

1.原理利用青霉素或頭孢菌素分子β-內(nèi)酰胺環(huán)可被堿定量水解的性質(zhì)。

2.方法

1）水解前：將樣品溶液的pH調(diào)至對(duì)酚酞指示液顯粉紅色；

2）水解：加入定量過量的標(biāo)準(zhǔn)堿溶液，水浴加熱使水解；

3）剩余滴定：水解后，過量的堿用酸標(biāo)準(zhǔn)液回滴定（酚酞：由粉紅至無色）。第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素（一）酸堿滴定法

2.方法第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素

Ch.P.(2010)苯唑西林鈉：取本品約0.5g，精密稱定，加新沸過的、并用0.01mol/l氫氧化鈉溶液中和至酚酞指示液剛顯紅色的水20ml，使溶解，再用0.01mol/l氫氧化鈉溶液中和后，精密加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l）25ml，搖勻，置水浴上加熱20min，注意避免吸收空氣中的二氧化碳，冷卻后，加酚酞指示液1-2滴，用鹽酸滴定液（0.1mol/l）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l）相當(dāng)于40.14mg的C19H19N3O5S。3.討論

1）溶劑：消除水中酸性物質(zhì)的影響；

2）中和：消除能消耗堿的雜質(zhì)影響；將羧酸變成鈉鹽；

3）空白試驗(yàn)：消除水解過程中吸收二氧化碳對(duì)滴定結(jié)果的影響。（二）碘量法

1.原理利用青霉素或頭孢菌素分子不消耗碘，而其降解產(chǎn)物消耗碘的性質(zhì)，采用剩余碘量法測(cè)定，以標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法計(jì)算含量。第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素2.方法第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素

取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，精密稱取約0.12g，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置碘瓶中，加1mol/L氫氧化鈉溶液1ml放置20分鐘，再加1mol/L鹽酸溶液1ml與醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)5ml，精密加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml，密塞，搖勻，在20～25℃暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，繼續(xù)滴定并強(qiáng)力振搖，至藍(lán)色消失，消耗硫代硫酸鈉滴定液體積V；另精密量取供試品溶液5ml，置碘瓶中，加醋酸-醋酸鈉緩沖液（pH4.5）5ml，精密加入碘滴定液（0.01mol/L）15ml，密塞，搖勻，在暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，作為空白，消耗硫代硫酸鈉滴定液體積V0。同時(shí)用青霉素鈉對(duì)照品同法測(cè)定作對(duì)照（對(duì)照品消耗硫代硫酸鈉滴定液體積VR，對(duì)照品空白消耗硫代硫酸鈉滴定液體積VR0，算出供試品的含量。2.方法第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素V樣空V樣對(duì)照液+緩沖液+碘液+回滴+堿+酸+緩沖液+碘液+回滴V對(duì)空V對(duì)供試液+緩沖液+碘液+回滴+堿+酸+緩沖液+碘液+回滴空白試驗(yàn)：以未經(jīng)水解的樣品做空白測(cè)定I2Na2S2O3I-I2藍(lán)色：樣品中存在的降解產(chǎn)物消耗的、其他耗碘雜質(zhì)及碘的揮發(fā)消耗的碘粉色：樣品的降解產(chǎn)物消耗的碘黃色：剩余的與硫代硫酸鈉反應(yīng)的碘第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素空白樣品3.討論

1）溶液的pH4.5；

2）溫度：20-25℃；

3）放置時(shí)間：15-20min

第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素堿↑I2→IO3-+I-酸↑普魯卡因與碘在酸性條件下會(huì)產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀溫度＞38℃未水解的供試品亦消耗碘3.討論

4）空白試驗(yàn)與一般空白試驗(yàn)有何區(qū)別？目的：消除樣品中預(yù)先存在的降解產(chǎn)物、其它耗碘雜質(zhì)及碘揮發(fā)的影響。

5）對(duì)照試驗(yàn)?zāi)康模嚎上郎囟?、pH、操作、環(huán)境等條件的影響；使本法測(cè)定結(jié)果與微生物檢定法一致。

6）靈敏度高第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素

精密量取對(duì)照品溶液及供試品溶液各1ml，分別置干燥具塞試管中，各精密加無水乙醇9ml與氯化三苯四氮唑試液1ml，搖勻，各再精密加氫氧化四甲基銨試液1ml，搖勻，在25℃的暗處放置40~50min，在485nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得。4.計(jì)算

第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素V0、VR0分別為滴定供試品空白液和對(duì)照品空白液消耗的硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）的體積(ml)V、VR分別為滴定供試品和對(duì)照品消耗的硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）的體積(ml)mR、W、D分別為對(duì)照品的質(zhì)量、供試品取樣量(g)和稀釋倍數(shù)mR××DV0－VVR0－VRW含量%=×對(duì)照品%×100%mR××DV0－VVR0－VRW標(biāo)示量%=×平均裝量標(biāo)示量×100%×對(duì)照品%

精密稱取供試品0.1205g，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置碘瓶中，加1mol/L氫氧化鈉溶液1ml放置20分鐘，再加1mol/L鹽酸溶液1ml與醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)5ml，精密加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml，密塞，搖勻，在20～25℃暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，繼續(xù)滴定并強(qiáng)力振搖，至藍(lán)色消失；另精密量取供試品溶液5ml，置碘瓶中，加醋酸-醋酸鈉緩沖液（pH4.5）5ml，精密加入碘滴定液（0.01mol/L）15ml，密塞，搖勻，在暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，作為空白。同時(shí)用青霉素鈉對(duì)照品同法測(cè)定作對(duì)照，算出供試品的含量。已知對(duì)照品（97.5%）稱重0.0819g；樣品和空白消耗的硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/l）分別為8.05ml和16.23ml，對(duì)照品和空白消耗的硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/l）分別為8.15ml和16.45ml，計(jì)算本品的百分含量。普魯卡因青霉素的含量測(cè)定：（三）汞量法

1.原理利用青霉素分子不與汞反應(yīng)，而其堿性水解產(chǎn)物如青霉噻唑酸及青霉胺在一定條件下能與二價(jià)過渡金屬離子Hg2+形成穩(wěn)定的配位化合物。第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素2.方法第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素

取本品約50mg，精密稱定，加水5ml溶解后，加1mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置15分鐘，加1mol/L硝酸溶液5ml，醋酸鹽緩沖液(pH4.6)20ml及水20ml，搖勻，照電位滴定法(附錄ⅦA)，用鉑電極為指示電極，汞-硫酸亞汞電極為參比電極，在35～40℃，用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)緩慢滴定，（控制滴定過程約為15分鐘），不計(jì)第一個(gè)等當(dāng)點(diǎn)，計(jì)算第二個(gè)等當(dāng)點(diǎn)時(shí)消耗滴定液的量。每1ml硝酸汞滴定液(0.02mol/L)相當(dāng)于7.128mg的總青霉素(按C16H17N2NaO4S計(jì)算)。另取本品約0.5g，精密稱定，加水與上述醋酸鹽緩沖液各25ml，振搖使完全溶解，在室溫下，立即用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)滴定，終點(diǎn)判斷方法同上.每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相當(dāng)于7.128mg的降解物（按C16H17N2NaO4S計(jì)算）?？偳嗝顾氐暮?%)與降解物的含量(%)之差值即為青霉素的含量。3.討論第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素（1）以第二次滴定突躍為終點(diǎn)（電位法指示終點(diǎn)），反應(yīng)摩爾比1:1（2）水解必須完全水解不完全，將使測(cè)定結(jié)果偏低（3）空白試驗(yàn)消除供試品可能存在降解產(chǎn)物干擾（4）優(yōu)點(diǎn)不需標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照，汞鹽滴定液用EDTA標(biāo)定即可。

4.計(jì)算

青霉素經(jīng)堿水解，生成青霉噻唑酸，并進(jìn)一步降解生成青霉胺，此時(shí)即有巰基（-SH）產(chǎn)生。青霉胺與硝酸汞發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)，2分子青霉胺與1分子汞離子的比例絡(luò)合，發(fā)生第一次滴定突躍，但突躍范圍很小，變化比較平緩，不宜用做滴定終點(diǎn)；繼續(xù)用硝酸汞滴定時(shí)，青霉胺分子與汞離子全部按1:1的比例絡(luò)合，生成穩(wěn)定的絡(luò)合物——青霉胺絡(luò)汞，發(fā)生第二次滴定突躍。其突躍范圍較大，變化較急劇，宜用于確定滴定終點(diǎn)。第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素（四）紫外分光光度法（硫醇汞鹽法）

1.原理利用青霉素類的降解產(chǎn)物青霉烯酸在320nm-360nm處有強(qiáng)烈吸收的性質(zhì)。此水解產(chǎn)物不穩(wěn)定，可加入銅離子或汞離子等與其生成穩(wěn)定的配位化合物，在324nm-345nm處有最大吸收。第二節(jié)β-內(nèi)酰胺類抗生素（五）HPLC

第二節(jié)氨基糖苷類抗生素的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)性質(zhì)：

1.堿性與水溶性能與礦酸或有機(jī)酸形成鹽；

2.水解性鏈霉素在酸性或堿性條件下可水解

3.紫外吸收鏈霉素有紫外吸收4.旋光性5.穩(wěn)定性第二節(jié)氨基糖苷類抗生素的分析二、鑒別試驗(yàn)1.茚三酮反應(yīng)

具有羥基胺類和α-氨基酸的性質(zhì)，可與茚三酮縮合成藍(lán)紫色化合物。第二節(jié)氨基糖苷類抗生素的分析二、鑒別試驗(yàn)2.Molisch反應(yīng)

在酸性條件下水解、脫水，生成糠醛或羥甲基糠醛，這些產(chǎn)物遇α-萘酚或蒽酮呈色。第二節(jié)氨基糖苷類抗生素的分析二、鑒別試驗(yàn)3.N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)

水解產(chǎn)生的葡萄糖胺衍生物在堿性溶液中與乙酰丙酮縮合成吡咯衍生物（Ⅰ），與對(duì)二甲氨基苯甲醛的酸性醇溶液反應(yīng)，生成櫻桃紅色縮合物（Ⅱ）。第二節(jié)氨基糖苷類抗生素的分析二、鑒別試驗(yàn)4.麥芽酚（Maltol）反應(yīng)☆在堿性溶液中，鏈霉素經(jīng)分子重排使環(huán)擴(kuò)大形成六元環(huán)，消除N-甲基葡萄糖胺，再消除鏈霉胍生成麥芽酚，麥芽酚與高鐵離子在微酸性溶液中形成紫紅色配位化合物。鏈霉素的特征反應(yīng)。第二節(jié)氨基糖苷類抗生素的分析二、鑒別試驗(yàn)5.坂口（Sakaguchi）反應(yīng)☆

在堿性溶液中，鏈霉素水解生成鏈霉胍。鏈霉胍和α-萘酚分別同次溴酸鈉反應(yīng)，其各自產(chǎn)物再相互作用生成橙紅色化合物。鏈霉素的水解產(chǎn)物鏈霉胍的特有反應(yīng)。6.硫酸鹽反應(yīng)第二節(jié)氨基糖苷類抗生素的分析三、特殊雜質(zhì)檢查1.有關(guān)物質(zhì)（HPLC）2.硫酸鹽測(cè)定（EDTA滴定法、HPLC）3.組分測(cè)定（HPLC（紫外檢測(cè)器檢測(cè)、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)、柱前衍生化））四、含量測(cè)定（微生物鑒定法、HPLC）第二節(jié)氨基糖苷類抗生素的分析1、霧化：液體流動(dòng)相在載氣壓力的作用下在霧化室內(nèi)轉(zhuǎn)變成細(xì)小的液滴，從而使溶劑更易于蒸發(fā)。液滴的大小和均勻性是保證檢測(cè)器的靈敏度和重復(fù)性的重要因素。2、蒸發(fā)：載氣把液滴從霧化室運(yùn)送到漂移管進(jìn)行蒸發(fā)。在漂移管中，溶劑被除去，留下微?；蚣?nèi)苜|(zhì)的小滴。3、檢測(cè)：光源采用激光，溶質(zhì)顆粒從漂移管出來后進(jìn)入光檢測(cè)池，并穿過激光光束。被溶質(zhì)顆粒散射的光通過光電倍增管進(jìn)行收集。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器第三節(jié)四環(huán)素類抗生素的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)性質(zhì)：

1.酸堿性與溶解性

2.旋光性

3.紫外吸收和熒光性質(zhì)

4.與金屬離子形成配位化合物（酚羥基、烯醇基）第三節(jié)四環(huán)素類抗生素的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)性質(zhì)：

5.穩(wěn)定性

四環(huán)素類抗生素在干燥狀態(tài)下較穩(wěn)定，對(duì)各種氧化劑、酸、堿均不穩(wěn)定，易被破壞變色，導(dǎo)致活性降低、毒副作用增加。

1）差向異構(gòu)化性質(zhì)

在弱酸性（pH2-6）溶液中A環(huán)C4構(gòu)型發(fā)生改變，形成差向四環(huán)素類。反應(yīng)可逆。四環(huán)素、金霉素很容易差向異構(gòu)化，產(chǎn)生差向四環(huán)素和差向金霉素，抗菌活性極弱或完全消失。第三節(jié)四環(huán)素類抗生素的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)性質(zhì)：

5.穩(wěn)定性

2）降解性質(zhì)

酸性降解：在酸性（pH＜2）條件下，特別是加熱情況下，四環(huán)素類抗生素C6上的醇羥基和C5a上的氫發(fā)生反式消除生成脫水四環(huán)素（ATC）。第三節(jié)四環(huán)素類抗生素的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)性質(zhì)：

5.穩(wěn)定性

2）降解性質(zhì)

堿性降解：在堿性溶液中，由于氫氧離子的作用，C環(huán)破裂，生成無活性的具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的異構(gòu)體（異四環(huán)素）。第三節(jié)四環(huán)素類抗生素的分析二、鑒別試驗(yàn)

1.色譜法

2.光譜法

3.化學(xué)鑒別法

1）硫酸顯色反應(yīng)

2）三氯化鐵顯色反應(yīng)

3）氯化物的鑒別反應(yīng)第三節(jié)四環(huán)素類抗生素的分析三、特殊雜質(zhì)檢查

1.有關(guān)物質(zhì)（HPLC）

異構(gòu)體雜質(zhì)、降解雜質(zhì)

2.雜質(zhì)吸收度

四、含量測(cè)定（HPLC）1．下列哪個(gè)藥物會(huì)發(fā)生羥肟酸鐵反應(yīng)（）

A.青霉素B.慶大霉素C.紅霉素D.鏈霉素2．屬于

-內(nèi)酰胺類的抗生素藥物有（）

A.青霉素B.紅霉素C.頭孢菌素

D.慶大霉素E.四環(huán)素3．能和茚三酮發(fā)生呈色反應(yīng)的物質(zhì)有（）

A．鏈霉素B．慶大霉素C．土霉素

D．氨基酸E．苯巴比妥練習(xí)4.青霉素類藥物可用下面哪些方法測(cè)定（）

A.三氯化鐵比色法B.汞量法C.碘量法

D.硫醇汞鹽法E.酸性染料比色法5．四環(huán)素在酸性條件下的降解產(chǎn)物是（）

A.差向四環(huán)素B.脫水四環(huán)素C.異四環(huán)素

D.去甲四環(huán)素E.去甲氧四環(huán)素練習(xí)A.茚三酮反應(yīng)B.麥芽酚反應(yīng)C.坂口反應(yīng)D.FeC13反應(yīng)E.羥肟酸鐵反應(yīng)6．頭孢唑林鈉（）7．鏈霉素（）8．慶大霉素（）9．青霉素（）練習(xí)抗生素類藥物鑒別實(shí)驗(yàn)總結(jié)β-內(nèi)酰胺類羥肟酸鐵反應(yīng)三氯化鐵反應(yīng)茚三酮反應(yīng)氨基糖苷類Molisch反應(yīng)N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)茚三酮反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)坂口反應(yīng)四環(huán)素類硫酸顯色三氯化鐵反應(yīng)1、巴比妥類藥物在吡啶溶液中與銅離子作用，生成配位化合物，顯綠色的藥物是（

）A.苯巴比妥B.異戊巴比妥C.司可巴比妥D.巴比妥E.硫噴妥鈉2、中國(guó)藥典用碘量法測(cè)定加有亞硫酸氫鈉的維生素C注射液。在滴定前應(yīng)加入（

）A.丙酮B.乙醇C.草酸D.鹽酸E.氯化鈉3、兩步滴定法測(cè)定阿司匹林片是因?yàn)椋?/p>

）

A.片劑中有其他酸性物質(zhì)B.片劑中有其他堿性物質(zhì)C.需用堿定量水解D.阿司匹林具有酸堿兩性E.使滴定終點(diǎn)明顯4、用銀量法測(cè)定巴比妥類藥物的含量時(shí)，指示終點(diǎn)的原理是（

）

過量的滴定劑使巴比妥類藥物形成銀鹽沉淀

B.過量的滴定劑使一銀鹽渾濁恰好溶解C.過量的滴定劑與巴比妥類藥物的一銀鹽作用形成二銀鹽渾濁

D.滴定至所有的巴比妥類藥物全部成為二銀鹽沉淀E.過量的滴定劑使熒光黃指示劑變色5、下列哪個(gè)藥物能使溴試液褪色？（

）A.異戊巴比妥B.司可巴比妥C.苯巴比妥D.巴比妥酸E.環(huán)己巴比妥6、用雙相滴定法測(cè)定含量的藥物為（

）

A.阿司匹林B.對(duì)乙酰氨基酚C.水楊酸D.苯甲酸E.苯甲酸鈉7、異煙肼加氨制硝酸銀試液即發(fā)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上形成銀鏡。這是由于其分子結(jié)構(gòu)中有（）A.酰肼基B.吡啶環(huán)C.叔胺氮D.共軛系統(tǒng)E.酰胺基8、鑒別水楊酸及其鹽類，最常用的試劑是（）A.碘化鉀B.碘化汞鉀C.三氯化鐵D.硫酸亞鐵E.亞鐵氫化鉀9、亞硝酸鈉滴定指示終點(diǎn)的方法有若干，我國(guó)藥典采用的方法為（）A.電位滴定法B.自身指示劑法C.內(nèi)指示劑法D.比色法E.永停滴定法10、非水溶液滴定法直接測(cè)定硫酸奎寧含量時(shí)，反應(yīng)摩爾比為（）A.1：1B.1：2C.1：3D.1：4E.1：511、茚三酮試劑與下列藥物顯藍(lán)紫色的是（）

A.對(duì)乙酰氨基酚B.慶大霉素C.丁卡因D.地西泮E.硝西泮12、酸性染料比色法中，實(shí)驗(yàn)受許多因素的影響，下列哪一項(xiàng)是最重要的（）A.酸性染料的濃度B.水相的pH值C.水分的影響D.有機(jī)溶劑的影響E.關(guān)于陰離子的選擇13、能發(fā)生硫色素特征反應(yīng)的藥物