標準解讀

《GB/T 43163-2023 苜蓿黃萎病菌溯源檢測方法》是一項國家標準，主要針對苜蓿黃萎病菌（Verticillium albo-atrum 和 Verticillium dahliae）的檢測與追溯。該標準適用于農業(yè)領域中對苜蓿及其制品進行黃萎病菌污染情況的監(jiān)測與控制，通過科學的方法和技術手段來識別、追蹤這些病原體的存在。

在內容上，本標準詳細規(guī)定了從樣品采集到實驗室分析的一系列操作流程。首先，在樣品準備階段，明確了不同類型樣本（如植物組織、土壤等）的具體采集要求；其次，對于樣品處理部分，則介紹了如何正確地保存和運輸采集到的材料以確保其完整性不受破壞。此外，還特別強調了實驗室安全措施的重要性，包括個人防護裝備的選擇使用以及廢棄物處置辦法等。

關于檢測方法，《GB/T 43163-2023》推薦了幾種常用的分子生物學技術，比如PCR擴增結合凝膠電泳法、實時熒光定量PCR(qPCR)等，用于特異性地識別目標DNA序列。同時，也提供了相應的引物設計原則及反應條件設置指南，幫助研究人員根據(jù)實際情況調整實驗參數(shù)以獲得最佳結果。另外，還涉及到了數(shù)據(jù)分析環(huán)節(jié)，指導用戶如何準確解讀實驗數(shù)據(jù)，并據(jù)此判斷樣品是否受到苜蓿黃萎病菌感染。


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....

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  • 現(xiàn)行
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  • 2023-09-07 頒布
  • 2024-04-01 實施
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文檔簡介

ICS6502020

CCSB.16.

中華人民共和國國家標準

GB/T43163—2023

苜蓿黃萎病菌溯源檢測方法

TraceabilitydetectionofVerticilliumalbo-atrumReinkeetBerthold

2023-09-07發(fā)布2024-04-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

GB/T43163—2023

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本文件起草單位中華人民共和國深圳海關深圳市檢驗檢疫科學研究院

:、。

本文件主要起草人高瑞芳章桂明王穎黃河清向才玉

:、、、、。

Ⅰ

GB/T43163—2023

苜蓿黃萎病菌溯源檢測方法

1范圍

本文件描述了應用基因片段和生物信息學分析方法對苜蓿黃萎病菌進行溯源檢測的方法

。

本文件適用于苜蓿黃萎病菌相關寄主植物材料中攜帶的苜蓿黃萎病菌的溯源檢測

。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件

。

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

。

31

.

鄰接法neighbor-joining

基于最小演化準則的迭代聚類方法

。

4方法原理

苜蓿黃萎病菌拉丁名Verticilliumalboatrum基本信息見附錄溯源是利

,-ReinkeetBerthold,A。

用對物種有進化和溯源價值的基因片段將核酸序列信息與來源地寄主等來源信息進行相關性歸類

、。

檢測過程是應用生物信息學的分析手段篩選有效區(qū)分種內差異并且有效歸類的基因片段或分子標

記獲得這些基因片段或分子標記的核酸序列應用統(tǒng)計學手段完成核酸序列與來源地寄主信息的主

,,、

成分分析完成不同來源地寄主個體的群體分子系統(tǒng)進化關系和群體結構分析基于基因序列的相似

,、,

度和重復率等構建網(wǎng)絡進化圖

,。

5儀器和試劑

51儀器與試驗用具

.

儀器恒溫恒濕培養(yǎng)箱超凈工作臺低溫冰箱擴增儀冷凍離心機核酸蛋白分析儀

:、、-20℃、PCR、、、

電泳儀凝膠成像系統(tǒng)高壓滅菌鍋

、、。

試驗用具解剖刀離心管鑷子移液器凍存管培養(yǎng)皿酒精燈接種針

:、、、、、、、。

52試劑

.

試劑酒精十六烷基三甲基溴化銨Taq酶Taq緩沖液標

:70%、(CTAB)、PCR、PCR、dNTP、DNA

記無菌超純水

、。

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基去皮土豆切成小方塊加入無菌水煮沸

(PDA):200g,1000mL,

四層紗布過濾得到濾液濾液中加入葡萄糖瓊脂粉加熱溶解后將溶液定容至

15min,,18g

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