海洋放線菌的培養(yǎng)鑒定與分離方法

海洋放線菌的培育鑒定與分別方法一、放線菌的分布子如有機質(zhì)、水分、溫度、通氣狀況等也影響其數(shù)量。它適宜在含水量較低的土壤內(nèi)生長。而廄肥和堆肥中僅限于高溫放線菌活動腥味。河流和湖泊中，放線菌數(shù)量不多，大多為小單孢菌、游動放線菌和孢囊鏈霉菌，還有少數(shù)鏈植物、食品甚至衣物等外表均有大量的放線菌存在，由于它們耐枯燥，常隨塵埃、水滴，借助風(fēng)力飛入大氣所致。霉味。安康動物，特別是反芻動物的腸道內(nèi)有著大量的放線菌，它們可有是腸道內(nèi)定居的微生物，生性放線菌存在。了解放線菌的分布，對于進一步開發(fā)放線菌資源，覺察和篩選的抗生素，無疑是很重要的。二、放線菌的形態(tài)與構(gòu)造1這是諾卡氏菌與結(jié)核桿菌的區(qū)分之一。子絲三種。(一)養(yǎng)分菌絲又叫初級絲體或一級菌絲體，匍匐生長于培育基內(nèi)，主要生理功能是吸取養(yǎng)分物，故亦稱基內(nèi)菌絲。養(yǎng)分菌絲一般無隔膜，即使有也格外少；直徑0.2-0.8微米，但長度差異100600微米以上；有的無色素，有的產(chǎn)生黃、橙、紅、紫、藍、綠、褐、黑等不同色素，假設(shè)是水溶性的色素，還可透入培育基內(nèi)，將培育基染上相應(yīng)的顏色，假設(shè)是非水溶性(或脂溶性)色素，則使菌落噸呈現(xiàn)相應(yīng)的顏色。因此，色素是鑒定菌種的重要依據(jù)。(二)氣生菌絲又稱二級菌絲體。養(yǎng)分菌絲體發(fā)育到肯定時期，長出培育基外并伸向空間的較深，直徑比養(yǎng)分菌絲粗，約1-1.4微米，其長度則更懸殊。直形或彎曲而分枝，有的產(chǎn)生色素。(三)孢子絲當(dāng)氣生菌絲體發(fā)育到肯定程度，其上分化出可形成孢子的菌絲即孢子絲，又名產(chǎn)孢絲或生殖菌絲。孢子絲的外形和在氣生菌絲上的排列方式，隨菌種而異。數(shù)目、疏密程度、旋轉(zhuǎn)方向等都是種的特征。螺旋數(shù)目通常為5-10轉(zhuǎn)，也有少至1個多至20個的；旋轉(zhuǎn)方向多為逆時針，少數(shù)種是順時針的。孢子絲的排列方式，有的交替著生，3級輪生。上述特征，皆可作為菌種鑒定的依據(jù)。孢子絲生長到肯定階段可形成孢子。在光學(xué)顯微鏡下，孢子呈球形、橢圓形、桿狀、瓜子狀等；在電子顯微鏡下還可看到孢子的外表構(gòu)造，有的光滑、有的帶小疣、有的生刺(不同種的孢子，刺的粗瘦長短不同)或有毛發(fā)狀物(圖2-63)。孢子外表構(gòu)造也是放線菌種鑒定的重要絲形成的孢子外表光滑；而螺旋狀孢子絲形成的孢子，有的光滑，有的帶刺或毛；白色、黃色、淡綠、灰黃、淡紫色的孢子外表一般都是光滑型的，粉紅色孢子只有極少數(shù)帶刺，黑色孢子絕大局部都帶刺和毛發(fā)。由于孢子含有不同色素，成熟的孢子堆也表現(xiàn)出特定的顏色，而且在肯定條件下比較穩(wěn)定，要依據(jù)。由于，即使從一個孢子子絲分化出來的孢子，外形和大小可能也有差異。1-3個芽管；芽管伸長，長出分枝，分枝越來越多形成養(yǎng)分菌絲體；定程度，在它的上面形成孢子絲；孢子絲以肯定方式形成孢子。如此周而復(fù)始，得以生存進展。三、放線菌和菌落特征具輻射狀菌絲?？偟奶卣鹘橛诿咕c細菌之間，因種類不同可分為兩類：絨狀或堅實、枯燥、多皺，菌落較小而不集中；養(yǎng)分菌絲長在培育基內(nèi)，所以菌落與培育基有色素，使菌落有面或反面呈現(xiàn)不同顏色。質(zhì)狀，用針挑起則粉碎。瓶底而不使培育基混濁；如以震蕩培育，常形成由短的菌絲體所構(gòu)成的球狀顆粒。四、放線菌的生殖方式放線菌主要通過形成無性孢子的方式進展生殖，也可借菌體為裂片段生殖。分生孢子。孢子的產(chǎn)生有以下幾種方式。(圖2-65)。多數(shù)放線菌按此方式形成孢子，如鏈霉菌孢子的形成多屬此類型。對些種方式現(xiàn)已提出了異議。(圖2-66)。一般呈圓柱形或桿狀，體積根本相等，大小相像，約0.7-0.8×1-2.5微米。諾卡氏菌屬按此方式形成孢子。有些放線菌首先在菌絲上形成孢子囊(sporangium)，在孢子囊內(nèi)形成孢子，孢子囊成熟后，裂開形成，有的由孢子囊柄頂端膨大形成。孢囊孢子形成過程見圖2-67。(5-10微米)的特別分枝，分枝還可再分枝杈，每個枝杈頂端形成一個球形、橢圓形或長圓形孢了聚攏在一起，很象一串葡萄(2-68)，這些孢子亦稱分生孢子。某些放線菌間或也產(chǎn)生厚壁孢子。放線菌孢子具有較是的耐枯燥力量，但不耐高溫，60-65℃處理10-15分種即失去生活力量。酵生產(chǎn)抗生素時，放線菌就以此方式大量生殖。假設(shè)靜置培育，培育物外表往往形成菌膜，膜上也可產(chǎn)生出孢子。五、放線菌的生理它們能利用不同的碳水化合物，包括糖、淀、粉有機酸、纖維素、半纖維素等作為能源。最好的碳源是葡萄糖、在麥芽糖、糊精、淀粉和甘油，而蔗糖、木糖、棉子糖、醇和有機酸次之。有機酸中以醋酸、乳酸、檸檬酸、琥珀酸和蘋果酸易于利用，而草酸、酒石酸和馬尿酸較難利用。某些放線菌還可利用幾丁質(zhì)，碳氫化合物、丹寧以至橡膠。氮素養(yǎng)分方面，以蛋白質(zhì)、蛋白有胨以及某些氨基酸最適，硝酸鹽銨鹽和素次之。除諾卡氏菌外，絕大多數(shù)放線菌都能利用酷蛋白，并能液化明膠。和其他生物一樣，放線菌的生長一般都需要K、Mg、Fe、CuCaMgK對于菌絲鏈霉菌產(chǎn)生霉素時必需Zn元素，而Mg、Fe、Cu、AlMn和等不起作用。Co是放線菌產(chǎn)生維生素B12的必需元素，當(dāng)培育基中含12ppmCo時，可提高灰色鏈霉菌的維生素產(chǎn)量三倍，假設(shè)培育基中Co20-50ppm時則產(chǎn)生毒害作用。另外，Co還有促進孢子形成的功能。為23-37℃，高溫放線菌的生長溫度范圍在50-65℃，也有很多菌種在20-23℃以下仍生長良CaCl2和H2SO4的枯燥器內(nèi)能存活一年半左右。效益，查找和開發(fā)放線菌資源無疑是很重要的。六、放線菌的代表屬(一)鏈霉菌屬(Streptomyces)共約1，000多種，其中包括和很多不同的種別和變種。它們具有發(fā)育良好的菌絲體，菌絲體分枝，無隔膜，直徑約0.4-1微米，長短不一，多核。菌絲體異，這是鏈霉菌屬分種的主要識別性狀之一。究說明，抗生素主要由放線菌產(chǎn)生，而其中90%又由鏈霉菌產(chǎn)生，著名的、常用的抗生素如鏈霉菌的鏈霉菌爭論很廣，但對這些生物的生態(tài)學(xué)相互關(guān)系了解甚少，這是今后應(yīng)加強的。和篩選的抗生素。鏈霉菌不僅種類繁多，而且其中50%以上的都能產(chǎn)生抗生素。中國科學(xué)院北京微生物所依據(jù)氣候菌絲的顏色(孢子堆的顏色)；基內(nèi)菌絲的顏色、可溶性色素、孢子絲的外形、孢子的外形和外表構(gòu)造等特征，將鏈霉菌分為14個種組，每個種組又包括很多不同的種。(二)諾卡氏菌屬(Nocardia)根或不彎曲，具有長菌絲。這個屬的特點是在培育154天內(nèi)，菌絲體產(chǎn)生橫隔膜，分枝的菌絲體突然全部斷裂成長短近于全都的桿狀或球狀體或帶杈的桿狀體(圖2-69)—子實體或孢子絲。孢子絲直形、個別種呈鉤狀或螺旋，具橫隔膜。以橫隔分裂形成孢子，孢子桿狀、柱形兩端截平或橢圓形等。菌落外貌與構(gòu)造多樣，一般比鏈霉菌菌落小，外表坎坷多皺，致密枯燥，一觸即碎，或者為面團；有的種菌落平滑或凸起，無光或發(fā)亮呈水浸狀。合物、纖維素等。10030多種抗生素。如對結(jié)核分枝桿菌型霉素，對革蘭氏陽性細菌有作用的瑞斯托菌素等。另外，有此諾卡氏菌用于石油脫蠟、烴類發(fā)酵以及污水處理中分解腈類化合物。(三)放線菌屬(Actinomyces)放線菌屬多為致病菌，只有養(yǎng)分菌絲，直徑小于1微米，有橫隔，可斷裂成“V“形或“Y“形體。無氣生菌絲，也不形成孢。一般為厭氣菌或兼性厭氣菌。起后顎骨腫瘤和肺部感染。它們的生長需要較豐富的養(yǎng)分，通常在培育基中加放血清或心、腦浸汁等。(四)小單孢菌屬(Micromonospora)菌絲體纖細，直徑0.3-06微米，無橫隔膜、不斷裂、菌絲體侵入培育基內(nèi)，不形成氣生菌絲。只在菌絲上長出很多分枝小梗，頂端著生一個孢子。菌落比鏈霉菌小得多，一般2-3毫米，通常橙黃色，也有深褐、黑色、藍色者；菌落外表掩蓋在土壤或湖底泥土中，堆肥的廄肥中也有不少。此屬約30多種，也是產(chǎn)抗生素較多的一個共30B12，應(yīng)予重視。(五)鏈孢囊菌屬(Streptosporangium)主要特點是能形成孢囊和孢囊孢子。其形成過程參見圖2-67。有時還可形成螺旋孢子絲，成熟后分裂為分生孢子。此屬菌的養(yǎng)分菌體分枝很多，橫隔稀有，直徑0.5-1.2微米，氣生菌絲體成叢、散生或同心環(huán)排列。此屬菌約15種以上，其中(polymycin)，可抑制革素