醫(yī)院檢驗科檢驗工作標準技術操作規(guī)章

!-!-醫(yī)院檢驗科檢驗技術操作規(guī)程目錄第一節(jié)全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程第四節(jié)半自動生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié)血常規(guī)檢驗操作規(guī)程第六節(jié)尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程第七節(jié)肝功能檢驗操作規(guī)程第八節(jié)腎功能檢驗操作規(guī)程第九節(jié)血脂檢驗操作規(guī)程第十節(jié)血液葡萄糖測定技術操作規(guī)程第十一節(jié)凝血四項檢驗操作規(guī)程第十二節(jié)AB0血型正、反血型鑒定技術操作規(guī)程第一節(jié)全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準備開機前的檢查、準備在開啟分析儀電源之前，操作者須按以下要求進行檢查:檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足，有無過期;試劑管路是否彎折，連接是否可靠。電源線是否正確連接。廢液桶是否清空。UPS電是否足夠，打印紙安裝是否正確，是否足夠。確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。.開機打開分析儀后面的電源開關,電源指示燈亮，屏幕上顯示“Initializing…”.分析儀進行初始化，整個初始化過程持續(xù)約4?7分鐘。初始化過程結束后，系統(tǒng)自動進入“計數(shù)”界面。動物類型選擇按［菜單］鍵，移動光標，選擇“動物”，按［確認］進入“動物”界面。操作者根據測量的動物類型，選擇需要分析的動物類型。按［菜單］鍵，選擇“計數(shù)”，進入“計數(shù)”界面。再按［模式］鍵，將當前模式設置為“全血”模式。確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“全血”。將準備好的全血樣本放到采樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。按計數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。采樣針自動吸取13ul的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。分析完成后，按［F4］鍵進入“樣本信息編輯”界面。按［F9］鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按［F8］鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換，輸入樣本信息，輸入完成后，點擊“確認”，保存輸入的內容并返回到“計數(shù)”界面。按［打印］鍵打印樣本分析報告。按照此操作過程進行其余樣本的分析。2.2預稀釋樣本分析按［菜單］鍵，選擇“計數(shù)”，進入“計數(shù)”界面。再按［模式］鍵，將當前模式設置為“預稀釋”模式。按［稀釋］鍵，屏幕彈出“加稀釋液”對話框，取一個干凈的樣本杯放在采樣針下，按計數(shù)鍵，微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中，避免產生氣泡或濺出。加完稀釋液后，按［確認］鍵，“加稀釋液”對話框關閉，分析儀自動清洗采樣針。采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“預稀釋”。將準備好的預稀釋樣本放到采樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。按計數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。采樣針自動吸取0.7ml的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。分析完成后，按［F4］鍵進入“樣本信息編輯”界面。按［F9］鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按［F8］鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換，輸入樣本信息，輸入完成后，點擊“確認”，保存輸入的內容并返回到“計數(shù)”界面。按［打?。萱I打印樣本分析報告。按照此操作過程進行其余樣本的分析。3、樣品分析結束后按［菜單］鍵，彈出系統(tǒng)菜單，選擇“關機”。界面彈出“關機”對話框，點擊“確認”進入關機界面。將E-Z清洗液放到采樣針下，按計數(shù)鍵，采樣針將自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。按照界面提示信息，將E-Z清洗液放到采樣針下，按計數(shù)鍵，采樣針將再次自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。執(zhí)行完成后，界面提示“請關閉電源”是，關閉分析儀的電源開關。關閉電源后檢查分析儀是否有滲漏，并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程本測試儀是一項精密儀器，為了更好的維護和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連，接通電源，先打開電腦，再打開分析儀；儀器啟動，風扇轉動，推進器移動，屏幕顯示“系統(tǒng)正在測試……”，此時系統(tǒng)正在自檢，顯示屏顯示主菜單，工作臺檢條區(qū)有紅色光交替閃爍，用戶可以開始測試點擊電腦桌面尿液分析軟件；將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出，將試紙條的側邊沿尿樣容器的管壁刮去多余尿液；將蘸有尿液的試紙平放在工作臺的檢條區(qū)，確保試紙同工作臺前壁接觸；儀器檢測到試紙存在后，推進器將試紙推到測試區(qū)進行測試；當推進器退回原位，放下一條試紙……，這樣實現(xiàn)連續(xù)測試；當工作臺上所有的試紙條測試完畢，打印結果輸出結束后，按菜單鍵進入儀器設置，將電源開關撥到“斷（。）”位置，關閉儀器電源。二、儀器維護不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器；不要用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機溶劑擦拭儀器；不要用水清洗液晶屏，不要用任何會擦傷工作臺和白基準的物質擦拭工作臺；不要用任何溶劑清潔白基準，如果白基準有明顯劃痕或損壞，請與供應商聯(lián)系；用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器，保持儀器清潔；用柔軟、無磨損的布擦拭液晶屏；為使儀器正常運行并提供準確的測試結果，必須定期從儀器中取下推進器、工作臺、步進板、用清水沖洗，用軟布依次擦干保持工作臺的清潔。三、注意事項測試時不要將儀器放置在陽光直射的地方,以免影響測試精度；請在測試前核對尿液分析試紙型號，避免因使用的尿液分析試紙型號不正確而導致測試結果錯誤；請勿使用過有效期或變質的尿液分析試紙；尿樣本中血的濃度高時，可影響測試的準確性，儀器能夠識別出高濃度血尿并打印出“結果無效”的提示；必須在推進器動作前，將待測試紙條放好；在放置試紙條時應確保試紙條前端接觸工作臺前壁；如果儀器測試頭下發(fā)生故障導致紙條運行受阻。關掉儀器，拉出工作臺，取出受阻試紙條后，重新安裝工作臺。開機自檢后，對未得出結果的樣本重測。第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程1、儀器的常規(guī)操作打開電源開關前的檢查。檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過低，請用蒸餾水或去離子水將罐充滿。清空廢液瓶。管道連接檢查各種管線的連接。確保沒有管子脫落或扭結，電源線被安全的插入交流插座。確保打印機中有足夠的紙張以供打印當天所需處理的所有樣本結果。補充反應杯丟棄用過的反應杯，加入適量的干凈的反應杯。打開電源開機順序：打印機f壓力單元f電源單元和主單元（右側）。打開電源后，儀器自動進入自檢。將病人樣本，質控與試劑分別按要求準備就緒，進入分析過程：試劑準備fSetReagentf輸入確認試劑體積f補充反應杯f安放樣本架樣本分析:WorkListfIDNo.Entryf輸入樣本號fENTERf選擇所需檢測的項目（一變?yōu)椤＃?確認所有的設置結束后fENTERf按屏幕右上方“Start”鍵，執(zhí)行分析。分析完畢,儀器進入準備狀態(tài)。關機前的工作每日清潔所有樣本針和試劑針：在主菜單屏上按下【Rinseprobe】鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【Excute】鍵。關機關閉電源。2.儀器保養(yǎng)每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做完試驗都必須清洗樣品針，主要是預防堵針，執(zhí)行[RinseProbe]f[Excute]清空垃圾箱清空廢液查看儀器后面防逆流瓶TrapChamber有無水，防止因為有水而導致真空泵不能抽真空在洗液瓶中注蒸餾水，最高不要超過上面的凹槽，防止因水過滿，工作時水回流到壓力泵和壓力傳感器上導致人為破壞。每周保養(yǎng)做一次管路清潔，執(zhí)行[SpecialOperate]f[Rinse&Prepare]清潔儀器每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶內部，清洗洗液瓶出水管上的過濾網一次。每三或六個月保養(yǎng)清潔傳動滑軌（X軸、Y軸）并上潤滑油。防止因積塵而使樣品針運行不到位，向下扎錯位置造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié)半自動生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】.開機之前檢查電源線是否連接無誤，電源要求接地良好;連接打印機電源線，接通打印機電源開關;將廢液管插入廢液容器內;接通顯示器開關及主機背部電源開關。.開機f自檢后f鍵入Enter,確定已設定測試參數(shù)f鍵入￡他。口進入編制工作表f在設置欄，開啟聯(lián)機打印^儀器預熱20分鐘后，調用已設定測試項目進行樣品測定^打印結果f清洗儀器f關機。.吸液口由不銹鋼保護管和鋼管內聚四氟乙烯吸液管組成，應注意保護，不要碰彎。.切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口?！緝x器的保養(yǎng)與維護】.日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動比色皿，每天工作結束后，要用蒸餾水清洗。具體方法如下：將吸液管插入蒸餾水中，向上扳動吸液開關，反復沖洗流動比色皿，直到蒸餾水的吸光度值正常為止。.每周要用專門的清洗劑清洗一次流動比色皿，清洗時，讓清洗劑停留在比色皿中約半小時，然后排掉，再用蒸餾水沖洗干凈，最后注入蒸餾水。.不使用儀器時，流動比色皿內一定要保證充滿蒸餾水。.更換打印機色帶時，嚴格遵照打印機操作手冊，避免不規(guī)范操作。.光源燈更換時一定要先切斷儀器的電源，手不可觸摸光源燈的玻璃部分，萬一光源燈的玻璃部分弄臟了，可用無水乙醇將污物除去。.更換的蠕動泵管尺寸材料應與原泵管一致，如不一致則要重新調整吸液量。第五節(jié)血常規(guī)檢驗操作規(guī)程【標本】抗凝靜脈血（有些儀器也可用末梢血）?！痉椒ā垦杭毎詣臃治鰞x測定法。【試劑】血液細胞自動分析儀配套試劑。操作】詳見血液細胞自動分析儀使用手冊。附注】.血常規(guī)包括白細胞計數(shù)及分類、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細胞比積、血小板計數(shù)等項目。這些項目亦有相應的手工方法，詳見有關資料。.半自動及全自動血液細胞分析儀從設計上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點為：（1）靜脈血能正確地反映病人實際情況，重復性好；（2）利于延長儀器的使用壽命；（3）解決了采血盤的交叉感染問題等。.血細胞計數(shù)應用EDTA?K2：為抗凝劑（EDTA?K2?2H2O1.5?2.2mg可抗凝1ml血）。.貯血容器應選用有蓋塑料管?？鼓杉笤谑覝刂匈A存應不超過6h；如需制作血涂片應在2h內完成。.測定前必須將EDTA?K2抗凝血充分混勻。.血細胞分析儀測定最適溫度為18?22℃,低于15℃或高于30℃,均可使細胞體積發(fā)生改變，影響各參數(shù)的結果。7.血細胞分析儀用于白細胞分類只能當作一種過篩手段，當白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板的任何一項有明顯升高或降低；白細胞分類出現(xiàn)異常結果（中間細胞群百分率三8.0%）；紅細胞、白細胞和血小板的任何一個直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況，須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié)尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程【標本】新鮮尿液?！痉椒ā炕瘜W試帶法?！驹噭扛餍吞柲蛞夯瘜W分析儀配套試帶?！静僮鳌吭斠娔蛞夯瘜W分析儀使用手冊。【附注】尿常規(guī)檢查使用尿液化學分析儀，目前能進行8?10項檢測（PH、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細胞）。這些項目亦有相應的手工方法，詳見有關資料。必須了解所用試帶各膜塊注意事項、藥物干擾。要注意尿液化學分析儀測定結果與手工法的差異，必要時用手工法復查。尿液化學分析儀檢測僅是一個過篩手段，當?shù)鞍住㈦[血、白細胞等出現(xiàn)異常結果（如尿蛋白“＋”或以上）時，應進行鏡檢。尿液顏色、透明度等一般性狀異常時也應報告。第七節(jié)肝功能檢驗操作規(guī)程血清總膽紅素（TBIL）和結合膽紅素（DBIL）測定改良J?G法【試劑】參照書刊文獻（如《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第二版）自配，配制標準液的膽紅素應符合如下標準，純膽紅素的氯仿溶液在25℃當光徑1.000±0.001Cm,波長453nm條件下其摩爾吸光系數(shù)應在60700±1600范圍內，偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應在74380±866范圍內，配制標準液的稀釋劑須含白蛋白，可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。標準液應貯於棕色瓶中避光保存，在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高。【操作】按試劑盒說明書或相應書刊文獻規(guī)程手工操作，比色測定，波長600nm.制作準曲線。血樣測定，從標準曲線上求TBIL及DBIL的含量以umo1/L報告。也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說明書的要求將相應的程序及參數(shù)設入，用自動生化分析儀測定?！緲吮尽垦澹崭寡獮橐?，脂血、脂溶性色素及嚴重溶血干擾此測定，暫不能測定的標本應避光保存，室溫可穩(wěn)定8h,2?8℃可保存48h。含疊氮鈉作防腐劑的質控血清不宜用此法測定膽紅素。膽紅素氧化酶（BOD）法【試劑】市售成套試劑。BOD試劑復溶后2~8℃可保存一周。【操作】按廠家提供的試劑及儀器說明書要求設置程序輸入參數(shù)用自動生化分析儀測定。波長450或460nm?！緲吮尽垦逡笈c改良J一G法相似。二甲亞楓（DMSO）法【試劑】市售現(xiàn)成試劑。【操作】按試劑盒說明書手工操作比色測定或用自動生化儀測定。波長560nm。【標本】血清、輕度脂血，溶血標本對結果無明顯影響、重度脂血、溶血標本須作標本空白進行較正。血氨測定【方法】酶兩點法?！驹噭渴惺鄢商自噭！静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說明書要求，設入相應的程序及各項參數(shù)、用自動生化分析儀測定。波長340nm。【標本】EDTA.Na2抗凝血漿。靜脈采血后與EDTA.Na2混勻，立即置冰水中盡快分離出血漿，加塞置2?4℃保存，在2?3h內分析，-20℃可穩(wěn)定24h。溶血標本忌用。第八節(jié)腎功能檢驗操作規(guī)程尿素氮.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中尿素的含量，為臨床對相關疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。.標本要求：病人準備：空腹12小時。標本類型：血清、肝素化的血漿或24小時尿。.設備和試劑：儀器設備：邁瑞半自動生化分析儀試劑材料：試劑試劑的貯存：2?8℃密閉避光貯存至標簽所注失效期。開蓋上機2?8℃避光穩(wěn)定30天。變質指示：試劑混濁變色或空白吸光度值＜1.000時，不能繼續(xù)使用。注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。.操作步驟：見生化分析儀操作流程。.質量控制：質控物：RANDOX多項人基質血清質控措施：室內質控：每日日常工作前進行。室間質控：參加北京臨床檢驗中心臨床化學室間質評。.干擾因素：總膽紅素W40mg/dL,血紅蛋白W450mg/dL,抗壞血酸W400mg/dL對本法無干擾。.參考區(qū)間及可報區(qū)間：參考范圍：血清/血漿2.86?8.20mmol/L24小時尿15?35g/24h可報范圍：0.00?35.00皿皿01/1。樣品Urea含量超過線性范圍應用生理鹽水稀釋重做，結果乘以稀釋倍數(shù)。.異常結果處理：結果異常、與臨床診斷不符，應復查或與臨床聯(lián)絡。肌酐1.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中肌酐的含量，為臨床對相關疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。.標本要求：病人準備：空腹12小時。標本類型：血清、肝素化的血漿或尿液。.設備和試劑：儀器設備：邁瑞半自動生化分析儀試劑材料：試劑試劑的貯存：2?8℃密閉避光貯存至標簽所注失效期。開蓋上機2?8℃避光穩(wěn)定30天。變質指示：試劑混濁變色或空白吸光度值＞0.050時，不能繼續(xù)使用。注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。.操作步驟：見半自動生化分析儀操作流程。.質量控制：質控物：RANDOX多項人基質血清質控措施：室內質控：每日日常工作前進行。室間質控：參加臨床化學室間質評。.干擾因素：直接膽紅素W257umol/L,血紅蛋白W0.5g/L,抗壞血酸W3mmol/L,甘油三酯W15.0mmol/L肝素W50KU/L,枸櫞酸鈉W10g/L對本法無干擾。8.參考區(qū)間及可報區(qū)間：8.1參考范圍：血清/血漿53.0?123.0umol/L（男性）44.0?106.0口mol/L（女性）首次晨尿1530?15320口mol/L24小時尿6.6?15.0mmol/24h8.2可報范圍：0.0?8840.0口mol/L。樣品Crea含量超過線性范圍應用生理鹽水稀釋重做，結果乘以稀釋倍數(shù)。9.異常結果處理：結果異常、與臨床診斷不符，應復查或與臨床聯(lián)絡。9.危急值及處理方法：>177umol/L。及時與臨床聯(lián)絡。10.實驗室解釋：增高：嚴重腎功能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降低：營養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié)血脂檢驗操作規(guī)程標本采集與處理1．受檢者抽血前二周應保持平衡的飲食習慣，近期體重穩(wěn)定無外傷，手術等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥，B-受體阻滯劑，免疫抑制劑，激素藥物等，則應根據所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測。.空腹抽血，TG,脂蛋白，載脂蛋白測定應至少禁食12小時（僅作膽固醇測定不必強求空腹）24小時內不作劇烈運動。抽血前不要久站立。至少應靜坐5分鐘。抽血時止血帶使用不可超過1分鐘。.標本用血清，也可用肝素或EDTA.Na2抗凝之血漿。EDTA.Na2濃度不宜太高。.血標本室溫放置不得超過3h,放置30?45分鐘后應即時分離出血清（漿）蓋封於4℃冰箱中可穩(wěn)定至少4天，如需長期保存，應於-70℃中冰凍存放，不可反復凍融。血清總膽固醇（TC）測定酶法（CHOD~PAP法）試劑】市售現(xiàn)成試劑。操作】按試劑及儀器使用說明書要求設定程序，輸入參數(shù)用自動或半自動生化分析儀測定（速率法）終點法可手工操作，用普通分光光度計比色測定。波長500nm或520nm。標本】血清（漿）參看本節(jié)的標本采集與處理。附注】本法為中華醫(yī)學會檢驗學會推薦的TC測定常規(guī)方法（中華醫(yī)學檢驗雜志，1995、18：185）。膽固醇標準液以定值參考血清為宜，而不宜用Chol的水溶液作標準。Chol定值質控血清亦不應用作標準液。主要技術指標：終點法批內CVV1.5%、批間CVW2.5%。靈敏度:顯色劑用酚時，TC5.2mmo1/L（200mg時1的吸光度（A500nm）約0.30~0.35故A500nm=0.005時TC濃度約為0.08mmo1/L（3mg/dL）。測定范圍：當血清與試劑用量之比為1:100時其測定的上界為13mmo1/L（500ng/dL）。血清甘油三酯（T6）測定酶法（GPO~PAP法）試劑】市售現(xiàn)成試劑。有兩種。一步酶法單一試劑，二步酶法雙試劑。標準液（參考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不適用於二步酶法。操作】按試劑及儀器使用說明書要求設定程序和參數(shù)，用自動或半自動生化分析儀測定，終點法可用普通分光光度計手工操作，比色測定。波長500nm。標本】血清（漿）參看本節(jié)標本采集與處理。附注】本法在操作程序上分為一步酶法與二步酶法，二步酶法為中華醫(yī)學檢驗學會的推薦方法（中華醫(yī)學檢驗雜志1995、18：249）?，F(xiàn)階段允許二法并存，要求逐步過渡到統(tǒng)一采用二步酶法，在方法尚未統(tǒng)一前，實驗室報告TG測定結果時應注明“除FG值”或“未除FG值”。主要枝術指標：酶試劑用緩沖液配制后，20~25℃應穩(wěn)定1天，4℃可穩(wěn)定3~7天，試劑空白為A500nmW0.05；顯色后穩(wěn)定二30min：測定上界11.3mmo1/L（100mg/dL）；精密度：批內CVW3%,批間CVW5%：靈敏度：2mmo1/LTGA500nm三0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）測定磷鎢酸鎂沉淀法試劑】市售成套試劑，沉淀劑，酶試劑（同TG測定）。操作】按試劑盒說明書操作。.沉淀含apoB的脂蛋白。.測定上清液（只含HDL）的膽固醇含量（方法同酶法TC測定）。標本】血清（漿）。硫酸葡聚糖一鎂沉淀法試劑】市售成套試劑：總HDL試劑，HDL3試劑，酶試劑（同TC試劑）。操作】按試劑說明書操作：.沉淀含apoB的脂蛋白，（總HDL試劑）；.沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2（HDL3試劑）；.測定總HDL~C及HDL3~C（同酶法TC測定），并計算出HDL2~C量。血清（漿）血樣在室溫中不宜久放，應即時測定，原則應低溫保存。直接HDL?C測定法試劑】市售專門的試劑，無沉淀劑。酶試劑同TC測定。（如日本第一化學藥品株式會社的產品）。操作】按試劑盒及儀器使用說明書要求設置程序，輸入參數(shù)直接用自動或半自動生化分析儀測定，無須沉淀離心分離出HDL步驟。標本】血清（漿）。血清低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測定Friedwald工式計算法：LDL-C=TC—HDL-C—TG/5（以mg/dl為單位計）；LDL-C=TC—HDL-C—TG/2.2（以mmo1/L為單位計）；（3）只有當血TGV4.52mmo/L結果才較準確；只有TC、TG、HDL-C三項測定都準確且符合標準化要求時，才可計算出LDL-C的近似值。2．聚乙烯硫酸沉淀法試劑】沉淀劑市售，酶試劑同TC測定。操作】.TC測定。.選擇性沉淀血清中LDL,測定上清液之HDL—C與VLDL—C之和的量，(同TC測定)。.計算出LDL—C的含量。標本】血清。血清載脂蛋白A1(apoAl)測定免疫透射比濁法。波長340nm，本法批間CVV5%。試劑】市售試劑盒，試劑2~8℃保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價不應低於16。操作】按試劑及儀器使用說明書要求，設定程序和參數(shù)用自動生化分析儀測定，也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測定，或用含340nm的分光光度計手工操作測定。標本】血清。血清載脂蛋白B(apoB)測定免疫透射比濁法。波長340nm，本法批間CVV5%。試劑】市售試劑，2~8℃保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價不應低於1：128。操作】參看apoA1測定。標本】血清。第十節(jié)血液葡萄糖測定技術操作規(guī)程1.檢測目的：檢測血清或血漿中葡萄糖的含量，為臨床對相關疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。.標本要求：病人準備：空腹12小時。標本類型：血清或NaF抗凝的血漿。采血后及時分離，以避免血清或血漿中葡萄糖被細胞利用而降低。.設備和試劑：儀器設備：奧林巴斯AU600生化分析儀試劑材料：四川邁克公司試劑參與反應成份：R1：酚(12.0mmol/L)R2：GOD(三35KU/L)、POD(三5KU/L)、4-AAP(1.20mmol/L)試劑的貯存：2?8℃密閉避光貯存至標簽所注失效期。開蓋上機2?8℃避光穩(wěn)定30天。變質指示：試劑混濁變色或空白吸光度值＞0.150時，不能繼續(xù)使用。注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。質量控制：質控物：RANDOX多項人基質血清質控措施：室內質控：每日日常工作前進行。室間質控：參加北京臨床檢驗中心臨床化學室間質評。.參考區(qū)間及可報區(qū)間：參考范圍：空腹 3.89?6.11mmol/L餐后1小時7.78?8.89mmol/L餐后2小時3.89?7.78mmol/L可報范圍：0.00?22.30mmol/L。樣品GLU含量超過線性范圍應用生理鹽水稀釋重做，結果乘以稀釋倍數(shù)。.危急值及處理方法：<2.5mmol/L或>10mmol/L。及時與臨床聯(lián)絡。第十一節(jié)凝血四項檢驗操作規(guī)程全血凝固時間檢驗（CT）【標本】靜脈取血3ml。【方法與操作】試管法、硅管法操作參見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。【附注】靜脈取血要一針見血，盡量減少組織液和空氣混入。水浴箱溫度要恒定，過高或過低，可影響結果。活化部分凝血活酶時間測定（APTT）標本】自靜脈取血，用109mmol/L枸椽酸鈉作1:9抗凝。試劑】市售成套試劑。方法與操作】按試劑及有關儀器說明書要求進行。附注】.標本應及時檢測，最遲不超過2h。.分離血漿應在3000r/min,離心10min。.本試驗較試管法全血凝血時間敏感，能檢出因子^：CV25%輕型血友病。血漿凝血酶原時間測定（PT,一期法）標本】靜脈血1.8ml,用109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml抗凝。試劑】組織凝血活酶浸出液；0.025mol/LCaCl2液；方法與操作】見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》