復方丹參滴丸抗垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血的藥效研究

復方丹參滴丸抗垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血的藥效研究

現(xiàn)在出版的《人參滴丸》由丹參、三七和婆羅洲組成。其中，婆羅洲是一種合成的婆羅洲，主要起到輔助作用。冰片有天然冰片和合成冰片之分，天然冰片原名龍腦香，分布于南洋群島，主產(chǎn)于印尼，主要成分是右旋龍腦，合成冰片除含有龍腦以外還含有大量的異龍腦，異龍腦為龍腦的差向異構體[l,2]。本實驗觀察了天然冰片組成的復方丹參滴丸(以下簡稱：復方丹參滴丸“天”)抗實驗性心肌缺血的藥效，并與合成冰片組成的復方丹參滴丸(以下簡稱：復方丹參滴丸“合”)進行比較。1材料和方法1.1主要實驗設備多道生理記錄儀(MP-100，美國BIOPAC公司),半自動生化分析儀(荷蘭威圖Dpu-411TypeⅡ)。1.2藥物、試劑、儀器復方丹參滴丸(含天然冰片和合成冰片)由天士力集團提供，出膏率為0.2%；消心痛，5mg/片，批號：000901(天津市海光制藥廠)；垂體后葉素(pituitrin,Pit)，每支1OU/mL，批號：20000501(天津市生物化學制藥廠)；乳酸脫氫酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)試劑盒購于南京建成生物工程公司。1.3各組隨機分組Sprage-Dawley大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量（215±24)g，由北京維通利華動物中心提供。隨機分為7組：正常對照組、模型組、消心痛組、復方丹參滴丸(天)高劑量組、復方丹參滴丸(天)中劑量組、復方丹參滴丸(合)高劑量組、復方丹參滴丸(合)中劑量組。上述受試藥物使用前均用生理鹽水配制，濃度為lmL/kg(模型組和正常對照組灌服生理鹽水lmL/kg，正常對照組不注射Pit)。1.4pit敏感大鼠實驗于實驗前1d首先進行動物對垂體后葉素(Pit)敏感性篩選實驗，方法舌下靜脈注射Pit0.35U/kg(濃度為1U/2mL)，觀察心電圖變化情況，選取對Pit敏感大鼠用于實驗(T波明顯抬高，ST段抬高超過0.1mV)，不敏感大鼠及心電圖不正常大鼠淘汰。將篩選獲得的敏感大鼠于次日實驗前1h按隨機分組原則分別灌胃給藥(10只正常對照組只給生理鹽水不注射Pit,復方丹參滴丸劑量均為生藥量，3%戊巴比妥納（30mg/kg）腹腔注射麻醉，仰位固定，多道生理記錄儀連接，動態(tài)描記Ⅱ?qū)?lián)心電圖，心電圖正常者舌下靜脈注Pit0.35U/kg，于5s內(nèi)注完，動態(tài)觀察心電圖變化，3h心臟取血以檢測各項生化指標。1.5統(tǒng)計方法2結(jié)果2.1pit的變化大鼠注射Pit后，觀察Ⅱ?qū)?lián)心電圖T波峰值的變化百分率，模型組大鼠注射Pit后即刻T波明顯抬高，15s時達到高峰，即出現(xiàn)第1期心電圖的變化，于注射Pit第1min后出現(xiàn)T波低平、雙相、倒置，心率減慢，P-R及Q-T間期延長等心電圖第2期變化。各用藥組均能夠?qū)筆it引起的大鼠第1期和第2期的變化，與模型組比較差異非常顯著(P<0.05,P<0.01)。各給藥組之間無明顯差異。2.2各組血清內(nèi)sod活性、mda含量比較模型組注射PitRG3h血清CK升高，與正常對照組比較差異非常顯著（P<0.01），消心痛組、天然冰片和合成冰片組成的復方丹參滴丸生藥3.04g/kg,1.52g/kg組對血清CK有不同程度的減少，與模型組比較差異顯著（P<0.05），各復方丹參滴丸劑量組之間無明顯差異；模型組注射Pit后3h血清LDH明顯升高，與正常對照組比較（P<0.05），但各用藥組與模型組比較以及各用藥組之間無明顯差異。模型組注射Pit后3h血清SOD活性明顯下降、MDA含量升高，與正常對照組比較差異顯著（P<0.01），消心痛組及各復方丹參滴丸劑量組均能夠提高SOD活性，降低MDA含量，與模型組比較差異顯著（P<0.01）；各給藥組之間無顯著差異。3復配體系對大鼠心肌缺血的作用復方丹參滴丸是在復方丹參片基礎上，利用現(xiàn)代高科技手段制成的純中藥滴丸制劑，但滴丸的藥理作用和臨床療效明顯優(yōu)于復方丹參片，是治療冠心病心肌缺血的常用藥物，主要有抗氧化、鈣拮抗、擴張冠狀動脈、抗動脈硬化、抗血栓形成、降血脂等作用。方中冰片具有開竅醒神、止痛、抗炎等作用。有天然冰片和合成冰片之分。我國在江西、湖南等地發(fā)現(xiàn)樟科樟屬植物廣泛含有龍腦，尤其是梅片樹和龍腦樟可提取獲得98%以上純度的右旋龍腦，從而結(jié)束了我國不產(chǎn)天然冰片的歷史。由于合成冰片阻礙其組方進入國際市場的進程，因此用天然冰片取代合成冰片將成為一種趨勢。垂體后葉素(Pit)是從動物腦垂體中提取的，內(nèi)含有加壓素(抗利尿素)和催產(chǎn)素，加壓素能直接使血管，特別是毛細血管和小動脈收縮，包括冠狀動脈收縮，從而使血壓升高，心肌缺血缺氧；同時收縮全身小血管，導致心臟負荷加重；本實驗應用Pi舌下靜脈注射，對大鼠造成急性心肌缺血的模型，觀察心電圖、心肌酶、過氧化物的變化，該模型復制方法簡便，廣泛用于篩選抗心肌缺血藥物的研究。近年來隨著心肌缺血損傷機制研究的深入，發(fā)現(xiàn)大量氧自由基生成及脂質(zhì)過氧化物反應增強是心肌缺血損傷的主要機制之一。超氧化物歧化酶(SOD)是機體清除氧自由基的重要酶類，對機體的氧化平衡起著至關重要的作用。SOD能清除超氧陰離子，保護細胞免受損傷，其活力的高低常間接地反映了機體清除自由基的能力，當心肌受損時，可導致SOD活性的降低。測試丙二醛的含量常?？梢苑从硻C體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，間接反映細胞損傷的輕重，本實驗證明消心痛組以及各丹參滴丸劑量組(天然冰片、合成冰片)均能夠明顯增強SOD的活性，降低MDA的含量，從而對心肌發(fā)揮保護作用。磷酸肌酸激酶(CPK)以及乳酸脫氫酶(LDH)在心肌損傷時因缺血后細胞膜損傷而釋放入血內(nèi)，故可作為觀察心肌缺血的指標，兩