專題1：基因工程0000

考綱要求:考綱內(nèi)容考向定位1.基因工程的誕生2.基因工程的原理及技術(shù)3.基因工程的應(yīng)用4.轉(zhuǎn)基因生物的安全性1.基因工程操作工具的作用2.基因工程原理及基本操作過程3.基因工程應(yīng)用及基因治療、基因工程藥物1．(10·全國Ⅱ)下列敘述符合基因工程概念的是()A．B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞中含有B淋巴細(xì)胞中的抗體基因B．將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株C．用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株D．自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上B一、基因工程的原理及技術(shù)基因工程的別名基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)操作環(huán)境生物體外操作對象基因操作水平DNA分子水平基本過程剪切→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)結(jié)果人類需要的基因產(chǎn)物1、原理：2、技術(shù)：（1）基本工具限制性核酸內(nèi)切酶－“分子手術(shù)刀”分布：主要在原核生物中特點：特異性，即識別特定核苷酸序列，切割特定切點結(jié)果：產(chǎn)生黏性未端或平末端舉例：大腸桿菌的一種限制酶能識別GAATTC序列，并在G和A之間切開“切哪里”磷酸二酯鍵一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。（斷開的不是氫鍵）雙鏈DNA結(jié)構(gòu)和磷酸二酯鍵位置切割DNA分子時產(chǎn)生的兩種不同末端5.下列有關(guān)基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶的描述，錯誤的是（）A.一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列B.限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度的影響C.限制性核酸內(nèi)切酶能識別和切割RNAD.限制性核酸內(nèi)切酶可從原核生物中提取CCB5、原核6、核苷酸7、磷酸二酯鍵8、黏性末端9、平末端連接酶的作用是：將互補(bǔ)配對的兩個黏性末端連接起來，使之成為一個完整的DNA分子。（恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵）分子縫合針——DNA連接酶連接酶的分類根據(jù)酶的來源分：

１.Ｅ．coliDNA連接酶：只能“縫合”ＤＮＡ片段互補(bǔ)的黏性末端２.Ｔ4DNA連接酶：能“縫合”ＤＮＡ片段互補(bǔ)的黏性末端和平末端

ＤＮＡ分子的切割和連接10、片段“縫合”起來11、磷酸二酯鍵12、黏性末端13、平末端BDNA連接酶和DNA聚合酶的區(qū)別？DNA連接酶DNA聚合酶將雙鏈DNA上的兩個缺口同時連接起來，不需要摸板以DNA的一條鏈為模板連接部位形成特定兩個DNA片段之間的磷酸二酯鍵將單個核苷酸通過磷酸二酯鍵形成與摸板鏈互補(bǔ)的DNA鏈都能形成磷酸二酯鍵4.作為基因的運輸工具—運載體，必須具備的條件之一及理由是（）A.能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定的保存下來并大量復(fù)制，以便提供大量的目的的基因B.具有多個限制酶切點，以便于目的基因的表達(dá)C.具有某些標(biāo)記基因，以便目的基因能夠與讓結(jié)合D.它的參與能夠使目的基因在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存5.基因工程中常見的載體是（）A.質(zhì)體B.染色體C.質(zhì)粒D.線粒體DC作用：將外源基因送入受體細(xì)胞條件：（1）能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存（2）具有一個或多個限制酶切點（3）具有某些標(biāo)記基因（4）載體必須安全，不會對受體細(xì)胞有害種類：質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒基因的運輸工具——運載體1.細(xì)胞染色體外能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子2.質(zhì)粒是基因工程中最常用的運載體3.最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒4.存在于許多細(xì)菌及酵母菌等生物中5.質(zhì)粒的存在對宿主細(xì)胞無影響6.質(zhì)粒的復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)完成常用載體－質(zhì)粒的特點大腸桿菌及質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu)示意圖復(fù)制原點目的基因插入位點氨芐青霉素抗性基因14、復(fù)制15、環(huán)狀16、噬菌體17、復(fù)制18、限制酶19、特殊的遺傳標(biāo)記基因B1.在基因工程中使用的限制性核酸內(nèi)切酶，其作用是（）A.將目的基因從染色體上切割出來B.識別并切割特定的DNA核有酸序列C.將目的基因與運載體結(jié)合D.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞2.基因工程中常用細(xì)菌等原核生物作受體細(xì)胞的原因不包括（）A.繁殖速度快B.遺傳物質(zhì)相對較少C.多為單細(xì)胞，操作簡便D.DNA為單鏈，變異少BD3.基因工程是DNA分子水平的操作，下列有關(guān)基因工程的敘述中，錯誤的是（）A.限制酶只用于切割獲取目的基因B.載體與目的基因必須用同一種限制酶處理C.基因工程所用的工具酶是限制酶DNA連接酶D.帶有目的基因的載體是否進(jìn)入受體細(xì)胞需檢測A科學(xué)家通過基因工程，將蘇云金芽孢桿菌的Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入到普通棉花植株細(xì)胞內(nèi)，并成功的實現(xiàn)了表達(dá)．從而培育出了能抗棉鈴蟲的棉花植株——抗蟲棉請簡要寫出其操作步驟？獲取Bt毒蛋白基因

Bt毒蛋白基因與運載體結(jié)合將重組載體導(dǎo)入棉花受精卵Bt毒蛋白基因的檢測與鑒定二、基本步驟：第一步：目的基因的獲取第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞第四步：目的基因的檢測與鑒定2．不屬于獲得目的基因的方法有（）A．構(gòu)建基因文庫從基因文庫中獲取B．人工合成C．PCR技術(shù)大量獲得D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得

DP9

DP93.從基因文庫中獲取目的基因的根據(jù)是（）A.基因的核苷酸序列B.基因的功能C.基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNAD.以上都是4．下列屬于PCR技術(shù)的條件的是（）①引物②目的基因所在的DNA片段③游離的4種脫氧核苷酸④游離的4種核糖核苷酸⑤DNA連接酶⑥D(zhuǎn)NA聚合酶⑦DNA限制性核酸內(nèi)切酶A．①②③⑤B．①②③⑥C．①②③⑤⑦D．①②④⑤⑦B

過程高溫變性（解旋為單鏈）低溫退火（引物與單鏈互補(bǔ)結(jié)合）適溫延伸（在Taq酶的作用下合成與模板互補(bǔ)的DNA雙鏈）重復(fù)循環(huán)預(yù)變性（增加DNA變性的概率）2