食品微生物檢測技術(shù)基礎(chǔ)-培養(yǎng)基的配制與滅菌

培養(yǎng)基的配制與分裝01培養(yǎng)基的配制原則02培養(yǎng)基的配制方法和步驟03培養(yǎng)基的配制和滅菌過程中的注意事項目錄01FIRST

CHAPTER培養(yǎng)基的配制原則1、培養(yǎng)基的配制原則⑴目的明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的選擇原料自養(yǎng)型：不加碳源（CO2碳源）異養(yǎng)型：有機碳源⑵營養(yǎng)全面、濃度適宜、比例恰當(dāng)⑶適宜的pH值：加入緩沖劑細菌偏堿，真菌偏酸02SECONDCHAPTER培養(yǎng)基的配制方法和步驟1234567按培養(yǎng)基

配方稱量加水加熱熔化調(diào)節(jié)

pH值過濾分裝包裝滅菌質(zhì)量測試2、培養(yǎng)基的配制方法和步驟培養(yǎng)基、玻璃器皿電子天平試劑柜培養(yǎng)基配制–器材培養(yǎng)基的配制過程1培養(yǎng)基的制備記錄2培養(yǎng)基成分的稱取3培養(yǎng)基各成份的混合和溶化65培養(yǎng)基的過濾澄清47培養(yǎng)基的滅菌8培養(yǎng)基的質(zhì)量測試9培養(yǎng)基的保存培養(yǎng)基pH的校正培養(yǎng)基的分裝2.1培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄1235678培養(yǎng)基名稱配方最終pH值消毒的溫度和時間制備的日期制備者4成份來源2.2培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，最好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜谂詡?cè)，每稱完一種成分即在配方上面做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進行一次檢查。放上秤藥紙并歸零以秤藥匙舀出適當(dāng)量培養(yǎng)基(請看培養(yǎng)基罐上說明)按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取。對于易吸潮的在稱取時動作要迅速。另外，稱藥品時嚴防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。培養(yǎng)基配制–秤藥清理配藥桌面與天平清洗秤藥匙，擦干放回藥品放回藥品柜注意事項–配藥結(jié)束2.3培養(yǎng)基各成份的混合和溶化指示劑應(yīng)在調(diào)節(jié)好PH值后再加入；煮溶后要補加足水份；不能把培養(yǎng)基煮焦，焦化的不能使用。以量桶裝取適當(dāng)量蒸餾水于玻璃容器中于玻璃容器上標(biāo)示培養(yǎng)基名稱培養(yǎng)基的配制–裝水培養(yǎng)基配制–溶解培養(yǎng)基傾倒培養(yǎng)基時小心不要沾到玻璃壁上2.4培養(yǎng)基pH的校正滅菌后PH值會下降0.1～0.2，在做培養(yǎng)基校正pH值時，應(yīng)比實際值高0.1～0.2；pH調(diào)整后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸。液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法瓊脂培養(yǎng)基,可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾2.5培養(yǎng)基的過濾澄清(1)液體分裝：分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。(2)固體分裝：分裝試管，其裝量不超過管高的1/5，滅菌后制成斜面，分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為恰當(dāng)；分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。(3)半固體分裝試管：一般以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。2.6培養(yǎng)基的分裝培養(yǎng)基配制–分裝調(diào)整分注器(Dispensette)刻度分裝試管蓋上試管蓋（1）含糖類或明膠的培養(yǎng)基：113℃滅菌15分鐘或115℃滅菌10分鐘。（2）無糖培養(yǎng)基：121℃滅菌15~20分鐘。（3）血液、體液和抗生素等以無菌操作技術(shù)抽取后再加入冷卻至約50℃左右的培養(yǎng)基中。（4）瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后冷至55℃-60℃時取出，再擺置成適當(dāng)斜面。2.7培養(yǎng)基的滅菌殺菌鍋(Autoclave)2.8培養(yǎng)基的質(zhì)量測試（１）如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測定其最終pH。（２）將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過夜，如發(fā)現(xiàn)有菌生長，即棄去。（３）用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1~2管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng)24～48小時，如無菌生長或生長不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次，如結(jié)果仍同前，則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去，不能使用。

2.9培養(yǎng)基的保存（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基不能超過兩周（2）生化試驗培養(yǎng)基不宜超過一周（3）選擇性或鑒別性培養(yǎng)最好當(dāng)天使用，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。03THIRD

CHAPTER培養(yǎng)基的配制過程中的注意事項（1）蛋白胨很易吸濕，在稱取時動作要迅速。（2）稱藥品時嚴防藥品混雜，一把牛交匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈，擦干，再稱取另一藥品。瓶蓋也不要蓋錯。（3）在瓊脂溶化過程中，應(yīng)控制火力，以免培養(yǎng)基因沸騰而溢出容器。同時，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底燒焦，配制培養(yǎng)基時，不可用銅或鐵鍋加熱溶化，以免離子進入培養(yǎng)基中，影響細菌生長。（4）pH不要調(diào)過頭，以免回調(diào)而影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。（5）分裝過程中，注意不要使培養(yǎng)基沾在管（瓶）口上以免引起污染。

培養(yǎng)基的配制與分裝電子圖片培養(yǎng)基配制

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器材培養(yǎng)基玻璃器皿天平秤藥匙培養(yǎng)基的配制

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裝水以量桶裝取適當(dāng)量蒸餾水于玻璃容器中于玻璃容器上標(biāo)示培養(yǎng)基名稱培養(yǎng)基配制–

秤藥放上秤藥紙并歸零以秤藥匙舀出適當(dāng)量培養(yǎng)基培養(yǎng)基配制–

溶解培養(yǎng)基傾倒培養(yǎng)基時小心不要沾到玻璃壁上注意事項–

配藥結(jié)束清理配藥桌面與天平清洗秤藥匙，擦干放回藥品放回藥品柜培養(yǎng)基配制–

分裝調(diào)整分注器刻度分裝試管

培養(yǎng)基的滅菌目錄01滅菌的定義02常見的滅菌方法分類03高壓蒸汽滅菌的方法和操作注意事項04其它滅菌方法簡介01DEFINITIONOFSTERILIZATION滅菌的定義滅菌是指用物理或化學(xué)的方法，殺死物體表面和孔隙內(nèi)的一切微生物或生物體，即把所有生命的物質(zhì)全部殺死。細菌真菌放線菌藻類其他微生物菌種類特點極小，肉眼看不見無處不在，無時不有，無孔不入在自然條件下忍耐力強，生活條件要求簡單，繁殖力極強，條件適宜時便可大量滋生02COMMONSTERILIZATIONMETHODSARECLASSIFIED常見的滅菌方法分類化學(xué)方法：物理方法干熱（烘燒和灼燒）濕熱（常壓或高壓蒸煮）射線處理（超聲波、微波）過濾清洗大量無菌水沖洗根據(jù)工作中的不同材料不同目的適當(dāng)選用。使用升汞、甲醛、過氧化氫、高錳酸鉀、來蘇兒、漂白粉、次氯酸鈉、抗菌素、酒精化學(xué)藥品處理。熱力滅菌高溫殺滅細菌焚燒

----最徹底的滅菌方法燒灼

----直接用火焰滅菌干烤----加熱160-180℃2小時2.1物理消毒滅菌法干熱滅菌法右手拿接種環(huán)（如握鋼筆），在火焰上燒灼滅菌。注意：有可能伸入試管內(nèi)的接種環(huán)其余部分也要燒灼，特別是箍處。2.1物理消毒滅菌法加壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃20~30分鐘煮沸消毒法水煮100℃5分鐘(繁殖體)~2小時(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法水蒸汽100℃15~30分鐘(繁殖體)反復(fù)多次流動蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度（61℃30分鐘）殺滅致病菌----------------------------濕熱滅菌法2.1物理消毒滅菌法濕熱滅菌法濕熱滅菌法菌體吸收水分蛋白質(zhì)較易凝固濕熱的穿透力比干熱大，水的傳熱能力比許多非導(dǎo)體的固體強濕熱的蒸汽有潛熱存在，1g水在100℃由氣態(tài)變?yōu)橐后w態(tài)可放出2.26kJ，可增強滅菌效果優(yōu)點2.2化學(xué)消毒滅菌法類別作用機制常用種類酚類蛋白變性，細胞膜損傷石炭酸醇類蛋白變性乙醇氧化劑氧化、蛋白沉淀高錳酸甲重金屬鹽氧化、蛋白酶變性紅汞、硫柳汞氧化劑氧化、蛋白沉淀過氧乙酸、碘酒表面活性劑蛋白變性，細胞膜損傷新潔而滅染料干擾氧化、抑制繁殖龍膽紫常用消毒劑種類03Operationmethodandprecautionsforhighpressuresteamsterilization高壓蒸汽滅菌的操作方法和注意事項手提式高壓蒸汽滅菌鍋安全閥安全閥壓力表緊固螺栓底架滅菌桶排氣軟管蓋排氣閥注意事項–殺菌鍋的使用放東西調(diào)整溫度時間加水蓋過鐵板關(guān)門關(guān)緊泄壓閥12345滅菌結(jié)束后，等壓力降回零時才可打開門進入殺菌釜之物品，蓋子不可關(guān)太緊或太松注意事項–殺菌釜的使用拿滅菌后物品請記得帶耐熱手套注意事項–殺菌釜的使用04Introductiontoothersterilizationmethods其它滅菌方法簡介4.1過濾除菌法不能用加熱滅菌的液體物質(zhì)（如維生素、血清），一般可用細菌過濾器進行除菌。4.2輻射殺菌法紫外線：殺菌機理：波長200~300nm的紫外線具有殺菌作用特點：應(yīng)用范圍：空氣消毒；手術(shù)室、傳染病房、細菌實驗室；不耐熱物品的表面消毒

干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄紫外線穿透力較弱

培養(yǎng)基的滅菌

電子圖片手提式高壓滅菌鍋立式高壓滅菌鍋手提式高壓蒸汽滅菌鍋放入殺菌鍋

(Autoclave)

滅菌培養(yǎng)基配制–

滅菌放東西調(diào)整溫度時間注意事項–

殺菌鍋的使用注意事項–

殺菌釜使用滅菌結(jié)束后，等壓力降回零時才可打開門進入殺菌釜之物品，蓋子不可關(guān)太緊或太松注意事項–

殺菌釜使用拿滅菌后物品請記得帶耐熱手套過濾除菌法培養(yǎng)基的配制與分裝01培養(yǎng)基的配制原則02培養(yǎng)基的配制方法和步驟03培養(yǎng)基的配制和滅菌過程中的注意事項目錄01FIRST

CHAPTER培養(yǎng)基的配制原則1、培養(yǎng)基的配制原則⑴目的明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的選擇原料自養(yǎng)型：不加碳源（CO2碳源）異養(yǎng)型：有機碳源⑵營養(yǎng)全面、濃度適宜、比例恰當(dāng)⑶適宜的pH值：加入緩沖劑細菌偏堿，真菌偏酸02SECONDCHAPTER培養(yǎng)基的配制方法和步驟1234567按培養(yǎng)基

配方稱量加水加熱熔化調(diào)節(jié)

pH值過濾分裝包裝滅菌質(zhì)量測試2、培養(yǎng)基的配制方法和步驟培養(yǎng)基、玻璃器皿電子天平試劑柜培養(yǎng)基配制–器材培養(yǎng)基的配制過程1培養(yǎng)基的制備記錄2培養(yǎng)基成分的稱取3培養(yǎng)基各成份的混合和溶化65培養(yǎng)基的過濾澄清47培養(yǎng)基的滅菌8培養(yǎng)基的質(zhì)量測試9培養(yǎng)基的保存培養(yǎng)基pH的校正培養(yǎng)基的分裝2.1培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄1235678培養(yǎng)基名稱配方最終pH值消毒的溫度和時間制備的日期制備者4成份來源2.2培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，最好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜谂詡?cè)，每稱完一種成分即在配方上面做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進行一次檢查。放上秤藥紙并歸零以秤藥匙舀出適當(dāng)量培養(yǎng)基(請看培養(yǎng)基罐上說明)按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取。對于易吸潮的在稱取時動作要迅速。另外，稱藥品時嚴防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。培養(yǎng)基配制–秤藥清理配藥桌面與天平清洗秤藥匙，擦干放回藥品放回藥品柜注意事項–配藥結(jié)束2.3培養(yǎng)基各成份的混合和溶化指示劑應(yīng)在調(diào)節(jié)好PH值后再加入；煮溶后要補加足水份；不能把培養(yǎng)基煮焦，焦化的不能使用。以量桶裝取適當(dāng)量蒸餾水于玻璃容器中于玻璃容器上標(biāo)示培養(yǎng)基名稱培養(yǎng)基的配制–裝水培養(yǎng)基配制–溶解培養(yǎng)基傾倒培養(yǎng)基時小心不要沾到玻璃壁上2.4培養(yǎng)基pH的校正滅菌后PH值會下降0.1～0.2，在做培養(yǎng)基校正pH值時，應(yīng)比實際值高0.1～0.2；pH調(diào)整后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸。液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法瓊脂培養(yǎng)基,可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾2.5培養(yǎng)基的過濾澄清(1)液體分裝：分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。(2)固體分裝：分裝試管，其裝量不超過管高的1/5，滅菌后制成斜面，分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為恰當(dāng)；分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。(3)半固體分裝試管：一般以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。2.6培養(yǎng)基的分裝培養(yǎng)基配制–分裝調(diào)整分注器(Dispensette)刻度分裝試管蓋上試管蓋（1）含糖類或明膠的培養(yǎng)基：113℃滅菌15分鐘或115℃滅菌10分鐘。（2）無糖培養(yǎng)基：121℃滅菌15~20分鐘。（3）血液、體液和抗生素等以無菌操作技術(shù)抽取后再加入冷卻至約50℃左右的培養(yǎng)基中。（4）瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后冷至55℃-60℃時取出，再擺置成適當(dāng)斜面。2.7培養(yǎng)基的滅菌殺菌鍋(Autoclave)2.8培養(yǎng)基的質(zhì)量測試（１）如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測定其最終pH。（２）將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過夜，如發(fā)現(xiàn)有菌生長，即棄去。（３）用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1~2管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng)24～48小時，如無菌生長或生長不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次，如結(jié)果仍同前，則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去，不能使用。

2.9培養(yǎng)基的保存（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基不能超過兩周（2）生化試驗培養(yǎng)基不宜超過一周（3）選擇性或鑒別性培養(yǎng)最好當(dāng)天使用，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。03THIRD

CHAPTER培養(yǎng)基的配制過程中的注意事項（1）蛋白胨很易吸濕，在稱取時動作要迅速。（2）稱藥品時嚴防藥品混雜，一把牛交匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈，擦干，再稱取另一藥品。瓶蓋也不要蓋錯。（3）在瓊脂溶化過程中，應(yīng)控制火力，以免培養(yǎng)基因沸騰而溢出容器。同時，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底燒焦，配制培養(yǎng)基時，不可用銅或鐵鍋加熱溶化，以免離子進入培養(yǎng)基中，影響細菌生長。（4）pH不要調(diào)過頭，以免回調(diào)而影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。（5）分裝過程中，注意不要使培養(yǎng)基沾在管（瓶）口上以免引起污染。

培養(yǎng)基的配制與分裝電子圖片培養(yǎng)基配制

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器材培養(yǎng)基玻璃器皿天平秤藥匙培養(yǎng)基的配制

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裝水以量桶裝取適當(dāng)量蒸餾水于玻璃容器中于玻璃容器上標(biāo)示培養(yǎng)基名稱培養(yǎng)基配制–

秤藥放上秤藥紙并歸零以秤藥匙舀出適當(dāng)量培養(yǎng)基培養(yǎng)基配制–

溶解培養(yǎng)基傾倒培養(yǎng)基時小心不要沾到玻璃壁上注意事項–

配藥結(jié)束清理配藥桌面與天平清洗秤藥匙，擦干放回藥品放回藥品柜培養(yǎng)基配制–

分裝調(diào)整分注器刻度分裝試管

微生物的營養(yǎng)目錄頁1、微生物的營養(yǎng)要求1.1微生物細胞的化學(xué)組成1.2營養(yǎng)物質(zhì)及其生理功能2、微生物的營養(yǎng)類型微生物的營養(yǎng)1、微生物的營養(yǎng)要求1.1微生物細胞的化學(xué)組成1.1.1化學(xué)元素(chemicalelement):大量元素(macroelement):碳、氫、氧、氮、磷、硫、鉀、鎂、鈣、鐵（其中前六種占細菌細胞干重的97%）。微量元素(traceelement):

鋅、錳、鈉、氯、鉬、硒、鈷、銅、鎢、鎳、硼。

元素細菌酵母菌霉菌

碳5049.847.9

氮1512.45.2

氫86.76.7

氧2031.140.2

磷3——

硫1——

表1

微生物細胞中幾種主要元素的含量（干重％）1.1.2元素在細胞內(nèi)存在形式：上述元素主要以水、有機物、無機鹽的形式存在于細胞中：1．有機物：蛋白質(zhì)、糖、脂類、核酸、維生素及其降解產(chǎn)物.2．無機物：1)參與有機物組成，

2)單獨存在于細胞質(zhì)內(nèi)以無機鹽的形式存在.3、水：約占細胞總重70%～90%，以游離水和結(jié)合水兩種形式存在游離水：干重法可測得；結(jié)合水：不易蒸發(fā)、不凍結(jié)、也不能滲透,

占水總量的17%—28%

。1.2營養(yǎng)物質(zhì)及其生理功能碳源 氮源 無機鹽生長因子 水（一）、碳源（Carbonsource）◆定義：凡可被用來構(gòu)成細胞物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中碳素來源的營養(yǎng)物質(zhì)?！艄δ埽禾峁┖铣杉毎镔|(zhì)及代謝物的原料;并為整個生理活動提供所需要能源（異養(yǎng)微生物）。◆種類:無機含碳化合物：如CO2和碳酸鹽等。有機含碳化合物：糖與糖的衍生物（多糖：如淀粉、麩皮、米糠等；飴糖；單糖）,脂類、醇類。有機酸、烴類、芳香族化合物以及各種含氮的化合物。表2微生物利用的碳源物質(zhì)種類碳源物質(zhì)備注糖葡萄糖、果糖、麥芽糖、蔗糖、淀粉、半乳糖、乳糖、甘露糖、纖維二糖、纖維素、半纖維素、甲殼素、木質(zhì)素等單糖優(yōu)于雙糖，己糖優(yōu)于戊糖，淀粉優(yōu)于纖維素，純多糖優(yōu)于雜多糖。有機酸糖酸、乳酸、檸檬酸、延胡索酸、低級脂肪酸、高級脂肪酸、氨基酸等與糖類比效果較差，有機酸較難進入細胞，進入細胞后會導(dǎo)致pH下降。當(dāng)環(huán)境中缺乏碳源物質(zhì)時，氨基酸可被微生物作為碳源利用。醇乙醇在低濃度條件下被某些酵母菌和醋酸菌利用。脂脂肪、磷脂主要利用脂肪，在特定條件下將磷脂分解為甘油和脂肪酸而加以利用。烴天然氣、石油、石油餾分、石蠟油等利用烴的微生物細胞表面有一種由糖脂組成的特殊吸收系統(tǒng)，可將難溶的烴充分乳化后吸收利用。CO2CO2為自養(yǎng)微生物所利用。碳酸鹽NaHCO3、CaCO3、白堊等為自養(yǎng)微生物所利用。其他芳香族化合物、氰化物蛋白質(zhì)、核酸等利用這些物質(zhì)的微生物在環(huán)境保護方面有重要作用。當(dāng)環(huán)境中缺乏碳源物質(zhì)時，可被微生物作為碳源而降解利用。微生物工業(yè)發(fā)酵中用做碳源的原料

糖類（單糖，麥芽糖）

淀粉（玉米粉、山芋粉、野生植物淀粉等）

麩皮 各種米糠等

纖維素石油

凡用來構(gòu)成菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中氮素來源的營養(yǎng)源。種類：無機氮：銨鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽、尿素、氨、N2等；有機氮：蛋白質(zhì)及其降解產(chǎn)物（如胨、肽、氨基酸等）、牛肉膏、魚粉、花生餅粉、

黃豆餅粉、玉米漿等功能：

1）提供合成細胞中含氮物，如蛋白質(zhì)、核酸，以及含氮代謝物等的原料；2）少數(shù)細菌可以銨鹽、硝酸鹽等氮源為能源。（二）氮源（Nitrogensource）：微生物利用的氮源物質(zhì)種類氮源物質(zhì)備注蛋白質(zhì)類蛋白質(zhì)及其不同程度降解產(chǎn)物(胨、肽、氨基酸等)大分子蛋白質(zhì)難進入細胞，一些真菌和少數(shù)細菌能分泌胞外蛋白酶，將大分子蛋白質(zhì)降解利用，而多數(shù)細菌只能利用相對分子質(zhì)量較小其降解產(chǎn)物氨及銨鹽NH3、(NH4)2SO4等容易被微生物吸收利用硝酸鹽KNO3等容易被微生物吸收利用分子氮N2固氮微生物可利用，但當(dāng)環(huán)境中有化合態(tài)氮源時，固氮微生物就失去固氮能力其他嘌呤、嘧啶、脲、胺、酰胺、氰化物大腸桿菌不能以嘧啶作為唯一氮源，在氮限量的葡萄糖培養(yǎng)基上生長時，可通過誘導(dǎo)作用先合成分解嘧啶的酶，然后再分解并利用嘧啶可不同程度地被微生物作為氮源加以利用（三）無機鹽（inorganicsalt）大量元素：P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe（微生物生長所需濃度在10-3~10-4mol/L）微量元素：Cu、Zn、Mn、Mo、Co（微生物生長所需濃度在10-6~10-8mol/L）

一般微生物生長所需要的無機鹽有：硫酸鹽、磷酸鹽、氯化物以及含有鈉、鉀、鎂、鐵等金屬元素的化合物。功能：1、構(gòu)成細胞結(jié)構(gòu)組分；

2、作為酶組分或活化劑；

3、參與能量傳遞或提供能源；

4、維持結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性；

5、調(diào)節(jié)滲透壓。無機鹽的生理功能：無機鹽大量元素微量元素一般功能特殊功能酶的激活劑（Cu2+、Mn2+、Zn2+）特殊分子結(jié)構(gòu)成分（Co、Mo等）

維持滲透壓生理調(diào)節(jié)物質(zhì) 酶的激活劑

pH的穩(wěn)定化能自養(yǎng)菌的能源(S、Fe2+、NH4+、NO2-)無氧呼吸時的氫受體(NO3-、SO42-)細胞內(nèi)一般分子成分(如P、S、Ca、Mg、Fe等)（四）生長因子（growthfactor）定義：是一類對微生物正常生活所不可缺少而需要量又不大，微生物自身不能合成，或合成量不足以滿足機體生長需要的有機營養(yǎng)物質(zhì)。不同微生物需求的生長因子的種類和數(shù)量不同。缺乏合成生長因子能力的微生物稱為“營養(yǎng)缺陷型”微生物。維生素(vitamin)、氨基酸、嘌呤與嘧啶三大類（五）水（water）起溶劑與運輸介質(zhì)的作用；參與細胞內(nèi)化學(xué)反應(yīng)；維持蛋白質(zhì)、核酸等天然構(gòu)象；有效控制胞內(nèi)溫度的變化：因水比熱高，能有效吸收代謝熱并及時散發(fā)出體外；保持充足的水分是細胞維持自身正常形態(tài)的重要因素；幾種生物的游離水含量人體：~60%海蟄：~96%微生物孢子營養(yǎng)體霉菌孢子：~39%細菌芽孢：皮層：~70%核心：極低細菌：~80%酵母：~75%霉菌：~85%◆水在細胞中有兩種存在形式：結(jié)合水和游離水.◆不同細胞及不同細胞結(jié)構(gòu)中游離水的含量有較大差別：

表3幾類微生物生長最適aw

微生物