實驗五觀察細(xì)胞中DNA和RNA的分布

實驗三觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布原理：甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠和吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA和染色劑結(jié)合。Unna染色法：Unna染色法：

1899年P(guān)appenheim首創(chuàng)了甲基綠-哌洛寧（mehtyl-green-pyronim）染色法。1902年Unna對這一方法進(jìn)行了改良。1940年Brachet研究證明用甲基綠—哌洛寧對DNA和RNA有選擇性的染色效果。堿性的甲基綠-哌洛寧混合染料處理細(xì)胞后，由于DNA、RNA對染料具有的親和力不同，而使這兩種染料對兩類核酸具有了選擇性。DNA被甲基綠染成綠色，RNA被哌洛寧染成紅色，這樣就能使細(xì)胞中兩種核酸分布顯示出來。實驗?zāi)康?、學(xué)會準(zhǔn)備本實驗。2、練習(xí)并熟練掌握本實驗操作過程。3、學(xué)會指導(dǎo)學(xué)生實驗。［課前準(zhǔn)備］

1、實驗材料用具：人的口腔上皮細(xì)胞或蠶豆葉表皮，洋蔥表皮大燒杯，小燒杯，溫度計，滴管，消毒牙簽，載玻片，蓋玻片，鐵架臺，石棉網(wǎng)，火柴，酒精燈，吸水紙，顯微鏡2、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%的鹽酸，吡羅紅甲基綠染色劑（取A液20mL,B液80mL配成染色劑，使用時現(xiàn)配。A液：取吡羅紅甲基綠粉1g，加入100mL蒸餾水中溶解，放入棕色瓶中備用。B液：取乙酸鈉16.4g,用蒸餾水溶解至1000mL。取乙酸12mL，用蒸餾水稀釋至1000mL。取稀釋的乙酸鈉溶液30mL和乙酸20mL，加蒸餾水50mL,配成pH為4.8的溶液），蒸餾水。Unna試劑甲液5%派洛寧水溶液，6ml2%的甲基綠水溶液，6ml蒸餾水，16ml乙液，1mol/L乙酸鈉，16ml用時混合。乙液，1mol/L乙酸鈉，A、取乙酸6mL---100mLB、乙酸鈉13.5g---100mLA40mL+B60ml即可。學(xué)生預(yù)習(xí)實驗。

學(xué)生預(yù)習(xí)實驗。（一）老師介紹實驗的原理以及科學(xué)認(rèn)識的模式原理：甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠和吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA和染色劑結(jié)合?？茖W(xué)認(rèn)識模式是“假設(shè)檢驗”，即在提出問題后，接著提出猜測性的假設(shè)，然后用觀察和實驗來檢驗。這種科學(xué)認(rèn)識模式的程序是問題→試探性假設(shè)→批判與檢驗。這是科學(xué)探究的一般程序，也是探究性學(xué)習(xí)的一般程序。（二）找一個預(yù)習(xí)作業(yè)做得比較好的同學(xué)，（二）找一個預(yù)習(xí)作業(yè)做得比較好的同學(xué)，陳述實驗如何進(jìn)行A.問題的提出：DNA和RNA在細(xì)胞中是怎么分布的？B.試探性假設(shè)：DNA分布在細(xì)胞核，RNA分布在細(xì)胞質(zhì)。C.實驗檢驗：甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色，通過觀察兩種顏色出現(xiàn)的部位來判斷DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。實驗方法步驟

1.取口腔上皮細(xì)胞（1）在潔凈的載玻片上，滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液。（2）用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下，把牙簽上附有碎屑的一端，放在載玻片的液滴中涂抹幾下。（3）點燃酒精燈，將涂有口腔上皮細(xì)胞的載玻片烘干。2.水解（1）在小燒杯中加入30mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸，將烘干的載玻片放入小燒杯中。（2）在大燒杯中加入30℃溫水。（1）用吸水紙吸去載玻片上的水分。（2）將吡羅紅甲基綠染色劑滴2滴在載玻片上，染色5min。（3）吸去多余染色劑，蓋上蓋玻片