中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在中藥飲片質(zhì)量控制中的應(yīng)用

中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在中藥飲片質(zhì)量控制中的應(yīng)用

中醫(yī)藥的制備是根據(jù)中醫(yī)藥理論、藥理學(xué)的性質(zhì)和臨床應(yīng)用的需要，采用獨(dú)特的制藥技術(shù)創(chuàng)造的。藥材經(jīng)炮制后得到的飲片,既可直接用于臨床配方,又可用于中藥制劑的生產(chǎn),其質(zhì)量?jī)?yōu)劣直接影響到療效的好壞。因此,系統(tǒng)深入的研究制定飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與評(píng)價(jià)方法顯得尤為重要。目前,《中國(guó)藥典》和各省、市、自治區(qū)地方炮制規(guī)范共同形成了中藥飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系。中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(包括中藥化學(xué)對(duì)照品、對(duì)照藥材與對(duì)照提取物)在中藥飲片質(zhì)量控制中發(fā)揮了重要作用。但中藥成分復(fù)雜,且炮制過(guò)程又是藥物的理化性質(zhì)發(fā)生復(fù)雜變化的過(guò)程,因此飲片的物質(zhì)基礎(chǔ)———化學(xué)成分更加復(fù)雜。采用當(dāng)前的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法與質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),尚存在一定的缺陷,這也在一定程度上制約了飲片產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展,影響了中藥的現(xiàn)代化與國(guó)際化進(jìn)程。因此,只有研究建立更加科學(xué)、完善、合理、可控的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),保障中藥飲片的安全性、有效性、穩(wěn)定性和質(zhì)量可控性,才能使中藥在國(guó)際市場(chǎng)占有一席之地。本文對(duì)中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的概況及其在中藥飲片質(zhì)量控制中的應(yīng)用現(xiàn)狀作簡(jiǎn)要綜述,對(duì)當(dāng)前中藥飲片質(zhì)量控制中存在的問(wèn)題加以分析探討,并提出解決問(wèn)題的思路。1中藥對(duì)照物質(zhì)的選擇原則《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理辦法》第三條規(guī)定:“國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是指供國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中物理和化學(xué)測(cè)試及生物方法試驗(yàn)用,具有確定特性量值,用于校準(zhǔn)設(shè)備、評(píng)價(jià)測(cè)量方法或者給供試品賦值的材料或物質(zhì)。”其中,中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是國(guó)家頒布的一種計(jì)量標(biāo)準(zhǔn),是定性、定量檢測(cè)中藥所使用的實(shí)物對(duì)照,必須具有高度均勻性、量值準(zhǔn)確性和良好的穩(wěn)定性。目前中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可分為中藥化學(xué)對(duì)照品(包括內(nèi)標(biāo)物)、對(duì)照藥材和對(duì)照提取物。依據(jù)《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)規(guī)范》,中藥對(duì)照物質(zhì)的選擇原則可歸納為:1新建標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)必須考慮其制備、標(biāo)定、保存和分發(fā)使用的可能性;2專(zhuān)屬性強(qiáng)、穩(wěn)定性強(qiáng)、可大量制備;3質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)中所采用的中藥化學(xué)對(duì)照品物質(zhì)要有可靠性。此外,該指導(dǎo)原則對(duì)中藥化學(xué)對(duì)照品、對(duì)照藥材和對(duì)照提取物的標(biāo)定都制定了較為具體的技術(shù)細(xì)則。2收載中藥飲片數(shù)量增加中藥飲片質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響到療效的好壞,規(guī)范、穩(wěn)定、可控的炮制工藝技術(shù)是中藥飲片質(zhì)量的根本保證。深入研究中藥飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、建立中藥飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)體系對(duì)于控制飲片質(zhì)量具有重要意義。目前,《中國(guó)藥典》和省、市、自治區(qū)地方炮制規(guī)范共同形成了中藥飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系。《中國(guó)藥典》作為我國(guó)藥品檢驗(yàn)的最高標(biāo)準(zhǔn),收載的飲片數(shù)目不斷增加,2005年版收載中藥飲片13種,2010年版收載中藥飲片439種,總品種數(shù)822種,即將修訂的2015年版《中國(guó)藥典》計(jì)劃新增43%的品種。中藥飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)由形態(tài)、性狀、氣味及簡(jiǎn)單的理化鑒別方法,逐步發(fā)展成為一個(gè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系,具體包含以下15項(xiàng)內(nèi)容:名稱(chēng)、來(lái)源、制法、性狀、鑒別、檢查、輔料測(cè)定、浸出物測(cè)定、量測(cè)定、性味歸經(jīng)、功能主治、用法用量、注意事項(xiàng)、有效期、包裝貯藏。這對(duì)于提高飲片質(zhì)量、指導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)、保證臨床用藥的安全有效性具有重要意義。3對(duì)照藥材鑒別2010年版《中國(guó)藥典》收載的822種飲片規(guī)格,其中72%需采用蒸、煮、火單、制、炒、煅等技術(shù)炮制。所收載的飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)用到的中藥對(duì)照物質(zhì)共計(jì)640種,其中對(duì)照藥材有239種,中藥化學(xué)對(duì)照品有400種,對(duì)照提取物有1種。3.2飲片鑒別2010年版《中國(guó)藥典》中,飲片鑒別項(xiàng)應(yīng)用了239種對(duì)照藥材,300種中藥化學(xué)對(duì)照品,1種對(duì)照提取物,即薏苡仁油對(duì)照提取物。其中,僅采用對(duì)照藥材鑒別的飲片有94種,如三棱、大血藤、大薊、山藥、千里光、川木香、麥冬、麥芽、花椒、蒼耳子、重樓、桔梗、狼毒等;僅采用中藥化學(xué)對(duì)照品鑒別的飲片有152種,如秦艽、秦皮、莪術(shù)、桃仁、黨參、遠(yuǎn)志、吳茱萸、阿膠、陳皮等;同時(shí)采用對(duì)照藥材和中藥化學(xué)對(duì)照品鑒別的飲片有78種,如芫花、蒼術(shù)、蘇木、兩面針、沙苑子、獨(dú)活、姜黃、穿心蓮、萊菔子、桂枝、柴胡等;采用對(duì)照提取物和中藥化學(xué)對(duì)照品鑒別的有1種,即薏苡仁。3.3飲片含量測(cè)定2010年版《中國(guó)藥典》中,飲片含量測(cè)定項(xiàng)應(yīng)用了320種中藥化學(xué)對(duì)照品。其中,飲片含量測(cè)定的成分與藥材不同的有7種,分別為(制)草烏、(熟)地黃、(制)遠(yuǎn)志、附子、禹州漏蘆、(制)淫羊藿,具體見(jiàn)表2。飲片含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)低于藥材的有55種,分別為姜炭、山豆根、山茱萸、炒山楂、焦山楂、炒川楝子、馬錢(qián)子粉、制遠(yuǎn)志、赤芍、炒芥子、何首烏、炒苑子、陳皮、忍冬藤、姜黃、絡(luò)石藤、王不留行、木青、烏梅、薏苡仁、青皮、苦杏仁、苦參、知母、佩蘭、金蕎麥、澤瀉、荊芥、茜草、草果仁、梔子、厚樸、甘松、甘草、石菖蒲、龍膽、仙茅、槲寄生、秦皮、莪術(shù)、荷葉、桃仁、積雪草、益母草、焦檳榔、地榆炭、朱砂根、延胡索、防己、黃芩、黃精、豬苓、淫羊藿、續(xù)斷、肉豆蔻。飲片含量測(cè)定限度高于藥材的有3種,分別為商陸、板藍(lán)根、(清)半夏,具體見(jiàn)表3。4研究主要行政藥品中的質(zhì)量控制方法4.1以對(duì)照藥材、對(duì)照品控制飲片質(zhì)量,不能全面體現(xiàn)炮制作用中藥炮制的作用主要體現(xiàn)在解毒、增效、改性3個(gè)方面?，F(xiàn)代研究表明,通過(guò)炮制技術(shù)影響毒性成分是炮制解毒的有效途徑。炮制增效主要與提高有效成分溶出率、改變藥物成分的含量或化學(xué)組分的比例以及生成新的有效成分有關(guān)。現(xiàn)行的飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中,以對(duì)照藥材、中藥化學(xué)對(duì)照品控制飲片質(zhì)量,忽略了炮制過(guò)程中飲片發(fā)生的變化,不能全面體現(xiàn)炮制的作用,這樣的標(biāo)準(zhǔn)是不合理、不完善的。如生表22010年版《中國(guó)藥典》飲片與藥材含量測(cè)定成分的比較Table2ThecomparisonofcomponentsincontentdeterminationbetwwenherbalpiecesandcrudedrugsinChinesePharmacopoe-ia(2010edition)地黃甘、苦、寒,歸心、肝、腎經(jīng),具有清熱涼血、養(yǎng)陰生津的功效,臨床主要用于熱入營(yíng)血、溫毒發(fā)斑、熱病傷陰、骨蒸勞熱等;經(jīng)酒燉法或蒸制法炮制成為熟地黃后,性味、歸經(jīng)、功效都發(fā)生了不同程度的變化,其性味偏溫,歸肝、腎經(jīng),具有滋陰補(bǔ)血、益精填髓的功效,臨床主要用于血虛萎黃,心悸怔腫,月經(jīng)不調(diào),崩漏下血,肝腎陰虛,盜汗遺精,內(nèi)熱消渴等。2010年版《中國(guó)藥典》中,生地黃項(xiàng)下以梓醇和毛蕊花糖苷作為鑒別項(xiàng)和含量測(cè)定項(xiàng)的檢測(cè)指標(biāo),熟地黃項(xiàng)下以毛蕊花糖苷作為鑒別項(xiàng)和含量測(cè)定項(xiàng)的檢測(cè)指標(biāo)。藥材與飲片之間、不同炮制品之間的性味歸經(jīng)和功能主治是有區(qū)別的,采用相同的評(píng)價(jià)指標(biāo)和檢測(cè)方法顯然是不合理的,因此需要深入研究能體現(xiàn)炮制作用與飲片特點(diǎn)的質(zhì)量控制方法。中藥化學(xué)對(duì)照品存在分離難度大、單體不穩(wěn)定、供應(yīng)價(jià)格高、資源浪費(fèi)、供應(yīng)數(shù)目有限且所測(cè)成分單一等缺點(diǎn)。中藥飲片成分多樣且復(fù)雜,以單體化學(xué)對(duì)照品控制飲片質(zhì)量,所提供的信息遠(yuǎn)遠(yuǎn)不足,達(dá)不到整體質(zhì)量控制的目的,與中醫(yī)藥整體觀的學(xué)術(shù)思想不相符。2010年版《中國(guó)藥典》飲片質(zhì)量控制中應(yīng)用的化學(xué)對(duì)照品約400種,占對(duì)照物質(zhì)總數(shù)的62.5%。因此,建立更加科學(xué)、系統(tǒng)、可操作性強(qiáng),能客觀真實(shí)的反映中藥飲片內(nèi)在質(zhì)量與整體質(zhì)量的評(píng)價(jià)方法勢(shì)在必行。4.3炮制后產(chǎn)生的新組分如何在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中體現(xiàn)中藥飲片的炮制加工過(guò)程是藥物的理化性質(zhì)發(fā)生復(fù)雜變化的過(guò)程。同種藥材,其炮制工藝不同,飲片的理化性質(zhì)就會(huì)發(fā)生不同的變化,相應(yīng)的藥性功效也不相同。因此,照搬藥材的質(zhì)量控制方法和標(biāo)準(zhǔn)是不合理的。陸兔林等［2］采用GC-MS分析炮制對(duì)莪術(shù)揮發(fā)油成分的影響,結(jié)果顯示,莪術(shù)經(jīng)醋制后組分變化很大,并產(chǎn)生2個(gè)新組分4-異丙基苯甲酸和2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)-環(huán)己酮。2010年版《中國(guó)藥典》中,僅以揮發(fā)油總量控制莪術(shù)與醋莪術(shù)的質(zhì)量,未能體現(xiàn)炮制過(guò)程中組分變化的情況。中藥經(jīng)過(guò)炮制后發(fā)生的變化極其復(fù)雜,有些會(huì)形成新的物質(zhì),而真正起藥效作用的不一定是原來(lái)存在于藥材中的物質(zhì),有可能是炮制后經(jīng)過(guò)多途徑變化的新組分。因此,在飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定過(guò)程中,應(yīng)深入研究炮制后產(chǎn)生的新組分,尤其應(yīng)注重具有生物活性作用的新組分的研究,這對(duì)于體現(xiàn)炮制過(guò)程和飲片特點(diǎn)具有重要意義。4.4動(dòng)物藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)水平較低動(dòng)物藥是中醫(yī)藥寶庫(kù)中不可缺少的部分,在臨床應(yīng)用中占有重要地位。臨床應(yīng)用的動(dòng)物藥多為炮制后的飲片,成分復(fù)雜,雖然近年來(lái)在其質(zhì)量控制方面的研究已取得許多成果,但進(jìn)展相對(duì)緩慢,質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)水平仍較低。2010年版《中國(guó)藥典》收載的動(dòng)物藥中有14味無(wú)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),分別為血余炭、蟲(chóng)白蠟、雞內(nèi)金、金錢(qián)白花蛇、海龍、蛇蛻、鹿角、鹿角霜、紫河車(chē)、蜈蚣、蜂房、蜂蠟、蟬蛻、鱉甲。有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物藥中,僅12味有含量測(cè)定項(xiàng),占總動(dòng)物藥的26.7%,分別為牛黃、五倍子、冬蟲(chóng)夏草、牡蠣、龜甲膠、阿膠、豬膽粉、鹿角膠、斑蝥、蜂膠、蜂蜜、麝香。但動(dòng)物藥成分復(fù)雜,僅以某一種或某幾種化合物的含量作為其質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)是不完善、不充分的。5完善飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)5.1研究制定中藥對(duì)照飲片現(xiàn)行的飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中,以對(duì)照藥材、中藥化學(xué)對(duì)照品控制飲片質(zhì)量,忽略了炮制過(guò)程中飲片發(fā)生的變化,不能體現(xiàn)炮制的作用,因此建議研究制定中藥對(duì)照飲片,即按標(biāo)準(zhǔn)炮制工藝生產(chǎn),經(jīng)鑒定、標(biāo)化合格后,用于鑒別中藥飲片及其制劑的對(duì)照物質(zhì)。對(duì)照飲片標(biāo)定項(xiàng)目應(yīng)符合以下幾點(diǎn)要求:1應(yīng)是符合對(duì)照藥材要求,并按標(biāo)準(zhǔn)炮制工藝生產(chǎn)的樣品;2應(yīng)是符合GAP及GMP規(guī)范生產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)中藥飲片;3飲片應(yīng)經(jīng)性狀、組織及粉末顯微鑒定,須符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定;4應(yīng)對(duì)飲片進(jìn)行雜質(zhì)、水分、灰分、浸出物測(cè)定,毒性中藥應(yīng)檢查毒性成分的含量;5薄層測(cè)定項(xiàng)應(yīng)依據(jù)炮制后飲片的成分選擇合適的提取方法和展開(kāi)條件;7含量測(cè)定項(xiàng)應(yīng)選擇炮制后飲片的特征性成分等進(jìn)行測(cè)定。對(duì)照飲片專(zhuān)屬性高、穩(wěn)定性強(qiáng)并可大量制備,在飲片質(zhì)量控制過(guò)程中積極引入對(duì)照飲片,可真實(shí)可靠的反映飲片質(zhì)量的優(yōu)劣。5.2研究制定飲片對(duì)照提取物對(duì)照提取物相對(duì)于中藥化學(xué)對(duì)照品和對(duì)照藥材有專(zhuān)屬性較強(qiáng)、配制操作簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉等特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)。對(duì)照提取物可以應(yīng)用于薄層色譜法,彌補(bǔ)對(duì)照藥材不能體現(xiàn)飲片炮制前后不同的缺點(diǎn),還能應(yīng)用于其他如液相、氣相色譜鑒別。同時(shí),在含量測(cè)定中對(duì)照提取物可以標(biāo)示多個(gè)單體成分含量,達(dá)到“一標(biāo)多測(cè)”的目的。因此,推行以飲片對(duì)照提取物為對(duì)照的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系,可以完善飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),解決部分飲片標(biāo)準(zhǔn)缺失和炮制加工后成分改變標(biāo)準(zhǔn)未相應(yīng)改變等問(wèn)題。目前,2010年版《中國(guó)藥典》收載了16種對(duì)照提取物對(duì)中藥及其制劑進(jìn)行質(zhì)量控制,飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中僅薏苡仁油1種對(duì)照提取物。5.3研究制定不同炮制品的有效成分、指標(biāo)性成分中藥飲片是一個(gè)天然化合物組合庫(kù),成分復(fù)雜,有效成分常常是一類(lèi)化合物,而非單體化合物,應(yīng)采用專(zhuān)屬性強(qiáng)與療效有直接關(guān)系的有效成分進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。炮制加工對(duì)成分都有一定破壞,而破壞程度只能用指標(biāo)成分的含量來(lái)衡量［3］。因此對(duì)于制定飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),研究制定不同炮制品的有效成分和(或)指標(biāo)性成分就顯得很有必要。為此,要加強(qiáng)炮制機(jī)制研究,尤其是要加強(qiáng)對(duì)毒性飲片的藥理、藥效研究;明確炮制過(guò)程中成分含量的變化;針對(duì)飲片炮制工藝水平、有效成分和藥效的認(rèn)知程度、量化指標(biāo)等研究情況,分別制定不同級(jí)別的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。例如對(duì)于有效成分和藥效基本清楚、量化指標(biāo)和檢測(cè)方法科學(xué)的飲片制定專(zhuān)業(yè)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。這樣的標(biāo)準(zhǔn)更容易做到成分檢驗(yàn)有理有據(jù)、清楚明白,結(jié)果令人信服。5.4研究建立飲片特征圖譜標(biāo)準(zhǔn)中藥指紋圖譜是采用指紋圖譜的模式,將中藥的內(nèi)在化學(xué)物質(zhì)特性轉(zhuǎn)化為常規(guī)的色譜數(shù)據(jù)信息,通過(guò)對(duì)中藥樣品特征性的識(shí)別,全面、整體、特異性地表征中藥的化學(xué)品質(zhì)［4］。目前,在中藥質(zhì)量控制體系中,化學(xué)指紋圖譜在中藥的真實(shí)性鑒定方面已比較成熟;譜效學(xué)、生物指紋圖譜和代謝指紋圖譜由于與藥效活性相關(guān),在中藥的有效性評(píng)價(jià)中已體現(xiàn)出優(yōu)勢(shì);色譜指紋圖譜在中藥的安全性評(píng)價(jià)方面的應(yīng)用也愈來(lái)愈受到重視［5］。中藥的物質(zhì)群在炮制過(guò)程中會(huì)發(fā)生復(fù)雜的變化,這種變化包括物質(zhì)數(shù)、物質(zhì)量以及物質(zhì)的組成比例等,采用單一成分的線性質(zhì)量控制模式是不合理的,研究清楚每一種物質(zhì)的變化情況也是不現(xiàn)實(shí)的。因此,利用特征圖譜的整體性與模糊性,將其引入中藥飲片的質(zhì)量控制體系中,既體現(xiàn)了中醫(yī)藥整體觀的理論內(nèi)涵,又可以全面、整體、特異地表征飲片的質(zhì)量?jī)?yōu)劣。采用標(biāo)準(zhǔn)炮制工藝得到標(biāo)準(zhǔn)飲片,建立標(biāo)準(zhǔn)飲片的指紋圖譜庫(kù),通過(guò)對(duì)比藥材與炮制品的指紋圖譜,可得到炮制前后發(fā)生變化的成分,通過(guò)對(duì)比不同批次炮制品的特征圖譜,可對(duì)飲片的質(zhì)量?jī)?yōu)劣及穩(wěn)定性進(jìn)行分析。這對(duì)于炮制機(jī)制的研究和炮制工藝的評(píng)判都具有重要意義。目前,中藥飲片色譜指紋圖譜質(zhì)量控制已取得較多成果,但也存在不少困難,飲片特征圖譜標(biāo)準(zhǔn)的建立還需要更加深入的探索與研究。5.5研究建立“一測(cè)多評(píng)”及“替代對(duì)照品”模式控制飲片質(zhì)量中藥化學(xué)對(duì)照品的單一性難以體現(xiàn)中藥飲片多成分、多功效的復(fù)雜性,相應(yīng)提出的多成分質(zhì)量控制和多指標(biāo)的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系也由于中藥化學(xué)對(duì)照品生產(chǎn)成本及技術(shù)要求高、單體不穩(wěn)定、供應(yīng)數(shù)量有限和供應(yīng)價(jià)格高等因素,實(shí)施時(shí)有諸多限制。近年來(lái),王智民等［6］提出“一測(cè)多評(píng)”法及謝元超等［7］首次提出“替代對(duì)照品”法,即以中藥中某一典型組分(有對(duì)照品供應(yīng)者)為內(nèi)標(biāo),建立該組分與其他組分(對(duì)照品難以得到或難供應(yīng))之間的相對(duì)校正因子,通過(guò)校正因子計(jì)算其他組分的含量。這種測(cè)定一個(gè)成分,實(shí)現(xiàn)對(duì)多個(gè)成分定量的方法,稱(chēng)為“一測(cè)多評(píng)”或“替代對(duì)照品”。目前,2010年版《中國(guó)藥典》一部中,已經(jīng)收載該方法測(cè)定黃連中小檗堿、巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿等5個(gè)成分的含量。同時(shí)“一測(cè)多評(píng)”的研究文獻(xiàn)逐漸增多,是中藥質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)模式的發(fā)展趨勢(shì)之一。該方法在部分多指標(biāo)成分的測(cè)定中得到了成功的應(yīng)用,但還需要對(duì)其技術(shù)適用性和應(yīng)用可行性進(jìn)一步完善和探索。6著力提高中藥飲片質(zhì)量控制體系的科學(xué)性隨著國(guó)家醫(yī)藥衛(wèi)生保障事業(yè)的發(fā)展,藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的應(yīng)用