急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)

急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)1目的（1)檢測(cè)消毒劑對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的急性毒性作用和強(qiáng)度。（2)為亞急（慢）性毒性等試驗(yàn)提供劑量選擇的依據(jù)。2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠或大鼠任選一種，雌雄各半。小鼠體重18g～22g，大鼠體重180g～220g，根據(jù)不同的計(jì)算LD50方法，選用適當(dāng)?shù)膭?dòng)物數(shù)量。3試驗(yàn)分組如應(yīng)用概率單位-對(duì)數(shù)圖解法計(jì)算LD50，隨機(jī)分為5個(gè)～6個(gè)劑量組。通常最高劑量組的動(dòng)物死亡率應(yīng)≥90%，最低劑量組動(dòng)物死亡率應(yīng)≤10%。可先以較大的組距較少量動(dòng)物進(jìn)行預(yù)試，找出其粗略致死劑量范圍，然后再設(shè)計(jì)正式試驗(yàn)的劑量分組。4操作程序（1）動(dòng)物的準(zhǔn)備：試驗(yàn)前，一般禁食過(guò)夜，不限制飲水。（2）受試物的配制：常以水或食用植物油為溶劑配制成溶液，或采用0.5%羧甲基纖維素配制成混懸液。灌胃給予受試物的最大容量，小鼠不超過(guò)0.2ml/10g體重，大鼠不超過(guò)1.0ml/100g體重。（3）染毒方法：用灌胃方式將受試物一次給予動(dòng)物。若受試物毒性很低，一次灌胃容量太大，可在24h內(nèi)分成2次～3次給予，其總劑量作為一日劑量計(jì)算。（4）染毒后觀察動(dòng)物的中毒表現(xiàn)和死亡數(shù)及死亡時(shí)間，并對(duì)死亡動(dòng)物和觀察期滿處死動(dòng)物進(jìn)行尸體解剖，肉眼觀察，發(fā)現(xiàn)有異常的組織或臟器，尚需進(jìn)一步作組織病理學(xué)檢查。觀察時(shí)間14d。5LD50的計(jì)算方法根據(jù)給受試物后14d內(nèi)的各劑量組動(dòng)物死亡率計(jì)算LD50(半數(shù)致死劑量)。5.1概率單位-對(duì)數(shù)圖解法：（1）根據(jù)各劑量組動(dòng)物死亡率，從表2-9中查各組的概率單位。因死亡率為0%和100%的概率單位，與所試動(dòng)物數(shù)有關(guān)，故需另在表2-10中查找。例如：對(duì)死亡率為45%的概率單位，可查表2-9。先在表的左側(cè)縱標(biāo)目上找到40，而后在表的上行橫標(biāo)目處找到5，兩者交叉點(diǎn)處的4.87，即為45%的概率單位。又如:某組用10只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如果全部存活(死亡率為0%)，查表2-10，其概率單位為3.04。表2-9百分率-概率單位換算表%01234567890..2.672.953.123.253.363.453.523.593.66103.723.773.823.873.923.964.014.054.084.12204.164.194.234.264.294.334.364.394.424.45304.484.504.534.564.594.614.644.674.694.72404.754.774.804.824.854.874.904.924.954.97505.005.035.055.085.105.135.155.185.205.23605.252.285.315.335.365.395.415.445.475.50705.525.555.585.615.645.675.715.745.775.81805.845.885.925.955.996.046.086.136.186.23906.286.346.416.486.556.646.756.887.057.33注:橫標(biāo)目數(shù)字為死亡率的個(gè)位數(shù)，縱標(biāo)目數(shù)字為死亡率的十位數(shù)。表2-10相應(yīng)于反應(yīng)率為0％及100％的概率單位該組動(dòng)物數(shù)反應(yīng)率該組動(dòng)物數(shù)反應(yīng)率0%100%0%100%.........113.007.0023.856.15122.977.0333.626.38132.937.0743.476.53142.907.1053.366.64152.877.1363.276.73162.857.1573.206.80172.827.1883.136.87182.807.2093.096.91192.787.22103.046.96202.767.24（2)用方格紙繪散點(diǎn)圖，橫軸表示劑量的對(duì)數(shù)值(X)，縱軸為概率單位值(Y)，將各組數(shù)值點(diǎn)在圖上。（3)按各點(diǎn)的分布趨勢(shì)，用直尺繪出一條最適合于各點(diǎn)的直線，使線上方的點(diǎn)到線的總距離與線下方的點(diǎn)到線的總距離相近，此線應(yīng)盡量靠近概率單位為5的點(diǎn)及附近的點(diǎn)。（4）查出求概率單位5處的劑量對(duì)數(shù)，其反對(duì)數(shù)即為L(zhǎng)D50。按下列公式計(jì)算LD50的95%可信限。S=(X2－X1)/(Y2－Y1)Sm=S/(N'/2)-1/2LD50對(duì)數(shù)值的95%可信限=logLD50±1.96Sm(上式結(jié)果，經(jīng)反對(duì)數(shù)變換后，可得LD50的95%可信限)[Sm為L(zhǎng)D50的標(biāo)準(zhǔn)誤；S為標(biāo)準(zhǔn)差；X1、X2分別為機(jī)率單位等于4(Y1)和6(Y2)時(shí)相應(yīng)的劑量對(duì)數(shù)值；N'為Y1(=4)及Y2(=6)相應(yīng)的死亡率間所用的動(dòng)物數(shù)]。5.2一次最大限度試驗(yàn)：如20只動(dòng)物(雌雄各半)一次灌胃劑量5000mg/kg體重，在14d內(nèi)又無(wú)死亡，可判定LD50大于5000mg/kg體重。5.3其他方法：如霍恩(Horn)法、寇氏(Karber)法等。6評(píng)價(jià)規(guī)定消毒劑的毒性評(píng)價(jià)：LD50大于5000mg/kg體重者屬實(shí)際無(wú)毒；