不同營養(yǎng)水平和粒度全混合日糧對綿羊瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響

不同營養(yǎng)水平和粒度全混合日糧對綿羊瘤胃內(nèi)環(huán)境的影響

全混合日糧（tr）是一種用于反芻動物規(guī)范化和飼養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)。在生產(chǎn)和加工mtr時，采用專門的攪拌機，將混合、切割和揉捏日糧的各部分，以確保動物飼料的精髓和粗素比例穩(wěn)定，以及養(yǎng)分平衡。這一技術(shù)在美國、加拿大、日本等國家得到了推廣和應用。中國已經(jīng)開始采用這一技術(shù)。蔣濤等人使用了兩種糧食作為飼料，并使用了粗素分離。這表明，mtr飼養(yǎng)技術(shù)可以有效防止反芻動物瘤的胃中毒。根據(jù)研究，粗飼料經(jīng)過氨化和堿化處理，成熟并轉(zhuǎn)化為mtr，以飼養(yǎng)山羊。提高日常飼料量，消化率和飼料轉(zhuǎn)化率。馮加農(nóng)和楊方湖對各種營養(yǎng)化水平的研究結(jié)果表明，適合短期山羊育肥。以上mtr在養(yǎng)羊業(yè)中的研究報道主要是人工mtr，對非tr和tr的機械加工以及粗素粒和養(yǎng)分的結(jié)合沒有報道。在本試驗中，我們將為羊的生存提供兩個養(yǎng)分和兩個粒度的四個tmr，以及在綿羊生產(chǎn)中使用mtr的基本數(shù)據(jù)。1材料和方法1.1中國肉羊飼養(yǎng)標準采用2×2二因子析因試驗設(shè)計,A因子為營養(yǎng)水平,其中A1為1.0倍中國肉羊飼養(yǎng)標準(中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準,NY/T816-2004),A2為1.5倍中國肉羊飼養(yǎng)標準;B因子為青貯玉米前處理方式,B1為不粉碎,B2為粉碎處理.試驗設(shè)預試期7d,正試期4d.1.2試驗飼糧配方和設(shè)備的準備根據(jù)各飼料原料的干物質(zhì)(drymatter,DM)、粗蛋白(crudeprotein,CP)、鈣(Ca)和磷(P)含量,參照中國肉羊飼養(yǎng)標準中妊娠母羊前期營養(yǎng)需要量來設(shè)計飼糧配方(表1).用TMR攪拌機(司達特9SJW-700型)制作TMR.加工TMR時,B1中的青貯玉米不粉碎,B2中的青貯玉米用去掉篩片后的錘片式粉碎機(40型,寧夏中衛(wèi)市天元鋒機械制造有限責任公司)進行粉碎.谷物精料預先用粉碎機粉碎,然后按照先精后粗,先干后濕的順序,依次加入精料、苜蓿干草和青貯玉米.制作好的TMR用賓州粗飼料分級篩(PSPS)(美國Nasco公司)評定粒度(表2).試驗飼糧一次加工,置于1～3℃的封閉室內(nèi),避光保存.1.3試驗方法及投料量選24只體況良好,體質(zhì)量相近[(55.2±3.34)kg]的2歲左右空懷期小尾寒羊母羊,隨機分為4組,每組6只.綿羊采用單欄飼養(yǎng)(2.5m×1.2m).試驗前對羊舍、羊欄、食槽和水槽進行消毒.過渡期5d,每天用20%的試驗日糧逐步替換原來日糧,每只綿羊每天投料量為1.6kg(按DM計算),等量飼喂3次(8∶00、14∶00和20∶00),自由飲水,并記錄剩料量.1.4瘤液中總氮、氨氮、尿素氮和揮發(fā)性脂肪酸含量的測定在正試期結(jié)束后,綿羊于8∶00飼喂1次,分別在食前及食后2、4、6、8h用胃管從瘤胃中抽取50mL瘤胃液,立即測定pH.然后用4層紗布過濾,并按瘤胃液體積的1/100加入飽和氯化汞溶液(使酶滅活),最后分裝于采樣瓶中,置冰箱(-20℃)冷凍保存,用于測定瘤胃液的總氮、氨氮、尿素氮和揮發(fā)性脂肪酸(volatilefattyacid,VFA).1.5氨氮的測定瘤胃液pH用SartoriusPB-10型酸度計現(xiàn)場測定;總氮用凱氏定氮法測定;氨氮參照馮宗慈改進的比色法測定;尿素氮濃度采用二乙酰一肟法測定(試劑盒購買于南京建成生物工程研究所).VFA采用氣相色譜儀(Agilent-6890N)測定.瘤胃液蛋白氮=瘤胃液總氮-瘤胃液氨氮-瘤胃液尿素氮1.6多重比較試驗采用SPSS16.0軟件,對數(shù)據(jù)進行兩因子方差分析,用Tukey法進行多重比較.綿羊瘤胃液VFA體積百分數(shù)進行反正弦轉(zhuǎn)換.試驗結(jié)果用(xˉ±s)表示.(xˉ±s)表示.2結(jié)果與分析2.1對兩組丙二醛的影響由表3可見,各處理綿羊的瘤胃液pH在6.21～6.80之間波動,采食后,pH先降低后升高,變化規(guī)律基本相同.在食后2～8h,采食含A1TMR的綿羊瘤胃液pH(6.47～6.71)高于采食A2TMR的綿羊(6.21～6.48).A因子對各處理綿羊食后2h和4h的瘤胃液pH有極顯著影響(P<0.01),對各處理綿羊食后6h瘤胃液pH有顯著影響(P<0.05).A×B交互作用對綿羊食后4h瘤胃液pH產(chǎn)生了顯著影響(P<0.05),A1B1組綿羊瘤胃液pH極顯著高于A2B1組(P<0.01).2.2兩組大鼠食前后瘤液總氮濃度的變化由表4可見,采食A2TMR的綿羊瘤胃液總氮濃度(553.97～798.01mg/100mL)高于采食A1TMR的綿羊(270.87～438.04mg/100mL),A因子對各處理綿羊所有時間點的瘤胃液總氮濃度都產(chǎn)生了極顯著影響(P<0.01).B因子對綿羊食前瘤胃液總氮濃度有顯著影響(P<0.05).A×B交互作用對綿羊食后2h和8h瘤胃液總氮濃度有顯著影響(P<0.05).在食后2h,A2B2組綿羊瘤胃液總氮濃度極顯著高于A1B1組和A1B2組(P<0.01),A2B1組綿羊瘤胃液總氮濃度顯著高于A1B1組(P<0.05).在食后8h,A2B2組綿羊瘤胃液總氮濃度極顯著高于A1B1組和A1B2組(P<0.01),A2B1組綿羊瘤胃液總氮濃度顯著高于A1B2組(P<0.05).在食后4h,A1B1組與A1B2組,A2B1組與A2B2組綿羊瘤胃液總氮濃度接近.2.3對大鼠瘤液氨氮濃度的影響由表5可知,各處理綿羊瘤胃液氨氮濃度變化趨勢相近,在食后2h達到最高,然后逐漸降低.采食A2TMR的綿羊瘤胃液氨氮濃度有高于采食A1TMR的綿羊的趨勢.在各時間點,采食B2TMR的綿羊瘤胃液氨氮濃度低于采食B1TMR的綿羊.A因子對食前、食后2h和食后4h的綿羊瘤胃液氨氮濃度產(chǎn)生了極顯著影響(P<0.01).B因子對食后2、4、6h綿羊瘤胃液氨氮濃度有顯著影響(P<0.05).A×B交互作用在食后4h對瘤胃液氨氮濃度產(chǎn)生了顯著影響(P<0.05),A2B1組極顯著高于A1B1組、A1B2組和A2B2組(P<0.01).2.4兩組羊瘤獸藥氨氮表達水平比較由表6可見,采食含A2因子TMR的綿羊瘤胃液尿素氮濃度(1.18～1.60mg/100mL)高于采食含A1因子TMR的綿羊(0.56～1.02mg/100mL).A因子對各時間點的綿羊瘤胃液尿素氮濃度都產(chǎn)生了極顯著影響(P<0.01).B因子對食后2、6、8h的綿羊瘤胃液氨氮濃度有顯著影響(P<0.05),對食后4h綿羊瘤胃液氨氮濃度有極顯著影響(P<0.01).A×B交互作用對食前、食后6h和食后8h的綿羊瘤胃液氨氮濃度產(chǎn)生了顯著影響(P<0.05).在食前,A2B1組和A2B2組綿羊瘤胃液氨氮濃度極顯著高于A1B1組和A1B2組(P<0.01),在食后6h和8h,A1B1組綿羊瘤胃液氨氮濃度極顯著低于A1B2組、A2B1組和A2B2組(P<0.01),A1B2組綿羊瘤胃液氨氮濃度顯著高于A2B1組(P<0.05).2.5對大鼠說的影響由表7可見,采食含A2因子TMR的綿羊瘤胃液蛋白氮濃度(506.86～776.63mg/100mL)高于采食含A1因子TMR的綿羊(252.14～421.76mg/100mL).A因子對各時間點的綿羊瘤胃液蛋白氮濃度都產(chǎn)生了極顯著影響(P<0.01).B因子對食前的綿羊瘤胃液蛋白氮濃度有顯著影響(P<0.05).A×B交互作用對食后2h和8h的綿羊瘤胃液氨氮濃度產(chǎn)生了顯著影響(P<0.05).在食后2h,A2B1組綿羊瘤胃液氨氮極顯著高于A1B1組和A1B2組(P<0.01),A2B2組綿羊瘤胃液氨氮顯著高于A1B2組(P<0.05).2.6不同主體間的交互作用顯著影響tvfa的體積分數(shù)表8中列出了所采瘤胃液測定結(jié)果的平均值,采食A1和B1TMR的綿羊瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸(totalvolatilefattyacid,TVFA)濃度極顯著高于采食A2和B2的綿羊(P<0.01).采食A2TMR的綿羊瘤胃液丁酸和其他酸占TVFA的體積分數(shù)極顯著高于采食含A1因子TMR的綿羊(P<0.01).采食A1因子TMR的綿羊瘤胃液乙酸占TVFA的體積分數(shù)和乙酸/丙酸極顯著高于采食A2TMR的綿羊(P<0.01).采食含B2因子TMR的綿羊其他酸占TVFA的體積分數(shù)顯著高于采食A1的綿羊(P<0.05).A×B交互作用顯著影響了綿羊瘤胃液乙酸和丙酸占TVFA的體積分數(shù)(P<0.05),極顯著影響了乙酸/丙酸(P<0.01).A1B2組、A2B1組和A2B2組綿羊丙酸占TVFA的體積分數(shù)顯著高于A1B1組(P<0.05),A2B1組綿羊丙酸占TVFA的體積分數(shù)顯著高于A1B1組(P<0.05).3討論3.1試驗結(jié)果與分析瘤胃液pH可以綜合反映瘤胃發(fā)酵水平,它受唾液分泌、飼糧性質(zhì)、瘤胃內(nèi)VFA及其他有機酸的生成、吸收和排出的影響.pH也是反映可消化碳水化合物發(fā)酵速率的指標之一.Nagaraja和Lechtenberg的研究表明,反芻動物瘤胃pH在低于5.0時,家畜出現(xiàn)臨床性酸中毒;當pH在5.0～5.5時,家畜處于亞臨床性酸中毒.瘤胃pH的正常變化范圍為5.5～7.5.隨動物采食呈周期性變化,瘤胃pH變化形式與幅度與飼料特性、飼喂方法和飼喂后時間有關(guān),一般飼喂后2～6h達最低值.本試驗結(jié)果表明,各處理綿羊的瘤胃液pH在6.21～6.80之間波動,均處于綿羊的正常生理范圍內(nèi)(5.5～7.5),相比以前報道的波動范圍要小.采食后,pH先降低后升高,在食后8h升至最高,變化規(guī)律與鄭琛和史清河的報道相似.pH降至最低點的時間與以上各研究結(jié)果之間略有差別,可能與飼糧的結(jié)構(gòu)、物理形態(tài)、原料種類及其加工方法、飼喂方式等的不同有一定關(guān)系.pH先降低后升高的原因可能是TMR在消化過程中,瘤胃微生物分解纖維產(chǎn)生VFA,使瘤胃液pH下降,但綿羊在進行咀嚼和反芻活動時分泌大量唾液,唾液中的磷酸鹽和碳酸氫鹽可中和瘤胃中的酸性物質(zhì),使pH逐漸上升.本試驗結(jié)果表明,采食A2TMR的綿羊瘤胃液pH變化范圍(6.21～6.48)低于采食A1的綿羊(6.47～6.71).據(jù)報道,飼糧中精料比例對瘤胃液pH影響作用很大.1.5倍營養(yǎng)水平下TMR中精料比例增加,因精料發(fā)酵速度較快,單位質(zhì)量產(chǎn)生的VFA比粗料多,且精料的顆粒小,密度大,采食和反芻的時間短,唾液分泌量相對減少,對瘤胃中酸性物質(zhì)的中和作用降低,因而pH較低.本試驗中TMR粒度對瘤胃液pH的影響不顯著.TMR粒度對瘤胃液pH的影響在眾多試驗中結(jié)論并不一致,有研究表明,降低TMR中粗飼料長度可以降低瘤胃液pH,但也有研究表明,瘤胃液pH并未受到玉米青貯顆粒長短的影響.瘤胃飼料粒度的降低會增大粗飼料與微生物接觸面積使得粗飼料消化更為完全,產(chǎn)生更多的VFA,同時由于反芻時間短唾液分泌量減少,但是由于瘤胃內(nèi)容物的外流速度上升,飼喂不同粒度的TMR在瘤胃發(fā)酵、唾液分泌和外流速度方面的差異有可能相互平衡導致本試驗中飼料粒度對瘤胃pH的影響差異不顯著.3.2瘤液總氮和蛋白氮濃度的變化瘤胃液總氮包括氨氮、尿素氮、菌體蛋白氮、飼料中可溶解蛋白氮及唾液蛋白氮等,飼料蛋白質(zhì)含量及降解率對其有直接的影響,與飼糧在瘤胃中滯留時間的長短也有密切的關(guān)系.鄭琛的試驗結(jié)果表明,各處理組綿羊瘤胃液總氮濃度在101.20～273.87mg/100mL之間變動,在食后2h下降到最低,然后逐漸上升,變化規(guī)律基本相同.本試驗中,綿羊不同采樣時間點的瘤胃液總氮和蛋白氮濃度均變化不大,但采食A2TMR的綿羊瘤胃液總氮濃度(553.97～798.01mg/100mL)和蛋白氮濃度(506.86～776.63mg/100mL)高于采食含A1因子TMR的綿羊總氮濃度(270.87～438.04mg/100mL)和蛋白氮濃度(252.14～421.76mg/100mL).A因子對不同采樣時間的瘤胃液總氮和蛋白氮濃度都產(chǎn)生了極顯著影響,但TMR粒度僅對食前瘤胃液總氮濃度有顯著影響.瘤胃液氨氮濃度和尿素氮濃度相對于總氮濃度處于較低水平,對總氮濃度的貢獻較小,因此瘤胃液總氮主要是由菌體蛋白和飼料中可溶解蛋白氮組成.提高TMR中精料比例后,飼糧中可溶解蛋白氮和碳水化合物比例升高,瘤胃微生物活性增加,合成更多的菌體蛋白,瘤胃液總氮和蛋白氮濃度均隨之升高.本試驗中不同粒度的TMR對食后瘤胃液總氮和蛋白氮濃度沒有產(chǎn)生顯著影響,雖然飼料粒度會影響瘤胃微生物對飼料氮的降解轉(zhuǎn)化,但是由于瘤胃內(nèi)吸收的氮僅有氨氮,且占總氮的比例很小,因而對瘤胃總氮和蛋白氮濃度的影響不顯著.3.3食肉過程中瘤胃微生物對氨氮的濃度瘤胃液氨氮是飼料蛋白質(zhì)、內(nèi)源性蛋白質(zhì)和其他非蛋白氮化合物分解的終產(chǎn)物,同時在有能量和碳鏈的情況下,又是瘤胃微生物合成菌體蛋白的主要氮源.瘤胃液氨氮濃度受瘤胃壁吸收和食糜排空速度的影響.Satter等報道,瘤胃微生物生長和合成蛋白質(zhì)的最低氨氮濃度為5mg/100mL,當氨氮含量低于此濃度時,瘤胃微生物生長緩慢,碳水化合物的分解利用受到影響.在本試驗中,各處理瘤胃液氨氮濃度都在5mg/100mL以上,在食后2h達到最高,然后逐漸降低,變化趨勢相近.與鄭琛和史清河的報道相符合.TMR的中精料比例增大后,瘤胃中可降解的飼料蛋白質(zhì)含量增加,微生物分解生成的氨增加,而此時瘤胃液pH下降,瘤胃壁對氨的吸收量減少.因此本試驗中采食A2TMR的綿羊瘤胃液氨氮濃度有高于采食A1TMR的綿羊的趨勢.在各時間點,采食B2TMR的綿羊瘤胃液氨氮濃度均低于采食B1TMR的綿羊.可能是由于TMR粒度降低后,綿羊反芻時間減少,食糜在瘤胃中的滯留時間變短,瘤胃微生物與飼料顆粒的作用時間減少,導致氨氮濃度降低所致.3.4不同處理組的尿素氮濃度瘤胃液尿素氮濃度是反映瘤胃氮代謝的指標之一,其主要來源是飼糧和瘤胃氮素再循環(huán).動物的采食速度、飼料尿素氮含量、再循環(huán)進入瘤胃的尿素氮量和瘤胃尿素氮的分解量都會對瘤胃尿素氮濃度產(chǎn)生影響.瘤胃中脲酶的活性很高,分解尿素的速度是微生物利用氨合成蛋白質(zhì)的4倍,瘤胃中尿素氮濃度一般很低.本試驗中,各處理組的尿素氮濃度在0.56～1.60mg/100mL之間.張昌吉的研究結(jié)果表明,瘤胃尿素氮濃度在0.27～0.52mg/100mL之間變化;鄭琛報道瘤胃尿素氮濃度在1.63～4.35mg/100mL之間浮動.本試驗與上述研究結(jié)果不一致,可能是由于飼料結(jié)構(gòu)和飼喂間隔時間不同造成的.本試驗中,采食A2TMR的綿羊瘤胃液尿素氮濃度(1.18～1.60mg/100mL)高于采食A1TMR的綿羊(0.56～1.02mg/100mL),可能是由于高營養(yǎng)水平下瘤胃中可降解的飼料蛋白質(zhì)含量增加,微生物分解生成的氨增加,而瘤胃中氨濃度高時脲酶活性受到抑制,尿素分解速度下降的原因.采食B2TMR的綿羊瘤胃液尿素氮濃度高于采食B1的TMR綿羊,可能是由于TMR粒度降低后,瘤胃內(nèi)氨氮濃度降低,瘤胃吸收的氨氮增加,因而再循環(huán)進入瘤胃的尿素數(shù)量增多的原因.3.5試驗兩組患者tvf