環(huán)氧化酶-2、血管內皮生長因子c在胃癌組織中的表達及其與淋巴管生成、淋巴結轉移的關系

環(huán)氧化酶-2、血管內皮生長因子c在胃癌組織中的表達及其與淋巴管生成、淋巴結轉移的關系

淋巴結轉移是癌癥的主要傳播形式，也是影響術后復發(fā)和五年生存率的主要原因之一。本研究采用免疫組織化學SABC法對胃癌組織COX-2、VEGF-C、VEGFR-3的表達、淋巴管密度進行檢測，并結合完整的臨床及隨訪資料，分析它們之間的相互關系及與淋巴結轉移、預后的關系。1材料和方法1.1病例選擇及分期51例胃癌及15例癌旁組織石蠟標本來自于中國醫(yī)科大學附屬一院1998年4月～1999年3月接受胃大部切除術的患者。男女之比為2.6:1，年齡29～80歲，平均54.9歲。其中，早期8例，進展期43例。病理分級：高分化9例，中分化8例，低分化34例。淋巴結轉移36例，血行轉移5例。TNM分期：Ⅰ期9例，Ⅱ期12例，Ⅲ期14例，Ⅳ期16例。臨床隨訪63～74個月，患者生存時間為3～74個月，中位生存時間35個月。1.2試劑COX-2、VEGF-C、VEGFR-3多克隆抗體及SABC檢測試劑盒和DAB顯色液均購自武漢博士德生物技術有限公司。1.3明書所示步驟操作免疫組化SABC法，按照SABC檢測試劑盒說明書所示步驟操作。PBS代替一抗作為陰性對照，用已知COX-2陽性前列腺增生組織切片和VEGFR-3陽性淋巴結轉移癌組織切片作為陽性對照。1.4vegfr-3標記的淋巴管判定COX-2、VEGF-C的判定以胞漿中出現棕黃色顆粒為顯色，以陽性細胞>10%為陽性，≤10%為陰性。VEGFR-3標記的淋巴管判定標準染色為棕黃色的內皮細胞形成的條狀、隙狀結構及有管腔者。在40×光鏡下確定3個著色密集的區(qū)域（熱點），200×光鏡下分別計數淋巴管個數，取其均值為淋巴管密度。1.5統(tǒng)計方法采用t檢驗，卡方檢驗，Spearman秩相關分析、Kaplan-Meier生存曲線，使用SPSS10.0軟件進行分析。2結果2.1cox-2和vegf-c表達51例胃癌組織COX-2和VEGF-C表達的陽性表達率分別為62.8%(32/51）和60.7%(31/51),COX-2和VEGF-C的陽性產物為棕黃色顆粒，均位于癌細胞胞漿內（圖1），腫瘤間質及癌旁組織未檢出COX-2和VEGF-C表達。VEGFR-3陽性產物表達于腫瘤間質淋巴管內皮細胞胞漿中（圖2），淋巴管分布腫瘤周邊多于間質。2.2vegf-c表達與淋巴結轉移的相關性表1經統(tǒng)計學分析，COX-2表達與胃癌臨床分期（r=0.34,P<0.05）、淋巴結轉移（r=-0.58,P<0.01）呈正相關，與分化程度（r=-0.57,P<0.01）呈負相關。VEGF-C表達與淋巴結轉移呈正相關（r=0.46,P<0.05），與臨床分期，分化程度無關（均P>0.05）。COX-2與VEGF-C表達呈顯著正相關（r=0.74,P<0.01）。但與患者性別、年齡、組織類型、血行轉移無關（均P>0.05）。2.3化療程度的相關表達51例胃癌組織淋巴管密度范圍為3.33～18.65個，平均9.92±3.36個。淋巴管密度與淋巴結轉移（r=0.70,P<0.01）、臨床分期（r=0.40,P=0.01）、COX-2(r=0.69,P<0.01）、VEGF-C(r=0.45,P<0.01）表達正相關，與分化程度負相關（r=-0.42,P<0.05），與組織類型、血行轉移無關（均P>0.05）。2.4兩組生存情況對比經Kaplan-Meier生存曲線分析，COX-2表達與生存率負相關，COX-2陽性表達組患者5年生存率15.6%，陰性表達患者為36.8%,log-rank檢驗兩組生存曲線差異有非常顯著性意義（P<0.05）。而VEGF-C表達與5年生存率無關（P>0.05）。3血管內皮生長因子與腫瘤中vegf-c表達關系的研究環(huán)氧化酶（cyclooxygenase,COX）是花生四烯酸合成前列腺素（PGs）的限速酶，在哺乳動物中COX同功酶有2種，即COX-1和COX-2。COX-2被認為是“誘導性酶”，它與肺癌、乳腺癌、結腸癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。本研究表明：胃癌組織中COX-2的陽性表達率顯著高于癌旁正常組織，COX-2表達與臨床分期、淋巴管密度、淋巴結轉移呈正相關，與病理分化程度負相關，提示COX-2可能是胃癌發(fā)生發(fā)展過程中的重要調控因子，它的表達與胃癌的生物學行為、淋巴結轉移密切相關。目前為止，胃癌淋巴結轉移的機制尚不清楚。血管內皮生長因子C(VEGF-C）屬于血管內皮生長因子家族，其受體之一VEGFR-3較特異的表達于淋巴管內皮細胞上。VEGF-C與受體VEGFR-3結合后通過MEK/ERK和PI3/激酶/Akt途經促進淋巴管內皮細胞增生。Yonemura等在胃癌研究中發(fā)現，腫瘤內淋巴管密度與VEGF-CmRNA、胃癌分化程度、淋巴結轉移和淋巴結浸潤有關。在前列腺癌和惡性間皮瘤的研究也發(fā)現：VEGF-C表達上調促進腫瘤的淋巴管生成和淋巴結轉移。最近Su等的研究表明，COX-2可能通過EP1和HER-2/Neu受體途徑上調VEGF-C的表達，進而促進肺腺癌的淋巴管生成和淋巴結轉移。我們研究結果顯示：胃癌組織COX-2表達與VEGF-C、淋巴管密度、淋巴結轉移呈正相關，提示：COX-2與VEGF-C及淋巴結轉移存在某種內在的聯系。我們推測：COX-2表達上調可能促使癌細胞VEGF-C分泌增加，VEGF-C通過作用于內皮細胞上的受體VEGFR-3，促進淋巴管生成，淋巴管數目的增多使癌細胞接觸淋巴管的機會增多，從而促進胃癌淋巴結轉移的發(fā)生。有關COX-2、VEGF-C表達與腫瘤預后關系的研究報道不多。已有資料顯示：VEGF-C表達上調在宮頸癌和乳腺癌能降低患者生存時間和生存率。COX-2表達是否與胃癌的預后有關尚不明