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顯齒蛇葡萄a(bǔ)mpelopsisgrisselenaa幼嫩莖葉營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定
野生葡萄是科西蛇的祖先。主要分布在廣東、廣東、云南、貴州、湖南、湖北、江西、福建等省區(qū)。其味甘淡、性涼,具清熱解毒、祛風(fēng)濕、強(qiáng)筋骨等功效,民間將其嫩莖葉制成保健茶,用于治療感冒發(fā)熱、咽喉腫痛、黃疸型肝炎、皰疔等癥,已有數(shù)百年應(yīng)用歷史。近年醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)表明,其粗提物具抗血小板聚集和血栓的形成、降血脂和抗氧化、殺菌等作用,既可深加工為抗心律失常、抗心肌缺血、抗高血壓的新型藥物,又可粗加工為食品抗菌防腐添加劑、新型類茶風(fēng)味飲料等。盡管目前湖南、廣西、廣東等地不少廠家紛紛推出以顯齒蛇葡萄葉為原料的保健食品,但至今未見對(duì)顯齒蛇葡萄葉的營(yíng)養(yǎng)功能成分的分析研究。故此,我們對(duì)顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中部分營(yíng)養(yǎng)功能成分進(jìn)行了分析研究,這將為我國(guó)顯齒蛇葡萄資源開發(fā)利用提供有價(jià)值的科學(xué)依據(jù)。1材料和方法1.1原植物的鑒定顯齒蛇葡萄植物幼嫩莖葉(7月下旬采摘)由湖南省張家界市永定區(qū)科委提供,由作者依參考文獻(xiàn)鑒定其原植物。顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉采收后立即送回實(shí)驗(yàn)室,在110℃的通風(fēng)干燥箱中進(jìn)行殺青30min,之后轉(zhuǎn)入70~80℃的通風(fēng)干燥箱中進(jìn)行熱風(fēng)干燥12h,粉碎過60目篩,裝入有塞玻璃瓶中保存,供分析用。1.2測(cè)量1.2.1質(zhì)量分析用凱氏定氮法測(cè)定。1.2.2水生蛋白質(zhì)考馬斯亮藍(lán)法。1.2.3氨基酸總數(shù)茚三酮比色法。1.2.4水解條件和樣品測(cè)定稱樣品20mg,加入6mol/LHCl液10ml,抽真空用酒精噴燈封口,在110℃下水解24h(色氨酸的水解條件為4mol/LNaOH溶液,110℃下水解20h),加入9.5ml6mol/LNaOH溶液中和,用蒸餾水定容至200ml待測(cè),樣品測(cè)定用美國(guó)Waters公司的HPLC色譜儀,分離柱為WatersAAA。1.2.5總灰燼水按GB8306-87茶葉灰分測(cè)定方法進(jìn)行。1.2.6有機(jī)營(yíng)養(yǎng)用原子吸收分光光度、比色等方法測(cè)定。1.2.7酚酒石酸亞鐵比色法。1.2.8第一次水浸提率測(cè)定稱顯齒蛇葡萄1g(測(cè)定含水量),放入100ml錐形瓶中,加適量水100℃下水浴0.5h,趁熱過濾,用蒸餾水定容,此濾液為第一次浸提液,濾渣烘干稱重,計(jì)算第一次水浸提率。之后,將濾渣轉(zhuǎn)入相同體積的錐形瓶中,重復(fù)前面相同步驟,依此類推,共進(jìn)行5次浸提,計(jì)算總水浸提率。1.2.9總黃酮用核酸蛋白質(zhì)分析儀測(cè)定(美國(guó),選擇波長(zhǎng)為294nm,測(cè)定時(shí)間為1min)。1.2.1d系列、beckman公司、美國(guó)新加工型不銹鋼柱用反相高效液相色譜測(cè)定(systemGold系列、Beckman公司、美國(guó)Nova-pakG18不銹鋼柱3.9×150mm,流動(dòng)相為甲醇∶水=36∶64,柱溫為30℃)。2結(jié)果2.1顯示齒蛇肉的粗蛋白含量13.94%。2.2顯示巴西葡萄酸鹽的含量0.55%。2.3顯示齒蛇果實(shí)氨基酸的總量2.53%。2.4人體氨基酸的制備每百克顯齒蛇葡萄中檢出的氨基酸的組分及含量如表1。由表1可以看出,顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中含有17種氨基酸,其中包含人體必需的8種氨基酸。E/E+N=0.2013,E/N=0.2520,與WHO/FAO提出的E/E+N應(yīng)為0.4左右,E/N為0.6左右的參考蛋白質(zhì)模式差別較大,但值得引起重視的是,其中包含有r-氨基丁酸、蛋氨酸等特殊氨酸數(shù),且天冬氨酸含量非常豐富,這對(duì)于深加工顯齒蛇葡萄或?qū)@齒蛇葡萄幼嫩莖葉開發(fā)為具特殊風(fēng)味的類茶產(chǎn)品具重要指導(dǎo)意義。2.5顯示牙齒蛇傷口的總成分6.80%。2.6表1和表2顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中含較豐富的無機(jī)營(yíng)養(yǎng)元素(表2)。值得注意的是,對(duì)人體健康與疾病防治有重要影響的無機(jī)元素,如Fe、Cu、Mn、Zn、Se顯齒蛇葡萄中均有較高含量。2.7顯示牙齒蛇的總酚18.5%。2.8總浸提率由表3可以看出,顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉的水浸出物特高,第一次浸提率高達(dá)50.31%,總浸提率高達(dá)72.97%;總黃酮含量高達(dá)38.965%,其中二氫楊梅素單體含量達(dá)30.598%,這可謂黃酮類化合物在植物體中分布的一種特例(其測(cè)定方法和精提工藝另文發(fā)表)。3顯齒蛇葡萄幼肉中總黃酮類化合物3.1顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中無機(jī)營(yíng)養(yǎng)元素蛋白質(zhì)含量極為豐富,且水浸出率高,耐沖泡,尤其是其含較豐富的r-氨基丁酸、蛋氨酸等特殊氨基酸和對(duì)鮮爽滋味具舉足輕重作用的天冬氨酸,這對(duì)將顯齒蛇葡萄的嫩莖葉開發(fā)為具特殊風(fēng)味的類茶飲料具重要的指導(dǎo)意義。3.2顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中總黃酮、二氫楊梅素含量極高,屬黃酮類化合物在植物體中分布的特例。黃酮類天然產(chǎn)物在人類健康中的作用是國(guó)際上過去十余年來天然藥物和健康產(chǎn)品研究開發(fā)的熱點(diǎn)之一,它具有清除自由基、抗氧化、抗血栓、抗腫瘤、消炎抑菌等多種奇特功效。二氫楊梅素系黃酮類化合物中的一員,其除具黃酮類化合物的普通特性之外,在解除醇中毒、抗高血壓、抑制體
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