中職《細菌染色鏡檢》競賽規(guī)程

2022年廣西水產(chǎn)畜牧學(xué)?！凹毦鷻z查技術(shù)項目”賽項規(guī)程賽項名稱賽項名稱：細菌檢查技術(shù)項目賽項組別：中職組二、競賽目的通過競賽活動，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，提升學(xué)生技能水平和職業(yè)素養(yǎng)，促進教學(xué)改革。三、競賽內(nèi)容細菌檢查技術(shù)，包括細菌涂片的制備、染色、鏡檢。競賽方式競賽方式為個人賽。每位選手通過現(xiàn)場抽簽的方式?jīng)Q定比賽時段及項目順序。競賽流程日期時間內(nèi)容5月18日15:00-15:30簽到15:30-17:30按序號進行比賽5月19日8:30-9:00簽到9:30-11:30按序號進行比賽競賽規(guī)則參賽資格本校2021級中職畜禽生產(chǎn)一年級學(xué)生。參賽準(zhǔn)則1.參賽選手必須穿大賽組委會統(tǒng)一提供的白大褂，并佩戴參賽序號牌（現(xiàn)場抽簽決定），選手不得在參賽服飾上作任何標(biāo)識，一經(jīng)查實取消本次競賽成績。2.賽前1日，各領(lǐng)隊組織選手參觀熟悉競賽場地和使用設(shè)備。大賽用物由畜牧獸醫(yī)專業(yè)科提供，不得使用自帶參賽物品。3.比賽當(dāng)日選手必須按競賽時間，提前30分鐘到指定檢錄處進行檢錄，并在工作人員的引導(dǎo)下進入候賽室，遲到10分鐘者取消參賽資格。選手憑學(xué)生證、身份證進入候賽室。工作人員負責(zé)對選手的身份進行核查。參賽選手不允許攜帶任何書籍和其他紙質(zhì)資料，不允許攜帶通訊工具和存儲設(shè)備。4.參賽選手在候賽室隨機抽簽決定比賽順序后，由競賽現(xiàn)場工作人員組織引導(dǎo)選手到指定的競賽場地進行競賽準(zhǔn)備工作。5.參賽選手在規(guī)定時間內(nèi)獨自完成各競賽環(huán)節(jié)。選手在競賽過程中，無論遇到任何問題，需舉手向裁判員示意。選手之間互相詢問按作弊處理。競賽過程中如出現(xiàn)儀器設(shè)備故障問題，應(yīng)提請競賽裁判長到賽場確認(rèn)原因。如果確實是因為設(shè)備故障原因?qū)е逻x手中斷或終止競賽，由競賽裁判長視具體情況做出決定。6. 選手在競賽過程中不得擅自離開賽場，如有特殊情況，需經(jīng)裁判員同意后作特殊處理。7. 在競賽規(guī)定時間結(jié)束時各參賽選手應(yīng)立即停止操作，不得以任何理由拖延競賽時間。參賽選手欲提前結(jié)束比賽，應(yīng)向現(xiàn)場裁判員舉手示意并記錄比賽終止時間，比賽終止后，不得再進行任何與比賽有關(guān)的操作。競賽結(jié)束后，經(jīng)裁判員許可后，參賽選手方可離開賽場。競賽地點實訓(xùn)樓二號樓一樓實訓(xùn)室技術(shù)規(guī)范細菌檢查技術(shù)操作規(guī)范細菌美藍染色參賽選手在規(guī)定的30min內(nèi)，對待測菌種（菌種范圍：大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌）進行簡單染色，要求各步驟正確，正確使用油鏡觀察染色結(jié)果并判斷。具體操作規(guī)范詳見下表：項目考核內(nèi)容操作標(biāo)準(zhǔn)制片滴加無菌生理鹽水涂片：取一潔凈的載玻片，用75%酒精棉球擦拭載玻片表面，自然晾干。滴一小滴生理鹽水于載玻片中央，按無菌操作要求(注：單手持無菌培養(yǎng)皿，打開皿蓋約45°角，另一手持滅菌好的接種環(huán)，在酒精燈8-10cm范圍內(nèi)進行操作)，用接種環(huán)挑取少量細菌于玻片中央水滴中，均勻涂布，形成直徑約為1-1.5cm的菌膜面，要求涂片薄而均勻。(注:涂片是否均勻?qū)⒃阽R檢中進行判定)接種環(huán)的使用涂片、干燥接種環(huán)的使用:按無菌操作要求，正確對接種環(huán)進行滅菌，并取菌、制作涂片。干燥：為在規(guī)定時間內(nèi)完成操作，可以利用酒精燈火焰溫度干燥涂片，注意不能太靠近火焰（應(yīng)在酒精燈火焰上方約10cm處），在固定之前要保證菌種細胞活性。固定固定：涂片干燥后，以鐘擺速度將玻片（菌膜面朝上）通過酒精燈火焰2-3次，進行固定。美藍染色染色步驟在已干燥、固定好的涂片或觸片上滴加適量的美藍染色液。1-2min后，水洗，干燥（吸水紙吸干或自然干燥），鏡檢。鏡檢顯微鏡的使用①載玻片安置：移開鏡套。插上電源，打開顯微鏡，將載玻片放置于載物臺上并用標(biāo)本夾夾住。②調(diào)節(jié)光源：調(diào)節(jié)光源、光圈到適當(dāng)?shù)恼彰鲝姸?。③低倍鏡觀察：移動推進器使觀察對象處于物鏡的最下方，轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，在視野中尋找物像，再略微轉(zhuǎn)動細準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物像更加清晰。④油鏡觀察：在低倍鏡下找到合適的觀察目標(biāo)并將其移至視野中心，通過轉(zhuǎn)換器將低倍鏡轉(zhuǎn)離工作位置，在待觀察的目標(biāo)區(qū)域滴上一滴香柏油，將油鏡轉(zhuǎn)到工作位置，油鏡鏡頭此時應(yīng)正好浸泡在鏡油中，調(diào)節(jié)光圈使視野的亮度合適，微調(diào)細準(zhǔn)焦螺旋使物象清晰。染色結(jié)果判斷染色結(jié)果判定:在實驗結(jié)果記錄表上完成對染色細胞形狀(球狀或桿狀)和顏色(紫色或紅色)的描述。顯微鏡清潔和歸位鏡檢完畢處理:①緩慢下降載物臺至最低位置，調(diào)節(jié)光源到最暗，關(guān)閉電源開關(guān)。②取下載玻片。③清潔顯微鏡：先用擦鏡紙擦去油鏡鏡頭上的香柏油，再用沾有少許二甲苯的擦鏡紙擦掉殘留的香柏油，最后再用干凈的擦鏡紙抹去殘留的二甲苯（注:需要按同一個方向擦洗鏡頭）。④清潔后，將物鏡轉(zhuǎn)成八字形，同時降下聚光鏡，將推進器歸位，拔下電源，罩上鏡套。文明操作實驗后臺面整理操作結(jié)束，將載玻片放回指定回收處，用酒精燈蓋子熄滅酒精燈（注:酒精燈應(yīng)在制片結(jié)束后立即熄滅），清理桌面上的實驗廢棄物。在操作過程中，無不當(dāng)操作。器皿破損實驗操作過程規(guī)范選手編號：細菌美蘭染色顯微鏡觀察結(jié)果記錄形態(tài)描述結(jié)果判斷附：細菌檢查技術(shù)競賽項目評分細則細菌美藍染色項目考核內(nèi)容分值評分標(biāo)準(zhǔn)及要點制片清潔消毒玻片3取75%酒精棉球擦拭玻片，自然晾干。3分。滴加生理鹽水4生理鹽水滴加在玻片中間，2分。生理鹽水無過多，無漏出。2分接種環(huán)的使用11接種環(huán)徹底灼燒，1分單手手持平皿，待接種環(huán)冷卻后再取菌，1分在酒精燈無菌區(qū)域范圍內(nèi)操作，2分；按無菌操作要求單手打開培養(yǎng)皿，3分取單菌落時培養(yǎng)基無劃破，2分涂片后灼燒接種環(huán)，放回原處，2分涂片、干燥4涂片區(qū)域均勻合理，2分干燥時，載玻片與火焰的距離適中，2分固定4在酒精燈外焰以鐘擺速度通過3次，4分美蘭染色染色干燥10無漏液，4分正確水洗，4分正確干燥，2分鏡檢顯微鏡的使用14正確放置載玻片,先使用低倍鏡尋找視野，2分滴加鏡油至鏡檢位置，并用油鏡觀察2分調(diào)亮視野至適合觀察的亮度，4分油鏡觀察時，使用細準(zhǔn)焦旋鈕，2分物像清晰，4分染色結(jié)果判斷30判斷結(jié)果正確，20分，實驗記錄規(guī)范，2分涂片均勻，細胞無過密或過疏，4分無其它雜菌和雜質(zhì)，2分視野亮適合觀察，2分顯微鏡清潔和歸位12鏡檢結(jié)束，正確步驟清潔油鏡鏡頭，6分顯微鏡正確歸位，4分操作結(jié)束，將載玻片放到統(tǒng)一回收處，2分文明操作實驗室后臺面整理8臺面整理，正確清理實驗廢棄物，并注意環(huán)保(按照《實驗室生物安全手冊(第三版)》、《實驗室生物安全通用要求》(GB19489-2008)的規(guī)范要求處理實驗廢奔物)，2分器皿破損未破損，2分實驗操作過程規(guī)范在操作過程中，無不當(dāng)操作，4分完成時間共用時間競賽時間結(jié)束時各參賽選手應(yīng)立即停止操作，不得以任何理由拖延競賽時間。合計100分各項操作應(yīng)當(dāng)規(guī)范、到位方可得分，凡操作錯誤一律不得分，如不熟練可酌情給分。技術(shù)平臺項目操作配備設(shè)施、材料備注細菌檢查技術(shù)項目待測菌種（大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌）、載玻片、無菌生理鹽水、酒精燈、接種環(huán)、美蘭染色液、顯微鏡、洗瓶、洗耳球、75%酒精棉、吸水紙、擦鏡紙、染色架、二甲苯。成績評定競賽評分嚴(yán)格按照公平、公正、公開的原則，由裁判員在競賽現(xiàn)場針對具體操作表現(xiàn)進行評判、打分、復(fù)核。各參賽選手成績由高到低排列，比賽成績相同時，比賽總用時少的名次在前；比賽成績和比賽總用時相同，名次并列。賽項安全1.學(xué)校相關(guān)部門制定安保須知、安全隱患規(guī)避方法及突發(fā)事件預(yù)案，設(shè)立緊急疏散路線及通道等，確保比賽期間所有進入賽點車輛、人員需憑證入內(nèi)；嚴(yán)禁攜帶易燃易爆等危險品及比賽嚴(yán)令禁止的物品進入場地；場地設(shè)備設(shè)施均可安全使用。2.參賽選手在參賽過程中，必須服從場內(nèi)裁判及工作人員的指揮，嚴(yán)格按照制作規(guī)程進行操作，正確使用器具及設(shè)備。如出現(xiàn)意外，立即向工作人員匯報并配合妥善處理。3.裁判員在比賽前，強調(diào)安全規(guī)則。當(dāng)現(xiàn)場出現(xiàn)突發(fā)事件時,應(yīng)及時給予處理。申訴與仲裁本次技能比賽設(shè)仲裁工作委員會，賽點設(shè)仲裁工作組，組長由大賽組委會辦公室指派，組員為賽項裁判長和賽點執(zhí)委會主任。2.參賽選手對賽事過程、工作人員工作若有疑異，在事實清楚，證據(jù)充分的前提下可由以書面形式向賽點仲裁組提出申訴。報告應(yīng)對申訴事件的現(xiàn)象、發(fā)生時間、涉及人員、申訴依據(jù)等進行充分、實事求是的敘述。非書面申訴不予受理。3.提出申訴應(yīng)在賽項比賽結(jié)束后1小時內(nèi)向賽點仲裁組提出。超過時效不予受理。提出申訴后申訴人及相關(guān)涉及人員不得離開賽點，否則視為自行放棄申訴。4.賽點仲裁工作組在接到申訴報告后的2小時內(nèi)組織復(fù)議，并及時將復(fù)議結(jié)果以書面形式告知申訴方。5.大賽仲裁委員會的仲裁結(jié)果為最終結(jié)果。6.申訴方不得以任何理由拒絕接收仲裁結(jié)果；不得以任何理由采取過激行為擾亂賽場秩序；仲裁結(jié)果由申訴人簽收，不能代收；如在約定時間和地點申訴人離開，視為撤訴。7.申訴方可隨時提出放棄申訴。競賽觀摩1.觀摩對象：本校在校生及全體教師。2.觀摩方法及遵守的紀(jì)律：參加觀摩的師生須遵守大賽紀(jì)律，按照大賽組委會的組織有序觀摩。比賽期間，注意賽場安靜。凡觀摩人員均不得進入賽場內(nèi)部進行拍照、交流、觀看。競賽視頻本賽項將對比賽整體情況進行攝制，形成教學(xué)宣傳片，反映本賽項整體情況和優(yōu)勢特色。競賽須知參賽選手須知1.參賽選手須認(rèn)真填寫報名表內(nèi)容，提供個人身份證明，弄虛作假者，將取消競賽資格和競賽成績。2.參賽選手須提前30分鐘到達檢錄處參加檢錄，遲到超過10分鐘不得入場。參賽選手必須攜帶參賽證、身份證和學(xué)生證，務(wù)必按時到達指定競賽報到處報到、抽簽，并接受大賽工作人員檢查，如不能按時參賽以自動棄權(quán)處理。3.參賽選手著裝穿戴須按大賽組委會要求。選手比賽前抽取比賽順序號，并對抽簽結(jié)果簽字確認(rèn)。4.參賽選手不允許自帶儀器設(shè)備，不允許攜帶任何書籍和紙質(zhì)資料，不允許攜帶通訊工具和存儲設(shè)備進入賽場；保持賽場安靜，自覺維護賽場秩序，不大聲喧嘩，文明參賽。5.參賽選手應(yīng)愛護競賽場所的儀器設(shè)備，不得人為損壞競賽用儀器設(shè)備，并自覺維護競賽場所的環(huán)境衛(wèi)生，操作儀器設(shè)備應(yīng)謹(jǐn)慎，不得觸動非競賽用儀器設(shè)備。6.參賽選手在比賽過程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守賽場紀(jì)律。收到開賽信號前不得啟動操作；在競賽過程中不得擅自離開競賽場地。在競賽規(guī)定時間結(jié)束時各參賽選手應(yīng)立即停止操作，不得以任何理由拖延競賽時間。參賽選手欲提前結(jié)束比賽，應(yīng)向現(xiàn)場裁判員舉手示意并記錄比賽終止時間，比賽終止后，不得再進行任何與比賽有關(guān)的操作。選手不得帶走競賽場地的任何物品，比賽結(jié)束后，經(jīng)評委或工作人員許可方可