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病理生理學(xué)實驗指導(dǎo)汪思應(yīng)鄭紅鄧松華安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室目錄概論┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈1病理生理實驗大致操作方式┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈2實驗性肺水腫┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈3兔小腸澆灌的水腫模型復(fù)制┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈3缺氧┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈4再吸入式缺氧┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈5鉀代謝障礙┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈5失血性休克┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈5喜樹堿誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈6急性左心衰竭┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈7急性右心衰┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈8病例討論—肝性腦病┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈8病例討論—急性腎功效不全┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈9病例討論—MODS┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈10病理生理學(xué)實驗教學(xué)大綱┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈11病理生理學(xué)教學(xué)大綱┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈12概論病理生理學(xué)(Pathophysiology)是一門聯(lián)系基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的重要橋梁學(xué)科之一。它在理論課程中要緊介紹了在致病因素作用下機體的性能代謝:=1\*GB3①發(fā)生何種變化(即臨床病癥及體征);=2\*GB3②為什么發(fā)生變化(即臨床病癥及體征顯現(xiàn)的機制);=3\*GB3③這些變化的規(guī)律性及與疾病的關(guān)系;=4\*GB3④防止和處置這些變化的機理(即疾病防治辦法的原理)。因此,病理生理學(xué)是一門理論性科學(xué)。同時它又是一門實驗性科學(xué)。病理生理學(xué)的實驗方式有兩種,即臨床研究和動物實驗研究。臨床研究的成果雖能直接應(yīng)用于患者,但有專門大的局限性。因此,病理生理學(xué)要緊采用動物實驗研究方式。在動物身上復(fù)制各類疾病或病理進(jìn)程,作為人類對應(yīng)疾病的模型。實驗者可操縱或變化實驗條件,以研究疾病的病因、發(fā)病環(huán)節(jié)、發(fā)病機制等。還可用于疾病的實驗性防止、醫(yī)治及新型藥品和醫(yī)治手腕的開發(fā)研究等。人類疾病動物模型的復(fù)制有諸多方式。大致歸納為下列幾個:=1\*GB3①從自然界當(dāng)選擇發(fā)病動物(如選擇生長有腫瘤的鼠、狗等)作為疾病動物模型。但該動物模型個體間不同專門大,且發(fā)病條件及病程等不易操縱,已極少被直接采納?,F(xiàn)要緊用經(jīng)人工選擇哺育的不同品系的發(fā)病動物如由Okamoto和Aoki選育成功的SHR大鼠,其成年后100%發(fā)生高血壓,經(jīng)常使用作自發(fā)性高血壓的動物模型。我國天津醫(yī)學(xué)院哺育成功的津白-Ⅱ小鼠,成年后易發(fā)生乳腺癌等;=2\*GB3②根據(jù)疾病發(fā)生緣故來復(fù)制疾病的動物模型。如用二乙基亞硝胺、二甲基偶氮苯來復(fù)制大鼠肝癌動物模型;我室張載福專家用盲腸結(jié)扎穿孔法造成小鼠腹腔感染來復(fù)制全身性炎癥反映綜合癥(SIRS)的動物模型;=3\*GB3③根據(jù)疾病發(fā)生機制復(fù)制動物模型。如本指導(dǎo)頂用大劑量快速輸液提高家兔肺毛細(xì)血管流體靜壓以復(fù)制的實驗性肺水腫模型,動脈操縱性放血造成的失血性休克模型。=4\*GB3④根據(jù)疾病的發(fā)生環(huán)節(jié)復(fù)制疾病的動物模型。本室將Lewis肺癌(Lewislungcarcinoma,LLC)接種小鼠足掌復(fù)制的腫瘤自發(fā)肺轉(zhuǎn)移模型,將LLC及B16黑色素瘤(B16Melanoma,B16M)細(xì)胞直接注入小鼠眼球后靜脈所復(fù)制的腫瘤血道轉(zhuǎn)移模型。⑤轉(zhuǎn)基因動物(TransgenicAnimal)或基因敲除(GeneKnock-out)復(fù)制疾病動物模型。要緊用于遺傳性疾病、重要基因功效的研究。一,病理生理的實驗?zāi)康牟±砩韺W(xué)實驗課的要緊目的是:=1\*GB3①通過教學(xué)實驗指導(dǎo)學(xué)生初步把握人類疾病動物模型復(fù)制的大致方式;=2\*GB3②通過典型臨床病例的課堂討論,哺育學(xué)生分析病例的能力,為臨床思維和臨床決策打下基礎(chǔ);=3\*GB3③幫忙學(xué)習(xí)者鍛煉操作技術(shù)、驗證和溫習(xí)理論知識;=4\*GB3④通過實驗與課堂討論的具體環(huán)節(jié),使學(xué)生初步含有進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究與臨床思維所必備的“嚴(yán)肅的科學(xué)態(tài)度、周密的科學(xué)方式和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)”等。二,病理生理學(xué)實驗課的規(guī)定實驗前=1\*GB3①認(rèn)真溫習(xí)實驗有關(guān)理論及預(yù)習(xí)實驗指導(dǎo),理解實驗的大致情形;=2\*GB3②用心聽取指導(dǎo)教師對實驗內(nèi)容的解說,熟悉實驗的具體方式及操作規(guī)程;=3\*GB3③領(lǐng)取并檢查實驗器材和藥品是不是齊全;=4\*GB3④小構(gòu)組員應(yīng)有分工,但同時應(yīng)注意合作,使每人都能獲得應(yīng)有的技術(shù)訓(xùn)練。實驗時=1\*GB3①每人應(yīng)確立嚴(yán)謹(jǐn)、實事求是的科學(xué)態(tài)度,正規(guī)和精確的技術(shù)操作耐心、細(xì)致地觀看實驗中顯現(xiàn)的每一種現(xiàn)象;并且要精確、及時、客觀地統(tǒng)計。整個實驗進(jìn)程都不得敷衍、馬虎和主觀臆測;=2\*GB3②必需隨著整個實驗進(jìn)程進(jìn)行科學(xué)思維,力求理解每一種環(huán)節(jié)和每一種現(xiàn)象的意義;=3\*GB3③要注意盡量減少對實驗動物的沒必要要損傷;=4\*GB3④愛惜實驗器材,運用藥品應(yīng)注意節(jié)省。實驗后=1\*GB3①認(rèn)真整頓和分析實驗成果;=2\*GB3②儀器和藥品用完后要清點,并放回原處。應(yīng)清洗者必需及時清洗干凈。每一種實驗組,應(yīng)維持自己桌面的清潔,每次下課后,清掃、整頓好實驗室;=3\*GB3③準(zhǔn)時完畢實驗報告,交教師評閱。三,病理生理實驗報告應(yīng)書寫的項目和內(nèi)容1,姓名、班次、組別、日期。2,實驗名稱。3,實驗?zāi)康募霸怼?,實驗動物及材料:涉及種類、數(shù)量、性別、體重。5,實驗的具體環(huán)節(jié):簡要寫出要緊實驗方式。6,實驗成果。依如實驗?zāi)康膶⒃冀y(tǒng)計系統(tǒng)化、層次化。其體現(xiàn)方式有:=1\*GB3①體現(xiàn)式:用文字將觀看到的、與實驗?zāi)康挠嘘P(guān)的現(xiàn)象客觀地加以描述,描述時需要有時刻概念與次序。=2\*GB3②表格式:能夠較為清晰地反映觀看內(nèi)容,有助于彼此對照。每一圖表應(yīng)闡明必然的中心問題。圖表應(yīng)由學(xué)生自己設(shè)計。表內(nèi)的項目及計量單位應(yīng)填明。=3\*GB3③曲線式:實驗中描記的血壓、呼吸等曲線應(yīng)寫于實驗報告中。書寫時,須根據(jù)原始的描記圖,取其明顯轉(zhuǎn)變的有關(guān)各段連接而成。7,實驗成果分析或討論。由于實驗指導(dǎo)中的每一種實驗,都通過編寫單位重復(fù)試做,成果靠得住。同窗所做實驗,次數(shù)雖少,假設(shè)與這成果大致一致,即可作為分析的根據(jù)。討論要涉及:=1\*GB3①運用所學(xué)理論,討論和闡明實驗成果,論證明驗?zāi)康摹?2\*GB3②實驗成果提示了哪些新問題。若是顯現(xiàn)“異樣現(xiàn)象”,應(yīng)加以分析。8,結(jié)論:依如實驗成果簡腹地寫明。(汪思應(yīng))實驗一大致實驗操作訓(xùn)練[實驗?zāi)康腯理解病理生理學(xué)動物實驗的大致用途、技術(shù);把握氣管、頸動脈、靜脈及股動脈插管,輸液及血壓測量技術(shù)。[藥品和器材]生理鹽水(%NaCl),%NaCl、%肝素、普魯卡因。小動物手術(shù)器械一套(每套大號止血鉗各兩把,中號采止血鉗兩把,彎直小號止血鉗各兩把,有齒鑷各一把,眼科剪和鑷各一把,組織剪和粗剪各一把,手術(shù)刀片的刀柄一副)、粗細(xì)縫線各一卷,2ml和5ml和30ml注射器(第6號針頭),標(biāo)本架(彈簧夾)一種,搪瓷搪瓷碗(25ml)和方盤各一種。[實驗動物]家兔,體重kg。[要緊內(nèi)容]病理生理學(xué)教學(xué)經(jīng)常使用實驗動物介紹病理生理學(xué)實驗研究采納何種動物,是決定研究成功與否的一種重要問題。同樣應(yīng)針對實驗?zāi)康模鶕?jù)各類實驗動物疾病模型的體會,一一考慮下述一系列問題:所規(guī)定的大致模型可否復(fù)制成功,成功率大小,采納的方式和所觀看指標(biāo)是不是簡樸易行,實驗成果穩(wěn)固一致的程度如何,動物是不是便于治理,所獲得的實驗成果和人的臨床情形相較相似性的大小,需耗費的人力、物力、財力等。只有對這些因素進(jìn)行綜合考慮,比較后來,才干確信采納何種動物較為適合。在教學(xué)上,不僅要考慮以上這些問題,還應(yīng)考慮教學(xué)成效,才干知足實驗的目的和規(guī)定。病理生理學(xué)實驗經(jīng)常使用的動物有:兔、大白鼠、小白鼠、狗等。它們和人同樣,都屬于哺乳類動物。它們的生理特性與人靠近?,F(xiàn)將病理生理學(xué)實驗經(jīng)常使用的動物用途介紹以下:家兔家兔能用于復(fù)制許多病理進(jìn)程和疾病,如:水腫、炎癥、電解質(zhì)紊亂、酸堿平穩(wěn)紊亂、出血性休克、DIC、肺癌、動脈粥樣硬化、高脂血癥、心律失常、慢性肺心病、慢性肺動脈高壓、肺水腫、肝炎、膽管炎、阻塞性黃疸、腎性高血壓、腎小球腎炎、急性腎功效衰竭等。特點:=1\*GB3①價錢較低,性溫順,易喂養(yǎng),繁衍率高,容易選到調(diào)劑類似的對照組兔。因此,當(dāng)實驗中必需用較大動物時,經(jīng)常使用家兔;=2\*GB3②在血液循環(huán)方面,家兔血管雖較狗略細(xì),但很容易做到直接描記頸動脈壓、股動脈壓、肺小動脈契壓、中心靜脈壓等。兔的心血管系統(tǒng)性能較貓、狗為差,用來觀看血壓反映不如狗。手術(shù)時,兔易發(fā)生反射性衰竭,血壓反映不穩(wěn)固,故給兔做手術(shù)時,動作要輕。兔的減壓神經(jīng)是獨立走向的,便于觀看減壓神經(jīng)對心、血管系統(tǒng)的作用。家兔心臟在離體情形下,搏動很久,是觀看有害因子對哺乳類動物心臟直接作用較適合的一種模型。離體兔耳,又可作為觀看有害因子對血管直接作用的一種模型;=3\*GB3③家兔合用于研究發(fā)熱、解熱藥和檢查致熱源;=4\*GB3④消化系統(tǒng)方面:家兔系草食動物,消化系統(tǒng)與人類相差較遠(yuǎn),缺少嘔吐反射,因此不能用家兔作消化系統(tǒng)方面的研究;⑤其它:家兔對組織胺不敏捷,對注射組織胺并非產(chǎn)生血壓下降,乃至顯現(xiàn)升壓反映;因此,對家兔注射大量組織胺,并非能造成過敏性休克模型。實驗用家兔體重必需公斤以上。小鼠小鼠能用于復(fù)制許多病理進(jìn)程和疾病,如:水腫、炎癥、缺氧、多個癌、肉瘤、白血病、多個傳染病、慢性氣管炎等。特點:=1\*GB3①小鼠是實驗室最經(jīng)常使用的一種動物,價錢低廉,便于大量繁衍,對動物實驗同種、純種、性別和年紀(jì)的規(guī)定,比較容易知足,生活條件也容易操縱。因此只要符合實驗規(guī)定,應(yīng)盡量采納。它適合于需要大量動物的實驗,容易知足統(tǒng)計學(xué)的規(guī)定。例如:胰島素、促腎上腺皮質(zhì)激素的生物效價測定,毒物半致死量的測定;=2\*GB3②小鼠對許多疾病有易感性,因此合用于研究這種疾病,例如:血吸蟲病、瘧疾、流感、腦炎等病。小鼠的純種品系甚多,每系有其獨特的生物特性,對某些疾病易感,例如:C3HA系對癌瘤敏捷,C58系那么抗癌;因此,純系小鼠普遍應(yīng)用于各類腫瘤的研究;=3\*GB3③當(dāng)研究指標(biāo)要緊為組織學(xué)專門是電鏡觀看時,應(yīng)用小鼠因器官較小,可節(jié)省人力、物力。例如:用于研究慢性氣管炎時肺的轉(zhuǎn)變;=4\*GB3④小鼠含有發(fā)達(dá)的神經(jīng)系統(tǒng),能應(yīng)用于復(fù)制神經(jīng)官能癥模型;⑤小鼠對外界環(huán)境適應(yīng)性差,不耐冷熱,經(jīng)不起饑飽,比較嬌嫩;因此,做實驗時要耐心細(xì)致,動作要輕,否則會干擾實驗成果。實驗用小鼠經(jīng)常使用品系有昆明種小鼠、BALB/C、C57BL/6等,必需6-8周齡,18-20克。可依如實驗規(guī)定選擇性別。大白鼠大白鼠能用于復(fù)制許多病理進(jìn)程和疾病,如:水腫、炎癥、缺氧、休克、DIC、心肌梗塞、肝炎、腎性高血壓、各類腫瘤等。特點:=1\*GB3①大白鼠和小白鼠相似,便于大量繁衍、對動物實驗同種、純種、性別和年紀(jì)的規(guī)定,比較容易知足,生活條件也容易操縱,適合于需要大量動物而小白鼠不能知足實驗規(guī)定時,如:中斷亞硝胺口服或胃腸道外給藥能誘發(fā)大白鼠食道癌,而在小白鼠那么極少引發(fā)食道癌;因此,在這種情形下,采納大白鼠較為適合;=2\*GB3②大白鼠較小白鼠體大,對需要作大致型的實驗,用大白鼠較為適合,例如:可用于直接統(tǒng)計血壓,其血壓反映較家兔為宜,大白鼠可用于研究休克,DIC時血液循環(huán)轉(zhuǎn)變,大白鼠后肢可用作肢體血管灌流實驗,其心臟可用作離體心臟實驗,從大白鼠胸導(dǎo)管采用淋巴能研究疾病時淋巴的轉(zhuǎn)變;=3\*GB3③大白鼠無膽囊,因此,經(jīng)常使用大白鼠膽管收集膽汁,進(jìn)行疾病時膽汁功效研究;=4\*GB3④大白鼠的垂體-腎上腺系統(tǒng)功效很發(fā)達(dá),經(jīng)常使用作應(yīng)急反映和腎上腺、垂體等內(nèi)分泌功效實驗,大白鼠的高級神經(jīng)活動發(fā)達(dá),因此,也普遍用于神經(jīng)官能癥的研究。大白鼠經(jīng)常使用品系有SD、Wister,經(jīng)常使用6-8周齡,體重250克的大鼠。動物的緝捕和固定及其它操作方式動物的緝捕和固定是進(jìn)行動物實驗的大致操作之一,實驗者應(yīng)當(dāng)把握嫻熟,第一,應(yīng)付動物的同樣習(xí)性有所理解,然后依其習(xí)性的不同,采納對應(yīng)溫順的方式,快速將其固定在便于實驗操作和觀看統(tǒng)計的體位。下面介紹幾個經(jīng)常使用動物的緝捕和固定方式。家兔的緝捕和固定,頸部手術(shù)、股動脈分離及插管1,家兔的緝捕和固定:家兔習(xí)性溫順,除腳爪銳利應(yīng)幸免被其抓傷,較易捕獲,緝捕時切忌以手提兔耳。拖沓四肢或提拿腰背部。對的的方式是用右手抓住其項背部皮毛,輕提動物,再以左手托住其臀部,使兔的體重要緊落在左手掌心。家兔的固定,依不同的實驗需要,經(jīng)常使用兔盒固定或兔臺固定。我室采納兔臺固定:在需要觀看血壓、呼吸和進(jìn)行頸、胸、腹部手術(shù)時,應(yīng)將家兔以仰臥位固定于兔手術(shù)臺上,固定方式是,先以四條寬的布帶做成活的騙局,別離套在家兔的四肢腕或踝關(guān)節(jié)上方,抽緊布帶的長頭,將兔仰臥位放在兔臺上,再將兔頭固定器固定。然后將兩前肢放平直,把兩前肢的系帶從背部交叉穿過,使對側(cè)的布帶壓住本側(cè)的前肢,將四肢別離系在兔臺的木樁上。練習(xí)耳緣靜脈注射。2,家兔頸部手術(shù)、股動脈分離及插管:家兔稱重固定于兔臺后,剪去其頸部兔毛,在取普魯卡因皮下浸潤麻醉,沿頸正中切開頸部皮膚約,分離皮下筋膜組織,可見三塊肌肉:即頸正中的胸骨舌骨肌,雙側(cè)的胸鎖乳突肌。在胸鎖乳突肌外緣與皮瓣交壤處是頸外靜脈,鈍性分離滑膩一側(cè)頸外靜脈,在下面穿兩條線,結(jié)扎頸外靜脈遠(yuǎn)心端,在近心端靠近結(jié)扎處剪一小口插入靜脈導(dǎo)管(靜脈導(dǎo)管連接靜脈輸液裝置,注意排除管道的氣體),結(jié)扎固定,打開靜脈輸液裝置的螺旋夾,若是輸液暢通時,即調(diào)節(jié)螺旋夾使液體維持5-10滴/分鐘以維持插管暢通。分離開胸骨舌骨肌,其下方是氣管,分離并“倒T型”切開氣管,插入氣管插管及結(jié)扎。預(yù)備描計呼吸。在氣管的左右后方,各有一條與交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)伴行的頸動脈,分離頸動脈并穿線兩條,結(jié)扎頸動脈遠(yuǎn)心端,用動脈夾夾住近心端,在近心端靠近結(jié)扎處剪一小口插入動脈導(dǎo)管(動脈導(dǎo)管內(nèi)充含肝素的生理鹽水,并與血壓計相連,血壓計壓力140mmHg左右),結(jié)扎并固定導(dǎo)管,松開動脈夾可測量血壓。剪去一側(cè)腹股溝兔毛,觸摸股動脈搏動以確信其位置,在%普魯卡因皮下浸潤麻醉下,沿股動脈走行方向切開皮膚,分離皮下組織,在股動脈隱窩處找出并警惕分離出股動脈,穿線兩條,結(jié)扎股動脈遠(yuǎn)心端,用動脈夾夾住近心端,在近心端靠近結(jié)扎處剪一小口插入動脈導(dǎo)管(動脈導(dǎo)管與50mL注射器相連,并用肝素抗凝),結(jié)扎并固定導(dǎo)管,松開動脈夾可放血。大白鼠的緝捕和固定大白鼠牙齒鋒利,要提防被其咬傷,從鼠籠內(nèi)緝捕時右手最佳帶手套,抓住其尾巴,提出置于實驗臺上,以左手拇指和食指、中指抓住兩耳后項背部皮膚,將鼠固定在左手掌中,右手進(jìn)行操作,也可張開左手之虎口,敏捷地從背部插向腋下,使食指位于左前肢前,拇指、中指位于左前肢后來,一把抓住,右手進(jìn)行操作,如操作時刻較長,可參考家兔固定方式將其固定在大白鼠固定板上。小鼠的捕獲和固定小鼠較大白鼠溫和,雖也要提防被其咬傷手指,但勿需帶手套捕獲。可先用右手抓住鼠尾提起,置于鼠籠或?qū)嶒炁_上,用左手的拇指和食指抓住小鼠兩耳后項背部皮膚,將鼠體置于左手心中,拉直后肢,以無名指及小指按住鼠尾。同時右手可手持注射器作小鼠腹腔等注射。(汪思應(yīng))實驗二實驗性肺水腫[目的規(guī)定]復(fù)制實驗性肺水腫結(jié)合理論把握肺水腫的體現(xiàn)及其發(fā)生機理[實驗原理]大劑量快速輸液致使兔肺毛細(xì)血管流體靜壓升高,肺組織液生成不小于回流,引發(fā)肺水腫的發(fā)生。[實驗動物]家兔,體重kg。[藥品及器材]%普魯卡因,腎上腺素,生理鹽水(%NaCl),常規(guī)小動物實驗用器材。[環(huán)節(jié)及觀看]一實驗組取兔一只,稱體重后仰臥固定于兔臺上、剪去頸部被毛,在1%普魯卡因局麻下切開頸部皮膚,按常規(guī)操作,分離氣管和一側(cè)頸外靜脈,在下面穿一線。切開氣管,插入氣管插管。預(yù)備描計呼吸。把靜脈導(dǎo)管連接靜脈輸液裝置,注意排除管道的氣體。結(jié)扎頸外靜脈遠(yuǎn)心端,在近心端靠近結(jié)扎處剪一小口插入靜脈導(dǎo)管,結(jié)扎固定,打開靜脈輸液裝置的螺旋夾,若是輸液暢通時,即擰緊螺旋夾。描計同樣正常呼吸,并用聽診器聽肺的呼吸音,然后輸入37℃生理鹽水(輸入總量按100-120ml/kg,輸記速度為180-200滴/分)待滴注將近完畢當(dāng)即從輸液瓶中加入稀釋腎上腺素生理鹽水(按腎上腺素kg體重)。緊密觀看呼吸變化和氣管插管是不是有粉紅色泡沫液體流出,并用聽診器聽診肺部有無濕性羅音顯現(xiàn),當(dāng)證明肺水腫顯現(xiàn)時,那么夾住氣管,處死動物,打開胸腔,用線在氣管分叉處結(jié)扎(避免肺水腫液流出)在結(jié)扎處上方切斷氣管,警惕把心臟及其血管分開,(勿損傷肺)把肺掏出,用濾紙吸去肺表面的水分后稱取肺重,計算肺系數(shù),用排水法測肺體積。然后肉眼觀看肺大致的變化,并切開肺,觀看肺水腫和正常肺組織切片。肺系數(shù)=肺重(克)/兔體重(公斤)正常肺系數(shù)二對照組與實驗組大致相似,除不加腎上腺素外。[注意事項]實驗兔和對照兔的輸記速度應(yīng)大致一致,輸液不要太快,以操縱在180-200滴/分為宜。解剖掏出肺時,注意勿損傷肺表面和擠壓肺組織,以避免水腫液流出,妨礙肺的數(shù)值。(鄭紅、汪思應(yīng))參考實驗一兔小腸澆灌的水腫模型復(fù)制[實驗?zāi)康腯學(xué)會小腸澆灌標(biāo)本的制作。理解毛細(xì)血管壓,膠體滲入壓,晶體滲入壓在水腫發(fā)生中的作用。[實驗?zāi)康腯運用血管機械阻斷與否,使局部組織液生成增加或減少。[藥品和器材]生理鹽水(%NaCl),%NaCl、%肝素、普魯卡因。小動物手術(shù)器械一套(每套大號止血鉗各兩把,中號采止血鉗兩把,彎直小號止血鉗各兩把,有齒鑷各一把,眼科剪和鑷各一把,組織剪和粗剪各一把,手術(shù)刀片的刀柄一副)、粗細(xì)縫線各一卷,2ml和5ml和30ml注射器(第6號針頭),標(biāo)本架(彈簧夾)一種,搪瓷碗(25ml)和搪瓷方盤各一種。[實驗動物]家兔,體重kg。[實驗環(huán)節(jié)]兔小腸灌流標(biāo)本的制作取家兔一只,稱重后背位固定于兔板,1%普魯卡因局部麻醉后,自劍突下做腹部正中切口約,打開腹腔,用溫鹽水紗布覆蓋切口及周邊皮毛。在左腹側(cè)腔將小腸輕輕牽出,并一側(cè)(使動脈位于靜脈之上)。找到腸系膜前動、靜脈(相稱于人的腸系膜上A、V),管徑較細(xì),色紅且有搏動的一根為動脈,另一根為靜脈。在靠近腸系膜前動脈的根部用小彎止血鉗分離動脈約cm,分離時注意不要損傷動脈的分支。然后穿兩根細(xì)線備用。自耳緣靜脈注射%肝素ml/kg,1-2分鐘后結(jié)扎腸系膜前動脈的近心端,向遠(yuǎn)心方向插入細(xì)塑料管約。扎牢后,將此線在細(xì)塑料管上再做一次結(jié)扎以防脫落。于動脈插管結(jié)扎線下第一根動脈分支的上方,動脈和靜脈之間穿一根粗線將腸管和靜脈一并結(jié)扎,然后在第一根分支的上方再穿一線將腸管單獨結(jié)扎,并從兩扎線間將腸管和靜脈切斷。注意標(biāo)本側(cè)的靜脈是游離的,其內(nèi)的液體能夠自由流出。自扎線處開始向下排空小腸約cm,在小腸cm和離動脈插管5.0cm的血管處穿兩根粗線,將腸管和血管一并結(jié)扎兩次,然后在兩結(jié)扎線間剪斷,最后沿圖中虛線所示游離標(biāo)本。將標(biāo)本懸掛在標(biāo)本架上,在腸游離緣上支腸長垂直剪3-4個小口,以腸腔內(nèi)容物能流出為度。以5ml注射器吸取生理鹽水,經(jīng)動脈插管沖去血管中的血液,該標(biāo)本即可用于澆灌。灌流裝置的預(yù)備。灌流:①%NaCl;②中分子右旋糖苷灌流,25cm水柱壓力加壓灌流;③%NaCl灌流;④%NaCl灌流;⑤100cm水柱壓力加壓灌流。[成果與討論](鄭紅、汪思應(yīng))實驗三缺氧[實驗?zāi)康腯:在動物身上復(fù)制缺氧性、血液性等缺氧模型;并觀看缺氧動物呼吸,活動狀態(tài)、皮膚及內(nèi)臟顏色的轉(zhuǎn)變,分析不同類型缺氧的發(fā)病機理;觀看麻醉、年紀(jì)等因素對缺氧耐受性的妨礙。[實驗原理]:人為制造小白鼠處在密閉環(huán)境,由于不停用氧,使其吸入氣體氧分壓下降,復(fù)制小鼠低張性缺氧動物模型,腹腔注射亞硝酸鹽、吸如CO復(fù)制小鼠等張性缺氧動物模型。[實驗動物]:小白鼠(18-22g,雌性或雄性)。[藥品器材]:碳酸氫鈉、甲酸、濃硫酸、5%亞硝酸鈉、1%美蘭、10%烏拉坦,%氰化鉀、生理鹽水、凡士林、25ml廣口瓶、一氧化碳發(fā)生裝置、手術(shù)剪子、鑷子、30ml、5ml及1ml注射器、氧氣袋。低張性低氧血癥:取體重相似,性別相似的小白鼠三只別離裝入三個廣口瓶內(nèi),觀看小白鼠正?;顒忧樾危粑l率(次/10秒),深度、皮膚和口唇的顏色,然后塞緊瓶塞,統(tǒng)計時刻,后來每三分鐘重復(fù)觀看上述指標(biāo)一次(如有其它轉(zhuǎn)變那么隨時統(tǒng)計)直到動物死亡為止。動物尸身在實驗做完后,依次打開腹腔,比較血液或肝臟顏色。2,麻醉對機體耐受缺氧的妨礙:體重相近的小白鼠兩只,其中一只腹腔內(nèi)注入%烏拉坦10g。別離放在廣口瓶中,塞緊瓶塞后,開始記時。下列環(huán)節(jié)同實驗1。3,年紀(jì)對機體耐受缺氧的妨礙:取1只成年鼠和一只新生紅皮鼠,同放在一種廣口瓶(紅皮小鼠放入一小青霉素瓶中)蓋緊瓶塞,觀看小鼠活動等情形,統(tǒng)計生存時刻。4,亞硝酸的中毒缺氧:取體重相近小鼠3只,甲鼠腹腔內(nèi)注射%亞硝酸鈉ml,乙鼠在注射亞硝酸鈉后(同劑量),再注射1%美蘭ml,丙鼠腹腔內(nèi)注射生理鹽水ml對照。觀看各鼠呼吸、皮膚顏色和全身活動,存活時刻。5,一氧化碳中毒缺氧:取小鼠兩只,觀看正?;顒?,口唇、鼻、尾部皮膚顏色,呼吸頻率。取1只小鼠放入250ml廣口瓶內(nèi),用注射器抽10ml一氧化碳注入瓶內(nèi),當(dāng)即蓋上瓶蓋,注意動物行為狀態(tài)和皮膚顏色轉(zhuǎn)變,呼吸頻率。待小鼠痙攣摔倒時,快速打開瓶蓋,掏出小鼠并進(jìn)行通氧等急救辦法,觀看恢復(fù)情形;另一只小鼠重復(fù)CO中毒實驗,但不進(jìn)行急救,身后進(jìn)行解剖,觀看皮膚、內(nèi)臟和血液的顏色。6,請自己設(shè)計一實驗,觀看環(huán)境溫度對小鼠缺氧耐受性的妨礙(附于實驗報告中)。(汪思應(yīng)、鄭紅)參考實驗二再吸入式缺氧[實驗?zāi)康腯:在動物身上復(fù)制乏氧性缺氧模型;并觀看缺氧動物血氧指標(biāo)轉(zhuǎn)變,分析不同類型缺氧的發(fā)病機理;[實驗原理]:人為制造家兔處在密閉環(huán)境,使其吸入氣體氧分壓下降,復(fù)制家兔低張性缺氧動物模型,并觀察血氧指標(biāo)的轉(zhuǎn)變。[實驗動物]:家兔,體重kg。[藥品器材]:生理鹽水(%NaCl),%NaOH、%肝素、普魯卡因。小動物手術(shù)器械一套(每套大號止血鉗各兩把,中號采止血鉗兩把,彎直小號止血鉗各兩把,有齒鑷各一把,眼科剪和鑷各一把,組織剪和粗剪各一把,手術(shù)刀片的刀柄一副)、粗細(xì)縫線各一卷,2ml和5ml和30ml注射器(第6號針頭),標(biāo)本架(彈簧夾)一種,搪瓷碗(25ml)和搪瓷方盤各一種,氧氣袋,血壓計,血紅素測定裝置等。[實驗環(huán)節(jié)]:稱重后背位固定于兔臺上,手術(shù)部位去毛。1%普魯卡因局麻下,切開頸部正中皮膚約5-8cm,分離氣管并作氣管插管,于氣管雙側(cè)分離頸總A穿線備用。局麻下,切開腹股溝部皮膚,分離一側(cè)股動脈,穿線備用。耳緣V注入肝素kg(500u/ml),使全身肝素化。側(cè)頸總A做動脈插管結(jié)扎固定并與血壓描計相連。氣管插管與呼吸描計相連,股A內(nèi)插入通針頭的細(xì)塑料管,結(jié)扎備用。描計正常呼吸曲線(涉及血壓曲線)。以另一側(cè)頸總A行夾閉反射。自股A放血數(shù)滴于表面器皿上測動物HB含量。8,用吸管吸取%NaOH10-20ml于再吸入式缺氧瓶內(nèi),塞緊瓶塞。將瓶之A端與氣管插管之側(cè)管相連,使兔的呼吸只能與缺氧瓶水柱壓記相通,當(dāng)即統(tǒng)計開始缺氧時刻,缺氧進(jìn)程中,不停搖動缺氧瓶,使兔呼出氣之CO2充足為NaOH所吸取。意動物血壓及呼吸轉(zhuǎn)變,當(dāng)血壓降至原水平1/2時,當(dāng)即自股動脈采血(開始幾滴血液棄去),測定HB含量,并行頸A夾閉反射。血壓降至20mmHg時,停止缺氧,觀看其恢復(fù)情形改良沙利氏血色素測定法于血色素稀釋管內(nèi)加1%鹽酸至%刻度處。用血紅蛋白吸管于表面皿內(nèi)吸血至20立方毫米刻度處,用脫脂棉擦去管口周邊的血液。將吸管快速浸入稀釋管中的鹽酸內(nèi),輕輕將管內(nèi)血液吹出,重復(fù)吸入上部之鹽酸將吸管的血洗凈,將稀釋管插入血色素比色架內(nèi),靜止10分鐘。10分鐘后于比色管內(nèi)緩慢加入蒸餾水稀釋,邊加邊混勻,當(dāng)管內(nèi)顏色靠近于原則比色柱時,加水的速度要慢。當(dāng)管內(nèi)顏色與原則比色柱一致時,從管壁刻度記下讀數(shù),即為100ml血壓所含血紅蛋白的克數(shù)。(鄭紅、汪思應(yīng))參考實驗三鉀代謝障礙[目的規(guī)定]觀看高血鉀對心臟的毒性作用理解和把握高血鉀心電圖變化的特點。[實驗原理]腹腔或靜脈注射鉀,造成動物血清鉀增高。[實驗動物]鼠(SD或Wister,或家兔(體重kg)。[藥品與器材]%烏拉坦溶液、%、%、%氯化鉀溶液。5ml注射器、小兒頭皮針、手術(shù)剪、心電圖機或二導(dǎo)生理統(tǒng)計儀。[實驗環(huán)節(jié)與觀看]鼠高血鉀(1)動物稱重、仰臥固定,用%烏拉坦100g體重腹腔注射麻醉。(2)在心電圖機原有的電極檢緊包鋁皮,套上6號注射針頭(勿松動)。然后將電極別離入四肢踝部皮下,導(dǎo)線按右前肢(紅),左前肢(黃)、右后肢(黑)、左后肢(綠)次序。(如用生理二導(dǎo)統(tǒng)計儀,那么按二導(dǎo)儀導(dǎo)線聯(lián)后方式連接)。(3)統(tǒng)計一段正常心電圖,紙長以每實驗小組內(nèi)每人分到4-5個園形為度。(4)由腹腔推入%氯化鉀ml,注射后5分鐘統(tǒng)計一次心電圖轉(zhuǎn)變。(或注射%氯化鉀ml)(5)從第一次推注氯化鉀起,每5分鐘再注射%氯化鉀ml。每次注后5分鐘統(tǒng)計一次心電圖變化(有可能要隨時統(tǒng)計)發(fā)生室顫時,當(dāng)即開胸觀看心跳狀態(tài)。兔高血鉀(1)稱重后仰臥固定,可不麻醉,假設(shè)躁動可用%烏拉坦ml/kg耳緣靜脈麻醉。(2)局麻下由胸壁正中線切開皮膚,切口約4-5厘米,分離左側(cè)胸壁肌肉,用粗剪子在靠近胸骨緣處剪斷第二及第三肋骨,用擴胸器撐開胸腔切口,暴露心臟。(3)連接心電圖導(dǎo)線,按右前肢(紅)、左前肢(黃)、右后肢(黑)、左后肢(綠)次序。(4)統(tǒng)計一段正常心電圖。(或二導(dǎo)儀)(5)用小兒頭皮針插入耳緣靜脈,并用膠布固定,經(jīng)耳緣靜脈推注%氯化鉀ml/kg1分鐘注完,注射后5分鐘統(tǒng)計一次心電圖或二導(dǎo)儀的轉(zhuǎn)變。(6)后來每5分鐘由耳緣靜脈注入%氯化鉀2ml,中斷統(tǒng)計心電轉(zhuǎn)變,假設(shè)在30分鐘仍未顯現(xiàn)室顫,可由耳緣靜脈緩慢注入10%氯化鉀,并觀看心電轉(zhuǎn)變情形,直至家兔心臟停博。[注意事項]1.腹腔注射氯化鉀,應(yīng)選擇下腹部前1/4處,以幸免將溶液注入膀胱內(nèi)。2.盡量幸免導(dǎo)線縱橫交錯,動物固定臺上維持干燥,每次運用針形電極時要用酒精或鹽水擦凈,以維持良好的導(dǎo)電狀態(tài)。(鄭紅、汪思應(yīng))實驗四失血性休克[實驗?zāi)康腯復(fù)制失血性休克的動物模型;檢測休克時部份體液因子的轉(zhuǎn)變;通過比較擴血管藥和縮血管藥對失血性休克的療效,分析休克發(fā)生機制。[實驗原理]用操縱性動脈放血造成家兔急性失血,復(fù)制失血性休克的動物模型。[實驗動物]家兔,體重kg。[藥品和器材]動物手術(shù)器械一套,呼吸血壓描記裝置,靜脈輸液裝置一套,三通開關(guān),50ml、20ml、10ml注射器各一種,肝素(500μ/ml),1%普魯卡因,生理鹽水,低分子右旋糖苷,山莨菪堿,去甲腎上腺素。[實驗方式和環(huán)節(jié)]1.家兔一只稱重,麻醉,剪去頸部、股部兔毛。%普魯卡因局麻下頸部正中切開皮膚,分離氣管,分離左側(cè)頸動脈及右邊頸靜脈,穿線備用,分離一側(cè)股動脈穿線備用。3.耳緣靜脈注入肝素(ml/kg)4.作氣管插管;頸靜脈插管連接中心靜脈壓裝置;頸動脈插管(內(nèi)有含肝素的生理鹽水)并連接血壓描記裝置;股動脈插入帶有三通開關(guān)的乳膠管備用。5.劍突下處在腹正中線切開皮膚cm,將腹白線輕輕拖起,切開腹白線,注意止血,用手輕輕將一段二十指腸和系膜拉出腹前用溫生理鹽水紗布包裹,然后將家兔向左側(cè)位固定,把腸系膜放在置于微循環(huán)裝置的觀看孔上,用大頭針固定,用顯微鏡直接觀看血前后的腸系膜毛細(xì)血管的血流狀況。6.打開連接股動脈的三通開關(guān),一次快速放血于50ml注射器內(nèi),待血壓降到40mmHg水平,取血備用。維持血壓40mmHg30分鐘,每隔10分鐘取血,別離檢測休克不同時刻TNF,MDF,兒茶酚胺等的水平。休克急救——實驗分組對照組:動脈血壓降至40mmHg后維持1小時,然后將放出的血自頸靜脈全數(shù)快速點滴輸回,必要時加低分子右旋糖苷ml,觀看輸液進(jìn)程中各項指標(biāo)轉(zhuǎn)變。(呼吸、血壓)去甲腎上腺素組:放血后血壓降至40mmHg后,維持30分鐘,然后自頸靜脈緩慢滴入去甲腎上腺素生理鹽水ml(含去甲腎上腺素),在20-30分鐘內(nèi)滴完,將放出的血快速自頸靜脈輸回,觀看20分鐘,觀看各項指標(biāo)。654-2組:在動脈血壓降至于40mmHg30分鐘后,自頸靜脈緩慢滴入654-2生理鹽水ml(含654-2)于30分鐘內(nèi)滴完,再將放出的血自頸靜脈快速回,必要時加低分子右旋糖苷,觀看20分鐘各項指標(biāo)。分析各組實驗成果討論:失血性休克進(jìn)程中,微循環(huán)轉(zhuǎn)變特點。(鄭紅、汪思應(yīng))實驗五喜樹堿誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡[實驗?zāi)康腯:初步把握檢測細(xì)胞凋亡(Apoptosis)這一特殊的細(xì)胞生命活動現(xiàn)象;結(jié)合理論討論細(xì)胞凋亡與疾病的關(guān)系。[實驗原理]:喜樹堿(camptothecin)是一種抗腫瘤藥品,研究發(fā)現(xiàn)其能夠誘導(dǎo)多個腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。本實驗用含必然量喜樹堿的哺育液哺育K562細(xì)胞,誘導(dǎo)哺育3小時后,提取K562細(xì)胞的DNA,用凝膠電泳法分析其是不是發(fā)生凋亡,并用正常及壞死的K562細(xì)胞DNA作對照。[實驗器材]:100mA電泳儀,電泳槽,紫外觀看儀,高速離心機,OLYPMUS顯微鏡,水浴箱,K562細(xì)胞,喜樹堿,瓊脂糖,溴化乙錠,ml蛋白酶K,,NP40,,RNase,1×TBE緩沖液,上樣緩沖液,TE緩沖液,DLMarker.[實驗環(huán)節(jié)]:取指數(shù)生長久的K562細(xì)胞×106個,用含喜樹堿的哺育液哺育3小時(對照組不加喜樹堿),取少量細(xì)胞滴片,染色后高倍鏡觀看;用含、的PBS離心洗兩遍(1200rpm),棄上清,。加μlTBE(臨歷時加%NP40),μlRNase至ml,37℃,30分鐘。加蛋白酶K(ml)μl,37℃,30分鐘。14000rpm,4離心15分鐘,收集上清(-70℃)。取上清μl,加上樣緩沖液μl,%瓊脂糖凝膠電泳30分鐘,紫外線透視儀下觀看,凋亡細(xì)胞顯現(xiàn)DNALadder,DNA多為100-300bp。下列圖為示教成果:(汪思應(yīng))實驗六急性右心衰竭[實驗?zāi)康腯復(fù)制急性右心衰竭動物模型;觀看急性右心衰竭時血液動力學(xué)的要緊變化。[實驗?zāi)康腯運用液體石臘阻塞兔大部份肺毛細(xì)血管,造成右心后負(fù)荷增加;大劑量快速輸液增加右心前負(fù)荷,誘發(fā)家兔急性右心衰。[實驗動物]家兔,體重kg。[藥品和器材]%戊巴比妥鈉溶液;%普魯卡因溶液;%肝素溶液、液體石蠟、山梗菜堿。手術(shù)器械一套:1ml、5ml、10ml注射器;中心靜脈壓測量裝置、輸液裝置、二導(dǎo)儀、秒表[實驗環(huán)節(jié)]家兔稱重,仰臥固定。頸部正中皮下注射%普魯卡因局部麻醉,作頸部正中切口,游離出雙側(cè)頸外靜脈和一側(cè)頸總動脈。由耳緣靜脈注入%肝素液(ml/kg),經(jīng)右邊頸外靜脈插入中心靜脈壓導(dǎo)管;測量中心靜脈壓,經(jīng)左側(cè)頸外靜脈插管連接輸液裝置,經(jīng)頸總動脈插管連接二導(dǎo)儀描記血壓,劍突下皮下穿大頭針一只,連接二導(dǎo)儀統(tǒng)計呼吸。測量實驗前各類指標(biāo)動脈血壓:呼吸;中心靜脈壓;循環(huán)時刻側(cè)記。(自耳緣靜脈快速注入%山梗菜堿,計由注入至顯現(xiàn)呼吸變深變快的時刻)。實驗進(jìn)程實驗前各項指標(biāo)觀看完畢,即用1ml注射器,由耳緣靜脈注入液體石蠟(ml/kg),注射速度要慢(注射到血壓下降到70mmHg為度),10分鐘后再觀看上述指標(biāo)有何轉(zhuǎn)變。待動物血壓、呼吸穩(wěn)固后,加速輸液速度(180-200滴/分)快速輸入生理鹽水后,再重復(fù)上述指標(biāo)測定。待動物死后來,剖開胸、腹腔,觀看有無腹水及其量,腸壁有無水腫,肝臟體積、心臟體積有無胸水,肺臟外觀及切面轉(zhuǎn)變,最后剪破靜脈,放出血液,注意肝臟和心臟體積轉(zhuǎn)變。(鄭紅、汪思應(yīng))性能綜合實驗三、急性中毒性腎功效不全【實驗?zāi)康摹浚?)觀察正常家兔尿量及ADH對尿量的妨礙;(2)急性中毒性腎功效不全的動物模型;(3)觀看比較急性腎功效不全與正常動物血氣、酸堿、血清鉀及尿的轉(zhuǎn)變,分析其發(fā)生機制;(4)運用有關(guān)藥品對急性腎功效進(jìn)行初步醫(yī)治?!緦嶒炘怼坎杉{腎毒物重金屬HgCl2溶液造成家兔急性腎小管壞死,復(fù)制急性腎功效不全的動物模型,通過觀看動物的血氣、酸堿、血尿素氮(BUN)、血清鉀及尿的轉(zhuǎn)變,學(xué)習(xí)急性腎衰時內(nèi)環(huán)境的轉(zhuǎn)變?!緦嶒瀯游铩考彝?只,體重kg?!緦嶒炈幤放c器材】%HgCl2溶液,%戊巴比妥鈉溶液或%氨基甲酸乙醇溶液,%普魯卡因溶液,生理鹽水,%肝素生理鹽水溶液;兔臺,手術(shù)器械,1ml和5ml注射器,試管,滴管,漏斗,吸管,試管夾,酒精燈,試管架,頸動脈插管,血氣分析儀,生化分析儀,離心機,光電比色儀,水浴鍋?!居^看指標(biāo)】全血血氣分析儀測定pH值、PaCO2、HCO3-、K+、Na+和Cl-。血清生化分析儀測定BUN。尿尿量、尿蛋白定性和鏡檢。腎大致、剖面?!緦嶒灧绞脚c環(huán)節(jié)】(1)取家兔三只,一只為正常對照(A),一只為中毒實驗兔(B),另一只為ADH處置兔(C)。于實驗前一天稱重后,實驗兔皮下或肌內(nèi)注射%HgCl2(按~ml/kg,一次注射),造成急性中毒性腎功效不全模型,C兔注射ADH對照兔那么在相似部位注射同量的生理鹽水,作為對照。將三只兔籠別離置于大漏斗上,收集尿液,測量24h尿量。(2)實驗開始,家兔稱重后,%氨基甲酸乙酯溶液(~g/kg體重)或%戊巴比妥鈉(mg/kg體重)耳緣靜脈注入麻醉后,仰臥固定于兔臺。下腹部剪毛,在恥骨聯(lián)合上±cm處做長約cm的正中切口,分離皮下組織,沿腹白線切開腹膜,暴露膀胱,插管掏出全數(shù)尿液,供尿蛋白定性和尿液鏡檢。(3)頸部正中切口,分離一側(cè)頸總動脈,頸動脈插管內(nèi)注入肝素生理鹽水溶液,進(jìn)行頸動脈插管。(4)抽取ml動脈血做血氣分析,取ml動脈血(滴入肝素數(shù)滴后)離心(1500r/min,5~10min),取血清供BUN測定用。(5)尿常規(guī)檢查。1)將尿液1500r/min離心5~10min。2)顯微鏡檢查取尿沉渣,涂在玻片上,觀看有無異樣成分(細(xì)胞和管型)。3)尿蛋白定性檢查取大試管盛尿液,傾斜試管于酒精燈上,將試管中的尿加熱至沸騰,觀看有無混濁,加數(shù)滴醋酸,再加熱至沸騰,混濁不退為蛋白陽性,按其混濁程度以-、+、++、+++、++++表達(dá)之。“-”表達(dá)尿液清晰無混濁“+”表達(dá)尿液顯現(xiàn)輕度白色混濁(含蛋白~g/L)“++”表達(dá)尿液稀薄乳樣混濁(含蛋白質(zhì)~g/L)“+++”表達(dá)尿液乳濁或有少量絮片存在(含蛋白~g/L)“++++”表達(dá)尿液顯現(xiàn)絮狀混濁(含蛋白質(zhì)>g/L)如加醋酸后混濁消失,是因加醋酸可除去磷酸鹽或碳酸鹽所形成的白色混濁。(6)血清BUN的測定。取三只試管別離標(biāo)號后按下表操作:試劑(ml)1(空白管)2(原則管)3(樣品管)BUN試劑二乙酰單肟試劑蒸餾水尿素原則液1∶5稀釋的血清將上述各管充足搖勻,置滾水浴中加熱15min,用自來水冷卻3min,在540nm波長下比色,統(tǒng)計原則管的光密度讀數(shù)(D標(biāo))及樣品管的光密度讀數(shù)(D樣)。計算每100ml血清中BUN的含量(mg)=(D樣/D標(biāo))××(5×100g,蒸餾水溶解并加至ml。(2)BUN試劑取濃H2SO444.0ml,%H3PO4ml,溶于ml蒸餾水中,冷至室溫依次加硫氨脲mg,溶解后再加硫酸鎘μg(3CdSO4·8H2O)或g(3CdSO4·6H2O),溶解后加蒸餾水至,存冰箱,可保存6月。(3)BUN原則儲蓄液(mg%)精確稱取尿素mg,溶于50ml蒸餾水中加氯仿6滴,再用蒸餾水稀釋至ml,可貯存冰箱6個月。(4)BUN原則液(每毫升含微克)取上述BUN原則儲蓄液ml,加蒸餾水至ml。參考實驗四急性左心衰竭[實驗?zāi)康腯復(fù)制急性左心衰的動物模型。觀看心肌梗塞前、后的心率高低和血液動力學(xué)的變化。[實驗原理]運用冠狀動脈結(jié)扎術(shù),結(jié)扎家兔冠狀動脈左室支,造成急性心肌梗塞,誘發(fā)急性左心衰。[實驗動物]家兔[藥品和器材]%戊巴比妥鈉溶液、%普魯卡因溶液、%肝素溶液、碳素墨水。手術(shù)器械一套、小拉鉤一付、2ml、5ml、10ml注射器,固定支架、大木夾、大頭針、二導(dǎo)儀。[實驗環(huán)節(jié)]稱重、麻醉,按kg由家兔耳緣靜脈注入%戊巴比妥鈉,仰臥固定。在1%普魯卡因局部麻醉下,作頸部正中切口,分離出雙側(cè)頸總動脈。胸部局部麻醉后,沿胸骨中線自胸節(jié)平線到劍突上切開皮膚,暴露胸骨和肋軟骨,分離胸肌,沿胸骨左緣在肋軟骨部位切斷第2-4肋骨,用小拉鉤輕輕撐開胸腔切口,即可見心包及搏動的心臟,提起并剪快樂包,充足暴露心臟和外主動脈。用濕紗布包裹手指,將心臟略向右旋,暴露左心耳和左室大部,在左心耳下緣認(rèn)真找出冠狀動脈左室支的行走位置,用細(xì)園針(0號線)在左心耳下緣處繞左室縫穿一線,暫不結(jié)扎。從耳緣靜脈注入%肝素液(kg),經(jīng)左側(cè)頸動脈插管,描記動脈血壓,于劍突部位皮下穿一大頭針,連接二導(dǎo)儀描記呼吸。經(jīng)右邊頸動脈插入充滿%肝素液的左心室導(dǎo)管,經(jīng)傳感器和二道儀統(tǒng)計左室內(nèi)壓,插管時邊插邊觀看壓力曲線,等顯現(xiàn)左室內(nèi)壓力曲線時表達(dá)已插入左室、插入導(dǎo)管約左右,固定導(dǎo)管。觀看指標(biāo):心率、動脈血壓、呼吸和強度、左心室內(nèi)壓。實驗進(jìn)程:手術(shù)完畢后,統(tǒng)計麻醉安靜下指標(biāo)數(shù)值。結(jié)扎冠狀動脈左室支前,觀看各項指標(biāo)轉(zhuǎn)變,每隔2分鐘統(tǒng)計一次,結(jié)扎左室30分鐘后,假設(shè)仍無心律紊亂發(fā)生,可在頸部位結(jié)扎或再于室間溝處結(jié)扎前降枝。動物死后來,觀看心臟各部位體積高低,剪下心、肺,在離主動脈走始部位處,剪斷主動脈,插入塑料管,將動脈壁和塑料管壁結(jié)扎,并從左房根部結(jié)扎左房,由塑料管向外主動脈注入碳素墨水,邊觀看心室壁墨染范疇,估測未墨染面積約占左室游離壁面積比例。(鄭紅、汪思應(yīng))病例討論一患者男性,52歲。十年前因上腹部不適,伴有腹痛及食欲不振住入某醫(yī)院。住院檢查肝大肋下,肝功效正常,經(jīng)護(hù)肝醫(yī)治好轉(zhuǎn)出院。四年前上述病癥加重并伴有皮膚、鞏膜黃染,進(jìn)食時上腹部不適感加重、腹脹,有時伴惡心、嘔吐、便稀,病癥重復(fù)持續(xù)至今。近四個月來,病人呈進(jìn)行性消瘦,四肢無力,面色憔悴,皮膚粗糙,皮膚、鞏膜黃染加深,鼻和齒齦易出血,有時有血便。三天前因吃牛肉后顯現(xiàn)惡心、嘔吐,神志恍忽,煩躁不安急診入院?;颊咦阅贻p時起,性喜飲酒,日飲酒量均在半斤以上,常年不停,既往無瘧疾史,亦無吸蟲疫水接觸史。體檢:神志恍忽,步履失衡,煩躁不安,皮膚、鞏膜黃染,腹壁靜脈曲張,臉部及胸部有蜘蛛痣。腹稍隆,肝可觸及,質(zhì)硬,邊沿較鈍。脾大肋下3指,質(zhì)較硬,有腹水征。心肺無特殊發(fā)現(xiàn)。食道吞鋇X線顯示食道下段靜脈曲張。實驗室檢查:黃疸指數(shù)單位,谷丙轉(zhuǎn)氨酶單位,腦鱗脂膽固醇絮狀實驗(++),麝香草酚濁度實驗單位,血氨μg%。入院后,經(jīng)補液,靜脈注入葡萄糖、谷氨酸鈉、酸性溶液灌腸,限制蛋白飲食,補充維生素及大量抗生素等醫(yī)治辦法急救后,神志慢慢清晰,病情好轉(zhuǎn)。五往后,患者大便時突覺頭暈、虛汗、法力,繼之暈厥茅廁中。被發(fā)現(xiàn)時患者面色慘白,脈博細(xì)速,血壓下降,經(jīng)輸血,補液急救后,血壓上升,病情似有好轉(zhuǎn)。第二天,患者再度顯現(xiàn)神志恍忽,煩躁不安,尖叫。檢查發(fā)現(xiàn)雙手有撲翼樣震顫,大便呈柏油樣。繼后發(fā)生昏迷,血壓,瞳孔中度散大,對光反射削弱,皮膚、鞏膜深度黃染,黃疸指數(shù)單位,谷丙轉(zhuǎn)氨酶單位,血氨μg%。經(jīng)各類降氨醫(yī)治后,血氨降至μg%,但上述病癥無明顯改善,病人仍處在昏迷狀態(tài),隨即靜脈滴注左旋多巴醫(yī)治,病癥慢慢減輕,神志緩慢恢復(fù),于住院后第47天,臨床病癥大致消失出院休養(yǎng)。討論題對本病的初步印象是什么;有那些診療根據(jù)?人要緊臨床病癥產(chǎn)生的病理基礎(chǔ)是什么?針對病人要緊臨床體現(xiàn)采納的醫(yī)治辦法的理論根據(jù)安在?分辨診療要緊補充檢查哪些項目?請告知病人出院后的注意事項。(鄭紅、汪思應(yīng))病例討論二患者,男,33歲。入院前4個月經(jīng)胸片診療為結(jié)核性胸膜炎。予異煙肼、利福平、已胺丁醇三聯(lián)抗結(jié)核醫(yī)治。入院前一月雙下肢水腫,尿量約1000ml/d,尿中泡沫增多,尿常規(guī)蛋白+++,大量RBC,μmol/L,診療為急性腎小球腎炎,經(jīng)醫(yī)治1個月無效于1990年9月8日轉(zhuǎn)我院。入院查體血壓150/100mmHg,眼瞼輕微水腫,左下肺叩診濁音及呼吸音低,心率100次/分,律齊。腹平軟,肝脾未及,雙下肢可凹陷性水腫。輔助檢查HB90g/L,×109,×109。尿常規(guī)蛋白++++,尿沉渣RBC3-5/HPF,24小時尿蛋白定量。尿滲入濃度L。血生化:K+mmol/L,SCr963.6μmol/L,mmol/L,g/L,g/L,mmol/L,mmol/L。B超:左腎×cm×cm,右腎B超:cm×cm×cm,腎盂、腎盞無擴張。免疫檢查ANA(-),抗-dsDNA抗體(-),補體C3dl,ml,L,IgAL,L??鼓I抗體(-),ANCA(-)。腎穿刺活檢病理光鏡:5個腎小球內(nèi)可見3個細(xì)胞纖維新月體,腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù)增多,系膜區(qū)增寬,系膜細(xì)胞基質(zhì)增多,毛細(xì)血管襻受壓,多數(shù)管腔閉塞,近端腎小管濁腫,部份腎小管上皮細(xì)胞脫落及管腔完全閉塞,腎間質(zhì)普遍纖維化,符合新月體腎炎。免疫熒光:IgG+++沿GBM彌漫顆粒樣沉積。IgA++、IgM++沿GBM和系膜區(qū)彌漫顆粒樣沉積,C3++、C1q、FI+沿GBM彌漫顆粒樣沉積。入院后,在予以利尿、降壓等支持醫(yī)治的同時,予甲基強的松龍d沖擊醫(yī)治5天,沖后予強的松qd維持,尿量漸增至1500-2500ml/d,停用利福平,繼續(xù)運用異胭肼,乙胺丁醇抗結(jié)核醫(yī)治。2月后SCr降至μmol/L,帶藥出院回本地繼續(xù)醫(yī)治。討論:結(jié)合病明白得剖和病理生理所學(xué)知識,該疾病的診療是什么?該疾病的發(fā)病機制是什么?病人為什么顯現(xiàn)水腫?(鄭紅、汪思應(yīng))病例討論三患者,女,22歲,因“腹痛9日,少尿4日”急診?;颊哂?周前曾行人工流產(chǎn)術(shù)。9日前感腹痛、胸悶、惡心,嘔吐胃內(nèi)容物。腹部持續(xù)性隱痛,陣發(fā)性加重,在外院對癥醫(yī)治(具體不詳)病情無好轉(zhuǎn)。4日前尿量減少,每日約。既往軀體健康。來診時查體:體溫℃,脈搏60次/分,呼吸19次/分,血壓14.7/(1KPa=)。意識清晰,皮膚、粘膜、鞏膜、結(jié)膜、淺表淋巴結(jié)、扁桃體、雙肺呼吸無異樣。心界向左擴大,律齊,未聞及雜音。腹平軟,全腹輕壓痛,雙側(cè)上腹部為著,無反跳痛及肌緊張,肝臟于肋緣下及邊,脾未及,肝區(qū)叩擊痛、雙腎區(qū)叩擊痛均為陽性,移動性濁音陰性,雙踝部輕度凹陷性水腫。實驗室檢查:血常規(guī):紅細(xì)胞×1012/L,血紅蛋白L,血小板×109/L,白細(xì)胞×109/L,中性粒細(xì)胞,淋巴細(xì)胞。尿常規(guī):紅細(xì)胞滿視野/高倍視野,白細(xì)胞3-5個/高倍視野,上皮細(xì)胞9-11個/高倍視野。糞常規(guī):黃色稀便,潛血實驗(+)。動脈血氣:PH,PO2,,HCO3—L,堿剩余—L,肝功效:丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶13·s·L,天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶10·s·L,總膽紅素33μmol/L,直接膽紅素28μmol/L,血清肌酐806μmol/L,尿素氮L。血Ca2+L,K+mmol/L,Na+131mmol/L,Cl-90mmol/L,。凝血功效檢查:凝血酶原時刻(PT),,纖維蛋白原(FIB)6g/L,活化部份凝血激酶時刻(APTT)40s。心電圖示竇性心動過緩,I度房室傳導(dǎo)阻滯,普遍T波低平或倒置。心臟超聲:左房增大,二尖瓣、三尖瓣、主動脈瓣輕度反流,少量心包積液。X線胸片示:兩肺紋理增粗,心影明顯增大,雙側(cè)胸腔積液。腹部B超檢查:肝腫大,呈淤血變化,脾大,雙腎實質(zhì)彌漫性損害,少量腹水。診療:多臟器功效障礙綜合癥(MODS)。予以維持水、電解質(zhì)、酸堿平穩(wěn),抗感染,利尿,營養(yǎng)支持,制酸,愛惜肝臟,對癥醫(yī)治等。2周后患者病癥明顯減緩,各項輔助檢查指標(biāo)較前明顯改善或恢復(fù)正常出院。討論:該病人顯現(xiàn)幾個器官功效障礙,根據(jù)是什么?該患者M(jìn)ODS的發(fā)病機制可能是什么?該患者呼吸系統(tǒng)有無受損,什么緣故?(鄭紅、汪思應(yīng))
病理生理學(xué)教學(xué)大綱(實驗部份)安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室
病理生理實驗教學(xué)大綱病理生理學(xué)是一門理論學(xué)科,同時又是一門實驗學(xué)科。通過臨床研究特別是動物實驗,使病理生理理論獲得了極大的充實和進(jìn)展。同時病理生理的實驗教學(xué)不僅初步指導(dǎo)學(xué)生初步理解人類疾病動物模型復(fù)制的大致方式,鍛煉了操作技術(shù)、驗證和溫習(xí)理論知識;還通過實驗與課堂討論的具體環(huán)節(jié),使學(xué)生初步含有進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究與臨床思維所必備的“嚴(yán)肅的科學(xué)態(tài)度、周密的科學(xué)方式和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)”等。因此實驗課是病理生理教學(xué)的重要構(gòu)成部份。隨著人類社會知識更新速度的加速、分子生物學(xué)的進(jìn)展及研究手腕的進(jìn)步,病理生理學(xué)在近來幾年也有飛速的進(jìn)展。為配合原則教材第五版的運用,咱們根據(jù)本校的教學(xué)特點,對病理生理實驗進(jìn)行了部份調(diào)節(jié)。為此特修訂《病理生理實驗教學(xué)大綱》。使其更適合咱們教學(xué)需要。概論目的與規(guī)定:把握病理生理實驗課的規(guī)定,實驗報告的書寫格式;熟悉病理生理實驗?zāi)康?;理解人類疾病動物模型?fù)制的方式。要緊內(nèi)容:病理生理理論與實驗課的特點,人類疾病動物模型復(fù)制的大致方式;病理生理實驗課的目的和規(guī)定;病理生理實驗報告的書寫原則。實驗一大致實驗操作技術(shù)訓(xùn)練目的與規(guī)定:把握小鼠的緝捕、腹腔注射技術(shù);把握家兔的固定,耳緣靜脈注射,頸部、腹股溝手術(shù)操作規(guī)程及氣管、動脈、靜脈插管技術(shù);熟悉實驗室常規(guī)器件、儀器的運用,大鼠的緝捕及腹腔注射技術(shù);理解實驗動物的特點。要緊內(nèi)容:介紹了病理生理動物實驗的要緊對象——家兔、大鼠、小鼠的大致生理特點;重點進(jìn)行家兔的稱重、固定,術(shù)前皮膚預(yù)備,麻醉,頸部及腹股溝手術(shù);頸部手術(shù)要緊分離氣管、頸外靜脈、頸動脈并做對應(yīng)的插管,進(jìn)行呼吸描記,靜脈輸液及血壓測量;腹股溝手術(shù)要緊分離股動脈并插管以進(jìn)行股動脈放血;大、小鼠的緝捕及腹腔注射等技術(shù)。實驗二實驗性肺水腫目的與規(guī)定:把握用大劑量快速輸液法復(fù)制實驗性肺水腫的家兔模型;溫習(xí)水腫理論知識,闡明家兔肺水腫時病癥、體征的發(fā)生機制;討論本水腫發(fā)生的可能機制及腎上腺素的應(yīng)用意義。要緊內(nèi)容:家兔稱重、固定及頸部手術(shù)進(jìn)行氣管、頸外靜脈插管后,由靜脈大劑量(100-120ml/kg體重)快速輸液(180-200滴/分鐘)復(fù)制肺水腫模型;在液體輸入后,由耳緣靜脈注射腎上腺素(kg體重);觀看輸液前、輸液后、注射腎上腺素后,家兔的呼吸、心率、呼吸音有何轉(zhuǎn)變及有無氣管分泌物顯現(xiàn);結(jié)合理論,討論水腫家兔呼吸、心率、呼吸音轉(zhuǎn)變及氣管分泌物顯現(xiàn)的機制;腎上腺素的作用;討論除大劑量快速輸液使肺毛細(xì)血管靜水壓增加致使本水腫發(fā)生外,有無其它機制參加,什么緣故?書寫實驗報告。實驗三缺氧目的與規(guī)定:把握小鼠乏氧性缺氧、血液性缺氧的模型復(fù)制;依如實驗,熟悉亞硝酸鹽、CO中毒的臨床急救原理;結(jié)合理論,討論麻醉、年紀(jì)對缺氧耐受性的妨礙機制;設(shè)計簡樸實驗,驗證環(huán)境溫度對小鼠缺氧耐受性的妨礙。要緊內(nèi)容:用250ml磨口廣口瓶復(fù)制低張性缺氧的小鼠模型,并介紹設(shè)立對照在醫(yī)學(xué)研究中的意義;使腹腔注射適量烏拉坦的小鼠處低張性缺氧狀態(tài)、新生紅皮鼠與成年鼠對照以觀看麻醉、年紀(jì)對缺氧耐受性的妨礙;用腹腔注射亞硝酸鹽法復(fù)制等張性缺氧的小鼠模型,并觀看中毒小鼠的體現(xiàn)及美蘭對亞硝酸鹽中毒的作用;使小鼠處在高濃度CO環(huán)境復(fù)制煤氣中毒模型,觀看中毒小鼠的體現(xiàn)及理解CO中毒的急救原那么和原理;觀看不同類型缺氧小鼠皮膚、內(nèi)臟顯現(xiàn)的特殊顏色;書寫實驗報告,涉及設(shè)計實驗驗證環(huán)境溫度對缺氧耐受性的妨礙。實驗四失血性休克目的與規(guī)定:把握股動脈放血法復(fù)制失血性休克的動物模型;熟悉休克的急救辦法及原理;結(jié)合理論,討論休克家兔病癥、體征的發(fā)生機制。理解休克不同時刻TNF、MDF等轉(zhuǎn)變及意義。要緊內(nèi)容:常規(guī)手術(shù)分離家兔氣管、頸動脈、頸外靜脈并插管,分離股動脈并插管。由股動脈導(dǎo)管操縱性放血使家兔血壓維持在40mmHg左右30分鐘,觀看及檢測放血前后、放血不同時刻家兔活動、血壓、心率、四肢溫度及TNF、MDF、兒茶酚胺等轉(zhuǎn)變;分組采用輸血、給去甲腎上腺素、654-2等不同辦法對休克家兔進(jìn)行急救;結(jié)合理論分析休克家兔顯現(xiàn)各類“轉(zhuǎn)變”的機制;TNF、MDF、兒茶酚胺檢測試劑盒的運用。實驗五喜樹堿誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡目的與規(guī)定:把握用電泳法檢測細(xì)胞凋亡;熟悉喜樹堿誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的大致方式及凋亡細(xì)胞的顯微鏡下變化;理解細(xì)胞凋亡的其它檢測手腕;結(jié)合理論討論細(xì)胞凋亡的發(fā)生機制;要緊內(nèi)容:用含喜樹堿的哺育液哺育K562細(xì)胞以誘導(dǎo)其凋亡。鏡檢觀看凋亡細(xì)胞和正常K562的區(qū)別;用NP40裂解細(xì)胞,結(jié)合蛋白酶K、RNASE消化細(xì)胞蛋白和RNA以提取細(xì)胞DNA;用%瓊脂糖凝膠電泳檢測凋亡、正常K562細(xì)胞的DNA,誘導(dǎo)凋亡細(xì)胞的DNA應(yīng)顯現(xiàn)DNALadder.結(jié)合實驗,討論細(xì)胞發(fā)生凋亡的可能機制。實驗六實驗性右心衰目的與規(guī)定:把握家兔實驗性右心衰模型的復(fù)制;熟悉心衰的常見病癥、體征及診療原則;結(jié)合理論,溫習(xí)心衰的發(fā)生機制及機體的代償辦法。要緊內(nèi)容:經(jīng)頸部手術(shù)分離家兔氣管、頸動脈、頸外靜脈并插管后,由耳緣靜脈注射液體石蠟部份阻塞肺血管以增加后負(fù)荷、經(jīng)頸外靜脈大劑量快速輸液提高前負(fù)荷造成家兔右心急性衰竭;觀看并比較注射石蠟油前后、大劑量輸液后家兔呼吸、心率、心音、中心靜脈壓(CVP)的轉(zhuǎn)變;分析以上“轉(zhuǎn)變”顯現(xiàn)的機制;觀看家兔急性右心衰是不是引發(fā)其發(fā)生心源性休克;解剖家兔尸身,觀看右心及有無胸、腹水顯現(xiàn);書寫實驗報告。實驗七病例討論一目的與規(guī)定:把握病例討論時病歷報告的思路和方式;熟悉肝功效不全及肝性腦病患者的臨床體現(xiàn);理解臨床疾病診療及醫(yī)治的原那么。要緊內(nèi)容:一男性患者,52歲,年輕時日飲酒半斤,十年前開始,不停顯現(xiàn)消化道不適病癥,近期加重且有血便。無血吸蟲及肝炎病史。三天前因吃牛肉后顯現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)病癥入院求治;體檢發(fā)現(xiàn)病人神智恍忽,有黃膽、肝硬化腹水及側(cè)枝循環(huán)成立的典型體征,且實驗室檢察示肝功效受損,血氨升高;入院經(jīng)踴躍醫(yī)治病情好轉(zhuǎn),但病人顯現(xiàn)上消化道大出血,致使休克。急救休克使之好轉(zhuǎn)后,又顯現(xiàn)典型的肝性腦病;經(jīng)降血氨等醫(yī)治,病癥大致消失后出院;規(guī)定給病人診療病情、討論其病癥和體征顯現(xiàn)的機制、臨床醫(yī)治原理。并提示病人出院注意事項。實驗八病例討論二目的與規(guī)定:把握急性腎功效不全少尿期的性能代謝變化;熟悉急性腎炎的診療原則及發(fā)病機制;理解急性腎炎的臨床醫(yī)治。要緊內(nèi)容:患者因結(jié)核性胸膜炎服用異煙肼等抗結(jié)核藥,服用兩月后顯現(xiàn)水腫、尿少等病癥,曾在其它醫(yī)院診療為“急性腎炎”,醫(yī)治無效后轉(zhuǎn)入我院;入院體檢發(fā)現(xiàn)明顯水腫及左下肺實變,實驗室檢查提示符合急性腎炎、腎功效不全的診療;規(guī)定討論該疾病的發(fā)病機制和水腫顯現(xiàn)的機制。實驗九病例討論三目的與規(guī)定:明白得MODS的臨床病因是多個多樣的;把握SIRS/CARS特別是白細(xì)胞與MODS發(fā)病的關(guān)系;熟悉MODS的臨床體現(xiàn)。要緊內(nèi)容:患者因人工流產(chǎn)術(shù)后顯現(xiàn)劇烈腹痛且近五日顯現(xiàn)無尿而入院;入院體檢及各項實驗室檢查提示患者白細(xì)胞明顯升高,腎功效不全處少尿期,同時伴有肝、心功效不全,肺臟也有受損;規(guī)定討論該病人MODS的發(fā)生機制、各器官受損后有什么體現(xiàn)及考慮肺臟有無受累。(汪思應(yīng))
病理生理學(xué)教學(xué)大綱(理論部份)安徽醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室
附二病理生理學(xué)教學(xué)大綱前言病理生理學(xué)是醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)理論學(xué)科之一。它的任務(wù)是研究疾病的機制并結(jié)合機體性能代謝的轉(zhuǎn)變。闡明疾病發(fā)生、進(jìn)展的大致規(guī)律,揭發(fā)疾病的本質(zhì),為疾病的防治提供理論根據(jù)。病理生理學(xué)的大致內(nèi)容分總論和各論兩部份??傉撘o講述疾病中帶有共性的規(guī)律及大致病理進(jìn)程,各論要緊講述機體各系統(tǒng)疾病發(fā)生規(guī)律以至每一種疾病的特殊規(guī)律??墒歉鶕?jù)現(xiàn)在我國醫(yī)學(xué)教育情形,咱們只能選擇假設(shè)干重要章節(jié)作為教學(xué)內(nèi)容。在教學(xué)進(jìn)程中,以辯證唯物主義為指導(dǎo),對的明白得機體與環(huán)境,內(nèi)因和外因、局部與整體、性能與形態(tài)、損傷與抗損傷等辯證關(guān)系,通過教學(xué),哺育學(xué)生運用辯證唯物主義的世界觀和方式論觀看問題、分析問題和解決問題的能力,把握病理生理學(xué)的基礎(chǔ)理論和大致技術(shù),為后來臨床實踐和科學(xué)研究打下牢固基礎(chǔ)。在教學(xué)中必需堅持理論聯(lián)系實際(臨床),應(yīng)用啟發(fā)式教學(xué)方式,充足調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的主動性和踴躍性,哺育學(xué)生獨立自學(xué),科學(xué)思維,在學(xué)好理論課的同時學(xué)會和應(yīng)用實驗方式,分析實驗成果,得出實驗結(jié)論。根據(jù)教學(xué)打算,病理生理學(xué)教學(xué)共安排87學(xué)時,其中理論課為58學(xué)時,實驗課為29學(xué)時,要緊以臨床醫(yī)學(xué)、全科醫(yī)學(xué)、康復(fù)醫(yī)學(xué)、婦幼保健、口腔醫(yī)學(xué)等本科學(xué)生為教學(xué)對象。第一章緒論目的:把握病理生理學(xué)要緊研究方式2.熟悉病理生理學(xué)的任務(wù)、性質(zhì)和在醫(yī)學(xué)教育中的地位3.理解病理生理學(xué)進(jìn)展要緊內(nèi)容:病理生理學(xué)要緊探討疾病發(fā)生進(jìn)展的規(guī)律與機制,應(yīng)用正常人體的形態(tài)、功效、代謝方面的各類知識加以綜合、分析、再通過科學(xué)思維運到患病的機體,從而對的熟悉疾病中顯現(xiàn)的各類轉(zhuǎn)變。其性質(zhì)為一門與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)中多學(xué)科緊密有關(guān)的綜合性邊沿學(xué)科。也是一門溝通基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床的橋梁學(xué)科。病理生理學(xué)既是理論性較強的學(xué)科,又是一門實驗性學(xué)科,動物實驗或復(fù)制實驗動物模型、臨床觀看、疾病流行病學(xué)調(diào)查為其大致研究方式,從群體和整體水平、器官水平,細(xì)胞水平和分子水平上獲得研究成果,為探討疾病的病因,機制及防治提供根據(jù)病理生理學(xué)作為一獨立新興學(xué)科,隨著整個醫(yī)學(xué)實踐的需要慢慢進(jìn)展的,現(xiàn)在已由中國科協(xié)同意成立國家一級學(xué)會——中國病理生理協(xié)會。病生工作者在教學(xué)、科研中做出了重要奉獻(xiàn)第二章疾病概論目的:把握疾病發(fā)生的同樣規(guī)律和大致機制熟悉疾病發(fā)生的緣故和條件熟悉疾病和健康的概念理解疾病通過、轉(zhuǎn)歸和機體的衰老要緊內(nèi)容:健康涉及強健的體魄和健全的精神狀態(tài),疾病是在內(nèi)外內(nèi)素作用下,機體“自穩(wěn)態(tài)”破壞,發(fā)生一系列功效代謝和形態(tài)構(gòu)造的異樣轉(zhuǎn)變,顯現(xiàn)必然的病癥,體征和社會行為導(dǎo)常病因的種類,病因和條件的相對性把握機體損傷抗損傷、疾病中因果交替、局部與整體的關(guān)系等規(guī)律,增進(jìn)疾病往好的方向進(jìn)展、從神經(jīng)體液機制細(xì)胞機制和分子機制理解疾病的發(fā)生疾病分期,康復(fù)與死亡,腦死亡的概念第三章水、電解質(zhì)代謝障礙目的:把握水和電介質(zhì)代謝紊亂時的機體轉(zhuǎn)變規(guī)律熟悉水和電介質(zhì)代謝紊亂時的概念及病因理解水和電解質(zhì)代謝紊亂時的處置原那么要緊內(nèi)容:脫水(高滲性脫水、低滲性脫水、等滲性脫水),水中毒的概念高滲性脫水,低滲性脫水和水中毒的性能代謝轉(zhuǎn)變,臨床特點和防治原那么高鉀血癥,低鉀血癥的大致概念;緣故和機制;機體性能代謝轉(zhuǎn)變和防治原那么。強調(diào)高鉀對心臟的作用高鎂和低鎂血癥的緣故機制及對機體的妨礙第四章酸堿平穩(wěn)紊亂目的:把握酸堿中毒及混合性酸堿平穩(wěn)紊亂的病因發(fā)病學(xué),機體轉(zhuǎn)變規(guī)律及中毒對機體妨礙熟悉機體對酸堿平穩(wěn)的調(diào)劑機制熟悉機體對酸堿平穩(wěn)的調(diào)劑機制理解反映酸堿平穩(wěn)經(jīng)常使用的指標(biāo)和意義要緊內(nèi)容:機體通過體液緩沖系統(tǒng)的緩沖、肺的調(diào)劑、腎的調(diào)劑和細(xì)胞內(nèi)外離子交換來維持酸堿的相對穩(wěn)固代謝性酸中毒;(AG增高型和AG正常型)概念、緣故和機制、機體轉(zhuǎn)變(代償和失代償)及其對機體妨礙、防治原那么呼吸性酸中毒:概念、緣故和機制、機體轉(zhuǎn)變(代償和失代償)和防治原那么代謝性堿中毒和呼吸性堿中毒的概念、緣故和機制,機體的代償性轉(zhuǎn)變和失代償、防治原那么混合性解酸堿平穩(wěn)紊亂:呼吸性酸中毒歸并代謝性酸中毒呼吸性酸中毒歸并代謝性堿中毒呼吸性堿中毒歸并代謝性堿中毒呼吸性酸中毒歸并代謝性酸中毒代謝性酸中毒歸并代謝性堿中毒第五章水腫目的:1.把握水腫發(fā)生的大致機制2.熟悉各類水腫的發(fā)病機制和特點3.理解水腫液對肌體的妨礙要緊內(nèi)容:概念大致機制:血管內(nèi)外液體交換失衡:毛細(xì)管流體靜壓升高、毛細(xì)血管壁通透性增血漿膠體滲入壓減少、淋巴回流受阻體內(nèi)外液體交換失衡:鈉、水潴留心性水腫、腎性水腫、肝性水腫、肺水腫、腦水腫的發(fā)生機制和臨床特點水腫液散布特點和對機體妨礙第六章缺氧目的:把握各類類型缺氧的特點熟悉缺氧機會體性能化謝轉(zhuǎn)變及其機制3.理解缺氧的病因及處置原那么要緊內(nèi)容:1.大致概念2.經(jīng)常使用血氧指標(biāo)3.低張性缺氧、等張性缺氧、循環(huán)性缺氧、組織中毒性缺氧的血氧轉(zhuǎn)變4.缺氧機會體功效代謝轉(zhuǎn)變(1)代償性反映(呼吸系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、組織細(xì)胞的適應(yīng))(2)功效代謝障礙(細(xì)胞損傷、中樞神經(jīng)系統(tǒng)功效障礙、外呼吸功效障礙、循環(huán)系統(tǒng)功效障礙)5.妨礙機體對缺氧耐受性的因素6.氧療及氧中毒第七章發(fā)熱目的:把握發(fā)熱的機制及肌體的性能代謝轉(zhuǎn)變熟悉熱代謝特點理解發(fā)熱的緣故和處置原那么要緊內(nèi)容:發(fā)熱、致熱原、內(nèi)源性致熱原、發(fā)熱激活物大致概念發(fā)熱激活物的種類與性質(zhì):細(xì)菌及其毒素、病毒和其它微生物、抗原抗體復(fù)合物、類固醇、致炎物內(nèi)生致熱原種類及作用部位發(fā)熱時相:體溫上升期、頂峰期或稽留期、體溫下降期5.發(fā)熱時肌體性能代謝轉(zhuǎn)變和處置原那么第八章應(yīng)激目的:把握應(yīng)激機會體性能代謝轉(zhuǎn)變熟悉應(yīng)激與疾病的關(guān)系理解應(yīng)激機會體激素水平轉(zhuǎn)變要緊內(nèi)容:應(yīng)激、應(yīng)激原、全身適應(yīng)綜合癥大致概念應(yīng)激時神經(jīng)內(nèi)分泌反映:交感—腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)下丘腦—垂體—腎上腺皮質(zhì)激素系統(tǒng)其它激素:胰高血糖素和胰島素、β—內(nèi)啡肽、生長素、催乳素等急性期反映蛋白和熱休克蛋白的構(gòu)成、來源及生物學(xué)功效應(yīng)激時各系統(tǒng)功效轉(zhuǎn)變:代謝轉(zhuǎn)變、心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等應(yīng)激與疾病:應(yīng)激性潰瘍、原發(fā)性高血壓、心律失常、結(jié)腸激惹綜合癥等第九章彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)目的:把握DIC發(fā)病原理及臨床體現(xiàn)發(fā)生進(jìn)展規(guī)律熟悉DIC發(fā)生進(jìn)展規(guī)律理解DIC大致病因、誘因及防治原那么要緊內(nèi)容:大致概念病因和機制:血管內(nèi)皮損傷啟動內(nèi)源性凝血、組織因子入血啟動外源性凝血、紅細(xì)胞、白細(xì)胞大量破壞、血小板激活、酶激活凝血系統(tǒng)、蛋白C缺少、纖溶活性的轉(zhuǎn)變DIC發(fā)生進(jìn)展因素:單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)功效受損、血液高凝狀態(tài)、促凝物質(zhì)入血、肝功效嚴(yán)峻受損,微循環(huán)障礙,不恰本地應(yīng)用纖溶克制劑DIC分為高凝期、消耗性低凝期、繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)期。按發(fā)生速度分急性、亞急性、慢性三型DIC臨床體現(xiàn):出血、休克、器官功效障礙和和微血管內(nèi)溶血性貧血DIC防治原那么:防治原發(fā)病;改善微循環(huán)重建凝血和纖溶間動態(tài)平穩(wěn)第十章休克目的:把握休克的發(fā)病機制熟悉休克時重要器官功效轉(zhuǎn)變理解各類休克特點和醫(yī)治原那么要緊內(nèi)容:休克的大致進(jìn)展及其微循環(huán)學(xué)說大致概念休克分類:(1)按休克病因分(2)按休克時血液動力學(xué)分(3)按休克時始動環(huán)節(jié)分休克的分期和機制缺血性缺氧期:組織灌流轉(zhuǎn)變、微循環(huán)障礙機制、早期休克時機體代償、臨床體現(xiàn)(2)休克期:微循環(huán)血流轉(zhuǎn)變、微循環(huán)淤滯機制、休克失代償時臨床體現(xiàn)(3)休克晚期:DIC形成、重要器官功效衰竭體液因素在休克時的作用:兒茶酚胺、RAS、組胺、激肽、花生四烯酸產(chǎn)物(前列腺素和白三烯)、血小板活化因子、內(nèi)啡肽、腫瘤壞死因子、內(nèi)皮素、一氧化氮、氧自由基、心肌克制因子、補體成分休克時細(xì)胞和器官功效障礙:急性腎功效衰竭、急性呼吸衰竭、心功效障礙、腦功效障礙等感染性休克、心源性休克、低血容量性休克特點休克防治原那么:糾正酸中毒、補充血容量、血管活行性藥品應(yīng)用、抗細(xì)胞損傷、體液因子拮抗劑、避免器官功效衰竭等第十一章缺血—再灌流損傷目的:把握缺血—再灌流損傷的發(fā)病機制熟悉缺血—再灌流損傷時肌體的功效代謝轉(zhuǎn)變理解缺血—再灌流損傷防治原那么要緊內(nèi)容:大致概念和近代進(jìn)展緣故和妨礙因素缺血—再灌流損傷的發(fā)生機制:(1)自由基的作用(自由基的概念和分類、氧自由基的種類、氧自由基生成增多的機制、自由基在缺血—再灌流損傷中的作用)(2)鈣過荷(鈣過荷發(fā)生機制、鈣過荷引發(fā)再灌流損傷的機制)(3)中性粒細(xì)胞的作用(再灌流時中性粒細(xì)胞增多的緣故、中性粒細(xì)胞介導(dǎo)缺血再灌流損傷的機制)(4)高能磷酸化合物缺少心、腦、腸、腎缺血—再灌流損傷的轉(zhuǎn)變防治原那么:排除缺血緣故,及早恢復(fù)血流改善缺血組織代謝去除自由基(低分子去除劑、酶性去除劑)鈣拮抗劑—減輕鈣過荷細(xì)胞愛惜劑應(yīng)用第十二章細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙目的:1.把握細(xì)胞信號障礙的概念,對機體的妨礙2.熟悉細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙與疾病的關(guān)系3.理解細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)大致線路,發(fā)生障礙的緣故和可能機制要緊內(nèi)容:1.細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙的概念,細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的大致途徑,層次及參予的物質(zhì)。2.細(xì)胞內(nèi)外酶的磷酸化與去磷酸化和信號的傳導(dǎo)、調(diào)控的關(guān)系,細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙的發(fā)生緣故,可能的機制。3.細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙與各系統(tǒng)疾病的關(guān)系。第十三章細(xì)胞凋亡目的:1.把握細(xì)胞凋亡進(jìn)程中生化變化及基因調(diào)控2.熟悉細(xì)胞凋亡的特點、大致進(jìn)展和妨礙因素3.理解細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義及其與疾病的關(guān)系要緊內(nèi)容:1.細(xì)胞凋亡的概念、大致特點、研究現(xiàn)狀2.妨礙細(xì)胞的凋亡因素(1)細(xì)胞因子的作用(2)有關(guān)抗原和受體的作用(3)病毒與細(xì)胞凋亡(4)其它:化學(xué)藥品、射線、氧自由基等3.凋亡細(xì)胞早期生物化學(xué)轉(zhuǎn)變(1)胞漿內(nèi)Ca++升高(2)PH減少(3)DNA斷裂(4)新的RNA和蛋白質(zhì)合成4.基因調(diào)控(1)與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)的(2)與克制細(xì)胞凋亡有關(guān)的5.細(xì)胞凋亡與腫瘤發(fā)生6.細(xì)胞凋亡與腫瘤醫(yī)治7.細(xì)胞凋亡的問題與前景
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