中國水仙NTMADS1基因表達分析及轉(zhuǎn)化擬南芥研究

中國水仙NTMADS1究中國水仙是重要的觀賞植物，具有濃郁的香氣和美麗的花朵。本研1基因表達分析，發(fā)現(xiàn)該基因AroaceumNTMADS1在擬南芥中的表達。研究結(jié)果表明，NTMADS1基因在中國水仙中可能參與了花的形成和生長Chinesenarcissusisanimportantornamentalplantwithstrongfragranceandbeautifulflowers.Inthisstudy,theexpressionanalysisofNTMADS1geneinChinesenarcissusseedsandseedlingswasconducted,anditwasfoundthatthegenewashighlyexpressedintheflowersandrootsofChinesenarcissus.Meanwhile,thegenewastransferredtoArabidopsisthalianabyAgrobacterium-mediatedtransformation,andtheexpressionofNTMADS1inArabidopsiswassuccessfullyachieved.TheresultsofthisstudysuggestthatNTMADS1genemayparticipateintheformationandgrowthofflowersinChinesenarcissus,andthetransfertoArabidopsiscanprovideagoodresearchmodelforexploringthefunctionofthisgene.Keywords:Chinesenarcissus,geneexpression,NTMADS1,Arabidopsisthaliana,transformation1中國水仙（NarcissustazettavarchinensisRoem.）是一種重要的基因是決定生物性狀的基本單位，基因表達的調(diào)控是生物體內(nèi)多種多樣性狀的來源。因此，研究基因表達的機制和模式具有重要的意義。M-ox基因家族是植物中重要的轉(zhuǎn)錄因子家族之一，參與了花部分和生殖器官的分化和發(fā)育等重要生物學(xué)過程。（rstazeM-ox1）ADS-ox基因家族的一個重要成員，其在花部分的表達水平與花的開發(fā)和形態(tài)密切相關(guān)，然而目前對其功能的研究還十分有限。本研究旨在探究NTMADS1在中國水仙中的表達模式，并通過Agrobacterium介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法將NTMADS1基因轉(zhuǎn)化到擬南芥中，并分NTMADS1的功能提供一個良好的研2中國水仙種子和幼苗，擬南芥（Arabidopsisthaliana）Col-0RNAcDNA取中國水仙花朵、幼苗和根各1g，分別磨成粉末并加入2mLTRIzolRNARNA純度和濃度。隨后，將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。RT-NTMADS1PCR擴增，再用瓊脂糖凝膠電泳NTMADS1NTMADS1pCAMBIA1304根瘤菌轉(zhuǎn)化載體中，轉(zhuǎn)化到DH5αNTMADS1基因的重組菌落，提取質(zhì)粒并進將NTMADS1基因搭載于T-DNA區(qū)域，構(gòu)建表達載體，再通過AgrobacteriumCol-0，篩選出轉(zhuǎn)化陽性的植NTMADS1qRT-PCRNTMADS1基因3RT-PCRNTMADS1基因在花和根中表達較高（1）NTMADS1NTMADS1pCAMBIA1304根瘤菌轉(zhuǎn)化載體中，轉(zhuǎn)化到DH5αNTMADS1基因的重組菌落，提取質(zhì)粒并進將NTMADS1基因搭載于T-DNA區(qū)域，構(gòu)建表達載體，通過AgrobacteriumCol-0，篩選出轉(zhuǎn)化陽性的植株，結(jié)果表明NTMADS1基因成功表達在擬南芥中。NTMADS1qRT-PCRNTMADS1基因在擬南芥中得到了相對較高的表達（2）4MADS-box基因家族是植物中重要的轉(zhuǎn)錄因子家族之一。其中，NTMADS1是中國水仙中MADS-box基因家族的一個重要成員，參與了花部分的發(fā)育和生長過程。通過實驗研究，我們發(fā)現(xiàn)了NTMADS1基因在中NTMADS1基因轉(zhuǎn)化到擬南芥中，并在擬南芥中得到了較高的表達。這表明NTMADS1基因在花的形成和生NTMADS1NTMADS1基ChenQ,LiuX,XuY,etal.Genome-wideidentificationandanalysisoftheMADS-boxgenefamilyinNarcissustazettavar.chinensis[J].FrontiersinPlantScience,2016,7.LiuYS,LiuJL,SongT,etal.CloningandexpressionanalysisofaMADS-boxgene(NTMADS1)fromChinesenarcissus[J].MolecularBiologyReports,2012,39(6):6641-6649.ParenicováL,deFolterS,KiefferM,etal.Molecularandphylogeneticanalysesofthe