脂質(zhì)體及其制備方法的選擇

SANY原則化小組#QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#SANY原則化小組#QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#脂質(zhì)體及其制備辦法的選擇脂質(zhì)體及其制備辦法的選擇1.脂質(zhì)體概述1965年，英國(guó)學(xué)者Bangham和Standish將磷脂分散在水中進(jìn)行電鏡觀察時(shí)發(fā)現(xiàn)了脂質(zhì)體。磷脂分散在水中自然形成多層囊泡，每層均為脂質(zhì)的雙分子層；囊泡中央和各層之間被水相隔開(kāi)，雙分子層厚度約為４納米。后來(lái)，將這種含有類(lèi)似生物膜構(gòu)造的雙分子小囊稱(chēng)為脂質(zhì)體。此兩位學(xué)者曾獲得過(guò)諾貝爾獎(jiǎng)提名。某些磷脂分散在過(guò)量的水中形成了脂質(zhì)體，該脂分子本身排成雙分子層，在磷脂的重要相變溫度(Tm)以上，瞬間形成泡囊，且泡囊包圍水液，根據(jù)磷脂種類(lèi)及制備時(shí)所用溫度，雙分子層能夠是凝膠或液晶狀態(tài)。在凝膠態(tài)時(shí)磷脂烴鏈?zhǔn)且环N有規(guī)律的構(gòu)造，在液態(tài)時(shí)烴鏈?zhǔn)菬o(wú)規(guī)律的，每一種用來(lái)制備脂質(zhì)體的純磷脂由凝膠狀態(tài)過(guò)渡到液晶狀態(tài)時(shí)均含有特性的相變溫度。這種相變溫度(Tin)是根據(jù)磷脂性質(zhì)而變(見(jiàn)下表)，它可在-20～+90℃磷脂種類(lèi)相變溫度（℃）卵磷脂（卵磷脂膽堿）-15—7腦磷脂酰絲氨酸6—8二棕櫚磷脂41氫化大豆磷脂51脂質(zhì)體的相變行為決定了脂質(zhì)體的通透性、融合、聚集及蛋白結(jié)合能力，全部這些都明顯影響脂質(zhì)體的穩(wěn)定性和它們?cè)谏矬w系中的行為。脂質(zhì)體根據(jù)其脂質(zhì)膜的層數(shù)和腔室的數(shù)量，能夠分為單層脂質(zhì)體，多層脂質(zhì)體和多囊脂質(zhì)體，單層脂質(zhì)體。不同類(lèi)型的脂質(zhì)體其構(gòu)造特點(diǎn)各不相似，見(jiàn)下圖表。1971年，英國(guó)Rymen等人開(kāi)始將脂質(zhì)體用作藥品載體。所謂載體，能夠是一組分子，包蔽于藥品外，通過(guò)滲入或被巨嗜細(xì)胞吞噬后載體被酶類(lèi)分解而釋放藥品，從而發(fā)揮作用。它含有類(lèi)細(xì)胞構(gòu)造，進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)重要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機(jī)體的本身免疫功效，并變化被包封藥品的體內(nèi)分布，使藥品重要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中積蓄，從而提高藥品的治療指數(shù)，減少藥品的治療劑量和減少藥品的毒性。脂質(zhì)體技術(shù)是被喻為“生物導(dǎo)彈”的第四代靶向給藥技術(shù)，也是現(xiàn)在國(guó)際上最熱門(mén)的制藥技術(shù)。至于藥品在脂質(zhì)體中的負(fù)載定位，其取決于所載藥品的性質(zhì)，見(jiàn)下圖。2.脂質(zhì)體制備辦法分類(lèi)及其介紹脂質(zhì)體是由磷脂分子在水相中通過(guò)疏水作用形成的，因此制備脂質(zhì)體所強(qiáng)調(diào)的不是膜組裝，而是如何形成適宜大小、包封率高和穩(wěn)定性高的囊泡。制備的辦法不同，脂質(zhì)體的粒徑可從幾十納米到幾微米，并且構(gòu)造也不盡相似?，F(xiàn)在，制備脂質(zhì)體的辦法較多，慣用的有薄膜法、反相蒸發(fā)法、溶劑注入法和復(fù)乳法等，這些辦法普通稱(chēng)為被動(dòng)載藥法，而pH梯度法，硫酸銨梯度法普通被稱(chēng)為主動(dòng)載藥法。被動(dòng)載藥法脂質(zhì)體慣用制備辦法重要有薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、注入法、超聲波分散等。在制備含藥脂質(zhì)體時(shí)，首先將藥品溶于水相或有機(jī)相中，然后按適宜的辦法制備含藥脂質(zhì)體，該法適于脂溶性強(qiáng)的藥品，所得脂質(zhì)體含有較高包封率。2.1.1此法最初由Bangham等報(bào)道，是最原始但又是迄今為止最基本和應(yīng)用最廣泛的脂質(zhì)體的制備辦法。將磷脂和膽固醇等類(lèi)脂及脂溶性藥品溶于有機(jī)溶劑，然后將此溶液置于一大的圓底燒瓶中，再旋轉(zhuǎn)減壓蒸干，磷脂在燒瓶?jī)?nèi)壁上會(huì)形成一層很薄的膜，然后加入一定量的緩沖溶液，充足振蕩燒瓶使脂質(zhì)膜水化脫落，即可得到脂質(zhì)體。這種辦法對(duì)水溶性藥品可獲得較高的包封率，但是脂質(zhì)體粒徑在～5μm之間，可通過(guò)超聲波儀解決或者通過(guò)擠壓使脂質(zhì)體通過(guò)固定粒徑的聚碳酸酯膜，在一定程度上減少脂質(zhì)體的粒徑。2.1.2將磷脂、膽固醇和待包封藥品一起溶解于有機(jī)溶劑中，混合均勻后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，將剩余的溶液再經(jīng)超聲波解決，分離即得脂質(zhì)體。超聲波法可分為兩種“水浴超聲波法和探針超聲波法”，本法是制備小脂質(zhì)體的慣用辦法，但是超聲波易引發(fā)藥品的降解問(wèn)題。2.1.3脂質(zhì)體混懸液在貯存期間易發(fā)生聚集、融合及藥品滲漏，且磷脂易氧化、水解，難以滿足藥品制劑穩(wěn)定性的規(guī)定。1978年Vanleberghe等初次報(bào)道采用冷凍干燥法提高脂質(zhì)體的貯存穩(wěn)定性?，F(xiàn)在，該法已成為較有前途的改善脂質(zhì)體制劑長(zhǎng)久穩(wěn)定性的辦法之一。

脂質(zhì)體冷凍干燥涉及預(yù)凍、初步干燥及二次干燥3個(gè)過(guò)程。凍干脂質(zhì)體可直接作為固體劑型，如噴霧劑使用，也可用水或其它溶劑化重建成脂質(zhì)體混懸液使用，但預(yù)凍、干燥和復(fù)水等過(guò)程均不利于脂質(zhì)體構(gòu)造和功效的穩(wěn)定。如在凍干前加入適宜的凍干保護(hù)劑，采用適宜的工藝，則可大大減輕甚至消除凍干過(guò)程對(duì)脂質(zhì)體的破壞，復(fù)水后脂質(zhì)體的形態(tài)、粒徑及包封率等均無(wú)顯著變化。單糖、二糖、寡聚糖、多糖、多元醇及其它水溶性高分子物質(zhì)都能夠用做脂質(zhì)體凍干保護(hù)劑，其中二糖是研究最多也是最有效的，慣用的有海藻糖、麥芽糖、蔗糖及乳糖。本法適于熱敏型藥品前體脂質(zhì)體的制備，但成本較高。陳建明等以大豆磷脂為膜材，以甘露醇為凍干保護(hù)劑，采用凍干法制備了維生素A前體脂質(zhì)體，復(fù)水化后平均粒徑為μm，包封率%。林中方等采用凍干法制備了鬼臼毒素體脂質(zhì)體，復(fù)水化后平均粒徑為μm，包封率%，但是這種辦法仍然存在著局限性之處，例如脂質(zhì)體復(fù)水化后粒徑分布不夠均勻。2.1.4此法首先制備包封有藥品的脂質(zhì)體，然后冷凍。在快速冷凍過(guò)程中，由于冰晶的形成，使形成的脂質(zhì)體膜破裂，冰晶的片層與破碎的膜同時(shí)存在，此狀態(tài)不穩(wěn)定，在緩慢融化過(guò)程中，暴露出的脂膜互相融合重新形成脂質(zhì)體。何文等分別用反相蒸發(fā)法、乳化法和凍融法制備了甲氧沙林脂質(zhì)體。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，凍融法制備的脂質(zhì)體的包封率最高，但是粒徑最大。重復(fù)凍融能夠提高脂質(zhì)體的包封率，王健松制備了阿奇霉素脂質(zhì)體，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)3次重復(fù)凍融后，阿奇霉素脂質(zhì)體的包封率從%增加到78%，但是當(dāng)凍融次數(shù)增加到4次，包封率變化很小。該制備辦法適于較大量的生產(chǎn)，特別對(duì)不穩(wěn)定的藥品最適合。2.1.5此法第1步將磷脂溶于有機(jī)溶劑，加入待包封藥品的溶液，乳化得到W/O初乳，第2步將初乳加入到10倍體積的水中混合，乳化得到W/O/W乳液，然后在一定溫度下去除有機(jī)溶劑即可得到脂質(zhì)體。Kim用乳化法制得脂質(zhì)體的包封率比較高，但是粒徑較大。Tomoko等通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，第2步乳化過(guò)程和有機(jī)溶劑的去除過(guò)程的溫度對(duì)脂質(zhì)體的粒徑有比較大的影響，較低的溫度有助于減小脂質(zhì)體的粒徑，通過(guò)控制溫度能夠制得粒徑為400nm，包封率達(dá)成90%的脂質(zhì)體。2.1.6將類(lèi)脂質(zhì)和脂溶性藥品溶于有機(jī)溶劑中（油相），然后把油相均速注射到水相（含水溶性藥品）中，攪拌揮盡有機(jī)溶劑，再乳勻或超聲得到脂質(zhì)體。根據(jù)溶劑的不同可分為乙醇注入法和乙醚注入法。

乙醇注入法避免了使用有機(jī)溶劑，丁麗燕用乙醇法制備了司帕沙星脂質(zhì)體，通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)慢速注入可制得含有較高包封率的脂質(zhì)體，其包封率為47%。

乙醚注入法制備的脂質(zhì)體大多為單室脂質(zhì)體，粒徑絕大多數(shù)在2μm下列，操作過(guò)程中溫度比較低（40℃），因此，該辦法合用于在乙醚中有較好溶解度和對(duì)熱不穩(wěn)定藥品，同時(shí)通過(guò)調(diào)節(jié)乙醚中不同磷脂的濃度，能夠得到不同粒徑且粒徑分布均勻的脂質(zhì)體混懸液。2.1.7最初由Szoka提出，普通的制法是將磷脂等膜材溶于有機(jī)溶劑中，短時(shí)超聲振蕩，直至形成穩(wěn)定的W/O乳液，然后減壓蒸發(fā)除掉有機(jī)溶劑，達(dá)成膠態(tài)后，滴加緩沖液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使器壁上的凝膠脫落，然后在減壓下繼續(xù)蒸發(fā)，制得水性混懸液，除去未包入的藥品，即得大單層脂質(zhì)體脂質(zhì)體。此法可包裹較大的水容積，普通合用于包封水溶性藥品、大分子生物活性物質(zhì)等。2.1.8傳統(tǒng)的脂質(zhì)體制備辦法，必須要使用氯仿、乙醚、甲醇等有機(jī)溶劑，這對(duì)環(huán)境和人體都是有害的。超臨界二氧化碳是一種無(wú)毒、惰性且對(duì)環(huán)境無(wú)害的反映介質(zhì)。嚴(yán)賓等用超臨界法制備了頭孢唑林鈉脂質(zhì)體，將一定量的卵磷脂溶解于乙醇中配得卵磷酯乙醇溶液，與頭孢唑啉鈉溶液一起放入加入高壓釜中，將高壓釜放入恒溫水浴中，通入CO2。在其超臨界態(tài)下孵化30min，制備脂質(zhì)體。采用超臨界CO2法制備的包封率高、粒徑小，穩(wěn)定性增強(qiáng)。主動(dòng)載藥對(duì)于兩親性藥品，如某些弱酸弱堿，其油水分派系數(shù)介質(zhì)pH和離子強(qiáng)度的影響較大，用被動(dòng)載藥法制得的脂質(zhì)體包封率低。主動(dòng)載藥是運(yùn)用兩親性的藥品，能以電中性的形式跨越脂質(zhì)雙層，但其電離形式卻不能跨越的原理來(lái)實(shí)現(xiàn)的。通過(guò)形成脂質(zhì)體膜內(nèi)、外水相的pH梯度差別，使脂質(zhì)體外水相的藥品自發(fā)地向脂質(zhì)體內(nèi)部聚集。此法普通用脂質(zhì)體包封酸性緩沖鹽，然后用堿把外水相調(diào)成中性，建立脂質(zhì)體內(nèi)外的pH梯度。藥品在外水相的pH環(huán)境下以親脂性的中性形式存在，能夠透過(guò)脂質(zhì)體雙層膜。而在脂質(zhì)體內(nèi)水相中藥品被質(zhì)子化轉(zhuǎn)為離子形式，不能再通過(guò)脂質(zhì)體雙層回到外水相，因而被包封在脂質(zhì)體中。主動(dòng)載藥法廣義上就是指pH梯度法。人們把其細(xì)分為：（1）pH梯度法；（2）硫酸銨梯度法；（3）醋酸鈣梯度法。其中硫酸銨梯度法和醋酸鈣梯度法只是pH梯度法的兩種特殊形式。2.2.1pHpH梯度法通過(guò)調(diào)節(jié)脂質(zhì)體內(nèi)外水相的pH值，形成一定的pH梯度差，弱酸或弱堿藥品則順著pH梯度，以分子形式跨越磷脂膜而使以離子形式被包封在內(nèi)水相中。趙妍等用以pH梯度法制備硫酸長(zhǎng)春新堿脂質(zhì)體，其包封率不不大于85%，而被動(dòng)載藥法制備的硫酸長(zhǎng)春新堿脂質(zhì)體的包封率最高為%。Jia等用pH梯度法內(nèi)水相pH%外水相制備了卡苯達(dá)唑脂質(zhì)體，包封率高于95%。杜松等用pH梯度法制備鹽酸去氫駱駝蓬堿脂質(zhì)體，包封率不不大于80%，研究表明，即使制得的脂質(zhì)體沒(méi)有加強(qiáng)藥品的抗癌活性，但是大大減少了其毒副作用?？缒H梯度是影響包封率的最重要因素，普通pH梯度越大，載入脂質(zhì)體內(nèi)的藥品越多，包封率也越高。制備伊立替康脂質(zhì)體時(shí)，當(dāng)pH梯度≥時(shí)包封率達(dá)97%以上，當(dāng)pH梯度＜2時(shí)，包封率不到5%；Mamyer等在研究中發(fā)現(xiàn)通過(guò)跨膜pH梯度法制備多柔比星脂質(zhì)體，pH梯度達(dá)屆時(shí)包封率達(dá)98%，減少內(nèi)水相緩沖液的pH可增大pH梯度，但會(huì)加劇磷脂的水解，減少脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。另外，藥品本身性質(zhì)如油水分派系數(shù)、膜滲入性等亦可影響包封率。Quan等用pH梯度法制備多巴胺脂質(zhì)體，由于多巴胺親水性較強(qiáng)，無(wú)法直接克服能量壁壘穿過(guò)脂質(zhì)雙分子層進(jìn)入內(nèi)水相，但與拉沙洛西（lasalocid)結(jié)合形成復(fù)合物可暴露出親脂性表面，即可穿過(guò)脂質(zhì)膜進(jìn)入脂質(zhì)體，包封率提高到85%。氧化苦參堿水溶性較大，脂溶性較弱，因此采用pH梯度法制備脂質(zhì)體包封率只有50%。2.2.2硫酸銨梯度法通過(guò)游離氨擴(kuò)散到脂質(zhì)體外，間接形成pH梯度，使藥品積聚到脂質(zhì)體內(nèi)。其辦法為先將硫酸銨包與脂質(zhì)體內(nèi)水相，然后通過(guò)透析、凝膠色譜或超濾的辦法除去脂質(zhì)體外水相的硫酸銨。由于離子對(duì)雙分子層滲入系數(shù)的不同，氨分子滲入系數(shù)（0.13cm/s）較高，能很快擴(kuò)散到外水相中；H+的滲入系數(shù)遠(yuǎn)不大于氨分子，因此會(huì)使脂質(zhì)體內(nèi)水相呈酸性，形成pH梯度，梯度大小由［NH4+］外水相/［NH4+］內(nèi)水相比較決定，這樣使藥品逆硫酸銨梯度載入脂質(zhì)體。藥品與SO42-形成的硫酸鹽，對(duì)雙分子層有很低滲入系數(shù)，因而使藥品含有很高的包封率。劉陶世等采用硫酸銨梯度法制備馬錢(qián)子堿脂質(zhì)體，mol/L硫酸銨水溶液的用量為大豆卵磷脂的倍，制得的馬錢(qián)子堿脂質(zhì)體包封率在90%以上。米托恩醌以注入法或反相蒸發(fā)法制備的脂質(zhì)體，包封率較低，但是其為弱堿性蒽醌類(lèi)藥品，易與硫酸根離子形成溶解性更小的硫酸鹽，黃園用硫酸銨梯度法制備米托蒽醌脂質(zhì)體的平均粒徑均在60nm左右，包封率為%。Pan等用不同的主動(dòng)載藥法制備了5種多銨硼酸鹽脂質(zhì)體，得到較高的包封率僅為6%和15%。研究表明，用硫酸銨梯度法制備的脂質(zhì)體包封率要高于枸櫞酸鹽pH梯度法制得的脂質(zhì)體。Wong等用此法制備了環(huán)丙沙星單室脂質(zhì)體，包封率為90%。相比較于pH梯度法，硫酸銨梯度法不需要變化外水相的pH值，控制梯度也易實(shí)現(xiàn)，整個(gè)過(guò)程無(wú)需緩沖液或pH滴定，內(nèi)水相只有pH梯度法更有助于脂質(zhì)體的穩(wěn)定。2.2.3醋酸鈣梯度法通過(guò)醋酸鈣的跨膜運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的醋酸鈣濃度梯度（內(nèi)部的濃度高于外部），使得大量質(zhì)子從脂質(zhì)體內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)到外部產(chǎn)生pH梯度。醋酸的滲入?yún)?shù)（×10-4cm·s-1)比Ca2+（×10-11cm·s-1）大7個(gè)數(shù)量級(jí)，因此極少穿越雙分子膜留在脂質(zhì)體內(nèi)部，醋酸分子則參加了質(zhì)子轉(zhuǎn)運(yùn)。醋酸鈣跨膜運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的濃度梯度（內(nèi)部的濃度高于外部）造成大量質(zhì)子從脂質(zhì)體的內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)到外部產(chǎn)生pH梯度，而pH的不平衡為包載和聚集弱堿藥品提供了高效驅(qū)動(dòng)力。因此，在這基礎(chǔ)上應(yīng)用醋酸鈣梯度法把弱酸藥品萘啶酸包載入預(yù)制備好的空白脂質(zhì)體中，包封率約99%，在4℃下寄存10個(gè)月均穩(wěn)定未見(jiàn)泄露。Hwang等也用此法制備了雙氯芬酸鈉脂質(zhì)體，包封率約100%，而傳統(tǒng)的逆相蒸發(fā)法只有1%～8%。不同的制備辦法與脂質(zhì)體的構(gòu)造關(guān)系上述制備辦法的分類(lèi)是按照載藥方式的不同來(lái)分的，倘若將這些制備辦法進(jìn)行一種總結(jié)與歸納，不難得出，這些辦法普通涉及下列環(huán)節(jié)：首先形成脂質(zhì)薄膜，另首先，加入需要載入的藥品，使脂質(zhì)分散在其中，從而形成脂質(zhì)體。多個(gè)辦法的區(qū)別在于脂質(zhì)分散與水相介質(zhì)的辦法不同。多個(gè)辦法的分散類(lèi)型能夠歸納為機(jī)械分散法（如薄膜分散法、手搖法、前體脂質(zhì)體法、冷凍干燥法等），溶劑分散法（如逆向蒸發(fā)法、注入法、復(fù)乳法等），物理水化法（如超聲法、薄膜振蕩分散法、薄膜勻化法、擠壓法、干燥重建脂質(zhì)體和微囊化法、凍結(jié)融解法等）及其它辦法（如梯度法、表面活性法等）。采用不同的制備辦法得出來(lái)的脂質(zhì)體其構(gòu)造與大小各不相似，普通來(lái)說(shuō)，采用機(jī)械分散法得到的脂質(zhì)體大多是多層脂質(zhì)體，采用逆向蒸發(fā)法得到的是大單層脂質(zhì)體，乙醇注入法中小單層脂質(zhì)體比例較高，而乙醚注入法中大單層脂質(zhì)體較多，復(fù)乳法得到的脂質(zhì)體往往是多囊脂質(zhì)體。3.脂質(zhì)體制備辦法的選擇脂質(zhì)體制備辦法的選擇原則選用何種脂質(zhì)體制備辦法取決于所要包裹的藥品的性質(zhì)，其中最重要的性質(zhì)就是藥品的油水分派系數(shù)。油水分派系數(shù)是指平衡狀態(tài)時(shí)，藥品在油相和水相的分派之比。普通使用藥品在辛醇—水兩相的分派系數(shù)P來(lái)表達(dá)。根據(jù)P值的大小將藥品分成三類(lèi)：LgP＞脂溶性藥品LgP＜水溶性藥品＜LgP＜兩性藥品對(duì)于不同類(lèi)藥品脂質(zhì)體的制備辦法選擇原則以下圖：蛋白類(lèi)藥品脂質(zhì)體蛋白類(lèi)藥品脂質(zhì)體—表面活性劑解決法和鈣融正當(dāng)lgP>的藥品靶向脂質(zhì)體—機(jī)械分散法快速轉(zhuǎn)運(yùn)乙醇注入法pH誘導(dǎo)囊化法物理辦法減小粒徑lgP<的藥品制備大粒徑脂質(zhì)體制備小粒徑脂質(zhì)體lgP在－～的藥品主動(dòng)載藥法將藥品制成鹽(lgP<－或酯化(lgP>再包封脂質(zhì)體凍融法（適宜包裹水溶性蛋白類(lèi)）逆向蒸發(fā)法（大單室）復(fù)乳法(多囊)乙醚注入法（大單室）微囊化法冷凍干燥法干燥重建脂質(zhì)體脂質(zhì)體生產(chǎn)制備中的實(shí)際選擇許多脂質(zhì)體制備技術(shù)是以實(shí)驗(yàn)室規(guī)模進(jìn)行的，但這些小規(guī)模的制備技術(shù)不能直接用于大規(guī)模制備生產(chǎn)中，由于生產(chǎn)規(guī)模的變化會(huì)影響其分散性，變化制備分散體系的特性應(yīng)保持在可接受的一定范疇程度內(nèi)，即包封藥品的脂質(zhì)體在體內(nèi)處在無(wú)顯著變化為準(zhǔn)則。另首先，在脂質(zhì)體大規(guī)模生產(chǎn)制備過(guò)程中還得考慮實(shí)際的無(wú)菌、無(wú)熱源，粒徑的控制、穩(wěn)定性以及工藝便于放大等等實(shí)際問(wèn)題。從查閱的國(guó)內(nèi)外脂質(zhì)體制備文獻(xiàn)上來(lái)看，現(xiàn)在對(duì)于大規(guī)模生產(chǎn)脂質(zhì)體辦法上大多是根據(jù)設(shè)施設(shè)備條件結(jié)合兩三中脂質(zhì)體制備辦法來(lái)實(shí)現(xiàn)脂質(zhì)體的生產(chǎn)制備，如SOD的生產(chǎn)工藝就是結(jié)合了薄膜法和超聲法，阿霉素納米脂質(zhì)體的制備采用了薄膜分散法和擠壓法相結(jié)合。除了運(yùn)用常規(guī)脂質(zhì)體制備辦法相結(jié)合外，在脂質(zhì)體制備生產(chǎn)中還引入了其它前沿的生物學(xué)及化學(xué)上的技術(shù)。如Aphios脂質(zhì)體公司采用超臨界流體技術(shù)制備納米級(jí)單分散的脂質(zhì)體。該技術(shù)和常規(guī)的醇注入技術(shù)有類(lèi)似之處，所不同的是溶解磷脂和膽固醇時(shí)用的是超臨界流體。采用該技術(shù)，Aphios已經(jīng)成功的將紫杉醇（paclitaxel）,喜樹(shù)堿（camptothecin）等難溶性藥品制成了脂質(zhì)體制劑。BernaBiotech公司運(yùn)用Virosomes技術(shù)已經(jīng)開(kāi)發(fā)了2個(gè)產(chǎn)品，一種是流感疫苗（Inflexal.V），一種是甲肝疫苗（Epaxal.）。Virosomes與傳統(tǒng)脂質(zhì)體的區(qū)別重要在于，Virosomes的磷脂雙分子層上嵌入了病毒的膜蛋白。這些蛋白能夠確保Virosomes和免疫系統(tǒng)的細(xì)胞發(fā)生融合，進(jìn)而將其所包被的特異性抗原遞呈給免疫細(xì)胞。Virosomes不僅能夠模擬天然抗原的遞呈方式，還能夠同時(shí)引發(fā)體液免疫和細(xì)胞免疫，進(jìn)而增強(qiáng)疫苗的有效性。Celsion公司采用微波熱療技術(shù)相結(jié)合，開(kāi)發(fā)阿霉素?zé)崦糁|(zhì)體ThermoDox.，現(xiàn)已進(jìn)入1期臨床。脂質(zhì)體制備中包封率的影響因素及其提高方法影響脂質(zhì)體包封率的因素重要有脂質(zhì)體制備辦法、脂質(zhì)體構(gòu)造類(lèi)型、類(lèi)脂膜的構(gòu)成、藥品的性質(zhì)和濃度、溶劑的構(gòu)成等幾大因素。對(duì)于提高包封率除了對(duì)以上因素進(jìn)行優(yōu)化之外，還能夠針對(duì)全部包載的藥品的類(lèi)型采用下圖所示方略來(lái)提高其包封率。磷脂磷脂膽固醇抗氧劑溶于有機(jī)溶劑除去有機(jī)溶劑脂質(zhì)體干膜酸性藥品溶于堿性緩沖液水化堿性藥品溶于酸性緩沖液水化真空凍干堿性緩沖液復(fù)溶酸性緩沖液復(fù)溶.生物研究中心現(xiàn)有脂質(zhì)體制備設(shè)備能夠采用的制備辦法及見(jiàn)解生物研究中心脂質(zhì)體制備設(shè)備能夠采用的的制備辦法有注入法、復(fù)乳法、擠壓法及薄膜分散法（涉及逆向蒸發(fā)法），其中，以注入法和復(fù)乳法最利于現(xiàn)有工藝設(shè)施的生產(chǎn)放大。只但是，中心現(xiàn)有設(shè)備設(shè)施中，脂質(zhì)體制備工藝流程中人為操作的環(huán)節(jié)過(guò)多，不利于工藝生產(chǎn)中的再現(xiàn)性，也不利于無(wú)菌的控制。為了能更加好地闡明此問(wèn)題，先來(lái)看下陜西力邦醫(yī)藥科技有限公司在脂質(zhì)體生產(chǎn)中所設(shè)計(jì)和采用的自動(dòng)化脂質(zhì)體制備裝置，通過(guò)裝置圖及其使用流程闡明，不難看出，該裝置在脂質(zhì)體制備過(guò)程中使用了分散法和擠壓法相結(jié)合。運(yùn)用高壓泵提供穩(wěn)定的壓力，整個(gè)過(guò)程中避免了人員的干擾。參考文獻(xiàn)

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