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DB43/TXXX—2019規(guī)模豬場(chǎng)非洲豬瘟監(jiān)測(cè)檢測(cè)樣品采集及檢測(cè)技術(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《高致病性動(dòng)物病原微生物菌(毒)種運(yùn)輸包裝規(guī)范》3采樣區(qū)域根據(jù)規(guī)模豬場(chǎng)布局,采樣區(qū)域劃分為辦公區(qū)/生活區(qū)、生產(chǎn)區(qū)、其他區(qū)域(主要包括場(chǎng)外洗消中心、場(chǎng)外專(zhuān)用通道地面、場(chǎng)外公共道路地面、場(chǎng)外的無(wú)害化處理區(qū)域、水源及管線等)4采樣對(duì)象采樣對(duì)象為人員、車(chē)輛、飼料、物資、場(chǎng)內(nèi)環(huán)境等5采樣工具準(zhǔn)備棉簽、醫(yī)用紗布、自封袋、一次性注射器、真空采血管、防護(hù)服、手套、裝生理鹽水離心管或離心管、記號(hào)筆、記錄紙等,所有工具均須做無(wú)菌處理。6采集位置與數(shù)量樣品采集的位置與數(shù)量可參見(jiàn)附表A進(jìn)行。7樣品采集7.1環(huán)境樣品7.1.1物體表面用無(wú)菌棉拭子在物體表面涂抹轉(zhuǎn)動(dòng)3-5次后,放入無(wú)菌裝有0.5ml-1ml生理鹽水離心管中。7.1.2液體用無(wú)菌吸管吸取被檢液體1ml,放入滅菌離心管中。7.1.3固體采集2-5g大小樣品裝入滅菌離心管中。7.2生豬樣品7.2.1口、鼻拭子用無(wú)菌棉拭子插入豬口腔、鼻腔,充分濕潤(rùn)后放入無(wú)菌裝有0.5ml-1ml生理鹽水離心管中。7.2.2血液用一次性采血管或注射器,于頸靜脈、前腔靜脈或耳靜脈抽取。7.2.3組織樣品不推薦剖檢采樣,如確需采樣,須在保障生物安全條件下進(jìn)行,無(wú)菌采取脾臟、淋巴、扁桃體等優(yōu)選組織樣,放入封口袋。7.3軟蜱等媒介采用手動(dòng)或工具誘捕后,收集管中。所有樣品在采集時(shí)做好標(biāo)記和記錄。8樣品包裝采集好的樣品應(yīng)仔細(xì)包裝,做好標(biāo)記,一般采取泡沫箱中放入足量冰袋等冷卻材料防止運(yùn)輸中樣品變質(zhì),影響檢測(cè)結(jié)果。9樣品運(yùn)輸樣品運(yùn)輸嚴(yán)格遵守農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《高致病性動(dòng)物病原微生物菌(毒)種運(yùn)輸包裝規(guī)范》的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。10廢棄物處理采樣結(jié)束后,做好尸體、場(chǎng)地、物品、個(gè)人防護(hù)用品等消毒和無(wú)害化處理。11病原檢測(cè)樣品可送具有檢測(cè)資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、PCR等方法進(jìn)行檢測(cè),也可購(gòu)買(mǎi)商品化非洲豬瘟檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)時(shí),可以合并樣品檢測(cè),但合并樣品不建議超過(guò)5合1。12檔案記錄(采樣登記表)監(jiān)測(cè)檢測(cè)記錄表參見(jiàn)附表B。附表A(資料性附錄)樣品采集位置與數(shù)量參考表采樣區(qū)域采樣具體位置采樣點(diǎn)數(shù)量(份)采樣區(qū)域采樣具體位置采樣點(diǎn)數(shù)量(份)辦公區(qū)門(mén)衛(wèi)室10-15生產(chǎn)區(qū)人員進(jìn)出口區(qū)域10-15更衣室10-15物資進(jìn)出口區(qū)域10-15淋浴室10-15倉(cāng)庫(kù)區(qū)域10-15物料間10-15生產(chǎn)區(qū)公共地面10-15車(chē)輛進(jìn)出口區(qū)域5-10中轉(zhuǎn)豬車(chē)輛5-10人員進(jìn)出口區(qū)域10-15生產(chǎn)區(qū)車(chē)輛5-10物資進(jìn)出口區(qū)域10-15更衣室10-15接待室區(qū)域10-15淋浴間10-15飼料進(jìn)出口區(qū)域10-15隔離舍10-15食堂倉(cāng)庫(kù)和操作區(qū)域20-30種公豬站/舍15-30隔離區(qū)公共地面10-15配種妊娠舍10-15隔離區(qū)車(chē)輛10-15分娩舍10-15隔離區(qū)宿舍5-10保育舍10-15門(mén)及附屬物5-10育肥舍10-15屋頂5-10門(mén)及附屬物5-10裸露的土壤5-10窗及附屬物5-10各種溝渠5-10屋頂5-10水源及管線10-20裸露的土壤5-10生活區(qū)人員進(jìn)出口區(qū)域10-15舍內(nèi)設(shè)備設(shè)施正反面5-10物資進(jìn)出口區(qū)域10-15料塔5-10倉(cāng)庫(kù)區(qū)域10-15舍外料管線5-10生活區(qū)公共地面10-15選豬間5-10生活區(qū)車(chē)輛10-15出豬臺(tái)10-15員工宿舍5-10水源及管線5-10門(mén)及附屬物5-10糞溝及其他溝渠10-20窗及附屬物5-10其他區(qū)域洗消中心10-15屋頂5-10場(chǎng)外專(zhuān)用通道地面10-15水源及管線5-10場(chǎng)外公共通道地面10-15糞溝及其他溝渠10-20無(wú)害化處理區(qū)域10-15裸露的土壤5-10水源及管線10-15附表B(資料性附錄)規(guī)模豬場(chǎng)非洲豬瘟監(jiān)測(cè)檢測(cè)記錄表采樣地點(diǎn)省市縣(區(qū)、市)鎮(zhèn)(鄉(xiāng))單位及聯(lián)系人電話樣品記錄序號(hào)樣品名稱(chēng)樣品編號(hào)備注檢測(cè)結(jié)果序號(hào)樣品編號(hào)檢測(cè)結(jié)果備注采樣單位(蓋章):收樣人
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