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文檔簡介
免疫組化抗原修復簡介為何要進行抗原修復抗原修復的種類抗原修復的原理抗原修復的操作抗原操作的應用為何要進行抗原修復
常規(guī)的石蠟切片的組織要經(jīng)過福爾馬林固定和石蠟包埋,雖然上述過程能良好的保存標本在光鏡下的形態(tài),但是會不同程度地破壞組織的抗原,降低組織的抗原與抗體的免疫反響率。抗原修復的種類
熱修復〔HIER〕蛋白酶修復〔PIER〕雙修復〔特殊抗原和雙染〕不修復抗原修復的原理抗原修復目前常用的有熱修復〔HIER〕,蛋白酶修復〔PIER〕和不修復。不同的修復的原理不同。熱修復的原理蛋白酶修復原理熱修復(HIER)的原理“石說〞:固定通過改變蛋白結(jié)構(gòu)降低免疫反響性,AR逆轉(zhuǎn)大局部福爾馬林導致的蛋白修飾,冷卻后,會重建“近天然〞的結(jié)構(gòu),免疫反響的恢復是通過蛋白表位的復性。熱修復的特點易于施行易于標準化蛋白酶修復(PIER)原理蛋白酶的消化通過破壞福爾馬林造成的蛋白交聯(lián),實現(xiàn)抗原的修復。該方法的缺點是:破壞組織的完整性,會破壞抗原,而且酶的濃度,反響時間,反響溫度造成很大的差異,標準化難度較大??乖迯偷牟僮鳠嵝迯汀睭IER〕蛋白酶修復〔PIER〕雙重修復熱修復〔HIER〕高壓修復煮沸法修復微波修復水浴加熱……高壓修復切片先脫蠟水化將修復液注入高壓鍋,將液體煮沸放入切片〔甩開水分〕蓋上蓋子,等噴氣,計時1.5~2分鐘〔800W~1000W〕冷卻,沖洗玻片上的修復液1.5-2min10min>高壓鍋直接修復高壓鍋隔水間接修復煮沸法修復將修復液注入不銹鋼鍋中煮沸后,參加切片〔甩干水分〕用保溫檔,處理20分鐘左右冷卻,沖洗玻片上的修復液蛋白酶修復〔PIER〕
切片脫蠟水化切片上滴加酶,放入孵育盒,處理一定時間時間到,取出切片,沖洗。雙重修復
脫蠟水化后,對切片進行胰酶消化然后,對切片進行熱修復抗原操作的應用
時間溫度冷卻細節(jié)MOC31〔上皮糖蛋白-2,EGP-2)EGFR(CLONE:EGFR.113)HBcAg(兔多抗)C/HNO結(jié)論正確的修復對抗體的表達十分重要抗原修復是一個個性化的
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