《N-乙酰神經(jīng)氨酸》

2QB/TXXXXX—XXXXN-乙酰神經(jīng)氨酸本文件規(guī)定了N-乙酰神經(jīng)氨酸的原輔料、感官、理化、污染物限量、微生物限量和真菌毒素限量等要求，描述了相應(yīng)的試驗(yàn)方法，規(guī)定了檢驗(yàn)規(guī)則和標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯存的內(nèi)容，并給出了分子式、相對(duì)分子質(zhì)量及結(jié)構(gòu)式的信息。本文件適用于發(fā)酵法生產(chǎn)的N-乙酰神經(jīng)氨酸的生產(chǎn)、檢驗(yàn)和銷(xiāo)售。2規(guī)范性引用文件下列文件的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期的對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T601化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備GB/T602化學(xué)試劑雜質(zhì)測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制品的制備GB4789.2食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定GB4789.3—2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)GB4789.4食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)GB4789.10食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)GB4789.15食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母計(jì)數(shù)GB5009.3—2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測(cè)定GB5009.4食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測(cè)定GB5009.11食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無(wú)機(jī)砷的測(cè)定GB5009.12食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測(cè)定GB5009.17食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定GB5009.22食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中黃曲霉毒素B族和G族的測(cè)定GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1N-乙酰神經(jīng)氨酸N-acetylneuraminicacid；N-acetyl-D-neuraminicacid；NANA以葡萄糖和玉米漿等為主要原料，經(jīng)微生物發(fā)酵、過(guò)濾、滅菌、水解、提純等工藝制成的一種酸性氨基糖。4分子式、相對(duì)分子質(zhì)量及結(jié)構(gòu)式3QB/TXXXXX—XXXX4.1分子式C11H19NO94.2相對(duì)分子質(zhì)量309.27（按2021年國(guó)際相對(duì)原子質(zhì)量表）。4.3結(jié)構(gòu)式5要求5.1原輔料要求生產(chǎn)菌種符合國(guó)家許可公告，發(fā)酵用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和提取純化用的其他原輔料符合國(guó)家相關(guān)規(guī)定。5.2感官要求應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1感官要求項(xiàng)目色澤狀態(tài)氣味雜質(zhì)5.3理化指標(biāo)應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2理化指標(biāo)≥≤≤5.4污染物限量應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3污染物限量單位：毫克每千克項(xiàng)目≤≤≤5.5微生物限量4QB/TXXXXX—XXXX應(yīng)符合表4的規(guī)定。表4微生物限量項(xiàng)目≤≤≤≤5.6真菌毒素限量應(yīng)符合表5的規(guī)定。表5真菌毒素限量單位：微克每千克項(xiàng)目≤56試驗(yàn)方法6.1一般要求本方法中所用的水，在未注明其他要求時(shí)，應(yīng)符合GB/T6682中水的規(guī)格，所用試劑，在未注明其他規(guī)格時(shí)，均指分析純。分析中所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、雜質(zhì)測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，在沒(méi)有注明其他要求時(shí)，均按GB/T601、GB/T602和GB/T603的規(guī)定制備。6.2感官要求取適量樣品，置于清潔、干燥的白瓷盤(pán)中，在自然光線(xiàn)下，觀察其色澤和狀態(tài)，并嗅其氣味。6.3N-乙酰神經(jīng)氨酸含量（以干基計(jì)）6.3.1試劑及材料6.3.1.1硫酸：色譜純。6.3.1.2N-乙酰神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)品（C11H19NO9，CAS號(hào)：131-48-6）：純度不小于98%。6.3.2溶液配制6.3.2.1流動(dòng)相：量取硫酸0.15mL于燒杯中，緩緩注入約800mL水，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，以水定容并混勻，配制成流動(dòng)相。6.3.2.2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（10.0mg/mL）：稱(chēng)取適量的N-乙酰神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)品（應(yīng)按實(shí)際純度折算，精確至0.1mg），加流動(dòng)相配制成10.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。4℃條件下避光保存，保存期1個(gè)月。6.3.2.3標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別移取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL和1.0mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，置于10mL容量瓶中，加流動(dòng)相定容并搖勻，使其濃度分別為0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL和1.0mg/mL。6.3.3儀器及設(shè)備6.3.3.1高效液相色譜儀：配有柱恒溫系統(tǒng)。6.3.3.2流動(dòng)相真空抽濾脫氣裝置及0.22μm或0.45μm微孔濾膜。6.3.3.3電子天平：感量0.1mg。5QB/TXXXXX—XXXX6.3.3.4移液器。6.3.4參考色譜條件16.3.4.1檢測(cè)器：紫外光檢測(cè)器。6.3.4.2色譜柱：HPX-87H陽(yáng)離子交換色譜柱（300mm×7.8mm，粒徑9μm）或者具有同等性能的其他類(lèi)型色譜柱。6.3.4.3柱溫：60℃。6.3.4.4進(jìn)樣量：10μL。6.3.4.5流速：0.5mL/min。6.3.4.6檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm。6.3.5參考色譜條件26.3.5.1檢測(cè)器：紫外光檢測(cè)器。6.3.5.2色譜柱：AQ-C18色譜柱（250mm×4.6mm，粒徑5μm）或者具有同等性能的其他類(lèi)型色譜柱。6.3.5.3柱溫：30℃。6.3.5.4進(jìn)樣量：10μL。6.3.5.5流速：1.0mL/min。6.3.5.6檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm。6.3.6分析步驟6.3.6.1標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別進(jìn)樣后，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。6.3.6.2樣品處理稱(chēng)取樣品25.0mg（精確至0.1mg），加入50mL容量瓶中并用流動(dòng)相定容至刻度，搖勻，用0.22μm或0.45μm微孔膜過(guò)濾，濾液備用。6.3.6.3樣品測(cè)定將待測(cè)樣液進(jìn)樣后，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間，對(duì)待測(cè)液中N-乙酰神經(jīng)氨酸進(jìn)行定性，根據(jù)樣品的峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算N-乙酰神經(jīng)氨酸含量。N-乙酰神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)品及樣品的參考色譜圖見(jiàn)附錄A。6.3.7結(jié)果計(jì)算樣品中N-乙酰神經(jīng)氨酸含量（以干基計(jì)）按式（1）計(jì)算：-3··············································（1）-3-2式中：X——樣品溶液中N-乙酰神經(jīng)氨酸的含量，單位為克每百克（g/100g）；c——由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查得樣品溶液中N-乙酰神經(jīng)氨酸的濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；V——樣品溶液定容體積，單位為毫升（mL）；10-3——毫克與克的換算系數(shù)；6QB/TXXXXX—XXXXm——樣品質(zhì)量，單位為毫克（mg）；w——樣品中水分含量，6.5中實(shí)際測(cè)量值，單位為克每百克（g/100g）；10-2——克與百克的換算系數(shù)。計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后一位。6.3.8精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不應(yīng)超過(guò)其算術(shù)平均值的1%。6.4pH6.4.1儀器酸度計(jì)：精度0.01，備有玻璃電極和甘汞電極（或復(fù)合電極）。6.4.2分析步驟按儀器使用說(shuō)明書(shū)調(diào)試和校正酸度計(jì)。用新煮沸冷卻的中性蒸餾水配制2%（w/w）的N-乙酰神經(jīng)氨酸液待測(cè)液。然后，用水沖洗電極探頭，用濾紙輕輕吸干，將電極插入待測(cè)樣液中，調(diào)節(jié)溫度調(diào)節(jié)器，使儀器指示溫度與溶液溫度相同，穩(wěn)定后讀數(shù)。6.4.3結(jié)果表示所得結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后一位。6.4.4精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不應(yīng)超過(guò)0.1。6.5水分按GB5009.3—2016中“第二法減壓干燥法”測(cè)定。6.6總灰分按GB5009.4中規(guī)定的方法測(cè)定。6.7鉛（Pb）按GB5009.12中規(guī)定的方法測(cè)定。6.8總砷（以As計(jì)）按GB5009.11中規(guī)定的方法測(cè)定。6.9總汞（以Hg計(jì)）按GB5009.17中規(guī)定的方法測(cè)定。6.10菌落總數(shù)按GB4789.2中規(guī)定的方法測(cè)定。6.11霉菌和酵母按GB4789.15中規(guī)定的方法測(cè)定。6.12大腸菌群按GB4789.3—2016中“MPN計(jì)數(shù)法”測(cè)定。6.13金黃色葡萄球菌7QB/TXXXXX—XXXX按GB4789.10中規(guī)定的方法測(cè)定。6.14沙門(mén)氏菌按GB4789.4中規(guī)定的方法測(cè)定。6.15黃曲霉毒素B1按GB5009.22中規(guī)定的方法測(cè)定。7檢驗(yàn)規(guī)則7.1組批同原料、同配方、同工藝、同一生產(chǎn)線(xiàn)連續(xù)生產(chǎn)的，質(zhì)量均一的產(chǎn)品為一批。7.2抽樣每批產(chǎn)品的檢驗(yàn)按表6抽取樣本。表6產(chǎn)品抽樣表2141>500617.2.1取樣方法取樣時(shí)，用清潔、干燥的取樣工具插入包裝袋的三分之二。每袋取樣100g，將抽取的樣品迅速混勻，用四分法縮分，然后分裝于兩個(gè)潔凈、干燥的取樣袋中，密封。貼上標(biāo)簽，一份用于檢測(cè)，一份留存?zhèn)洳椤?.3出廠檢驗(yàn)7.3.1產(chǎn)品出廠前，應(yīng)按本文件規(guī)定逐批進(jìn)行檢驗(yàn)。檢驗(yàn)符合本文件要求后方可出廠。7.3.2出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目為感官、N-乙酰神經(jīng)氨酸含量、pH、水分、總灰分。7.4型式檢驗(yàn)型式檢驗(yàn)項(xiàng)目為本文件要求中規(guī)定的全部項(xiàng)目，一般情況下，型式檢驗(yàn)每半年進(jìn)行一次。有下列情況之一時(shí)，亦應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)：a)原輔材料有較大變化時(shí)；b)更改關(guān)鍵工藝或設(shè)備時(shí)；c)新試制的產(chǎn)品或正常生產(chǎn)的產(chǎn)品停產(chǎn)三個(gè)月以后，重新恢復(fù)生產(chǎn)時(shí)；d)出廠檢驗(yàn)與上次型式檢驗(yàn)結(jié)果有較大差異時(shí)；e)國(guó)家監(jiān)督機(jī)構(gòu)按有關(guān)規(guī)定需要抽檢時(shí)。7.5判定規(guī)則7.5.1抽取樣品經(jīng)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)項(xiàng)目全部符合要求，判定該批產(chǎn)品符合本文件。7.5.2檢驗(yàn)項(xiàng)目如有一項(xiàng)至兩項(xiàng)不符合要求，應(yīng)重新自同批產(chǎn)品中抽取兩倍量樣品進(jìn)行復(fù)驗(yàn)，以復(fù)驗(yàn)結(jié)果為準(zhǔn)。若仍有一項(xiàng)不符合要求，判定該批產(chǎn)品不符合本文件。檢驗(yàn)結(jié)果如有三項(xiàng)及以上指標(biāo)不符合要求，判定該批產(chǎn)品不符合本文件。8QB/TXXXXX—XXXX8標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯存8.1標(biāo)志包裝儲(chǔ)運(yùn)圖示標(biāo)志應(yīng)符合GB/T191的要求。8.2包裝包裝容器應(yīng)整潔、衛(wèi)生、無(wú)破損，并符合相關(guān)規(guī)定。8.3運(yùn)輸8.3.1運(yùn)輸工具應(yīng)清潔。8.3.2不應(yīng)與有毒、有害、有腐蝕性、有堿性和含有異味的物品混裝、混運(yùn)，宜避免受潮、受壓、曝曬。裝卸時(shí)，應(yīng)輕拿輕放，不應(yīng)直接鉤扎包裝。8.4貯存8.4.1應(yīng)貯存在室溫下通風(fēng)、干燥、清潔的倉(cāng)庫(kù)內(nèi)，嚴(yán)防曝曬雨淋，避免火種。8.4.2不應(yīng)與有毒、有害、有腐蝕性、有堿性和含有異味的物品放在一起。1QB/TXXXXX—XXXX（資料性）高