獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險評估技術(shù)指南

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險評估技術(shù)指南1范圍本文件給出了獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險評估相關(guān)風(fēng)險識別、風(fēng)險分析、風(fēng)險應(yīng)對和定期審查等活動的技術(shù)指導(dǎo)。本文件適用于獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的生物安全風(fēng)險評估。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用本文件。GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB50346生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范WS233病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則WS589病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)識NY/T1948獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全要求通則3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室veterinarylaboratory從事動物病原體相關(guān)檢測、檢驗(yàn)、研究、保藏、教學(xué)、動物實(shí)驗(yàn)、獸用生物制品研發(fā)等活動的實(shí)驗(yàn)室。3.2生物因子biologicalagents微生物和生物活性物質(zhì)。3.3危險hazard可能導(dǎo)致死亡、傷害或疾病、財產(chǎn)損失、工作環(huán)境破壞或這些情況組合的根源或狀態(tài)。3.4實(shí)驗(yàn)室生物安全laboratorybiosafety為了避免各種有害生物因子造成的實(shí)驗(yàn)室生物危害所采取的防控措施（硬件）和管理措施（軟件）。3.5風(fēng)險risk危險發(fā)生的概率及其后果嚴(yán)重性的綜合。3.6可接受風(fēng)險acceptablerisk在考慮到實(shí)驗(yàn)活動預(yù)期效益的情況下，認(rèn)為可以接受并允許工作繼續(xù)進(jìn)行的風(fēng)險。3.7風(fēng)險評估riskassessment評估危險發(fā)生的可能性、大小并將危險降至可接受水平的全過程。3.8良好微生物操作程序goodmicrobiologicalpracticeandprocedure（GMPP）適用于獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室活動的基本實(shí)驗(yàn)室操作守則，包括一般操作和無菌技術(shù)等，旨在保護(hù)實(shí)驗(yàn)室人員、周邊社區(qū)人員、動物免受感染，防止環(huán)境污染。3.9標(biāo)準(zhǔn)操作程序standardoperatingprocedures（SOPs）按照國際、國家、地方等法規(guī)、政策、標(biāo)準(zhǔn)所列最佳做法制定的一套詳細(xì)記錄的經(jīng)驗(yàn)證的操作步驟，確保實(shí)驗(yàn)室操作安全、及時、可靠。3.10個人防護(hù)裝備personalprotectiveequipment（PPE）防止實(shí)驗(yàn)室人員受到生物性、化學(xué)性和物理性等危險因子傷害的器材和用品。4基本原則4.1實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險評估工作是落實(shí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全工作的第一步，是保障實(shí)驗(yàn)室工作人員、周邊社區(qū)人員、周邊易感動物免受實(shí)驗(yàn)室致病生物因子傷害，環(huán)境免受生物因子污染的關(guān)鍵。4.2實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險大小與實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)等級并非完全對應(yīng)，實(shí)驗(yàn)室的生物安全風(fēng)險大小既與生物因子特性、實(shí)驗(yàn)設(shè)施、實(shí)驗(yàn)程序相關(guān)，也與工作人員執(zhí)行能力相關(guān)。4.3實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險評估以證據(jù)為基礎(chǔ)，采取標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化方式開展，確保評估結(jié)果可重復(fù)、可比較；依據(jù)評估結(jié)果制定經(jīng)濟(jì)、可行、可持續(xù)的風(fēng)險應(yīng)對措施。4.4當(dāng)風(fēng)險不可接受時，風(fēng)險評估包括風(fēng)險識別、風(fēng)險分析、風(fēng)險應(yīng)對和定期審核共4個步驟；當(dāng)風(fēng)險可接受時，風(fēng)險評估包括風(fēng)險識別、風(fēng)險分析、定期審核共3個步驟。見圖1。圖1.風(fēng)險評估流程圖5風(fēng)險評估5.1風(fēng)險識別5.1.1概述實(shí)驗(yàn)室工作內(nèi)容5.1.1.1實(shí)驗(yàn)室活動概況，主要包括以下內(nèi)容：1）實(shí)驗(yàn)活動類型，如檢驗(yàn)檢測、科學(xué)研究、生物制品研發(fā)、動物實(shí)驗(yàn)等；2）實(shí)驗(yàn)室所持有的，以及下一步將要涉及的生物因子、試劑清單；3）實(shí)驗(yàn)室的選址、平面布局，設(shè)施設(shè)備清單；4）實(shí)驗(yàn)活動流程；5）工作人員數(shù)量、專業(yè)背景、工作年限和崗位職責(zé)。5.1.1.2大型實(shí)驗(yàn)室宜單獨(dú)表述每種實(shí)驗(yàn)活動。5.1.2描述生物因子特性及潛在危險5.1.2.1對于已知生物因子，重點(diǎn)從以下方面進(jìn)行描述：1）生物因子是否列入農(nóng)業(yè)農(nóng)村部、國家衛(wèi)生健康委員會、海關(guān)等系統(tǒng)相關(guān)名錄疫病，如果列入，屬于何種等級；2）生物因子致病性、危害嚴(yán)重性，如發(fā)病率、死亡率、公共衛(wèi)生影響、對實(shí)驗(yàn)室影響等；3）生物因子流行病學(xué)特點(diǎn)，如潛伏期、傳播途徑、傳播能力、宿主范圍、病媒情況等；4）生物因子在環(huán)境中穩(wěn)定性，對消毒劑敏感性；5）人群和動物對該生物因子的免疫水平；6）針對該生物因子的預(yù)防、診斷、治療措施，包括疫苗、藥物、診斷試劑等；7）樣品中生物因子的濃度和體積；8）其他信息。5.1.2.2對于未知生物因子，如因懷疑可能感染某疫病而提交到實(shí)驗(yàn)室的樣品，可能含有一種或多種未知生物因子，重點(diǎn)從以下方面描述近一年內(nèi)：1）采樣地點(diǎn)、樣品數(shù)量、樣品種類（組織、血液、分泌物等）；2）患病動物種類、癥狀、可能感染的生物因子等情況；3）流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)，如樣品來源場所的動物發(fā)病率、死亡率、傳播范圍、傳播途徑、周邊其他發(fā)病場所調(diào)查數(shù)據(jù)；4）樣品運(yùn)輸過程包裝情況，如密封、裸露、破損等。5.1.3描述可能造成生物安全風(fēng)險的實(shí)驗(yàn)操作按照實(shí)驗(yàn)室操作流程，描述可能存在的風(fēng)險操作，重點(diǎn)從以下方面進(jìn)行描述：1）含生物因子樣品的移取、研磨、離心、振蕩、勻漿、混合、稀釋、超聲、渦旋等操作；2）生物因子分離、培養(yǎng)相關(guān)操作，如接種濃度和體積；3）實(shí)驗(yàn)活動涉及遺傳修飾生物體時，應(yīng)考慮重組體的危害；4）生物因子灑濺、溢出后的清理相關(guān)操作；5）鋒利銳器相關(guān)操作，如接種環(huán)、移液管、注射器、針頭、解剖器材、玻璃器皿等；6）組織切片相關(guān)操作，如涂片、熱固定、玻片染色；7）動物實(shí)驗(yàn)相關(guān)操作，如保定、解剖、收集組織、處置、接種、注射和抽血；8）生物廢棄物處理相關(guān)操作，如樣品、培養(yǎng)物、實(shí)驗(yàn)動物排泄物和墊料等的運(yùn)輸、滅活、處置等程序；9）實(shí)驗(yàn)室樣品的包裝運(yùn)輸相關(guān)操作，如樣品的容器、包裝和運(yùn)輸條件等。5.1.4描述實(shí)驗(yàn)室布局、設(shè)施和設(shè)備情況重點(diǎn)從以下方面進(jìn)行描述：1）實(shí)驗(yàn)室平面布局，如布局是否符合實(shí)驗(yàn)活動需求，高風(fēng)險實(shí)驗(yàn)活動是否在單獨(dú)的房間或空間里開展；2）實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)，如墻面、地面、頂棚等圍護(hù)結(jié)構(gòu)是否易清潔、不滲液、耐化學(xué)品和消毒滅菌劑的腐蝕，地面是否平整、防滑；3）實(shí)驗(yàn)室家具，如是否符合人體工程學(xué)要求，臺柜和座椅邊角是否圓滑，臺面是否防水、防腐蝕、耐熱和堅固；4）實(shí)驗(yàn)室門窗，如門是否有可視窗并可閉鎖，窗戶是否密封，如果有可開啟的外窗是否安裝了可防蚊蟲的紗窗；5）實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)空調(diào)、正負(fù)壓設(shè)置、電氣自控、給水排水等是否符合GB19489、GB50346的有關(guān)規(guī)定；6）個人防護(hù)裝備配備和使用情況，如手套、防護(hù)服、防護(hù)眼鏡、呼吸防護(hù)等；7）高壓滅菌器、生物安全柜、危廢柜、生命支持系統(tǒng)、正壓生物防護(hù)服、化學(xué)淋浴裝置配備和使用情況；8）離心機(jī)、孵化器、冰箱/冷凍柜、二氧化碳培養(yǎng)箱等設(shè)備配備和使用情況；9）防止生物因子丟失、被盜、意外釋放，防止人員誤用、擅自使用生物因子的設(shè)備及其使用情況。5.1.5描述實(shí)驗(yàn)室人員能力重點(diǎn)從以下方面進(jìn)行描述：1）工作人員的專業(yè)背景和工作經(jīng)歷；2）工作人員操作生物因子情況；3）工作人員執(zhí)行工作程序和操作實(shí)驗(yàn)設(shè)備情況；4）工作人員接受診斷樣品和試劑使用方面培訓(xùn)情況；5）工作人員生物安全意識和遵守生物安全程序情況；6）所有人員（包括清潔、維修人員和訪客）接受生物安全培訓(xùn)或簡要了解實(shí)驗(yàn)室生物安全情況；工作人員考核合格情況；7）之前該實(shí)驗(yàn)室工作人員是否被動物咬傷、抓傷、踢傷和其他傷害，是否出現(xiàn)過被針扎等操作失誤，是否出現(xiàn)過人員感染實(shí)驗(yàn)室病原等生物安全事件。5.1.6具體描述影響實(shí)驗(yàn)室生物安全的其他因素從以下方面進(jìn)行描述：1）組織能力和財務(wù)水平，如是否足以管控生物安全風(fēng)險；2）惡劣天氣或?yàn)?zāi)害，如是否存在可能對實(shí)驗(yàn)室操作產(chǎn)生不利影響的臺風(fēng)、洪水、地震等天氣或?yàn)?zāi)害；3）對實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行產(chǎn)生不利影響的其他因素，如是否存在可能對實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行產(chǎn)生不利影響的政治、經(jīng)濟(jì)或犯罪活動。5.2風(fēng)險分析5.2.1分析生物因子釋放/暴露的可能性5.2.1.1根據(jù)5.1的風(fēng)險識別結(jié)果，主要從以下幾方面分析生物因子釋放/暴露可能性：1）實(shí)驗(yàn)活動產(chǎn)生氣溶膠造成生物因子釋放/暴露的可能性，如打開包裝、轉(zhuǎn)移樣品、勻漿、研磨、離心、超聲、病原分離培養(yǎng)等；2）實(shí)驗(yàn)活動中因使用尖銳物品，開展非常規(guī)實(shí)驗(yàn)活動（如操作超常規(guī)樣品數(shù)量的檢測工作、超常規(guī)量的大量病毒或細(xì)菌培養(yǎng)）,或者開展新的實(shí)驗(yàn)活動導(dǎo)致生物因子釋放/暴露的可能性；3）工作人員能力不足或進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的外部人員操作不當(dāng)導(dǎo)致生物因子釋放/暴露的可能性；4）生物因子在環(huán)境中的穩(wěn)定性強(qiáng)弱，穩(wěn)定性強(qiáng)的生物因子更容易造成釋放/暴露；5）實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)空調(diào)、給水排水、電力自控、壓差控制等系統(tǒng)發(fā)生故障，個人防護(hù)裝備失效，實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行維護(hù)能力不足等因素，造成生物因子釋放/暴露的可能性；6）當(dāng)?shù)貥O端天氣造成生物因子釋放/暴露的可能性；7）嚙齒動物、媒介生物出沒實(shí)驗(yàn)室造成生物因子釋放/暴露的可能性；8）盛裝生物因子的容器不嚴(yán)密造成生物因子釋放/暴露的可能性；9）消毒和廢棄物處理不當(dāng)造成生物因子釋放/暴露的可能性；10）實(shí)驗(yàn)室安保不力，導(dǎo)致人員故意釋放/暴露生物因子的可能性。5.2.1.2對生物因子釋放/暴露可能性進(jìn)行分級，級別類型包括：1）基本不可能：評估組認(rèn)為被評估實(shí)驗(yàn)室發(fā)生相關(guān)生物因子釋放/暴露的可能性極低，類似區(qū)域/行業(yè)也極少發(fā)生；2）較不可能：評估組認(rèn)為被評估實(shí)驗(yàn)室發(fā)生相關(guān)生物因子釋放/暴露的可能性極低，但類似區(qū)域/行業(yè)偶有發(fā)生；3）可能：評估組認(rèn)為被評估實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)發(fā)生過相關(guān)生物因子釋放/暴露，類似區(qū)域/行業(yè)也偶有發(fā)生；或者被評估實(shí)驗(yàn)室雖未發(fā)生過相關(guān)生物因子釋放/暴露，但類似區(qū)域/行業(yè)發(fā)生頻率較高；4）很可能：評估組認(rèn)為被評估實(shí)驗(yàn)室發(fā)生相關(guān)生物因子釋放/暴露可能性較高；5）極有可能：評估組認(rèn)為被評估實(shí)驗(yàn)室發(fā)生相關(guān)生物因子釋放/暴露可能性極高。5.2.2分析生物因子釋放/暴露后果嚴(yán)重性5.2.2.1根據(jù)以下幾方面評價生物因子釋放/暴露的后果嚴(yán)重性：1）生物因子感染劑量，如低劑量即可導(dǎo)致人或動物發(fā)病的，后果更嚴(yán)重；2）生物因子傳播能力，如人傳人或者動物傳人速度快的，后果更嚴(yán)重；3）生物因子導(dǎo)致人員感染、發(fā)病嚴(yán)重性和致死率及公共衛(wèi)生影響；4）生物因子導(dǎo)致動物感染、發(fā)病嚴(yán)重性和致死率及相關(guān)生產(chǎn)損失；5）預(yù)防和治療措施，如缺少有效預(yù)防治療措施的，后果更嚴(yán)重；6）周邊易感動物和易感人群情況，如實(shí)驗(yàn)室周邊有居民區(qū)、易感動物養(yǎng)殖場，實(shí)驗(yàn)室與居民區(qū)、養(yǎng)殖場的距離較近，有野生動物出沒的，后果更嚴(yán)重；7)是否為地方流行病，如新發(fā)傳染病、本地區(qū)尚未流行的疫病，后果更嚴(yán)重。5.2.2.2對生物因子釋放/暴露后果的嚴(yán)重性進(jìn)行分級，級別分類如下：1）影響很小：基本沒有影響，不會造成不良的社會影響；2）影響一般：現(xiàn)場處理可立刻控制生物因子繼續(xù)釋放/暴露，造成中度財產(chǎn)損失，有較小的社會影響；3）影響較大：導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室人員感染或?qū)嶒?yàn)室內(nèi)動物發(fā)病，造成較大財產(chǎn)損失或賠償支付，在一定范圍內(nèi)產(chǎn)生不良社會影響；4）影響重大：導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室之外的少量人員感染或周邊動物發(fā)病的，造成嚴(yán)重財產(chǎn)損失，產(chǎn)生惡劣的社會影響；5）影響特別重大：導(dǎo)致大量社會人員感染或周邊大量動物發(fā)病的，造成巨大財產(chǎn)損失，產(chǎn)生極其惡劣的社會影響。5.2.3確定生物因子釋放/暴露的風(fēng)險等級5.2.3.1綜合5.2.1和5.2.2，對照風(fēng)險評估矩陣表（表1）確定風(fēng)險因子釋放/暴露的風(fēng)險等級。相關(guān)示例參見附錄A。5.2.3.2風(fēng)險等級包括以下類別：1）極低風(fēng)險；2）低風(fēng)險；3）中風(fēng)險；4）高風(fēng)險；5）極高風(fēng)險。表1.風(fēng)險評估矩陣表生物因子釋放/暴露可能性基本不可能較不可能可能很可能極有可能生物因子釋放/暴露后果嚴(yán)重性影響特別重大中中高極高極高影響重大中中高高極高影響較大低低中高高影響一般極低低低中中影響很小極低極低低中中5.2.4確定風(fēng)險等級是否可接受5.2.4.1按照以下原則，確定本實(shí)驗(yàn)室的可接受風(fēng)險：1）符合國家有關(guān)法律法規(guī)；2）符合實(shí)驗(yàn)室生物安全等級要求；3）不影響周邊社區(qū)人員健康和畜牧業(yè)正常生產(chǎn)。5.2.4.2對照5.2.4.1，確定5.2.3分析所得各風(fēng)險等級是否可接受。5.2.4.2.1如果風(fēng)險等級可接受，可維持現(xiàn)有的生物安全措施或采取預(yù)防措施。5.2.4.2.2如果風(fēng)險等級不可接受，可按照5.3采取風(fēng)險應(yīng)對措施，降低和控制不可接受風(fēng)險。5.3風(fēng)險應(yīng)對5.3.1描述本實(shí)驗(yàn)室在風(fēng)險應(yīng)對中可用的資源從以下方面進(jìn)行描述：1）是否有替代方法或可行的風(fēng)險應(yīng)對措施；2）是否能夠確保執(zhí)行并維持風(fēng)險應(yīng)對措施；3）管理層是否支持風(fēng)險應(yīng)對措施所需經(jīng)費(fèi)；4）管理層是否支持對人員進(jìn)行設(shè)備安裝、操作和維護(hù)培訓(xùn)；5）存在哪些可能限制風(fēng)險應(yīng)對措施實(shí)施的因素，例如：財務(wù)、法律、組織等；6）是否制定并執(zhí)行防止生物因子丟失、被盜、意外釋放，防止人員誤用、擅自使用生物因子相關(guān)措施。5.3.2確定風(fēng)險應(yīng)對措施5.3.2.1風(fēng)險應(yīng)對措施主要包括良好微生物操作程序（GMPP）、人員能力和培訓(xùn)、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計和設(shè)施設(shè)備、樣品接收和保存、消毒和廢棄物處理、個人防護(hù)、生物因子灑濺處理、職業(yè)健康等方面，生物安全二級實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險應(yīng)對措施示例參見附錄B。5.3.2.2綜合實(shí)驗(yàn)室可用資源、本實(shí)驗(yàn)室生物安全等級等因素，對照GB19489、GB50346、NY/T1948、WS233相關(guān)生物安全等級實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、管理等要求，采取風(fēng)險應(yīng)對措施，將各項(xiàng)不可接受風(fēng)險降至可接受水平。5.4定期審查5.4.1定期審查要求5.4.1.1完成5.1-5.3相關(guān)工作后，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室宜定期開展風(fēng)險審查。一般情況下，實(shí)行年度審查，特殊情形下開展特別審查。5.4.1.2按照5.1-5.3相關(guān)要求，收集、更新有關(guān)信息，重新開展風(fēng)險識別、風(fēng)險分析，確定是否需要實(shí)施新的風(fēng)險應(yīng)對措施。5.4.2開展特別審查出現(xiàn)下述情況時開展特別審查，具體情況包括：1）發(fā)生生物安全事件；2）生物因子發(fā)生變異，或者得到有關(guān)生物因子的新信息；3）實(shí)驗(yàn)室活動或設(shè)備發(fā)生較大變化；4）實(shí)驗(yàn)人員、流程、技術(shù)發(fā)生較大變化；5）收到實(shí)驗(yàn)室人員對現(xiàn)有風(fēng)險應(yīng)對措施有效性、可行性等方面反饋信息；6）國際規(guī)則變化，國內(nèi)相關(guān)政策、法規(guī)或標(biāo)準(zhǔn)發(fā)生改變；7）國家/區(qū)域動物疫病形勢改變；8）實(shí)驗(yàn)室遷址或翻新。6起草風(fēng)險評估報告起草風(fēng)險評估報告（參照附錄C）。

附錄A（資料性）風(fēng)險評估過程示例表A.1風(fēng)險評估過程示例第1步：風(fēng)險識別第2步：風(fēng)險分析第3步：風(fēng)險應(yīng)對第4步：定期審查進(jìn)行常規(guī)涂片鏡檢準(zhǔn)備以及唾液樣品顯微鏡檢相關(guān)操作；相關(guān)生物因子具備通過氣溶膠傳播的特性；實(shí)驗(yàn)室工作人員接受了規(guī)范培訓(xùn)，具備良好的操作能力因樣品體積和濃度較小，不易產(chǎn)生氣溶膠，且玻片經(jīng)過熱固定使得生物因子部分失活。綜合生物因子釋放暴露的可能性和后果嚴(yán)重性，評估認(rèn)為該項(xiàng)為低風(fēng)險。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室生物安全等級要求，采取應(yīng)對措施，完善SOPs。加強(qiáng)工作人員培訓(xùn)，使其熟悉SOPs操作要求，確保合規(guī)操作。定期審核SOPs執(zhí)行情況。當(dāng)發(fā)生生物安全事件、生物因子特性發(fā)生改變、實(shí)驗(yàn)室工作程序變化等情況時，開展臨時審查。少量離心液體培養(yǎng)基制備儲存液的相關(guān)操作；相關(guān)生物因子具備通過氣溶膠傳播的特性；實(shí)驗(yàn)室工作人員接受了規(guī)范培訓(xùn)，具備良好的操作能力因生物因子在液體中繁殖，盡管樣品體積小，但濃度高，因此，有可能產(chǎn)生氣溶膠。綜合生物因子釋放暴露的可能性和后果嚴(yán)重性，評估認(rèn)為該項(xiàng)為中風(fēng)險。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室生物安全等級要求，采取應(yīng)對措施，完善SOPs。應(yīng)對措施重點(diǎn)包括增加安全設(shè)備（如佩戴PPE、呼吸保護(hù)裝置，使用生物安全柜、離心時使用安全桶和密封轉(zhuǎn)子等），限制人員進(jìn)入等，并確保相關(guān)措施有效實(shí)施。對工作人員進(jìn)行SOPs和灑濺處理相關(guān)培訓(xùn)。定期審查SOPs和應(yīng)對措施執(zhí)行情況，評估應(yīng)對措施對控制生物因子風(fēng)險的有效性、可行性。大量培養(yǎng)耐藥菌；相關(guān)生物因子具備通過氣溶膠傳播的特性；實(shí)驗(yàn)室工作人員接受了規(guī)范培訓(xùn)，具備良好的操作能力因生物因子在液體中繁殖且樣品數(shù)量多，濃度非常高，極可能通過氣溶膠傳播，加之該生物因子為耐藥菌，因此，風(fēng)險高。綜合生物因子釋放暴露的可能性和后果嚴(yán)重性，評估認(rèn)為該項(xiàng)為高風(fēng)險。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室生物安全等級要求，采取應(yīng)對措施，完善SOPs。應(yīng)對措施重點(diǎn)包括將高風(fēng)險實(shí)驗(yàn)區(qū)域與其他區(qū)域隔離，完善通風(fēng)系統(tǒng)和廢物處理系統(tǒng)，增加安全設(shè)施設(shè)備等。對工作人員進(jìn)行SOPs、應(yīng)急處置和大量撒漏情況處理相關(guān)培訓(xùn)。定期審查實(shí)驗(yàn)室SOPs執(zhí)行情況。建議每年審核兩次應(yīng)對措施執(zhí)行情況，特別是灑濺等應(yīng)急事件處理、實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)情況。給嚙齒動物口服接種非傳染性輪狀病毒；由新培訓(xùn)人員操作接種的輪狀病毒屬于非病原類生物因子，相關(guān)操作不易造成操作人員皮膚損傷，但有可能被嚙齒動物咬傷。綜合生物因子釋放暴露的可能性和后果嚴(yán)重性，評估認(rèn)為該項(xiàng)為低風(fēng)險。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室生物安全等級要求，采取應(yīng)對措施，完善SOPs。確保實(shí)驗(yàn)過程按照SOPs進(jìn)行。對新進(jìn)員工開展SOPs和動物實(shí)驗(yàn)操作相關(guān)培訓(xùn)。定期審查實(shí)驗(yàn)室SOPs執(zhí)行情況。當(dāng)發(fā)生生物安全事件、生物因子特性發(fā)生改變、實(shí)驗(yàn)室工作程序變化等情況時，開展臨時審核。給嚙齒動物靜脈接種傳染性腦炎病毒；由新培訓(xùn)人員操作該生物因子能夠造成人類嚴(yán)重疾病，但有疫苗可以預(yù)防。操作過程中可能出現(xiàn)皮膚損傷或者被嚙齒動物咬傷。鑒于該生物因子特性，可能通過氣溶膠方式傳染給人。綜合生物因子釋放暴露的可能性和后果嚴(yán)重性，評估認(rèn)為該項(xiàng)為中風(fēng)險。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室生物安全等級要求，采取應(yīng)對措施，完善SOPs。應(yīng)對措施重點(diǎn)包括增加安全裝備/設(shè)施（如佩戴PPE、呼吸裝置，使用生物安全柜），給人員免疫等。對新進(jìn)人員進(jìn)行安全使用針頭等尖銳物品相關(guān)培訓(xùn)。定期審查實(shí)驗(yàn)室SOPs執(zhí)行情況。同時，每年審核一次應(yīng)對措施執(zhí)行情況，評估應(yīng)對措施有效性、可行性。給嚙齒動物靜脈接種克雅氏病病原（朊病毒）；由新培訓(xùn)人員操作該生物因子可致人死亡，沒有預(yù)防用的疫苗也沒有治療用的藥物。操作過程可能出現(xiàn)皮膚損傷或者被動物咬傷。該生物因子可通過氣溶膠傳播，且對常規(guī)消毒劑有高耐受性。綜合生物因子釋放暴露的可能性和后果嚴(yán)重性，評估認(rèn)為該項(xiàng)為高風(fēng)險。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室生物安全等級要求，采取應(yīng)對措施，完善SOPs。應(yīng)對措施重點(diǎn)包括將開展高風(fēng)險活動的區(qū)域與其他實(shí)驗(yàn)區(qū)域分隔，針對性消毒，增加安全裝備/設(shè)施，完善通風(fēng)和廢物處理系統(tǒng)等。對新進(jìn)人員進(jìn)行消毒、廢物處理等相關(guān)培訓(xùn)。定期審查實(shí)驗(yàn)室SOPs執(zhí)行情況。同時，每年審核兩次物品灑濺處理等應(yīng)急事件處理情況。審核培訓(xùn)計劃，特別是關(guān)于尖銳物品使用等的培訓(xùn)。附錄B（資料性）生物安全二級實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險應(yīng)對措施概況示例B.1良好微生物操作程序（GMPP）B.1.1良好操作要求B.1.1.1不將食品、飲品、個人物品（如衣服、包）放在實(shí)驗(yàn)室，不在實(shí)驗(yàn)室吃喝、抽煙，不在實(shí)驗(yàn)室里化妝；B.1.1.2在實(shí)驗(yàn)室里，不將鋼筆、鉛筆放在口中；B.1.1.3處理生物因子或?qū)嶒?yàn)動物后，在離開實(shí)驗(yàn)室之前用肥皂充分清洗手部，并用流動的溫水沖洗干凈；B.1.1.4請勿將可燃材料靠近火源或熱源；B.1.1.5進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前，先將身上的傷口或皮膚破潰處包裹妥當(dāng)；B.1.1.6進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前，確保實(shí)驗(yàn)室里有滿足實(shí)驗(yàn)需求的、足夠數(shù)量的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和耗材，如試劑、個人防護(hù)裝備、消毒劑等；且確保上述物品按照說明書要求存放，防止撒漏、跌落；B.1.1.7確保給生物類、化學(xué)類、輻射類試劑和材料粘貼合適標(biāo)簽；B.1.1.8保護(hù)檔案免受污染，例如給文字檔案（特別是需要帶離實(shí)驗(yàn)室的檔案）添加塑料封皮；B.1.1.9確保謹(jǐn)慎開展實(shí)驗(yàn)室活動，避免匆忙操作、疲勞操作；B.1.1.10保持工作區(qū)域整潔，不擺放非必要物品或材料；B.1.1.11禁止佩戴耳機(jī)，防止分散精力，確保工作人員能夠聽到設(shè)備設(shè)施發(fā)出的警報聲；B.1.1.12禁止佩戴可能劃破手套的首飾，避免造成污染或者引發(fā)感染。定期清洗消毒佩戴的首飾、眼鏡；B.1.1.13禁止使用非必要的可移動電子設(shè)備（例如移動電話、平板電腦、便攜式電腦、U盤、存儲卡、照相機(jī)等）；B.1.1.14將必要的可移動電子設(shè)備置于不易被污染的地方，同時，避免該設(shè)備成為污染源；如果必須將該設(shè)備放置在生物因子附近，則對設(shè)備外表進(jìn)行包裹，建立物理屏障，或者在離開實(shí)驗(yàn)室前對設(shè)備進(jìn)行消毒。B.1.2良好操作流程B.1.2.1避免吸入生物因子B.1.2.1.1處理樣品、將試劑從移液器轉(zhuǎn)移至試管、劇烈混合液體、打翻試管等情況容易產(chǎn)生氣溶膠和小液滴，緩慢小心混合液體，先離心去除附著在試管蓋上的液體后開蓋，降低氣溶膠和小液滴產(chǎn)生可能性；B.1.2.1.2由于將接種環(huán)等物品直接置于明火之上可能造成生物因子噴濺，因此，建議使用一次性接種環(huán)，或使用密閉式小型焚燒爐等其他不易產(chǎn)生生物因子噴濺的方式消毒金屬接種環(huán)。B.1.2.2避免食入生物因子，避免生物因子接觸皮膚和眼睛B.1.2.2.1處理樣品時全程佩戴一次性手套，且一次性手套不得重復(fù)使用；B.1.2.2.2避免用戴手套的手接觸面部；B.1.2.2.3完成實(shí)驗(yàn)操作后無菌摘除手套，按照規(guī)范認(rèn)真清洗手部；B.1.2.2.4當(dāng)實(shí)驗(yàn)操作可能造成液體灑濺時，提前遮擋或保護(hù)嘴部、眼睛和面部；B.1.2.2.5保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員頭發(fā)，防止污染；B.1.2.2.6用衣物遮蓋破損的皮膚。B.1.2.3避免刺入生物因子B.1.2.3.1盡可能將玻璃制品替換成塑料制品，對于必須使用的玻璃制品，定期檢查其完整性，及時丟掉破損、有缺口、有裂痕的玻璃制品；B.1.2.3.2盡可能使用鈍頭或圓頭剪刀，而非尖頭剪刀；B.1.2.3.3用安瓿瓶開瓶器打開安瓿瓶，確保安全；B.1.2.3.4使用鈍頭注射針頭降低相關(guān)使用風(fēng)險；B.1.2.3.5禁止用帶針頭的注射器進(jìn)行移液操作；B.1.2.3.6將尖銳物品（如針頭、注射器、刀片、碎玻璃片）置于防刺破裝置中，密封后丟棄。B.1.2.4避免散播生物因子B.1.2.4.1丟棄樣品和培養(yǎng)基時，置于防撒漏的容器中，丟入專門的垃圾箱；B.1.2.4.2宜在每個工作地點(diǎn)均設(shè)置垃圾箱，垃圾箱宜使用塑料、金屬等不易破碎材料；B.1.2.4.3定期清空垃圾箱，不積存垃圾和實(shí)驗(yàn)室廢棄物，規(guī)范處理垃圾；B.1.2.4.4確保所有垃圾都粘貼清晰的標(biāo)簽；B.1.2.4.5用消毒液浸濕的紗布包在試管瓶口，小心打開瓶蓋，防止液體灑濺；B.1.2.4.6工作結(jié)束后或者有東西灑落時，用適當(dāng)消毒液消毒工作臺表面；B.1.2.4.7確保消毒液能夠殺滅相應(yīng)生物因子。B.2.人員能力和培訓(xùn)人為失誤、技術(shù)不過硬等因素，都可能破壞生物安全屏障。人員培訓(xùn)內(nèi)容參照表A.1。表B.1.實(shí)驗(yàn)室操作人員培訓(xùn)內(nèi)容培訓(xùn)名稱培訓(xùn)內(nèi)容培訓(xùn)人員總體情況和生物安全意識培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)室整體布局、設(shè)施情況實(shí)驗(yàn)室操作手冊實(shí)驗(yàn)室安全手冊法律政策和法律責(zé)任風(fēng)險評估要求突發(fā)應(yīng)急處置程序?qū)嶒?yàn)室全體人員具體工作內(nèi)容培訓(xùn)根據(jù)工作性質(zhì)，分類開展培訓(xùn)對接觸生物因子的全體人員開展GMPP培訓(xùn)評估工作人員業(yè)務(wù)能力和業(yè)務(wù)熟練度獨(dú)立開展業(yè)務(wù)前開展熟練度評估定期考核業(yè)務(wù)能力及時向操作人員講解新程序、設(shè)備、技術(shù)、知識具體工作人員生物安全和生物安保培訓(xùn)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室危險意識，明確實(shí)驗(yàn)操作存在的相關(guān)風(fēng)險生物安全操作程序生物安保措施應(yīng)急準(zhǔn)備和響應(yīng)實(shí)驗(yàn)室全體人員B.3.實(shí)驗(yàn)室設(shè)計B.3.1實(shí)驗(yàn)室設(shè)計重點(diǎn)關(guān)注以下內(nèi)容：1）實(shí)驗(yàn)區(qū)域分區(qū)布局合理，為實(shí)驗(yàn)操作留出足夠空間；2）在每間實(shí)驗(yàn)室出口配備無接觸式洗手池；3）限制人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室進(jìn)門處安裝顯示屏，且該門具備自動關(guān)閉功能；4）在處理、儲存生物因子的實(shí)驗(yàn)室門口張貼生物安全標(biāo)識（參見WS589-2018）；5）實(shí)驗(yàn)室墻壁、地板、家具光滑且易于清理，防液體滲漏，防化學(xué)試劑和消毒劑腐蝕；6）實(shí)驗(yàn)室工作臺防水，耐消毒劑、酸、堿、有機(jī)溶劑，耐熱；7）經(jīng)常清掃擦拭工作臺、柜子、設(shè)備下面或旁邊的空隙；8）實(shí)驗(yàn)室照明滿足實(shí)驗(yàn)活動需求，合理利用日光節(jié)約能源，但避免強(qiáng)光照射和陽光反射，緊急情況下，應(yīng)急光照足以讓工作人員安全停止正在進(jìn)行的工作并安全撤離實(shí)驗(yàn)室；9）確保實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)（包括自然通風(fēng)和空調(diào)系統(tǒng)）符合安全要求，重點(diǎn)考慮風(fēng)速和風(fēng)向等因素，避免產(chǎn)生不穩(wěn)定氣流；10）設(shè)置足夠的物資儲備間，用于操作和儲存化學(xué)試劑、溶劑、放射性材料、壓縮氣體和液化氣體，避免在工作臺和走廊上堆積物品，長遠(yuǎn)看，宜將儲存間設(shè)在實(shí)驗(yàn)室外部；11）在實(shí)驗(yàn)室外部設(shè)置一個用于存放食物、衣物等個人物品的房間，同時，餐飲相關(guān)設(shè)施放置在實(shí)驗(yàn)室外部；12）將應(yīng)急設(shè)施納入實(shí)驗(yàn)室設(shè)計方案中，應(yīng)急設(shè)施符合當(dāng)?shù)氐乩?氣象環(huán)境，考慮火災(zāi)和洪水風(fēng)險，備有人員急救設(shè)備；13）將廢棄物處理設(shè)施納入實(shí)驗(yàn)室設(shè)計方案中，在實(shí)驗(yàn)室附近設(shè)置廢棄物消毒處理裝置，如消毒劑和高壓滅菌鍋。B.4.實(shí)驗(yàn)室設(shè)備B.4.1一般要求B.4.1.1安全使用實(shí)驗(yàn)室設(shè)備可有效降低人員接觸風(fēng)險因子的可能性，因此，有必要為設(shè)備運(yùn)行和維護(hù)提供合適預(yù)算，對設(shè)備操作和維護(hù)人員進(jìn)行培訓(xùn)，確保熟練操作。B.4.1.2儀器使用、維護(hù)、校準(zhǔn)記錄包括：B.4.1.2.1設(shè)備清單（如購買年份、功能等）；B.4.1.2.2設(shè)備購買要求；B.4.1.2.3設(shè)備購買、安裝、校準(zhǔn)、操作、維護(hù)等相關(guān)人員信息和聯(lián)系方式；B.4.1.2.4臨時維修等突發(fā)情況解決方式；B.4.1.2.5設(shè)備使用人員培訓(xùn)和業(yè)務(wù)能力情況。B.4.1.3儀器設(shè)備所采用的材料具備防水性，耐化學(xué)消毒劑腐蝕，且邊緣沒有尖銳棱角，防止造成人身傷害。B.4.1.4通常情況按照儀器說明書操作，必要時，可按照實(shí)驗(yàn)室SOP操作儀器。B.4.1.5定期檢查儀器完整性和存在問題，發(fā)現(xiàn)問題后立即糾正。B.4.1.6定期評估使用效果，確保儀器有效運(yùn)行。B.4.2具體設(shè)備舉例B.4.2.1移液器B.4.2.1.1不用移液器吹打混勻液體，防止產(chǎn)生氣溶膠；B.4.2.1.2在操作臺上準(zhǔn)備好一次性使用的、具備良好吸水性的擦拭物品，及時擦拭從移液器吸頭上滴落的生物因子；B.4.2.1.3如果移液器被生物因子污染，應(yīng)按要求清洗消毒移液器，。B.4.2.2離心機(jī)按照說明書操作和維護(hù)離心機(jī)，離心時宜使用安全桶和密封轉(zhuǎn)子，定期檢查密封轉(zhuǎn)子，出現(xiàn)裂縫及時更換。定期清洗并消毒離心機(jī)，發(fā)生灑濺后及時用消毒液消毒。B.4.2.3冰箱和冰柜佩戴好PPE（如保溫圍裙、手套）后從低溫環(huán)境中取放保存的樣品；從液氮中取拿樣品時還需佩戴面罩或眼罩。所有物品在保存前進(jìn)行標(biāo)注，并在文件中記錄物品所含成分。定期清理冰箱、冰柜中沒有標(biāo)簽的物品，定期檢查冰箱溫度記錄儀的溫度記錄。B.5.樣品接收和儲存B.5.1接樣B.5.1.1附上送檢樣品背景信息，例如，樣品采集時間、地點(diǎn)，樣品的數(shù)量、狀態(tài)、存放容器、封裝狀況、已經(jīng)進(jìn)行了何種處理、希望使用何種檢測方法；B.5.1.2對接收和處理樣品的工作人員進(jìn)行培訓(xùn)，培訓(xùn)內(nèi)容包括：B.5.1.2.1培訓(xùn)相關(guān)風(fēng)險知識，提升風(fēng)險意識；B.5.1.2.2按照GMPP要求，培訓(xùn)必要的防護(hù)知識；B.5.1.2.3培訓(xùn)如何處理包裝破損或滲漏的樣品，避免暴露在風(fēng)險因子之中；B.5.1.2.4培訓(xùn)如何處理撒漏情況，如何消毒防止污染。B.5.1.3接收樣品時首先觀察樣品外包裝是否完整，是否符合運(yùn)輸要求。如果包裝有缺口，將樣品放置到適當(dāng)?shù)?、密閉的容器中，然后對容器表面進(jìn)行消毒，處理樣品前將其放置在生物安全柜中。及時將樣品包裝破損情況通報樣品寄送和運(yùn)輸人員。B.5.1.4應(yīng)將樣品處理要求和信息說明置于防水信封中，與樣品分別放置，防止損壞或污染。如果實(shí)驗(yàn)室接收樣品數(shù)量較大，建議設(shè)置專門的樣品接收室。B.5.2保存B.5.2.1盛裝樣品的容器符合一定條件，具體如下：B.5.2.1.1容器材質(zhì)足夠堅固（必要時可使用塑料容器）、完整無缺口、空間足夠；B.5.2.1.2蓋上容器蓋子或塞子可確保容器不灑漏；B.5.2.1.3消毒容器外表面，確保不含生物因子；B.5.2.1.4準(zhǔn)確做好標(biāo)簽、標(biāo)記、記錄，便于辨認(rèn)。B.5.2.2對于保存在液態(tài)/氣態(tài)氮中的樣品，采用特殊的、適合液氮低溫保存的試管，蓋嚴(yán)試管塞，避免液氮/氣氮進(jìn)入樣品中或者移除液氮后試管破裂或爆炸；B.5.2.3從液氮中取放樣品時，佩戴隔熱手套、圍裙、護(hù)目鏡，防止液體濺出。B.5.3滅活如后續(xù)實(shí)驗(yàn)不需使用活生物因子，則在正式檢測分析前，需對樣品中生物因子進(jìn)行滅活處理。滅活方法與后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作需求相匹配。B.6.消毒和廢棄物處理B.6.1化學(xué)消毒B.6.1.1不建議日常用化學(xué)消毒劑清潔地板、墻壁、設(shè)備和家具，僅在發(fā)生生物因子灑濺等情況時才進(jìn)行化學(xué)消毒。B.6.1.2對于污染嚴(yán)重的物品，噴灑消毒劑后小心清理雜物，然后用化學(xué)消毒劑進(jìn)一步消毒。B.6.1.3化學(xué)消毒劑的選擇。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室存在的生物因子情況、消毒對象（固體還是液體）、消毒條件（如接觸時間、消毒劑濃度、環(huán)境溫度、是否存在血液等有機(jī)質(zhì)干擾）等因素，選擇消毒劑。B.6.1.4常用的消毒劑類型包括含氯類（次氯酸鈉、次氯酸鈣、二氯異氰尿酸鈉、氯胺、二氧化氯）、酚類（苯酚）、過氧化物類（過氧化氫、過乙酸）、醛類（甲醛、戊二醛）、季胺類化合物、醇類（乙醇、丙醇、異丙醇）。推薦使用1000ppm次氯酸鈉溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室消毒，但是對于污染嚴(yán)重的或者發(fā)現(xiàn)消毒劑耐藥性的，可以使用更高濃度消毒劑，例如5000ppm或10000ppm次氯酸鈉。B.6.1.5如果污染面廣，建議采用熏蒸方式消毒，熏蒸消毒劑主要包括福爾馬林、二氧化氯、過氧化氫三種。B.6.1.6多種化學(xué)消毒劑可能危害人體和動物健康，還容易引發(fā)火災(zāi)或爆炸。根據(jù)說明書要求，小心儲存、處理、使用消毒劑。B.6.2熱消毒熱消毒是常用的物理消毒方法，包括干熱（焚燒）和濕熱（高壓滅菌鍋、煮沸）兩種消毒方式。B.6.3廢棄物處理見表B.2。表B.2.實(shí)驗(yàn)室污染物及其處理措施實(shí)驗(yàn)室污染物種類處理措施未受污染的物品可以重復(fù)使用、循環(huán)使用，可以當(dāng)作