DB21T 3859-2023 文冠果組織培養(yǎng)育苗技術規(guī)程

ICS65.020.01DB21/TXXXXXDB21/TXXXXX—2022

DB21發(fā)布發(fā)布遼寧省市場監(jiān)督管理局2023-11-302023-10-30遼 寧 省 地 方 標 準DB21/T3859-2023文冠果組織培養(yǎng)育苗技術規(guī)程DB21/TDB21/T3859—2023DB21/TDB21/T3859—2023目 次前言 Ⅲ范圍 1規(guī)范性引用文件 1術語和定義 1外植體采集 1選取部位 1取材季節(jié) 2取材標準 2培養(yǎng)基配制 2接種器具和培養(yǎng)基滅菌 2初代培養(yǎng)基配方 2繼代培養(yǎng)基配方 2生根培養(yǎng)基配方 2外殖體處理 2處理 2消毒滅菌 2準備 2初代培養(yǎng) 2培養(yǎng)環(huán)境條件 2培養(yǎng)方法 3繼代培養(yǎng) 3培養(yǎng)環(huán)境條件 3培養(yǎng)方法 3生根培養(yǎng) 3培養(yǎng)環(huán)境條件 3培養(yǎng)方法 3生根 3組培苗移栽 3移苗季節(jié) 3移苗前準備 3移栽 4移栽后管理 4技術檔案 4III附錄A（資料性）文冠果穴盤苗培養(yǎng)的管理措施 5II附錄B（資料性）文冠果苗期病蟲害防治藥劑及使用方法 6附錄C（資料性）文冠果組織培養(yǎng)苗木質量分級 7IIIIII前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由遼寧省林業(yè)和草原局提出并歸口。本文件起草單位：大連民族大學、上海培林生物科技有限公司、大連市自然資源事務服務中心、國有阜新蒙古族自治縣林業(yè)科技示范林楊。歸口管理部門通訊地址：遼寧省林業(yè)和草原局（沈陽市和平區(qū)太原北街2號），聯系電話（841-875256。DB21/TDB21/T3859—2023DB21/TDB21/T3859—2023114.1 選取部位選取文冠果莖尖、莖段。4 外植體采集下列術語和定義適用于本文件。3.1Bunge無患子科文冠果屬的多年生落葉喬木。3.2初代培養(yǎng)primaryculture3.3繼代培養(yǎng)subculture3.4rootingculture文冠果組織培養(yǎng)育苗技術規(guī)程范圍本文件規(guī)定了文冠果Bunge）組織培養(yǎng)育苗過程中外植體采集、配養(yǎng)基配制、外殖體處理、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、組培苗移栽和技術檔案等技術要求。本文件適用于遼寧省行政區(qū)域內文冠果組織培養(yǎng)育苗。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB/T6001育苗技術規(guī)程LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術規(guī)程術語和定義7.1 7.1 培養(yǎng)環(huán)境條件27 初代培養(yǎng)處理用消毒過的剪刀，采集文冠果半木質化嫩枝作為外植體，用清潔水漂洗1h～2h，再用流水沖洗干1cm～2cm10min～303cm～5cm帶芽莖段。消毒滅菌75%30s～60s33min～10min45min，沖洗次數以水清澈為準。準備0.5cm～1cm6 外殖體處理5.4 生根培養(yǎng)基配方文冠果組織培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基：1/2MS培養(yǎng)基+吲哚-3-丁酸1mg/L+維生素C150mg/L+糖30g/L+瓊脂6g/L。取材季節(jié)在春季芽開始萌發(fā)或正萌發(fā)生長時取材。取材標準選取當年半木質化枝的嫩芽、嫩枝段做材料；莖尖、莖段長0.5cm～1.0cm，每段留芽1個～2個。培養(yǎng)基配制接種器具和培養(yǎng)基滅菌接種器具和培養(yǎng)基滅菌參照LY/T1882。初代培養(yǎng)基配方芐基腺嘌呤1mg/L+吲哚-3-丁酸0.1mg/L+山梨酸鉀20mg/L+糖30g/L+瓊脂6g/L。繼代培養(yǎng)基配方200mg/LMS6-芐基腺嘌呤0.5mg/L+萘乙酸0.1mg/L+糖30g/L+6g/L。200mg/LMS6-0.1mg/L0.1mg/L+維生素B12mg/L30g/L+6g/L。33移苗季節(jié)組培苗移入溫室全年均可進行，最佳時間為早春。移苗前準備清除培養(yǎng)基組培苗從瓶中取出，放在20cm的根進行適當修剪。最后蘸根寶3號生根劑1000倍液～2000倍液促進生根。穴盤準備10 組培苗移栽培養(yǎng)室溫度18～2520%～30%，光照強度2200lx～2500lx，整齊擺放在培養(yǎng)架上。培養(yǎng)方法剪子和鑷子剪成1.0cm～1.2cm莖段插入培養(yǎng)瓶內，每瓶插10株～15株。在黑暗環(huán)境中培養(yǎng)8d～10d,根原基開始萌動后，開始正常培養(yǎng)。生根生根過程為25d～30d，根數1條～5條，顏色白色，吸收力強，移栽成活率高。培養(yǎng)室溫度23℃～25℃，濕度20%～30%，光照強度2200lx～2500lx，整齊擺放在培養(yǎng)架上。7.2 培養(yǎng)方法3d25d～35d莖段上萌發(fā)出不定芽。繼代培養(yǎng)培養(yǎng)環(huán)境條件培養(yǎng)室溫度23℃～25℃，濕度20%～30%，光照強度2200lx～2500lx，整齊擺放在培養(yǎng)架上。培養(yǎng)方法外植體長滿培養(yǎng)瓶，就需轉入到新的繼代培養(yǎng)基中，在超凈工作臺上，用接種剪子和鑷子剪成1.0cm～1.2cm10段～1525d～30生根培養(yǎng)培養(yǎng)環(huán)境條件44按GB/T6001-1985要求，建立相應育苗技術管理檔案。11 技術檔案采用5×10的穴盤。將基質添加入穴盤的每一個穴位?；|要求排水性和透氣性良好，同時有一定的保水性；可采用草炭和沙子按照比例1:1進行混合，然后用敵克松500倍液～800倍液均勻噴灑進行消毒。移栽移栽后管理穴盤苗培養(yǎng)穴盤苗培養(yǎng)的管理措施見附錄A。缽苗培養(yǎng)組培苗在穴盤中生長30d7d～10d噴布一次殺菌劑多抗霉素10001500（或惡霉靈1000倍液1500倍液～2000苗木出圃文冠果組培苗在營養(yǎng)缽中生長40d后，達到苗木等級Ⅰ、Ⅱ級，即成苗、出圃。詳見附錄C。55附錄 A（資料性）文冠果穴盤苗培養(yǎng)的管理措施表A.1 文冠果穴盤苗培養(yǎng)的管理措施條件10d之內10d～19d20d～30d溫度20℃～25℃20℃～25℃20℃～25℃濕度控制在80%～90%，最好用間歇噴霧保濕，也可用塑料拱棚保濕。逐漸降低到40%～50%，采用拱棚保濕的，可逐漸打開。逐漸降低到40%以下。光照采用拱棚時，棚內控制在3000lx～5000lx。采用拱棚時，棚內逐漸增強至8000lx～10000lx。溫室內控制在10000lx以上。通風每天早晚各通風一次，每次通風以濕度降到60%～70%為宜。拱棚與溫室保持時時通風換氣。與溫室內空氣保持一致。殺菌劑每7d～10d噴布一次殺菌劑多抗霉素1000倍液、異菌多菌靈1500倍液（或惡霉靈1000倍液），防治根腐病、灰霉病。每7d～10d噴布一次殺菌劑多抗霉素10001500（或惡霉靈1000倍液腐病、灰霉病。每7d～10d抗霉素1000倍液、異菌多菌靈1500倍液（或惡霉靈1000倍液），防治根腐病、灰霉病、紅蜘蛛。66附錄 B（資料性）文冠果苗期病蟲害防治藥劑及使用方法表B.1 文冠果苗期病蟲害防治藥劑及使用方法藥劑名稱劑型病害及蟲害用藥量備注敵克松粉劑—400倍液～1000倍液基質消毒異菌多菌靈懸浮劑根腐病、灰霉病1000倍液～1200倍液移栽后噴布多抗霉素水劑根腐病、灰霉病1600倍液～1800倍液移栽后噴布惡霉靈99%粉劑根腐病、灰霉病800倍液～1200倍液移栽后噴布阿維菌素5%乳油紅蜘蛛1200倍液～1800倍液移栽后噴布77附錄 C（資料性）文冠果組織培養(yǎng)苗木質量分級表C.1 文冠果組織培養(yǎng)苗木質量分級名稱種類苗齡苗木等級綜合控制指標適用范圍Ⅰ級Ⅱ