DB21T 3859-2023 文冠果組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.01DB21/TXXXXXDB21/TXXXXX—2022

DB21發(fā)布發(fā)布遼寧省市場(chǎng)監(jiān)督管理局2023-11-302023-10-30遼 寧 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB21/T3859-2023文冠果組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程DB21/TDB21/T3859—2023DB21/TDB21/T3859—2023目 次前言 Ⅲ范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1外植體采集 1選取部位 1取材季節(jié) 2取材標(biāo)準(zhǔn) 2培養(yǎng)基配制 2接種器具和培養(yǎng)基滅菌 2初代培養(yǎng)基配方 2繼代培養(yǎng)基配方 2生根培養(yǎng)基配方 2外殖體處理 2處理 2消毒滅菌 2準(zhǔn)備 2初代培養(yǎng) 2培養(yǎng)環(huán)境條件 2培養(yǎng)方法 3繼代培養(yǎng) 3培養(yǎng)環(huán)境條件 3培養(yǎng)方法 3生根培養(yǎng) 3培養(yǎng)環(huán)境條件 3培養(yǎng)方法 3生根 3組培苗移栽 3移苗季節(jié) 3移苗前準(zhǔn)備 3移栽 4移栽后管理 4技術(shù)檔案 4III附錄A（資料性）文冠果穴盤苗培養(yǎng)的管理措施 5II附錄B（資料性）文冠果苗期病蟲害防治藥劑及使用方法 6附錄C（資料性）文冠果組織培養(yǎng)苗木質(zhì)量分級(jí) 7IIIIII前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由遼寧省林業(yè)和草原局提出并歸口。本文件起草單位：大連民族大學(xué)、上海培林生物科技有限公司、大連市自然資源事務(wù)服務(wù)中心、國有阜新蒙古族自治縣林業(yè)科技示范林楊。歸口管理部門通訊地址：遼寧省林業(yè)和草原局（沈陽市和平區(qū)太原北街2號(hào)），聯(lián)系電話（841-875256。DB21/TDB21/T3859—2023DB21/TDB21/T3859—2023114.1 選取部位選取文冠果莖尖、莖段。4 外植體采集下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1Bunge無患子科文冠果屬的多年生落葉喬木。3.2初代培養(yǎng)primaryculture3.3繼代培養(yǎng)subculture3.4rootingculture文冠果組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了文冠果Bunge）組織培養(yǎng)育苗過程中外植體采集、配養(yǎng)基配制、外殖體處理、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、組培苗移栽和技術(shù)檔案等技術(shù)要求。本文件適用于遼寧省行政區(qū)域內(nèi)文冠果組織培養(yǎng)育苗。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程術(shù)語和定義7.1 7.1 培養(yǎng)環(huán)境條件27 初代培養(yǎng)處理用消毒過的剪刀，采集文冠果半木質(zhì)化嫩枝作為外植體，用清潔水漂洗1h～2h，再用流水沖洗干1cm～2cm10min～303cm～5cm帶芽莖段。消毒滅菌75%30s～60s33min～10min45min，沖洗次數(shù)以水清澈為準(zhǔn)。準(zhǔn)備0.5cm～1cm6 外殖體處理5.4 生根培養(yǎng)基配方文冠果組織培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基：1/2MS培養(yǎng)基+吲哚-3-丁酸1mg/L+維生素C150mg/L+糖30g/L+瓊脂6g/L。取材季節(jié)在春季芽開始萌發(fā)或正萌發(fā)生長時(shí)取材。取材標(biāo)準(zhǔn)選取當(dāng)年半木質(zhì)化枝的嫩芽、嫩枝段做材料；莖尖、莖段長0.5cm～1.0cm，每段留芽1個(gè)～2個(gè)。培養(yǎng)基配制接種器具和培養(yǎng)基滅菌接種器具和培養(yǎng)基滅菌參照LY/T1882。初代培養(yǎng)基配方芐基腺嘌呤1mg/L+吲哚-3-丁酸0.1mg/L+山梨酸鉀20mg/L+糖30g/L+瓊脂6g/L。繼代培養(yǎng)基配方200mg/LMS6-芐基腺嘌呤0.5mg/L+萘乙酸0.1mg/L+糖30g/L+6g/L。200mg/LMS6-0.1mg/L0.1mg/L+維生素B12mg/L30g/L+6g/L。33移苗季節(jié)組培苗移入溫室全年均可進(jìn)行，最佳時(shí)間為早春。移苗前準(zhǔn)備清除培養(yǎng)基組培苗從瓶中取出，放在20cm的根進(jìn)行適當(dāng)修剪。最后蘸根寶3號(hào)生根劑1000倍液～2000倍液促進(jìn)生根。穴盤準(zhǔn)備10 組培苗移栽培養(yǎng)室溫度18～2520%～30%，光照強(qiáng)度2200lx～2500lx，整齊擺放在培養(yǎng)架上。培養(yǎng)方法剪子和鑷子剪成1.0cm～1.2cm莖段插入培養(yǎng)瓶內(nèi)，每瓶插10株～15株。在黑暗環(huán)境中培養(yǎng)8d～10d,根原基開始萌動(dòng)后，開始正常培養(yǎng)。生根生根過程為25d～30d，根數(shù)1條～5條，顏色白色，吸收力強(qiáng)，移栽成活率高。培養(yǎng)室溫度23℃～25℃，濕度20%～30%，光照強(qiáng)度2200lx～2500lx，整齊擺放在培養(yǎng)架上。7.2 培養(yǎng)方法3d25d～35d莖段上萌發(fā)出不定芽。繼代培養(yǎng)培養(yǎng)環(huán)境條件培養(yǎng)室溫度23℃～25℃，濕度20%～30%，光照強(qiáng)度2200lx～2500lx，整齊擺放在培養(yǎng)架上。培養(yǎng)方法外植體長滿培養(yǎng)瓶，就需轉(zhuǎn)入到新的繼代培養(yǎng)基中，在超凈工作臺(tái)上，用接種剪子和鑷子剪成1.0cm～1.2cm10段～1525d～30生根培養(yǎng)培養(yǎng)環(huán)境條件44按GB/T6001-1985要求，建立相應(yīng)育苗技術(shù)管理檔案。11 技術(shù)檔案采用5×10的穴盤。將基質(zhì)添加入穴盤的每一個(gè)穴位?；|(zhì)要求排水性和透氣性良好，同時(shí)有一定的保水性；可采用草炭和沙子按照比例1:1進(jìn)行混合，然后用敵克松500倍液～800倍液均勻噴灑進(jìn)行消毒。移栽移栽后管理穴盤苗培養(yǎng)穴盤苗培養(yǎng)的管理措施見附錄A。缽苗培養(yǎng)組培苗在穴盤中生長30d7d～10d噴布一次殺菌劑多抗霉素10001500（或惡霉靈1000倍液1500倍液～2000苗木出圃文冠果組培苗在營養(yǎng)缽中生長40d后，達(dá)到苗木等級(jí)Ⅰ、Ⅱ級(jí)，即成苗、出圃。詳見附錄C。55附錄 A（資料性）文冠果穴盤苗培養(yǎng)的管理措施表A.1 文冠果穴盤苗培養(yǎng)的管理措施條件10d之內(nèi)10d～19d20d～30d溫度20℃～25℃20℃～25℃20℃～25℃濕度控制在80%～90%，最好用間歇噴霧保濕，也可用塑料拱棚保濕。逐漸降低到40%～50%，采用拱棚保濕的，可逐漸打開。逐漸降低到40%以下。光照采用拱棚時(shí)，棚內(nèi)控制在3000lx～5000lx。采用拱棚時(shí)，棚內(nèi)逐漸增強(qiáng)至8000lx～10000lx。溫室內(nèi)控制在10000lx以上。通風(fēng)每天早晚各通風(fēng)一次，每次通風(fēng)以濕度降到60%～70%為宜。拱棚與溫室保持時(shí)時(shí)通風(fēng)換氣。與溫室內(nèi)空氣保持一致。殺菌劑每7d～10d噴布一次殺菌劑多抗霉素1000倍液、異菌多菌靈1500倍液（或惡霉靈1000倍液），防治根腐病、灰霉病。每7d～10d噴布一次殺菌劑多抗霉素10001500（或惡霉靈1000倍液腐病、灰霉病。每7d～10d抗霉素1000倍液、異菌多菌靈1500倍液（或惡霉靈1000倍液），防治根腐病、灰霉病、紅蜘蛛。66附錄 B（資料性）文冠果苗期病蟲害防治藥劑及使用方法表B.1 文冠果苗期病蟲害防治藥劑及使用方法藥劑名稱劑型病害及蟲害用藥量備注敵克松粉劑—400倍液～1000倍液基質(zhì)消毒異菌多菌靈懸浮劑根腐病、灰霉病1000倍液～1200倍液移栽后噴布多抗霉素水劑根腐病、灰霉病1600倍液～1800倍液移栽后噴布惡霉靈99%粉劑根腐病、灰霉病800倍液～1200倍液移栽后噴布阿維菌素5%乳油紅蜘蛛1200倍液～1800倍液移栽后噴布77附錄 C（資料性）文冠果組織培養(yǎng)苗木質(zhì)量分級(jí)表C.1 文冠果組織培養(yǎng)苗木質(zhì)量分級(jí)名稱種類苗齡苗木等級(jí)綜合控制指標(biāo)適用范圍Ⅰ級(jí)Ⅱ