藥物儀器分析技術(shù)第八章 薄層色譜法

薄層色譜法第八章

目錄CONTENTS01基礎(chǔ)知識(shí)02薄層色譜法03實(shí)訓(xùn)十四維生素C注射液的薄層鑒別04實(shí)訓(xùn)十五西咪替丁片的薄層鑒別案例導(dǎo)入

藥材青木香含有多種硝基菲酸，此類化合物結(jié)構(gòu)相近、性質(zhì)相似，醇提取后得到混合物，采用一般萃取、沉淀、蒸餾等方法很難再分離、純化；將其裝入硅膠柱用三氯甲烷-丙酮（20：1～10：3）溶劑洗脫，分段收集洗脫液，濃縮結(jié)晶。結(jié)晶經(jīng)薄層色譜檢查發(fā)現(xiàn)三種主要成分：馬兜鈴酸A、7-羥基馬兜鈴酸、馬兜鈴酸C?；A(chǔ)知識(shí)第一節(jié)011.能說出薄層色譜和紙色譜的分離原理。2.能說出平面色譜法的分類。學(xué)習(xí)目標(biāo)平面色譜法是色譜法的一種，主要包括薄層色譜法和紙色譜法。這兩種色譜法之所以被稱為平面色譜法，主要是由于其色譜分離是在薄層板和紙平面上進(jìn)行的，與各種柱形式的色譜法相區(qū)別。紙色譜法出現(xiàn)于20世紀(jì)40年代，在之后20年，該法在微量分析，特別在生化醫(yī)藥學(xué)方面的應(yīng)用十分廣泛。20世紀(jì)60年代后，薄層色譜法的發(fā)展和普及，使得紙色譜法的應(yīng)用逐漸減少，20世紀(jì)80年代出現(xiàn)了儀器化薄層色譜法，薄層色譜的每一步驟均用一整套儀器來代替以往的手工操作，再配以薄層掃描儀，這樣就使在較長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)被認(rèn)為只能用來定性和半定量的經(jīng)典薄層色譜法定量結(jié)果的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度大大提高，成為一種極有價(jià)值的分離分析方法。平面色譜法簡(jiǎn)介01平面色譜法紙色譜法是以紙作為載體的色譜法，分離原理屬于分配色譜的范疇。固定相一般為紙纖維上吸附的水分，流動(dòng)相一般為不與水相混溶的有機(jī)溶劑。紙色譜法薄層色譜法薄層色譜法是把固定相均勻地鋪在玻璃板、鋁箔或塑料板上形成薄層，在此薄層上進(jìn)行色譜分離。分離的原理因所用的固定相不同而異，基本上與柱色譜法相同，可分為吸附薄層法、分配薄層法、離子交換薄層法以及分子排阻薄層法。平面色譜法的分類02類型平面色譜法與柱色譜法的原理是完全相同的，只是平面色譜是開放型色譜，離線操作，而柱色譜是封閉型色譜，在線操作。平面色譜法的分類如下：薄層電泳法薄層電泳法是指帶電荷的被分離物質(zhì)（蛋白質(zhì)、核苷酸、多肽、糖類等）在紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠及聚丙烯酰胺凝膠等惰性支持介質(zhì)上，向與其相反的電極方向，以不同速度泳動(dòng)（或遷移）而得到分離，然后對(duì)組分進(jìn)行定性和定量。上述紙電泳和聚丙烯酰胺凝膠平板電泳等均屬于平面色譜范圍，但由于電泳的驅(qū)動(dòng)力來源、儀器設(shè)備及測(cè)定對(duì)象與薄層色譜法及紙色譜法有較大差別，故本章不予介紹。平面色譜法的分類02類型薄層色譜法第一節(jié)021.能說出薄層色譜的常用分離參數(shù)。2.能選擇薄層色譜的分離條件。3.能說出薄層色譜的儀器和材料。4.能說出薄層板制備、點(diǎn)樣、展開和顯色檢視等操作要點(diǎn)。學(xué)習(xí)目標(biāo)薄層色譜法是指將固定相均勻平鋪在表面光潔的玻璃、塑料或金屬板上形成薄層，在此薄層上進(jìn)行色譜分離的方法。鋪好固定相層的平板稱薄層板或薄板。按分離原理來分類，薄層色譜法也可分為吸附薄層法、分配薄層法、分子排阻薄層法等。本節(jié)主要介紹吸附薄層色譜分離檢測(cè)技術(shù)。薄層色譜法分離原理01薄層色譜是一種開放性色譜。將混合組分樣品溶液點(diǎn)在薄層板一端的起點(diǎn)線上，點(diǎn)樣處稱原點(diǎn)，在密閉容器中用適宜的流動(dòng)相（薄層色譜法中又稱為展開劑）展開，因吸附劑對(duì)不同組分的吸附能力不同，展開劑對(duì)不同組分的解吸能力也不完全相同，造成各組分在薄層板上移動(dòng)的速度有快有慢，經(jīng)過一段時(shí)間展開后，不同的組分彼此分開，最終形成相互分離的斑點(diǎn)。

在薄層色譜法中，一般采用定時(shí)展開，即觀測(cè)在同一段時(shí)間內(nèi)組分與展開劑遷移的距離。組分遷移的距離與展開劑遷移的距離之比稱為比移值，其計(jì)算公式為：當(dāng)色譜條件一定，組分的Rf為常數(shù)，是薄層色譜法的基本定性參數(shù)，其值應(yīng)在0.2~0.8。樣品中各組分Rf的值相差越大，表示分離得越開。薄層色譜參數(shù)021.比移值由于影響Rf值的因素很多，要在不同實(shí)驗(yàn)室，不同實(shí)驗(yàn)者間進(jìn)行同一組分的Rf值比較是很困難且不準(zhǔn)確的，所以，常采用相對(duì)比移值(Rr)作為定性參數(shù)。Rr是指被測(cè)組分i的比移值Rf(i)與參照組分s的比移值Rf(s)之比，其計(jì)算關(guān)系為：式中，li、ls分別為被測(cè)組分i和參照組分s的展開距離；l0為展開劑的展開距離。薄層色譜參數(shù)022.相對(duì)比移值分離度（R）是衡量薄層色譜分離效果的重要指標(biāo)，是指相鄰兩斑點(diǎn)中心至原點(diǎn)的距離之差與兩斑點(diǎn)平均徑向?qū)挾龋◤较驅(qū)挾仁侵赴唿c(diǎn)沿展開方向的寬度）的比值，其計(jì)算式為：式中，l1、l2分別為兩斑點(diǎn)中心至原點(diǎn)的距離；W1、W2分別為兩斑點(diǎn)的徑向?qū)挾?。R>1.0時(shí)，相鄰兩斑點(diǎn)完全分開。薄層色譜參數(shù)023.分離度吸附劑顆粒的大小對(duì)薄層色譜展開速度、Rf值和分離效果都有影響。顆粒大，總表面積小，吸附量低，展開速度快，展開后斑點(diǎn)較寬，分離效果差；若顆粒太小，則展開速度太慢。因此，一般選用顆粒的粒徑為10~40μm的吸附劑。最常用吸附劑：硅膠H、硅膠G、硅膠GF254、硅膠HF254等。硅膠H是不含黏合劑的硅膠；硅膠G是混合有煅石膏的硅膠；硅膠GF254是指混有煅石膏和無機(jī)熒光劑的硅膠，在254nm紫外光處呈現(xiàn)黃綠色熒光背景。用含有熒光劑的吸附劑制成的熒光薄層板可用于本身不發(fā)光且不易顯色物質(zhì)的研究。儀器與材料031.吸附劑吸附劑的載板是指表面光滑、平整清潔的玻璃板、塑料膜和金屬箔。最常用的是玻璃板，規(guī)格有5cm×20cm、10cm×10cm、10cm×15cm或10cm×20cm等，厚度一般為2mm。在使用前必須用清潔劑或鉻酸洗液浸泡洗滌，用清水充分清洗，再用蒸餾水或去離子水沖洗，洗凈后玻璃板表面應(yīng)不附水珠，晾干備用。儀器與材料032.載板薄層色譜點(diǎn)樣方式有手動(dòng)、自動(dòng)兩種方式。手動(dòng)點(diǎn)樣時(shí)一般采用定量毛細(xì)管或微量注射器，自動(dòng)點(diǎn)樣采用自動(dòng)點(diǎn)樣儀。儀器與材料033.點(diǎn)樣器定量毛細(xì)管平口微量注射器全自動(dòng)點(diǎn)樣儀應(yīng)使用適合薄層板大小的平底或雙槽薄層色譜專用展開缸，并配有嚴(yán)密的蓋子，展開缸底部應(yīng)平整光滑，側(cè)面應(yīng)便于觀察。常用雙底槽展開缸，水平展開時(shí)使用專用水平展開槽。儀器與材料034.展開容器雙槽薄層色譜專用展開缸顯色劑分通用型和專屬型。通用型顯色劑能與多數(shù)有機(jī)化合物反應(yīng)，顯示相同的顏色斑點(diǎn)；專屬型顯色劑對(duì)含有特定官能團(tuán)的化合物起反應(yīng)，顯示特定的顏色斑點(diǎn)。常見顯色劑見表8-1。儀器與材料035.顯色劑應(yīng)使用適合薄層板大小的平底或雙槽薄層色譜專用顯色方式有噴霧、浸漬和蒸汽熏蒸三種，各有相應(yīng)的顯色裝置。噴霧顯色：使用玻璃噴霧瓶或?qū)Ｓ玫膰婌F器，要求用壓縮氣體使顯色劑呈均勻細(xì)霧狀噴出；浸漬顯色：可用適宜玻璃容器或?qū)Ｓ谜归_槽（展開缸）代替；蒸汽熏蒸顯色：可用雙槽展開缸或適宜大小的干燥器代替。儀器與材料036.顯色裝置顯色噴霧瓶檢視裝置一般是裝有可見光或紫外光(254nm及365nm)光源及相應(yīng)的濾光片的暗箱，可附加攝像設(shè)備供拍攝色譜圖用，暗箱內(nèi)光源應(yīng)有足夠的光照度或用薄層色譜掃描儀。常用的是帶有黑布罩的三用紫外分析儀。儀器與材料037.檢視裝置三用紫外分析儀(1)自制薄層板自制薄層板一般可分為無黏合劑和含黏合劑兩種。無黏合劑薄層板是將固定相直接涂布于玻璃板上；含黏合劑薄層板是在固定相中加入一定量的黏合劑，一般常用10%~15%煅石膏(CaSO4·2H2O在140℃加熱4小時(shí)）或用0.2%~0.5%羧甲基纖維素鈉水溶液。薄層涂布時(shí)，將1份固定相和3份水（或羧甲基纖維素鈉水溶液）在研缽中沿同一方向研磨混勻，去除表面的氣泡后，置玻璃板上涂布均勻，或倒入涂布器（如圖）中，在玻璃板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（涂層厚度為0.2~0.3mm),取涂好的薄層板，置水平臺(tái)上于室溫下晾干后，110℃活化30分鐘，立即置于有干燥劑的干燥器中備用。薄層色譜操作技術(shù)041.薄層板制備(2)市售薄層板市售薄層板包括硅膠薄層板、聚酰胺薄膜和鋁基薄層板等，分為普通薄層板和高效薄層板。高效薄層板固定相粒徑為5~7μm。薄層板臨用前一般應(yīng)110℃活化30分鐘（聚酰胺薄膜不需活化）。薄層色譜操作技術(shù)041.薄層板制備硅膠類薄層板在適宜的溫度和濕度條件下，用微量毛細(xì)管或自動(dòng)點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，一般為圓點(diǎn)狀或窄細(xì)的條帶狀。點(diǎn)樣基線距底邊10~15mm（高效薄層板一般為8~10mm）；圓點(diǎn)狀直徑一般不大于4mm（高效薄層板一般不大于2mm）；條帶狀寬度一般為5~10mm（高效薄層板一般為4~8mm）；點(diǎn)間（條帶間）距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況而定，以相鄰斑點(diǎn)互不干擾為宜一般不小于8mm（高效薄層板一般不小于5mm)；點(diǎn)樣量最好在10μL以下（高效薄層板在5μL以下）。每次點(diǎn)樣后，使其自然干燥或用電吹風(fēng)機(jī)促其迅速干燥，在空氣中點(diǎn)樣以不超過10分鐘為宜，只有干燥后，才能點(diǎn)第二次。接觸點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)注意勿損傷薄層表面，不得出現(xiàn)凹點(diǎn)，不可刺出空洞。薄層色譜操作技術(shù)042.點(diǎn)樣（1）展開要求展開缸預(yù)先用展開劑進(jìn)行飽和處理可避免邊緣效應(yīng)；將點(diǎn)好樣的薄層板浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5~1cm（切勿將樣點(diǎn)浸入展開劑中），密封頂蓋。待展開至規(guī)定的距離（如20cm長(zhǎng)的薄層板，上行距離一般為8~15cm,高效薄層板上行距離為5~8cm),取出薄層板，在前沿處做好標(biāo)記，晾干，待檢測(cè)。薄層色譜操作技術(shù)043.展開（2）展開方式薄層板在展開劑中展開的方式有上行、近水平、雙向和多次展開等。上行展開：是目前薄層色譜法中最常用的一種展開方式。將點(diǎn)好樣的薄層板放入盛有展開劑的直立型色譜缸中，斜靠于色譜缸一邊壁上，展開劑沿下端借毛細(xì)管作用緩慢上升。該方式適合于含黏合劑的硬板的展開。近水平展開：適合于不含黏合劑薄層板的展開。在長(zhǎng)方形色譜缸內(nèi)，將點(diǎn)好樣的薄板下端浸入展開劑約0.5cm（樣品原點(diǎn)不能浸入展開劑中）。把薄板上端墊高，使薄板與水平成15°~30°,展開劑借助毛細(xì)管作用自下而上上升。薄層色譜操作技術(shù)043.展開上行展開示意圖近水平展開示意圖（2）展開方式雙向展開：即先向一個(gè)方向展開，取出晾干后，將薄層板轉(zhuǎn)動(dòng)90°,再用原展開劑或另一種展開劑進(jìn)行展開。常用于組分較多，且各組分性質(zhì)比較接近的難分離混合物的分離。多次展開：即取經(jīng)展開一次后的薄層板讓溶劑揮干，再用同一展開劑或改用新的展開劑按同法進(jìn)行多次展開，以達(dá)到更好的分離效果。薄層色譜操作技術(shù)043.展開有色物質(zhì)斑點(diǎn)可在日光下直接檢視，無色物質(zhì)斑點(diǎn)可用熒光或化學(xué)方法檢視。（1）熒光檢出法對(duì)無色物質(zhì)可在紫外光燈（254nm或365nm）下，觀察薄板上有無暗斑或熒光斑點(diǎn)，并記錄其顏色、位置及強(qiáng)弱。（2）化學(xué)檢出法利用化學(xué)試劑（顯色劑）與被測(cè)物質(zhì)反應(yīng)，使斑點(diǎn)產(chǎn)生顏色而定位。顯色方法可采用噴霧法、蒸汽熏蒸法或浸漬法。薄層色譜操作技術(shù)044.檢視《中國(guó)藥典（2020年版）》要求采用薄層色譜法進(jìn)行樣品定性、定量分析前，首先對(duì)色譜條件進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，即用樣品和對(duì)照物對(duì)色譜條件進(jìn)行試驗(yàn)和調(diào)整，應(yīng)達(dá)到規(guī)定的檢出限、比移值、分離效能以及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。檢出限：檢出限指限量檢查或雜質(zhì)檢查時(shí)，樣品溶液中被測(cè)物質(zhì)能被檢出的最低濃度或量。一般采用已知濃度的樣品溶液或?qū)φ諛?biāo)準(zhǔn)溶液，與稀釋若干倍的自身對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)溶液在規(guī)定的色譜條件下，在同一薄層板上點(diǎn)樣、展開、檢視，能顯示清晰可辨斑點(diǎn)的自身稀釋對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度或量即為檢出限。比移值：除有特殊規(guī)定外，Rf值應(yīng)在0.2~0.8為宜。分離效能：分離度一般應(yīng)大于1.0。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差：應(yīng)不大于5.0%薄層色譜檢測(cè)技術(shù)051.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用同濃度的樣品與對(duì)照品制備樣品溶液和對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)溶液，在同一薄層板上點(diǎn)樣、展開與檢視，樣品色譜圖中所顯斑點(diǎn)（或主斑點(diǎn)）的顏色或熒光、位置（用Rf表示）應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖的主斑點(diǎn)一致，而且主斑點(diǎn)的大小與顏色的深淺也應(yīng)大致相同，或采用樣品溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液等體積混合，應(yīng)顯示單一、緊密的斑點(diǎn)。也可選用與樣品化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的藥物對(duì)照品與樣品的主斑點(diǎn)比較，兩者Rf值應(yīng)不同，或?qū)⑸鲜鰞煞N溶液等體積混合，應(yīng)顯示兩個(gè)清晰分離的斑點(diǎn)。薄層色譜檢測(cè)技術(shù)052.鑒別化學(xué)藥品雜質(zhì)檢查可采用雜質(zhì)對(duì)照品法、樣品溶液自身稀釋對(duì)照法或雜質(zhì)對(duì)照品法與樣品溶液自身稀釋對(duì)照法并用。樣品溶液除主斑點(diǎn)外的其他斑點(diǎn)應(yīng)與相應(yīng)的雜質(zhì)對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)溶液或系列濃度雜質(zhì)對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)溶液的主斑點(diǎn)比較，或與樣品溶液的自身稀釋對(duì)照溶液或系列濃度自身稀釋對(duì)照溶液的相應(yīng)主斑點(diǎn)比較，不得更深。薄層色譜檢測(cè)技術(shù)053.雜質(zhì)檢查常用的定量方法有目視比色法、斑點(diǎn)洗脫法和薄層掃描法。薄層色譜法定量檢測(cè)時(shí)，準(zhǔn)確性較差，目前已很少使用。（1）目視比色法將一系列已知濃度的對(duì)照品溶液與樣品溶液點(diǎn)在同一薄層板上，展開并顯色后，以目視法直接比較樣品斑點(diǎn)與對(duì)照品斑點(diǎn)的顏色深度和面積大小，求出被測(cè)組分的近似含量。作為半定量的分析方法，精密度為±10%。薄層色譜檢測(cè)技術(shù)054.定量方法（2）斑點(diǎn)洗脫法將樣品液以線狀點(diǎn)在薄板的起始線上，展開后，用一塊稍窄一點(diǎn)的玻璃板蓋住薄板的中間，用定位方法定位出薄板兩邊斑點(diǎn)，拿開玻璃板將待測(cè)組分斑點(diǎn)中間條狀部分的吸附劑定量取下（如采用刀片刮下或用捕集器收集），再用合適的溶劑將待測(cè)組分定量洗脫，然后按照比色法或分光光度法測(cè)定其含量。但本法回收率往往偏低，其主要原因是樣品在吸附劑上不易完全洗脫。薄層色譜檢測(cè)技術(shù)054.定量方法斑點(diǎn)定位及捕集方法示意圖（3）薄層掃描法薄層掃描法指用一定波長(zhǎng)的光照射在經(jīng)薄層層析后的薄層板上，對(duì)具有吸收或能產(chǎn)生熒光的層析斑點(diǎn)進(jìn)行掃描，用反射法或透射法測(cè)定吸收的強(qiáng)度，以檢測(cè)層析譜。薄層色譜檢測(cè)技術(shù)054.定量方法實(shí)訓(xùn)十四維生素C注射液的薄層鑒別第一節(jié)031.能說出薄層色譜法鑒別原理和方法。2.能完成薄層板制備、點(diǎn)樣、顯色和檢視等操作技術(shù)。學(xué)習(xí)目標(biāo)１.器材玻璃板(10cm×20cm),研缽，10μL定量毛細(xì)管或平口微量注射器，紫外分析儀，雙槽底展開缸，電子天平，托盤天平，燒杯(250mL),干燥器，量筒(100mL、20mL、10mL),容量瓶(100mL、10mL),鉛筆，直尺。２.試劑與試藥維生素C對(duì)照品，乙酸乙酯，乙醇，純化水，羧甲基纖維素鈉(CMC-Na),硅膠GF254,均為分析純；維生素C注射液（市售）。實(shí)訓(xùn)準(zhǔn)備021.硅膠薄層板鋪制稱取羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）0.75g，置于燒杯中，加水100mL，加熱使CMC-Na溶解，放置一周，待澄清備用。取上述CMC-Na上清液30mL（或適量）置研缽中，稱取10g硅膠GF254,分次加入研缽中，在研缽中按同一方向研磨混合，調(diào)成均勻糊狀物，除去表面的氣泡。取糊狀物適量放在清潔的玻璃板上，輕輕振動(dòng)玻璃板，使硅膠均勻地流布于整塊玻璃板上（厚度0.2~0.3mm），或倒入涂布器中，在玻璃板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布，將涂布好的薄層板置水平臺(tái)上，室溫下晾干。03實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟2.薄層板活化將晾干的玻璃板置于烘箱中，110℃活化30分鐘，取出后置于有干燥劑的干燥器中備用。薄層板使用前應(yīng)檢查其均勻度，表面應(yīng)均勻、平整、光滑，無麻點(diǎn)、無氣泡、無破損、無污染。3.溶液制備(1)對(duì)照溶液的配制。取維生素C對(duì)照品適量，加水溶解并稀釋制成每1mL中約含1mg的溶液。(2)樣品溶液的配制。取供試品適量，用水稀釋制成每1mL中約含維生素C1mg的溶液。03實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟4.點(diǎn)樣在距薄層板底邊2.0cm處，用鉛筆輕輕劃一起始線，并將其分為三等份。用微量注射器（或毛細(xì)管）分別吸取對(duì)照液及樣品液各5μL,分別點(diǎn)于同一薄層板的兩個(gè)等份點(diǎn)上，邊點(diǎn)邊用洗耳球吹干，樣點(diǎn)為圓點(diǎn)，直徑2~3mm,位置應(yīng)正確、集中。點(diǎn)樣時(shí)不能損傷薄層板表面。03實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟5.展開分別量取乙酸乙酯、乙醇和純化水適量，配成乙酸乙酯－乙醇－純化水（5∶4∶1）展開劑置于雙槽底展開缸中底部一側(cè)槽內(nèi)（展開劑只需滿足薄層板浸入0.3~0.5cm的用量即可），把點(diǎn)好樣的薄層板置于展開缸底部另一側(cè)槽內(nèi)，密封頂蓋（否則溶劑揮發(fā)，改變展開劑比例，影響分離效果），飽和15分鐘后，傾斜展開缸，展開劑進(jìn)入薄層板一側(cè)，使點(diǎn)有樣品的一端浸入展開劑（點(diǎn)樣點(diǎn)不能浸入展開劑中），展開。待展開劑移行約12cm，取出薄層板，立即用鉛筆劃出溶劑前沿，將薄層板置于通風(fēng)櫥中晾干。03實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟6.檢測(cè)待展開劑揮散后，用紫外分析儀在254nm下觀察，標(biāo)出各斑點(diǎn)的位置、外形。

7.結(jié)果判定供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的位置和顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。03實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟03實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟8.數(shù)據(jù)處理與結(jié)果9.注意事項(xiàng)展開缸應(yīng)預(yù)先用展開劑飽和。點(diǎn)樣后，應(yīng)待溶劑揮發(fā)完，再放入展開室中展開。展開劑不可浸過樣點(diǎn)。CMC-Na溶液加熱以后不能再兌入冷水，否則，幾天以后就會(huì)變綠、起霉。放置時(shí)間太長(zhǎng)的CMC-Na溶液可能會(huì)發(fā)黃，而且可能有霉菌出現(xiàn)，絕對(duì)不能再使用。03實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟9.注意事項(xiàng)若用抽濾裝置直接把CMC-Na溶液濾過，則不必等沉淀后再取上清液，此方法一方面可節(jié)省CMC-Na溶液，另一方面避免倒濾過的CMC-Na溶液時(shí)下層的不溶物隨之倒出。CMC-Na是一種高分子材料，而高分子材料的溶解必然都會(huì)有一個(gè)溶脹、溶解的過程，所以配制的時(shí)候，應(yīng)該將少量稱好的CMC-Na撒在水的表面，讓其自然沉降，注意要散開平鋪，這樣能夠充分浸潤(rùn)，使其溶脹，之后可以置于水浴鍋內(nèi)加熱溶解；也可將其加熱溶解成所需濃度后超聲處理，再抽濾，以便快速得到上清液。03實(shí)訓(xùn)內(nèi)容與步驟實(shí)訓(xùn)測(cè)評(píng)04實(shí)訓(xùn)十五西咪替丁片的薄層鑒別第一節(jié)041.能說出薄層色譜法鑒別西咪替丁片的原理、操作技術(shù)。2.能完成片劑的樣品處理、薄層板制備、點(diǎn)樣、顯色和檢視等操作技術(shù)。01實(shí)訓(xùn)目的１.器材玻璃板(10cm×20cm),研缽，10μL定量毛細(xì)管或平口微量注射器，紫外分析儀，雙槽底展開缸，電子天平，托盤天平，燒杯(250mL),干燥器，量筒(100mL、20mL、10mL),容量瓶(100mL、10mL),鉛筆，直尺。２.試劑與試藥西咪替丁對(duì)照品，三氯甲烷，甲醇，羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)，硅膠G，均為分析純；西咪替丁片（市售）。實(shí)訓(xùn)準(zhǔn)備021.硅膠薄層板鋪制稱取羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）0.75g，置于燒杯中，加水100mL，加熱使CMC-Na溶解，放置一周，待澄清備用。取上述CMC-Na上清液30mL（或適量）置研缽中，稱取10g硅膠GF254,分次加入研缽中，在研缽中按同一方向研磨混合，調(diào)成均勻糊狀物，除去表面的氣泡。取糊狀物適量放在清潔的玻璃板上，輕輕振動(dòng)玻璃板，使硅膠均勻地流布于整塊玻璃板上（厚度0.2~0.3mm），或倒入涂布器中，在玻璃板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布，將涂布好的薄層板置水平臺(tái)上，室溫下晾干。03