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心肌肌鈣蛋白檢測對冠心病患者診斷的價值分析TOC\o"1-3"\h\u22751摘要 -3-摘要為了探究冠心病患者體內(nèi)心肌肌鈣蛋白檢測診斷冠心病的價值。選取2021年4月至2022年4月在海南西部中心醫(yī)院收治的193例冠心病患者為觀察組,按照WHOCHD診斷標(biāo)準分為心絞痛(AP)組和急性心肌梗死(AMI)組。AP組107例,其中男62例、女45例,平均(58±9)歲;AMI組86例,其中男47例、女39例,平均(61±10)歲。所有受檢者均進行血清肌鈣蛋白檢測(cTnI采用熒光免疫雙抗體夾心法;cTnT采用免疫層析分析法;CK-MB采用免疫抑制法)。結(jié)果表明:AMI組患者cTnT、cTnI、CK-MB水平與AP組、對照組相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),AP組cTnT、cTnI、CK-MB水平與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。AMI組患者的cTnT、cTnl陽性率與CK-MB陽性率相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。因此對心肌損傷cTnT、cTnI的檢測優(yōu)于CK-MB對AMI的檢測。關(guān)鍵詞冠心??;心肌肌鈣蛋白;檢測前言冠心病是一種常見病,臨床上常發(fā)生?;加性缙诠跔顒用}疾病的患者會出現(xiàn)胸痛、前部疼痛和疲勞。如果不及時治療,心力衰竭很容易發(fā)展,低血壓,包括最嚴重的休克,是對預(yù)期壽命的主要威脅。耐心。因此,早期診斷和治療患者可能會降低感染風(fēng)險[2]。在以往的研究中,經(jīng)常使用心電圖來區(qū)分診斷,但由于這些患者在發(fā)病時沒有心肌缺血的證據(jù),因此很難通過心電圖進行驗證[3]。此前,受試者發(fā)現(xiàn)了減少纖維蛋白原、D-二聚體和纖維蛋白的產(chǎn)品。由于心臟病臨床研究的深度,一些專家發(fā)現(xiàn)血小板與心臟病之間存在密切關(guān)聯(lián),對心肌肌鈣蛋白程度的評估更為準確。對冠心病患者冠心病預(yù)后的影響[4-5]。肌鈣蛋白水平升高提示心肌梗塞,見于急性心肌梗塞、不穩(wěn)定型心絞痛、肺梗塞、心力衰竭休克和其他引起心肌損傷的疾病。數(shù)值越高,傷害范圍越大。在急性心肌梗死患者中,3-6小時后開始釋放,10-24小時達到峰值。一些高水平的腎功能也可能出現(xiàn)在功能失調(diào)的患者身上[6]。肌鈣蛋白升高結(jié)合缺血證據(jù)有助于I型心肌梗死的早期診斷和治療。了解肌鈣蛋白升高的變化規(guī)律有助于肌鈣蛋白升高的鑒別診斷。cTnI過性升高,包括劇烈運動引起的一過性心肌損傷、心動過速、急性肺栓塞,可在1-2天內(nèi)恢復(fù)正常。心力衰竭引起的cTnI升高是長期升高的,這兩者都是心肌梗塞的特征。從1987年國外報道外周血檢測肌鈣蛋白診斷心肌梗死以來,10年左右的時間內(nèi)肌鈣蛋白逐漸取代了肌酸激酶同工酶(CK-MB)成為心肌梗死生化標(biāo)志物的金指標(biāo),肌鈣蛋白在急診胸痛的篩選、診斷和判斷急性心肌梗死預(yù)后中極具重要意義,其優(yōu)點體現(xiàn)在以下3點:高度特異性。心肌肌鈣蛋白基本只在心肌表達,升高即代表心肌損傷,比CK-MB更具心肌特異性。較小的分子量和更長的持續(xù)時間。當(dāng)心肌受損時,更易從心肌細胞彌散出來,能較早被檢測到,同時,持續(xù)時間長的優(yōu)點使得更多新近發(fā)生的心肌梗死能夠不被遺漏[7]。濃度與損傷程度的高度相關(guān)性。不同的濃度反映了不同程度的心肌壞死,其動態(tài)檢測對于判斷預(yù)后非常有幫助。[8]另外,值得一提的是在腎功能不全時,因肌鈣蛋白降解小片段的血漿清除下降,使得部分無心肌缺血患者亦出現(xiàn)升高,對于腎功能不全患者判斷上需謹慎[9]。1儀器設(shè)備與材料1.1實驗器材基蛋-GP1600,西門子XPT自動生化儀,臺式低速離心機,一次性止血帶,一次性靜脈采血針,醫(yī)用棉簽,醫(yī)用酒精,醫(yī)用碘伏,一次性采血墊,5mL促凝劑采血管,利器盒,醫(yī)療廢物桶,記號筆,試管架。1.2試劑cTnI檢測試劑條(包裝內(nèi)含有檢測試劑條一組,對應(yīng)試劑一瓶,裝載于機器后使用);cTnT檢測試劑條(包裝內(nèi)含有檢測試劑條一根、膠頭滴管一根,對應(yīng)試劑一瓶,包裝背面有檢測方法及如何查看結(jié)果);夸克CK-MB檢測試劑(包裝內(nèi)有R1、R2兩種試劑,一起裝載上機后使用)。1.3研究對象2021年4月至2022年4月在海南西部中心醫(yī)院確診并住院治療的冠心病患者193例,按照WHOCHD診斷標(biāo)準分為心絞痛(AP)組和急性心肌梗死(AMI)組。AP組107例,其中男62例、女45例,平均(58±9)歲;AMI組86例,其中男47例、女39例,平均(61±10)歲。同時隨機選取本院健康體檢者90例作為對照組,其中男41例、女49例,平均(43.28±8.27)歲。各組研究對象在性別、年齡等一般資料上述料的比較方面無統(tǒng)計學(xué)意義,具有可比性(P<0.05)。實驗人員均為清晨空腹采集血樣。2檢測原理及方法2.1檢測原理2.1.1心肌肌鈣蛋白I(cTnI)檢測原理本實驗采用熒光免疫雙抗體夾心法定量檢測人血中肌鈣蛋白的含量。樣本加入檢測卡后,與檢測卡上熒光標(biāo)記的cTnI單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合,形成熒光標(biāo)記抗體—抗原復(fù)合物,該復(fù)合物隨層析作用沿著試紙條上硝酸纖維素膜前移,分別被包被在硝酸纖維素膜上檢測區(qū)的cTnI單克隆抗體Ⅱ、Ⅲ和質(zhì)控區(qū)兔抗鼠免疫球蛋白G抗體捕獲,形成熒光標(biāo)記的雙抗體夾心復(fù)合物,應(yīng)用高度特異性的抗原抗體反應(yīng)及熒光免疫層析技術(shù),定量檢測人血中的cTnI含量。2.1.2心肌肌鈣蛋白T(cTnT)檢測原理本實驗采用免疫色譜法進行檢測。最初沒有將特異性抗體轉(zhuǎn)移穿過硝酸纖維素膜區(qū)域。當(dāng)干纖維素薄膜的另一端浸入試樣中時,試樣在涂層的作用下沿薄膜向前移動。當(dāng)轉(zhuǎn)移到抗體不動的部位時,樣品中相應(yīng)的抗原與抗體強烈結(jié)合,該部位有免疫膠體染料。2.1.3肌酸激酶同工酶(CK-MB)檢測原理本實驗采用免疫抑制方法。添加到試劑中的抑制CK-M相的抗體可以抑制CK-M的活性而不影響CK-B相的活性。得到的結(jié)果X2得到了CK-MB的性能。在反應(yīng)過程中,通過測量輸入在340nm處的轉(zhuǎn)化率來計算CK-MB的活性,轉(zhuǎn)化率(A/min)對應(yīng)于模型中CK-MB的操作。2.2檢測方法2.2.1標(biāo)本采集與處理采集患者于坐立位時的肘部靜脈血,用5mL的促凝劑采血管采取血液3~4mL,待其自然凝集后,放入低速離心機4000r/min離心機離心5min,得到無溶血的新鮮血清備用(不自然凝集的血清離心時可能會出現(xiàn)凝塊影響檢測)。并對其根據(jù)WHOCHD診斷標(biāo)準將血清分為心絞痛(AP)組和心肌梗死(AMI)組還有對照組。若當(dāng)日無法進行檢測,則應(yīng)放入4-8℃的冰箱進行保存。2.2.2上機操作將患者條碼信息錄入瑞美實驗室管理系統(tǒng),并編號標(biāo)記。cTnI的測定采用基蛋1600熒光免疫定量分析儀,將樣本開蓋后放入樣本架上并送入儀器進行檢測,測得樣本中待測物的含量,數(shù)據(jù)系統(tǒng)自動導(dǎo)出。cTnT的測定采用檢測試劑條進行檢測,測得樣本中是否含有該物質(zhì),手動輸入數(shù)據(jù)。CK-MB的測定采用西門子XPT,將樣本開蓋后放入樣本架上并送入儀器進行檢測,測得樣本中待測物的含量,數(shù)據(jù)系統(tǒng)自動導(dǎo)出。2.2.3cTnI檢測操作方法材料準備:cTnI檢測試劑盒、cTnI檢測配套試劑、檢測血清以及質(zhì)控品。樣品預(yù)處理:低速離心機樣本離心結(jié)束后可直接上機,對于低溫保存的標(biāo)本需要平衡至室溫后再進行檢測。開機預(yù)熱:基蛋GP1600開機初始化,開機時間大約一分鐘。檢測前處理:清洗管路,對管路系統(tǒng)進行大量清洗填充,確保加樣準確性。放入質(zhì)控品,質(zhì)控過關(guān)即可開始檢測血清。開始檢測:將血清編號脫蓋并將樣本架勻速移進樣本倉中,觸摸按鍵“1”-“6”進入對應(yīng)的樣本架編輯界面。編輯測試項目、樣本檢測類型以及測試病人信息,編輯完成之后點擊“添加”回到儀器主界面,點擊開始進行檢測結(jié)果觀察:自動傳輸,如未自動傳輸則從儀器菜單區(qū)中的“結(jié)果查詢”可以按照病人姓名、樣本ID、條形碼、日期進行結(jié)果查詢。以及編輯、打印、刪除、上傳結(jié)果。2.2.4cTnI檢測注意事項(1)檢測結(jié)束后的樣本應(yīng)重新蓋回蓋子,防止交叉污染。并統(tǒng)一回收至專門處理的位置,以便復(fù)查結(jié)果及統(tǒng)一處理。如發(fā)生傾倒或者濺出部分樣本,則應(yīng)進行健全、嚴格的消毒清理步驟。(2)設(shè)置檢測卡位置及檢測試劑位置時必須嚴格按照步驟執(zhí)行,對應(yīng)位置放置對應(yīng)試劑,否則可能導(dǎo)致測試錯誤結(jié)果無效。(3)試劑盒需要在適宜的條件保存,且在試驗開始前需要確定其是否處于有效期內(nèi),避免使用過期試劑影響檢驗結(jié)果。(4)檢測前應(yīng)確認血清中是否有凝塊。凝塊會導(dǎo)致血清吸取失敗以及造成針頭堵塞,影響檢測。如遇見有凝塊的血清則應(yīng)用膠頭滴管混勻以后再以4000rpm離心五分鐘,再確認是否有凝塊。2.2.5cTnT檢測操作方法材料準備:cTnT檢測試劑條、cTnT檢測稀釋液、膠頭滴管。樣品預(yù)處理:編號離心結(jié)束后的標(biāo)本可直接進行測試,對于無法當(dāng)日測試標(biāo)本需第二天平衡至室溫后方可檢測。加樣:取出檢測試紙條,在加樣端的加樣孔中滴加約30μL血清,并滴加兩滴稀釋用試劑,待樣品因毛細作用吸收至檢測區(qū)時開始計時,等待檢測結(jié)果。觀察:十分鐘后可觀察結(jié)果,可用包裝帶的說明書判定檢測結(jié)果以及范圍。2.2.6cTnT檢測注意事項(1)吸取血清的滴管不可混用,以免造成交叉污染。(2)檢測卡拆封后應(yīng)盡快檢測,避免放置于空氣中的時間過長導(dǎo)致受潮。(3)檢測卡可在室溫下密封保存,謹防受潮,低溫下保存的檢測卡應(yīng)平衡至室溫方可使用。(4)處理樣本時不可隨意放置,應(yīng)統(tǒng)一放置在指定位置,以防造成污染。(5)對于不確定的結(jié)果,可再進行一次檢測,兩次測試結(jié)果對比,確保其準確性。2.2.7CK-MB檢測操作方法(1)材料準備:CK-MB檢測試劑(R1、R2兩種)、離心常溫下血清。(2)開機:檢查并清潔試劑針、樣品針,確保針旋轉(zhuǎn)半徑內(nèi)無障礙物;檢查燈泡冷卻液、各種清潔液、生理鹽水等是否足量;打開水機;開啟主控計算機,登錄;開啟儀器電源,儀器與計算機進入聯(lián)機狀態(tài);在控制面板上點擊“系統(tǒng)操作”,“初始化”儀器復(fù)位;開機清洗。(3)裝載試劑與質(zhì)控:將CK-MB試劑平衡至室溫后,打開試劑裝載蓋,裝載試劑并重新探測試劑余量。探測完畢后開始質(zhì)控檢測,檢測過關(guān)則開始正式檢測標(biāo)本。(4)檢測標(biāo)本:將編號完畢的標(biāo)本掃碼輸單,隨后裝載于儀器專用檢測架,儀器掃描完畢后會自動根據(jù)當(dāng)前標(biāo)本所選項目進行檢測。(5)結(jié)果查看及復(fù)查:查看進程可點擊“樣本”,“樣本托盤”查看。查看結(jié)果點擊“試驗結(jié)果”;復(fù)查則是點擊“試驗結(jié)果”,在需要復(fù)查的項目上打“√”,點擊“重復(fù)”。試驗結(jié)果界面,點擊項目可以查看復(fù)查結(jié)果。(6)關(guān)機:關(guān)機前清洗:點擊“系統(tǒng)操作”,“沖洗”,“關(guān)機沖洗”,遵照提示在CTT、RTT相應(yīng)位置放置足量的清洗液和去離子水,“執(zhí)行”儀器開始進行關(guān)機清洗(約38分鐘)。從狀態(tài)欄選擇“登入”圖標(biāo),在登出確認對話框中選擇“是”,選擇“關(guān)機”,“是”,工作站關(guān)閉,即可關(guān)閉系統(tǒng)。2.2.8CK-MB檢測注意事項不可混用不同批次的試劑。離心機必須配平,否則會有安全隱患。儀器工作時盡量將儀器頂蓋蓋下,加樣可在單獨的加樣窗口完成,保持儀器清潔及安全。開始清洗儀器前請確認各清洗液是否足量,否則可能浪費清洗時間。保持儀器的清潔對儀器的正常工作非常重要。如果樣本中結(jié)果超過200U/L時,應(yīng)將樣本用生理鹽水稀釋后再進行測定,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),本產(chǎn)品最大稀釋倍數(shù)為3倍。2.3統(tǒng)計方法使用SPSS20.0統(tǒng)計軟件,對冠心病組和對照組的計量資料進行統(tǒng)計學(xué)分析,計量資料x±s表示,兩組間比較采用LSD法,三組間比較采用單因素方差分析;以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.4參考范圍各項指標(biāo)正常參考值范圍cTnT:0~0.015ng/mL,cTnI:0~0.03ng/mL,CK-MB:0~25U/L。3結(jié)果與分析各組研究對象心肌標(biāo)志物測定對比結(jié)果見表1。表1各組研究對象心肌標(biāo)志物對比(x±s)組別ncTnT(ng/mL)cTnI(ng/mL)CK-MB(U/L)Ap組1070.020±0.0070.073±0.02116.531±2.741AMI組861.950±0.06017.506±4.075163.93±19.260對照組900.003±0.0010.002±0.00112.350±4.871由表1可知,各組研究對象心肌標(biāo)志物對比AMI組患者的cTnT、cTnI、CK-MB水平明顯高于AP組和對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);AP組患者cTnT、cTnI、CK-MB水平明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。根據(jù)檢測結(jié)果,將陽性的患者按百分比列出,見表2。表2各組研究對象陽性率百分比組別cTnT(%)cTnI(%)CK-MB(%)Ap組32.7115.8934.58AMI組10010067.44由表2可知,CHD患者心肌標(biāo)志物檢測情況AP組患者cTnT、cTnI、CK-MB的陽性率分別為32.71%(35例)、15.89%(17例),34,58%(37例)、13.08%(14例),cTnT、cTnI的陽性率與CK-MB陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);AMI組患者cTnT、cTnI、CK-MB陽性率分別為100%(86例),100%(86例)、67.44%(58例),cTnT、cTnI陽性率明顯高于CK-MB陽性率,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。AMI組癥狀癥狀的變化AMI組患者入院后接受標(biāo)準治療,并進行了幾種心肌癥狀的檢測。人體內(nèi)CTnT指標(biāo)水平一般保持在0.015ng/ml以內(nèi),而cTnI水平一般在0.03ng/ml以內(nèi)。心臟病發(fā)作后,心肌缺血缺氧引起心肌梗塞,信號水平越高,信號水平越高。使用每種煅燒指標(biāo)的水平評估疾病。本研究結(jié)果顯示,對照組心肌肌鈣蛋白水平明顯高于對照組(P<0.05)。結(jié)果表明,檢測冠狀動脈疾病患者的心肌肌鈣蛋白信號標(biāo)志物,可以根據(jù)癥狀水平的變化判斷患者疾病的嚴重程度。4總結(jié)與討論冠心病發(fā)病機制復(fù)雜,多與慢性病、肥胖、生活條件差等因素有關(guān)。心電圖目前用于檢測該疾病。但由于該病在發(fā)病時沒有典型的臨床癥狀,而且該技術(shù)只能在發(fā)病時檢測患者心肌的異常情況,因此比較簡單。當(dāng)診斷丟失時,一些患者無法及時采取行動。[10]CTnT、cTnI和CK-MB是心臟病的診斷標(biāo)志物,用于在臨床環(huán)境中檢測心臟損傷。然而,其中,cTnT、cTnI和CK-MB水平呈上升趨勢。他們的學(xué)位水平的變化。[11]冠心病會導(dǎo)致心肌細胞受損。在冠心病患者的血液中可檢測到心肌肌鈣蛋白(cTn)。血清中心肌肌鈣蛋白(cTn)升高反映了心肌細胞受損,其特異性與敏感性均高于以往常用的心肌酶譜[13-14]。健康人外周血中心肌肌鈣蛋白(cTn)水平非常低,在AMI發(fā)作期間迅速升高。因此,心肌肌鈣蛋白(cTn)是一項重要指標(biāo)。來自冠心病實驗室監(jiān)測。cTn由三個不同基因的亞基組成,即cTnT、cTnI和cTnC[15]。本研究中,冠心病患者cTnT、cTnI在入院后2-3天達到峰值,cTnT最為明顯,CK-MB在低水平基本呈直線。同時,cTnT、cTnI的陽性率明顯高于CK-MB的陽性率,說明cTn是臨床診斷冠心病的重要指標(biāo)。綜上所述,心肌肌鈣蛋白(cTn)是診斷冠心病的重要檢測指標(biāo)。參考文獻李幸旻,陳嘉喜,阮周琪.冠心病診斷中血清膽紅素,尿酸,肌鈣蛋白,B型鈉尿肽聯(lián)合檢測臨床價值分析[J].臨床檢驗雜志:電子版,2020,9(1):2.劉行超,曾桂芬,高云,等.血清肌紅蛋白、心肌肌鈣蛋白I、肌酸激酶同工酶聯(lián)合檢測在急性冠脈綜合征診斷中的應(yīng)用研究[A].粵桂瓊檢驗醫(yī)學(xué)新進展學(xué)術(shù)大會,2013.羅云杰,成守金.血小板、心肌肌鈣蛋白聯(lián)合檢測對冠心病患者臨床診治的意義[J].江西醫(yī)藥,2021,56(11):3.李春蓮
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