血漿脂蛋白及其代謝紊亂課件

第五章

血漿脂蛋白及其代謝紊亂

PlasmaLipoproteinsandItsMetabolicDisorderP100-135蚌埠醫(yī)學(xué)院生化與分子生物學(xué)教研室1教學(xué)目標(biāo)[教學(xué)時數(shù)]6學(xué)時[掌握]脂蛋白代謝紊亂（高脂血癥分型及特征），血漿脂類及脂蛋白測定方法

。[熟悉]血漿脂蛋白的化學(xué)和正常代謝，載脂蛋白的結(jié)構(gòu)與功能

。[了解]脂蛋白受體及代謝有關(guān)酶

。2

分類含量

分布

生理功能脂肪

甘油三酯

95﹪脂肪組織、血漿1.儲脂供能2.提供必需脂酸3.促脂溶性維生素吸收4.熱墊作用5.保護(hù)墊作用6.構(gòu)成血漿脂蛋白類脂糖酯、膽固醇及其酯、磷脂5﹪生物膜、神經(jīng)、血漿1.維持生物膜的結(jié)構(gòu)和功能2.膽固醇可轉(zhuǎn)變成類固醇激素、維生素、膽汁酸等3.構(gòu)成血漿脂蛋白脂類的分類、含量、分布及生理功能3

甘油三酯(triglyceride,TG)

游離膽固醇(freecholesterol,FC)

膽固醇酯（cholesterolester,CE)

總膽固醇(TC)

磷脂(phospholipid,PL)

游離脂肪酸(freefattyacid,FFA)

血脂(血漿脂類)

plasmalipids

糖脂(glycolipid)

4

第一節(jié)血漿脂蛋白

5一、脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu)

(一)化學(xué)組成

相同點(diǎn)：蛋白質(zhì)+脂類(TG、PL、FC+CE)

(1)蛋白質(zhì)和脂類的含量不同

依蛋白質(zhì)含量多少：HDL>LDL>VLDL>CM

依脂類含量多少：CM>VLDL>LDL>HDL

其中，各種脂類的含量又有差異

(2)蛋白質(zhì)(Apo)的種類及其含量不同(詳后)

(二)結(jié)構(gòu)特征

相同點(diǎn)：球形

表層：極性分子――親水性

Apo、PL的極性部分(PL起橋梁作用)

核心區(qū)：非極性分子(TG、CE)和PL的非極性

部分――疏水性不同點(diǎn)6

Apo與PL、FC往往“鑲嵌”而存

不同點(diǎn)：因Apo含量差異，其在表層的覆蓋

程度不同

78二、分類

(一)

超速離心法(ultracentrifugationmethod)

亦稱密度梯度法(density-gradientmethod)

依據(jù)不同脂蛋白的密度差異，在離心時漂浮速率不同而進(jìn)行分離。Sf(Svedbergfloatationrate)

90.951.0061.021.101.151.2020406080500直徑(nm)510VLDLHDL2乳糜微粒LDLHDL3CMIDLLp(a)CM殘粒各類脂蛋白顆粒的密度及體積10(二)電泳法(electrophoresismethod)

依據(jù)血漿脂蛋白分子中蛋白質(zhì)表面電荷多少的不同而分離。通?？煞殖桑?/p>

CM、β-LP、pre-β-LP、α-LP

(對應(yīng)于CM、LDL、VLDL、HDL)

?CM前1112(三)、結(jié)構(gòu)與功能

１、乳糜微粒（chylomicron,CM）物理性質(zhì)：密度：0.95g/mlSf>400直徑：80~500nm電泳時處于點(diǎn)樣點(diǎn)化學(xué)組成：載脂蛋白1－2％：ApoB48、AⅠ、CⅠ、ＣⅡ、ＣⅢ。脂類98－99％：TG85－95％、磷脂3－8％，膽固醇2－8％合成部位：小腸粘膜細(xì)胞（十二指腸、空腸）

功能：運(yùn)輸外源性TG到全身各組織13應(yīng)用：CM顆粒大，一般不致動脈粥樣硬化,但易誘發(fā)胰腺炎。近年研究表明,CM殘

粒(代謝殘骸)可被巨噬細(xì)胞表面受體所識別而攝取,因而可能與AS有關(guān)。14２、極低密度脂蛋白（verylowdensitylipoprotein,VLDL）物理性質(zhì)：密度0.95~1.006g/mlSf20~400直徑30~80nm電泳時preβ－LP位化學(xué)組成：載脂蛋白5—10％:ApoB100、C、E脂類90—95％（TG50－70％，CH10－25％PL15－20％）15合成：肝細(xì)胞功能：運(yùn)輸內(nèi)源性TG的主要形式應(yīng)用：血漿VLDL水平升高已被確認(rèn)為冠心病的危險因子。16３、低密度脂蛋白（lowdensitylipoprotein,LDL）物理性質(zhì)：密度1.006~1.063g/mlSf0－20電泳時處于β－LP化學(xué)組成：載脂蛋白20—25％:ApoB100、脂類75-80％（TG5-10%CH45-50%PL20%）合成：①在血漿中由VLDL經(jīng)過IDL轉(zhuǎn)化而來（主要）②一部分肝細(xì)胞合成（次要）17功能：攜帶膽固醇由肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)到全身血漿中應(yīng)用：LDL相對較小,易于穿過動脈內(nèi)膜，是首要的致AS性脂蛋白。已證明AS斑塊中的膽固醇主要來自循環(huán)中的LDL。

18４、高密度脂蛋白（highdensitylipoprotein,HDL）物理性質(zhì)：密度1.063－1.21g/ml，Sf0，直徑7－10nm

電泳時處位于α－LP

化學(xué)組成：載脂蛋白45－55％

(ApoAⅠ、AⅡ、D)

脂類45－55％（TG2－7％CH18－25％PL26－32％）19HDL按密度大小可分為HDL1、HDL2和HDL3。HDL1又稱為HDLc，僅在攝取高膽固醇膳食后才在血中出現(xiàn)，健康人血漿中主要含HDL2和HDL3。合成：1.一部分肝細(xì)胞合成（主要），小腸也可合成2.VLDL→HDL功能：

將肝外組織細(xì)胞表面的膽固醇攝入并酯化再轉(zhuǎn)動到肝內(nèi)的載體進(jìn)行代謝。應(yīng)用：HDL有防止動脈粥樣硬化的作用。HDL被認(rèn)為是一種抗AS的血漿脂蛋白,是冠心病的保護(hù)因子。20215、脂蛋白(a)［LP-(a)，Lipoprotein(a)］

1963年被發(fā)現(xiàn)。組成與結(jié)構(gòu)類似于LDL，但分子量、顆粒較大，電泳較慢。

脂類：TG、PL、FC、CE

組成

蛋白質(zhì)：ApoB100、Apo(a)(特色)

結(jié)構(gòu)：類似于LDL

22臨床意義：血漿LP(a)是導(dǎo)致As的獨(dú)立危險因子，

因Apo(a)與纖溶酶原具有高度同源性，在纖溶系統(tǒng)多個環(huán)節(jié)發(fā)揮作用，從而影響As的發(fā)生和發(fā)展。2350~65%8~14%12~16%4~7%6~10%90~95%2~4%2~6%~1%1~2%ApoFCPLCETGVLDLCMApoFCPLCETG~7%10~20%25%~5%~45%5~6%22~26%35~45%6~15%22~25%LDLHDLTG－richLipoproteinCh－richLipoprotein24CMVLDLLDLHDL密度＜0.950.95~1.0061.006~1.0631.063~1.210組成脂類含TG最多，80~90%含TG50~70%含膽固醇及其酯最多，40~50%含脂類50%蛋白質(zhì)最少,1%5~10%20~25%最多，約50%載脂蛋白組成apoB48、E

AⅠ、AⅡAⅣ、CⅠCⅡ、CⅢapoB100、CⅠ、CⅡCⅢ、EapoB100apoAⅠ、AⅡ血漿脂蛋白的組成特點(diǎn)25第二節(jié)載脂蛋白

(apolipoprotein,apoprotein,Apo或apo)一、載脂蛋白的蛋白組成與特征(一)定義：

載脂蛋白:脂蛋白中的蛋白質(zhì)成分，具有結(jié)合與轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)及穩(wěn)定脂蛋白結(jié)構(gòu)等功能，在脂蛋白的代謝中具有重要生理功能。26(二)、分類

Apo種類多，類--亞類—亞亞類。ApoA：ApoAI、ApoAII和ApoAIVApoB：ApoB100和ApoB48

ApoC：CI、II、IIIApoD及ApoE、Apo(a)、ApoH、ApoJ(三)、功能：穩(wěn)定脂蛋白結(jié)構(gòu)功能調(diào)節(jié)酶的活性功能識別脂蛋白受體功能

27（四）、主要載脂蛋白的組成、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及生理功能

1、ApoA族

主要有ApoAI、ApoAII和ApoAIV。（1）、ApoA-I

組成

A族中含量最多；構(gòu)成HDL的主要載

脂蛋白。

含量

在HDL2和HDL3中，其含量均超過

60%,在CM、VLDL和LDL中亦有少

量存在

來源

肝、小腸

28功能

(1)維持HDL結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定與完整

(2)激活LCAT，促進(jìn)膽固醇酯化

起作用位置為肽段III(第116~151a.a)

(3)作為HDL受體的配體，被HDL受體識別

與結(jié)合

應(yīng)用：①HDL-C與AS發(fā)生呈負(fù)相關(guān)，ApoAI

作為HDL中的主要APO可能介導(dǎo)

HDL的抗AS作用

②ApoAI降低是CHD易患因素之一

ApoAI水平與CHD的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)

29（2）、ApoAII組成：二條肽鏈，77個氨基酸，在血漿中往往以二聚體形式存在。

含量：在HDL中的含量僅次于ApoAI，約占Apo總量的15%-25%功能：參與維持HDL結(jié)構(gòu)肝脂酶的活化劑，促進(jìn)脂蛋白中TG和PL的水解LCAT的抑制劑參與識別HDL受體

30來源：肝和小腸應(yīng)用：ApoAII含量與AS及CHD的易患性呈負(fù)性相關(guān)。312、ApoB族

（1）、ApoB100

來源：肝(主要)。分子量最大的載脂蛋白。組成：單鏈糖蛋白，51ku，4536個氨基酸，其中含25個Cys殘基。硫酯鍵(-C-S-)將脂肪酸與Cys殘基連接，從而將Apo與脂類相連。功能：

構(gòu)成LDL(占其Apo的95%)

作為LDL受體的配體，識別與結(jié)合該受體

32

（2）、ApoB48

來源：小腸

特點(diǎn)：分子量為ApoB100的48%，因而得

名。生物半壽期短(血漿中5~10min)，

易分解

ApoB48不在脂蛋白之間進(jìn)行交換

功能：構(gòu)成CM(占其Apo總量的9%)，從而

與運(yùn)輸外源性TG有關(guān)

333、ApoC族

分類：目前已發(fā)現(xiàn)I、II、III等3種亞型。是目前所知載脂蛋白分子量最小的一類。

34來源：主要為肝，小腸可少量合成

功能：(1)構(gòu)成各種脂蛋白，參與維系脂蛋

白結(jié)構(gòu)

(2)作為酶的活化劑

ApoCI激活LCAT

ApoCII激活LPL

354、ApoE

來源：以肝為主；腦、腎、骨骼、腎上腺等組織

特點(diǎn)：299個氨基酸殘基，其中，Arg和Lys較

多，故為堿性蛋白；

分布：主要分布于CM、VLDL及其殘粒中。

功能：(1)作為LDL受體的配體，同ApoB100一

樣，亦可被其識別和結(jié)合；

(2)作為肝細(xì)胞CM殘粒受體的配體；

(強(qiáng)調(diào))多態(tài)性顯著，與個體血脂水平和As發(fā)生率相關(guān)。已發(fā)現(xiàn)E2、E3、E4三種異構(gòu)體和6種不同表型。

365、Apo(a)

分布：主要包含在血漿LP(a)中。LP(a)也是正常存在于血漿中的一種脂蛋白，但人群間濃度差異甚大，0~1000mg/L

來源：肝

特點(diǎn)：

(1)LP(a)的脂類部分與LDL相似,蛋白質(zhì)部

分由Apo(a)和ApoB構(gòu)成，二者之間以

二硫鍵相連

(2)Apo(a)的分子結(jié)構(gòu)與纖溶酶原相似

37

(3)由于Apo(a)具有纖溶酶原的類似結(jié)構(gòu)，故它可能與纖溶酶原受體或纖維蛋白大分子結(jié)合，從而阻止凝血塊被溶解

Apo(a)參與構(gòu)成的LP(a)攜帶膽固醇到血管內(nèi)膜沉積，從而促進(jìn)動脈粥樣硬化的形成。

(4)現(xiàn)在一般認(rèn)為，血漿LP(a)是促進(jìn)As的獨(dú)立危險因素。

38LPApoAIAIIAIVB100B48CIICIIIECETP(a)CM√

√√√√√VLDL√√√√IDL√√LDL√√HDL√√√√√√√LP(a)√載脂蛋白的分布39Apo分類生理功能AI激活LCAT,使FC酯化;參與RCTAII抑制LCAT活性AIV激活LCAT;參與RCT;輔助CII激活LPL;調(diào)節(jié)食欲B100介導(dǎo)LDL與LDL-R結(jié)合的配體B48為CM合成和分泌所必需,參與外源性脂代謝CII激活LPLCIII抑制LPL活性;抑制肝臟對HDL的攝取E作為配體與LDL受體和ApoE受體結(jié)合CETP介導(dǎo)HDL中的CE與VLDL中的TG等交換，參與RCT,40二、載脂蛋白的基因結(jié)構(gòu)及表型

基因型（genotype）：生物體所具有的特異基因結(jié)構(gòu)

表(現(xiàn))型(Phenotype)：生物體所具有的遺傳性狀。它是基因型與環(huán)境因素相互作用的產(chǎn)物。

41(一)

載脂蛋白基因結(jié)構(gòu)的共同特點(diǎn)

1．除ApoⅣ、ApoB、Apo(a)外，其余已發(fā)現(xiàn)的載脂蛋白均含有

內(nèi)含子(intron)：3個它們的相互位置大

致相同，按生理功能不同分開

外顯子(exon)：4個

42

2．有些載脂蛋白的基因往往在同一染色體上相互靠近，呈緊密連鎖狀態(tài)；

如：ApoAⅠ、CⅢ、AⅣ基因同位于11號染色體長臂2區(qū)

ApoE、CⅠ、CⅡ基因同位于19號染色體長臂3區(qū)

而有些載脂蛋白基因則單獨(dú)位于某染色體上，不與其它載脂蛋白基因連鎖。

43（二）幾種載脂蛋白的基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

1．ApoAⅠ

·基因全長1863bp，3個內(nèi)含子，4個外顯子（最長

者658bp）

·ApoAⅠ基因和ApoAⅣ基因連鎖，形成基因簇，位

于11號染色體442．ApoB

·位于2號染色體上。ApoB100基因全長

43kb，含28個內(nèi)含子和29個外顯子，

最長者達(dá)7572bp，最短者僅39bp。453．ApoE

·基因位于19號染色體，含3個內(nèi)含子，4個外

顯子

·ApoE的多態(tài)性較顯著，已發(fā)現(xiàn)3種異構(gòu)體：

ApoE2、ApoE3、ApoE4

純合子：E2/2、E3/3(野生型)、E4/4

6種表型

雜合子：E2/3、E2/4、E3/4

4．ApoC

·ApoCⅡ和ApoCⅢ基因長分別為3347bp和

3133bp，各含4個外顯子和3個內(nèi)含子。

465．Apo(a)

·基因位于6號染色體，與纖溶酶原的基因位點(diǎn)部分重疊；

該二種基因有很多相似之處。

纖溶酶原基因長525kb。含19個外顯子和18個內(nèi)含子。

·Apo(a)具有顯著多態(tài)性。至少已發(fā)現(xiàn)26個等位基因，34種異構(gòu)體。47

第三節(jié)脂蛋白受體

（LipoproteinReceptor）

一、LDL受體（LDLreceptor）

1974年首先在成纖維細(xì)胞膜上發(fā)現(xiàn)，此后證實(shí)在多種其它細(xì)胞膜上也存在。

目前已搞清人LDL受體的一級結(jié)構(gòu)和部分空間結(jié)構(gòu)

（一）LDL受體的結(jié)構(gòu)

單鏈，836個氨基酸殘基，分子量115kD。包含5個功能各異的區(qū)域。4849（二）LDL受體的分布與性質(zhì)

1．分布：廣泛存在于肝細(xì)胞、動脈壁平滑肌細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等多種組織細(xì)胞的細(xì)胞膜上。

在細(xì)胞膜上，受體相對集中于一區(qū)域，稱為“有被小窩”（coatedpit）

受體數(shù)目因細(xì)胞種類而異，從數(shù)千至數(shù)萬不等;且受細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平的反饋調(diào)節(jié)。

502．性質(zhì)

(1)化學(xué)本質(zhì)：糖蛋白

(2)親和性：其配體為ApoB100和ApoE，能與含這些載脂蛋白的脂蛋白結(jié)合，故其又被稱為ApoB-E受體。但ApoB48不是其配體。

(3)特異性：因LDL含ApoB100最多，故該受體與LDL的親和力最高，有利于LDL被吞入細(xì)胞內(nèi)進(jìn)一步代謝

(4)競爭性：其它含ApoB/E的脂蛋白可與LDL競爭該受體

51(三)LDL受體途徑（LDLreceptorpathway）

1．概念：LDL或其他含ApoB100、E的脂白如VLDL、β－VLDL均可與LDL受體結(jié)合內(nèi)吞入細(xì)胞使其獲得脂類，主要是膽固醇，這種代謝過程稱為LDL受體途徑。

注：β-VLDL為高膽固醇飲食引起的一種異常血漿脂蛋白。與正常VLDL比較：①密度范圍相似，但瓊脂糖電泳相當(dāng)于β-LP的位置；②在組成上，其核心富含CE，主要Apo為ApoE，而ApoC含量遠(yuǎn)較VLDL少

522．基本步驟（以攝入LDL為例）血漿LDL+細(xì)胞膜上LDL受體LDL-LDL受體復(fù)合物，并相繼形成“有被小窩”、被膜小泡（coatedvesicles）LDL受體與LDL解離，參加下一次循環(huán)；被膜小泡與溶酶體融合，其中LDL被降解：

Apo氨基酸

CEFFA+FC（代謝、利用）

TG甘油一酯+FFA

蛋白酶酸性酯酶53543．調(diào)節(jié)機(jī)制

主要受細(xì)胞內(nèi)FC濃度的調(diào)節(jié)。Ch的作用是：

（1）抑制HMGCoA還原酶（膽固醇合成的關(guān)鍵酶），減少細(xì)胞自身的膽固醇合成；

（2）激活A(yù)CAT（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)乙酰CoA膽固醇脂酰基轉(zhuǎn)移酶），促進(jìn)FC變成CE，便于儲存

(3)抑制LDL受體基因的表達(dá)，減少LDL受體合成，從而減少LDL的攝取，控制膽固醇的攝入

55

4．生理意義

①LDL受體途徑是血漿LDL代謝的主要通路，它既保證肝外組織對膽固醇的需要，又能保護(hù)細(xì)胞避免膽固醇過度堆積，從而維持細(xì)胞內(nèi)膽固醇濃度的動態(tài)平衡。

②與肝臟清除VLDL殘粒有關(guān)

③與肝臟清除CM殘粒有關(guān)

LDL受體不能與CM結(jié)合（CM中的ApoB48不能被LDL受體識別；少量ApoE被富量的ApoC掩蓋，不能與LDL受體接觸），但可與CM殘粒結(jié)合，后者進(jìn)入肝內(nèi)被清除。

56二、VLDL受體

（一）結(jié)構(gòu)：與LDL受體相似，均包含5個結(jié)構(gòu)域，但各結(jié)構(gòu)域的一級結(jié)構(gòu)均有差異。

（二）分布與性質(zhì)

廣泛分布于肝外組織，如心肌、骨骼肌、脂肪細(xì)胞等處；肝內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)。

與含ApoE的脂蛋白VLDL及其殘粒、β-VLDL的親和力高，而與含ApoB100多的脂蛋白LDL的親和力低。

受體數(shù)量（水平）不受細(xì)胞內(nèi)Ch濃度的負(fù)反饋調(diào)節(jié)。

57

(三)生理功能

與VLDL及其殘粒、β-VLDL等脂蛋白結(jié)合，使它們進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)降解。

(四)臨床意義：

（1）可能促進(jìn)早期As斑塊的形成，機(jī)制尚不清楚。

（2）可能與肥胖形成有關(guān)，機(jī)制不清

58三、清道夫受體（scavengerreceptor）

現(xiàn)象：LDL受體缺陷LDL受體缺乏LDL攝入障礙

但As斑塊的巨噬細(xì)胞中卻蓄積了LDL-CE，從何而來？推測另有途徑，后經(jīng)實(shí)驗證明，巨噬細(xì)胞中的LDL為乙酰化或氧化的LDL，能結(jié)合這些LDL的受體就被稱為清道夫受體（亦稱乙酰化LDL受體，氧化修飾LDL受體）。

59（一）結(jié)構(gòu)

糖蛋白，220ku。三聚體。二種亞基。

與LDL受體相反，其N-末端在膜內(nèi)側(cè)，而C-末端在膜外側(cè)，即所謂“內(nèi)翻外”（inside-out）型。已知的Ⅰ、Ⅱ型均含6個結(jié)構(gòu)域（從N-末端到C末端）。

6061（二）清道夫受體的配體

配體譜較廣，為多陰離子類化合物

1．主要配體：修飾的LDL—乙?；疞DL、氧化LDL（ox-LDL）等。這與As的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。

2．其它配體

（1）多聚次黃嘌呤核苷酸，多聚鳥苷酸

（2）多糖，如硫酸右旋糖酐

（3）某些磷脂，如絲氨酸磷脂

（4）細(xì)菌脂多糖，如內(nèi)毒素

62

（三）清道夫受體的功能

在體內(nèi)的確切功能尚不清楚。

巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞可使LDL氧化，而ox-LDL具有強(qiáng)烈致As作用。巨噬細(xì)胞可通過清道夫受體清除氧化LDL和細(xì)菌脂多糖，這可能是機(jī)體的一種自我保護(hù)機(jī)制。

63第四節(jié)脂代謝有關(guān)酶和特殊蛋白質(zhì)

一、LPL(lipoproteinlipase,脂蛋白脂肪酶)

（一）來源

脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、乳腺細(xì)胞等合成。

化學(xué)本質(zhì)：糖蛋白，60kD

性質(zhì)：能與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的多聚糖結(jié)合，肝素可促進(jìn)LPL釋放，從而提高LPL活性。

64（二）功能

1．（主要）水解CM、VLDL等脂蛋白核

心的TG

TG甘油一酯+FFA

TG水解產(chǎn)物作為能源物質(zhì),供組織細(xì)胞利用

2．分解PL，如卵磷脂（磷脂酰膽堿）、

磷脂酰乙醇胺

3．促進(jìn)脂蛋白之間PL、Apo和Ch的轉(zhuǎn)換

4．促進(jìn)CM殘粒的攝取

（三）活性的調(diào)節(jié)

ApoCⅡ為LPL必須的輔助因子，具有激

活LPL的作用。

6566（三）功能

1．主要（水解）VLDL及其殘粒、β-VLDL中的TG

2．調(diào)節(jié)脂蛋白間的膽固醇轉(zhuǎn)移，促進(jìn)HHDL3→HDL2有利于防止肝外組織過量膽固醇堆積

3．調(diào)節(jié)膽固醇從周圍組織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝，使肝內(nèi)的VLDL轉(zhuǎn)化為LDL。

67三、卵磷脂-膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(lecithin-cholesterolacyltransferase,LCAT)

(一)來源與特性

由肝合成，在血液中發(fā)揮催化作用。以游離形式或與HDL結(jié)合形式存在。糖蛋白，含416個氨基酸殘基，6.3kD。

(二)活性調(diào)節(jié)

ApoAI為最重要的激活劑。

68(三)功能

1.(主要)催化HDL中的FC→CE，CE進(jìn)入HDL核心儲存。(血液中CE均由LCAT催化生成)

卵磷脂F(xiàn)C

溶血卵磷脂CE

2.參與Ch的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)和組織中過量Ch的清除。69

四、HMGCoA還原酶(HMGCoAreductase)

(一)分布與特性

凡能合成膽固醇的組織細(xì)胞均有該酶存在。含量較多的場所是：肝、皮膚、腎上腺、性腺等。

70(二)功能

該酶為膽固醇合成的限速酶。

細(xì)胞內(nèi)的ch有兩個來源：

內(nèi)源細(xì)胞自身合成。若ch↑，HMGCoA還原酶活性↓(負(fù)反饋)。

外源從血漿中攝取。

細(xì)胞內(nèi)的ch可作為HMGCoA還原酶的抑制劑,降低其活性。

71五、膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白

(cholesterolestertransferprotein,CETP),亦稱為脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(LTP)

(一)來源與性質(zhì)

由肝、小腸、腎上腺、脂肪組織和巨噬細(xì)胞等合成

疏水性蛋白質(zhì)，74kD

(二)功能：促進(jìn)脂蛋白之間脂類的交換特別是CE的交換和平衡，參與血漿膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)。

膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)：肝外→肝72(三)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)(reversecholesteroltransport,RCT)1、定義：周圍組織細(xì)胞膜的游離膽固醇與HDL結(jié)合后，被LCAT酯化成膽固醇酯，移入HDL核心，并可通過CETP轉(zhuǎn)移給VLDL、LDL，再被肝臟LDL及VLDL受體攝入肝細(xì)胞，至此，完成膽固醇從周圍末梢組織細(xì)胞經(jīng)HDL轉(zhuǎn)運(yùn)到肝細(xì)胞的過程，稱為膽固醇的逆轉(zhuǎn)運(yùn)。2、轉(zhuǎn)運(yùn)過程：7374LiverLDL-R

LCATCETPFCCECETGN-HDLSR-BILDLVLDLIDLM-HDLCellNascentHDLMatureHDL2、轉(zhuǎn)運(yùn)過程：75(1)肝外組織細(xì)胞的FC結(jié)合至HDL上

(2)在HDL中，F(xiàn)CCE

HDL核心(儲存)

(3)CE

轉(zhuǎn)移至VLDL、LDL上

(4)肝細(xì)胞通過相應(yīng)受體攝取VLDL、LDL

上述作用是由CETP、LCAT和HDL等協(xié)同完成的

若缺乏CETP，則HDL中的CE不能運(yùn)出，導(dǎo)致血漿HDL-c↑

76

值得注意的是，研究表明，高活性CETP與As正相關(guān)。這可能因HDL-CE過多地轉(zhuǎn)移、聚集在LDL和某些脂蛋白的殘粒上，而后者的致As能力極強(qiáng)。

事實(shí)上，牛、羊、狗、大鼠等，CETP活性低，不易自發(fā)形成As，人、猴、兔等，CETP活性高，易發(fā)生As。77膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)(RCT)分兩個階段進(jìn)行①膽固醇自肝外細(xì)胞包括動脈平滑肌細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等的移出。②

HDL載運(yùn)膽固醇的酯化以及膽固醇酯的轉(zhuǎn)運(yùn)。78回顧復(fù)習(xí)

1.血漿脂蛋白結(jié)構(gòu)2.血漿脂蛋白分類3.血漿脂蛋白的組成特點(diǎn)4.載脂蛋白5.脂蛋白受體6.脂代謝有關(guān)酶和特殊蛋白質(zhì)

79第五節(jié)脂蛋白代謝脂蛋白代謝以肝臟為中心

HDL代謝：膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)(RCT)

VLDL-IDL-LDL代謝：由肝合成VLDL,再轉(zhuǎn)變?yōu)镮DL和LDL,并被肝或其它器官代謝的過程CM代謝：飲食攝入的Ch和TG在小腸中合成CM及其代謝過程LP代謝外源性代謝內(nèi)源性代謝80一、外源性脂質(zhì)代謝(CM代謝)

1.合成部位：小腸粘膜細(xì)胞

2.組成特點(diǎn)：含TG多、蛋白質(zhì)少、顆粒

大、密度小。

3.功能：轉(zhuǎn)運(yùn)外源性TG的主要形式，將外

源性TG由腸運(yùn)往全身。

4.代謝過程:

81外源性代謝途徑:CM代謝

(半壽期<1小時)TG,CETG,FC,PL,FFAApoE-R腸壁細(xì)胞FCHDLCMCM

殘粒LPL激活FFAStep3Step1Step282二、內(nèi)源性脂質(zhì)代謝(一)VLDL代謝1.合成部位：肝（主）小腸也可合成少量2.組成特點(diǎn)：富含TG(50%-70%)，以含ApoB100為主要特點(diǎn)。所含Ch來自于肝細(xì)胞自身合成和CM殘粒。3.功能：是內(nèi)源性TG由肝臟運(yùn)往全身的主要形式4.代謝過程：

83代謝過程84VLDL的生理功能：

運(yùn)輸內(nèi)源性TG內(nèi)源性VLDL的代謝85(二)、低密度脂蛋白代謝1.合成部位：血液中VLDL轉(zhuǎn)變而來，也可由肝臟合成2.組成特點(diǎn)：①富含Ch(45%-50%)，絕大部分為CE，它主要來自于HDL(需經(jīng)CETP轉(zhuǎn)運(yùn))②APO幾乎全為ApoB100

3.功能：轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性膽固醇（肝臟→肝外組織）的主要形式4.代謝過程：

(1)、LDL受體代謝途徑

86低密度脂蛋白受體代謝途徑：87（2）LDL的非受體代謝途徑血漿中的LDL還可被修飾，修飾的LDL如氧化修飾LDL(ox-LDL)可被清除細(xì)胞即單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)中的巨噬細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞清除。這兩類細(xì)胞膜表面具有清道夫受體(scavengerreceptor,SR)，攝取清除血漿中的修飾LDL。*正常人每天降解45%的LDL，其中2/3經(jīng)LDL受體途徑降解，1/3由清除細(xì)胞清除。88LDL的代謝89

臨床觀察發(fā)現(xiàn)，有些患者的細(xì)胞表面受體缺乏或減少，致使血漿LDL含量增多，結(jié)果是血漿膽固醇和膽固醇酯濃度升高并沉積于血管壁，促進(jìn)動脈粥樣硬化的發(fā)生,表現(xiàn)在心臟則引起冠心病。由于LDL中膽固醇含量升高與冠心病發(fā)病率呈正相關(guān)，所以LDL中的膽固醇稱為壞膽固醇。90(三)、HDL代謝1.合成部位：肝臟（主要）、小腸合成2.組成特點(diǎn)：蛋白質(zhì)含量高3.功能：①HDL是ApoE及LPL激活劑ApoCⅡ的儲存庫。②HDL能促進(jìn)外周組織膽固醇的清除，防止動脈粥樣硬化的形成，故HDL中的膽固醇被稱為好膽固醇。

4.代謝過程：

9192HDL的代謝93代謝新生HDL細(xì)胞膜CMVLDL卵磷脂、膽固醇CMVLDLapoCapoEHDL3LCAT

HDL2CMVLDL磷脂apoAⅠAⅡVLDLLDLCECETP

LCAT：卵磷脂膽固醇酯酰轉(zhuǎn)移酶CETP：膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9495血漿脂蛋白代謝總圖96第六節(jié)脂蛋白代謝紊亂

97

由某種原因?qū)е碌闹鞍状x紊亂，其基本表現(xiàn)為血漿脂蛋白水平異常改變。主要為高脂蛋白血癥（Hyperlipoproteinemia）。從血脂水平角度講，高脂蛋白血癥即為“高脂血癥”（Hyperlipidemia）。

98

·高脂血癥系指血漿中TG和/或TC濃度異常升高。

原發(fā)性高脂蛋白血癥從原因分類

繼發(fā)性高脂蛋白血癥99

一、原發(fā)性高脂蛋白血癥

·由基因突變引起或原因不明——“原發(fā)性”

由基因突變基因表達(dá)異常相關(guān)蛋白質(zhì)（Apo、LP受體、脂蛋白代謝酶等）水平異常。

通常按WHO的建議，以臨床檢驗結(jié)果將高脂蛋白血癥分為Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型，共六型。

100

分型的生化檢驗依據(jù)為：

(1)血清(血漿)外觀：在4℃冰箱放置16-24h后的血清外觀。透明(清亮)?混濁？有無奶油樣層？(血漿靜置實(shí)驗)

(2)血脂濃度：血清TG、TC含量

(3)血清LP電泳圖譜：某種(些)LP含量(%)是否升高(相應(yīng)區(qū)帶是否深染、加寬?)101正常情況：

血清外觀清亮、透明、均勻

血脂

TG0.56~1.70mmol/L

TC2.80~5.20mmol/L

血清LP電泳圖譜正常

α—LP0.23~0.52

β—LP0.35~0.60(供參考)

前β—LP0~0.30

CM0

102103（一）?型高脂蛋白血癥（家族性高CM血癥）1.發(fā)病原因：常染色體隱性遺傳（1）LPL遺傳性缺陷（2）ApoCⅡ缺乏ApoCⅡ缺陷(缺乏或結(jié)構(gòu)異常)LPL活性↓CM中的TG不能被水解CM變成CM殘粒受阻CM在血漿中堆積。2.臨床表現(xiàn)：常伴有視網(wǎng)膜止血癥、腹痛、胰腺炎、肝脾腫大等，發(fā)病多在兒童期。

1043.生化特征：

（1）血清外觀：乳白色混濁，4℃過夜，血漿上層出現(xiàn)“奶油樣”上層（由CM構(gòu)成），下層為透明至混濁。

（2）血脂分析：TG↑↑↑，膽固醇正常或輕度增高。

（3）電泳圖譜：正常人無CM帶，此時有區(qū)帶深染。（4）脂蛋白分析：CM↑↑

（5）血漿LPL活性降低，肝脂酶正常，毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞LPL活性因其輔助因子ApoCⅡ缺乏而低下。105(二)IIa型高脂蛋白血癥(家族性高膽固醇血癥）1．原因：主要為LDL受體缺陷，常染色體隱性遺傳

(1)LDL受體缺乏或減少(2)LDL受體活性（與LDL結(jié)合能力）降低

(3)LDL受體入胞（內(nèi)吞）障礙，即

LDL受體可與LDL形成復(fù)合物，但不能被內(nèi)吞。

以上均導(dǎo)致LDL不能以正常速度進(jìn)入細(xì)胞而堆積于血漿中，久之則使LDL-Ch大量沉積在動脈管壁AS。

1062.臨床表現(xiàn)：

黃色瘤、角膜弓狀云、AS等，純合子患者在青春期即發(fā)生AS和冠心病，可致死。3.生化特征：（1）血清外觀：透明，少有混濁（2）血脂分析：膽固醇↑↑，TG正常。（3）電泳圖譜：?－區(qū)帶深染、增寬（4）脂蛋白分析：LDL↑↑，ApoB↑107

(三)Ⅱb型高脂蛋白血癥（高β-LP合并高前β-LP血癥，混合型高脂蛋白血癥）

1.病因:

主要因ApoB100過多生成，導(dǎo)致血漿VLDL、LDL過量生成而分解并不加快，從而堆積。常染色體顯性遺傳。2.臨床表現(xiàn)：

Ⅱb型與Ⅱa的主要區(qū)別是前者LDL受體活性正常，患者多合并肥胖，糖代謝及胰島素分泌異常，易伴發(fā)黃色瘤及動脈粥樣硬化癥。

1083.生化特征：

(1）血清外觀：少有混濁

（2）血脂分析：膽固醇↑↑、TG↑↑

（3）電泳圖譜：?－LP和Pre?－LP區(qū)帶均深染，但兩者并不融合。

（4）脂蛋白分析：LDL↑、VLDL↑109

(四)Ⅲ型高脂蛋白血癥(高β-VLDL血癥，寬β-脂蛋白血癥)

1.病因

主要為ApoE異常所致，顯性遺傳

ApoE分為ApoE2、E3、E4等，性質(zhì)上的差異主要在于與ApoE受體(VLDL受體等)的結(jié)合能力不同，E2幾乎不能與VLDL受體結(jié)合。正常人基因型多為ApoE3/E3，其與VLDL受體的結(jié)合力正常，但Ⅲ型患者多為ApoE2/E2型，其與VLDL受體的結(jié)合力大為降低，導(dǎo)致VLDL在血漿中堆積。

1102.臨床癥狀—黃色瘤，AS和冠心病等

3.生化特征：（1）血清外觀：混濁，表面薄層奶油層

（2）血脂分析：TG↑↑，Ch↑↑（3）電泳圖譜：出現(xiàn)?-VLDL；?－LP和Pre?－LP區(qū)帶連接在一起形成寬而深染的色帶，故稱寬?-病。亦稱高?-VLDL血癥。（4）脂蛋白分析：IDL↑、(?-VLDL↑)111(五)Ⅳ型高脂蛋白血癥(家族性高TG血癥或高VLDL血癥)

本癥為高脂蛋白血癥中常見的類型，我國一半以上的高脂蛋白血癥屬于此型。常染色體顯性遺傳。1.病因：

由于VLDL合成亢進(jìn)和/或VLDL分解受阻。機(jī)制不詳。

1122.生化特征：（1）血清外觀：混濁，4℃冰箱過夜無奶油層（2）血脂分析：TG↑↑、Ch正?；蜉p度升高。

（3）電泳圖譜：

Pre?深染，（4）脂蛋白分析：

VLDL↑，所以稱高VLDL血癥1133.臨床表現(xiàn)：

多在成年人發(fā)現(xiàn)，青少年少見。患者很少有黃色瘤等皮膚特點(diǎn)，易發(fā)生冠心病，但不如Ⅱ、Ⅲ型嚴(yán)重。其他的癥狀可有肥胖、胰島素抵抗、高胰島素血癥、葡萄糖耐量異常及高尿酸血癥等。114(六)Ⅴ型高脂蛋白血癥(高CM和高前β-LP血癥)1.原因

ApoCⅡ↓LPL活性↓

CM、VLDL中的TG降解受阻

其它原因?qū)е碌腖PL活性↓

1152.臨床表現(xiàn)：常于20歲前發(fā)病，家族史明顯者，丘疹狀黃色瘤的發(fā)病率可高達(dá)30％－50％，并伴有胰腺炎、肝脾腫大；葡萄糖耐量異常、尿酸血癥以及缺血性心臟病等。3.生化特征：（1）血清外觀：上層奶油層、下層混濁。（2）血脂分析：TG↑↑↑Ch正常或↑（3）電泳圖譜：可見CM及前?－脂蛋白深染（4）脂蛋白：CM↑、VLDL↑116

高脂蛋白血癥WHO分型

表型血漿4℃過夜外觀TCTGCMVLDLLDL

I奶油上層,下層清↑→↑↑

↑↑

↑→↓→IIa透明↑↑→→→↑↑

IIb透明↑↑↑→↑↑III奶油上層,下層混濁↑↑↑↑↑↑↓IV混濁↑→↑↑

→↑↑→V奶油上層,下層混濁↑↑↑

↑↑

↑↓→117(七)高HDL血癥

已證實(shí)，HDL是抗AS的“保護(hù)因子”，AS發(fā)生率與血漿HDL水平呈負(fù)相關(guān)。但長期過高濃度的HDL仍為病理現(xiàn)象。

1．特征

血漿HDL-Ch含量>2.6mmol/L（正常為0.78~2.2mmol/L，0.3~0.85g/L）

118

2．原因

(1)原發(fā)性

①CETP缺陷：CETP合成↓，HDL-CE

蓄積，HDL分解障礙,HDL↑

②HTGL活性↓,HDL分解速度↓,血漿

HDL↑

HDL顆粒變大,HDL-ch↑↑(可達(dá)正常人

的3~5倍)

(2)繼發(fā)性：運(yùn)動失調(diào)、飲酒過量等原因

引起。

119

二、繼發(fā)性高脂蛋白血癥(secondaryhyperlipoproteinemia)

繼發(fā)于某些疾病導(dǎo)致的脂蛋白代謝紊亂，可以逆轉(zhuǎn)。以Ⅱ、Ⅳ型較常見。

(一)不合理飲食如高糖、高脂飲食,乙醇中毒

(二)代謝性疾病和內(nèi)分泌疾病如糖尿病、肥胖、甲狀腺機(jī)能減退、皮質(zhì)醇增多癥等

(三)肝、膽、胰疾病

肝炎、肝硬化、膽道阻塞、胰腺炎等

(四)腎臟疾病如腎病綜合癥等。

120第七節(jié)脂蛋白代謝紊亂與

動脈粥樣硬化

121

動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是危害人類健康的常見疾病之一。其主要特征，一是動脈血管平滑肌細(xì)胞增生，二是血脂(Ch、TG)在粥樣斑塊內(nèi)沉積，最終導(dǎo)致血管壁呈纖維化增厚、狹窄，使某些臟器(尤其是心、腦)供血不足而損傷，甚至危及生命。

AS的發(fā)病機(jī)制極為復(fù)雜。從生化角度講，血漿脂蛋白(脂類)代謝紊亂是重要環(huán)節(jié)。

引起脂蛋白代謝紊亂的因素繁多，凡促進(jìn)動脈管壁內(nèi)Ch內(nèi)流和沉積的因素，均是致AS因素；凡促進(jìn)Ch從管壁內(nèi)向外運(yùn)的因素，稱為抗AS因素。

122一、LDL與AS

(一)各種因素導(dǎo)致的血漿LDL水平升高，促進(jìn)AS

LDL受體數(shù)量↓

LDL受體異常LDL受體親和力↓

LDL受體入胞障礙

(二)化學(xué)修飾LDL促進(jìn)AS

資料顯示，部分AS和冠心病患者血漿LDL濃度并不高；當(dāng)巨噬細(xì)胞與高濃度LDL培養(yǎng)時，并未出現(xiàn)Ch大量堆積并轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞。后來發(fā)現(xiàn)，大量氧化LDL(ox-LDL)沉積在AS斑塊中。

123

ox-LDL致AS的機(jī)制：

①加速泡沫細(xì)胞生成

ox-LDL通過清道夫受體進(jìn)入巨噬細(xì)胞。此不受細(xì)胞內(nèi)Ch的反饋抑制，致使ox-LDL大量堆積而成泡沫細(xì)胞。

②細(xì)胞毒作用

ox-LDL引起血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性增高、細(xì)胞壞死并脫落、功能障礙等，促進(jìn)血液中單核細(xì)胞和LDL進(jìn)入血管內(nèi)膜。

124

③ox-LDL的免疫原性不同于LDL，它刺激機(jī)體產(chǎn)生自身抗體。ox-LDL的免疫復(fù)合物又刺激補(bǔ)體，引發(fā)局部炎癥。

此外，乙?；疞DL也具有ox-LDL的類似作用，易沉積在動脈管壁。

125氧化LDL等

巨噬細(xì)胞吞噬

形成泡沫細(xì)胞

形成AS斑塊

管腔變狹窄

急性缺血

(缺血性心、腦血管病)

126

二、過氧化脂質(zhì)與AS

·自由基（freeradical）：帶有奇數(shù)電子（未成對電子）的分子、離子或化學(xué)基團(tuán)。

O2+e—O2—,H2O2+e—+H+H2O+·OH

氧自由基：超氧陰離子自由基(O2—o),

羥基自由基(·OH)

活性氧

H2O2,單線態(tài)氧(lO2)

127·過氧化脂質(zhì)，為：

PL(其中的不飽和脂肪酸)

自由基及其引發(fā)的脂質(zhì)過氧化作用

(lipidperoxidation)

過氧化脂質(zhì)（LPO）

細(xì)胞膜脂最易發(fā)生過氧化作用，引起：

(1)膜脂流動性↓

(2)膜酶活性↓

(3)膜的通透性↑（尤其對離子），脂質(zhì)更易在血管內(nèi)膜沉積

·（過）氧化LDL的形成

128三、LP(a)與AS

LP(a)是促進(jìn)AS的獨(dú)立危險因子，與AS的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)

·可能機(jī)制

(1)選擇性地破壞受體介導(dǎo)環(huán)節(jié)，導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能失調(diào)。而內(nèi)皮細(xì)胞完整性受損和功能失調(diào)是AS發(fā)生的前提條件。

(2)促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增生

可能因Apo(a)具有肝細(xì)胞生長因子樣作用，加快細(xì)胞分裂

129(3)參與泡沫細(xì)胞的形成

LP(a)可通過清道夫受體途徑、VLDL受體途徑及非受體途徑等被巨噬細(xì)胞攝取，致使Ch堆積而變成泡沫細(xì)胞。

氧化LP（a）（ox-LP(a)）更易被巨噬細(xì)胞攝?。?/p>

Ox-LP(a)尚可刺激單核細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞

(4)抑制血栓溶解，促進(jìn)血栓形成

Apo（a）抑制纖溶酶原纖溶酶;

誘導(dǎo)血小板參與血栓形成。

四、Apo與AS

130第八節(jié)脂蛋白和脂類的

測定方法

131

·血脂和血漿脂蛋白濃度是衡量脂類代謝和脂蛋白代謝正常/異常的基本參數(shù)，又是臨床生經(jīng)檢驗的常規(guī)測定項目。

·血脂和血漿脂蛋白濃度檢測的臨床意義包括：

(1)發(fā)現(xiàn)和診斷高脂蛋白血癥(高脂血癥)

hyperlipoproteinemia(hyperlipidemia)

(2)協(xié)助診斷和予測動脈粥樣硬化癥132

(3)評價動脈粥樣硬化疾患(如冠心病，CHD)

(4)監(jiān)測與評價高脂蛋白血癥、AS或CHD等病癥的療效

·本節(jié)主要介紹常用檢測血脂和血漿脂蛋白的方法并予以簡要評價

133

一、血漿脂蛋白測定

·利用脂蛋白的理化性質(zhì)(密度、顆粒大小、表面電荷、免疫學(xué)性質(zhì)等)的差異對脂蛋白進(jìn)行分離和分析。常用超速離心法和電泳法。

(一)超速離心法

(ultracentrifugationmethod)

·基于各種脂蛋白的密度不同，在適當(dāng)密度介質(zhì)和超速離心力場中的行為(漂浮或沉降)也就不同，借此進(jìn)行分離和分析。

134制備性超離心法

分析性超離心法—最準(zhǔn)確

區(qū)帶超離心法

·對儀器和人員要求高；費(fèi)時；

不適于常規(guī)應(yīng)用，可作為參考方法和研究用。

135

(二)電泳法(electrophoresismethod)

·依據(jù)脂蛋白分子表面電荷數(shù)和大小而分離

使用不同的支持介質(zhì)，各有其優(yōu)缺點(diǎn)，目前普遍采用瓊脂糖凝膠電泳，其優(yōu)點(diǎn)是：

凝膠透明，電滲弱，吸附作用微

分離效果好，操作簡便

若需要同時測定脂蛋白分子量，可選擇PAGE

·脂蛋白染色所用染料均為親脂性，作用于TG或膽固醇酯

·電泳法有效，但較難實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)化。僅適于定性或半定量測定。

136在高脂蛋白血癥分型時，一般根據(jù)血清外觀和血脂(TG、TC)可確定，只有少數(shù)情況方需要進(jìn)行電泳分析。故電泳法不是常規(guī)項目。

(三)沉淀法(precipitatemethod)

·某些物質(zhì)可選擇性沉淀某種(些)脂蛋白，使這些脂蛋白得以分離。分離后，分別測定其中膽固醇含量來反映該種脂蛋白水平。

·沉淀劑多為“多聚陰離子+二價金屬離子”。例如：

137

138即：LDL-C==TC－(HDL-C+VLDL-C)

此類方法簡便、快速，較準(zhǔn)確，但須控制好條件(沉淀劑種類、濃度、pH等。)臨床常用。

(四)免疫化學(xué)法(immuno-chemicalmethod)

·利用Ag-Ab免疫反應(yīng)特性，主要用于脂蛋白分子中Apo的測定。

·具體方法有：單向免疫擴(kuò)散法、火箭電泳法，放射免疫法、酶聯(lián)免疫法、比濁法等。

139

二、膽固醇測定

血清（總）膽固醇（TC）包括游離膽固醇（FC）和膽固醇酯（CE），各約占1/3或／和2/3，可見以CE為主。

血清膽固醇含量測定的常規(guī)方法為酶法，化學(xué)法中主要用修改的LRC法。

140(一)LRC法

LRC為（美國）“臨床脂類調(diào)研組”

程序：血清異丙醇抽提

(TC+TG+PL)(沸石合劑)吸附PL提取液中的TC以高鐵-乙酸-硫酸試劑顯色、比色測定。

原理：分為兩類

L-B反應(yīng)（Liberm