內(nèi)毒素1,3-β-葡聚糖和降鈣素檢測的臨床應(yīng)用

內(nèi)毒素、1，3-β-葡聚糖和降鈣素原檢測的臨床應(yīng)用精選ppt內(nèi)毒素概述內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)中的脂多糖〔LPS〕，這些成分只在細(xì)菌死亡裂解后才釋放到菌體外或活菌以發(fā)泡形式將其釋出。精選ppt外層菌體多糖（O抗原），與細(xì)菌侵襲力有關(guān)。中層同一種屬之間是相同的。內(nèi)層特殊的糖磷脂，起毒性作用，而無種屬特異性。特異性多糖核心多糖類脂A內(nèi)毒素的結(jié)構(gòu)精選ppt發(fā)熱反應(yīng)1激活血管活性物質(zhì)的釋放2激活凝血和纖溶系統(tǒng)3內(nèi)毒素的生物學(xué)活性精選ppt直接或間接損害肝臟5激活白三烯、前列腺素及單核巨噬系統(tǒng)6內(nèi)毒素的生物學(xué)活性激活補(bǔ)體4精選ppt精選ppt內(nèi)毒素的有益作用增加機(jī)體非特異性免疫力1防御放射性損傷，促進(jìn)粒細(xì)胞生成2增加網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能3抗腫瘤，免疫佐劑作用4精選ppt內(nèi)源性內(nèi)毒素血癥外源性內(nèi)毒素血癥產(chǎn)生原因腸道內(nèi)毒素的吸收1敗血癥時血中細(xì)菌的釋放23有效的抗菌治療后，細(xì)菌崩解輸入了含有細(xì)菌的藥物、血液或者體液等。精選ppt內(nèi)毒素血癥臨床病癥主要決定于宿主對內(nèi)毒素的抵抗力。病癥和體征有：發(fā)熱，白細(xì)胞數(shù)變化，出血傾向，心力衰竭、腎功能減退、肝臟損傷、神經(jīng)系統(tǒng)病癥，以及休克、血壓下降、組織灌流缺乏、缺氧及酸中毒等。

內(nèi)毒素血癥的臨床病癥最嚴(yán)重的后果：致死性感染性休克，多器官功能衰竭，DIC等。病死率極高。精選ppt肺炎100%、尿路感染70-80%、腹腔感染72-84%、燒傷85%、急性胰腺炎90%、敗血癥70%、急性肝炎37-64%、爆發(fā)性肝炎58-100%、丙肝61.54%、膽石癥伴急性梗阻性化膿性感染85%、多器官功能衰竭100%。

各類疾病內(nèi)毒素血癥的發(fā)生率精選ppt內(nèi)毒素檢測的臨床應(yīng)用在肝膽疾病中的應(yīng)用1在呼吸系統(tǒng)感染中的應(yīng)用2在胰腺疾病中的應(yīng)用3在潰瘍性結(jié)腸炎中的應(yīng)用4在全身性細(xì)菌感染中的應(yīng)用5在不明原因發(fā)熱中的應(yīng)用6精選ppt內(nèi)毒素檢測在醫(yī)院中的應(yīng)用在醫(yī)院滅菌制劑檢驗中應(yīng)用1對注射器、輸液器等醫(yī)療器械的內(nèi)毒素檢測2在透析站和血站中的應(yīng)用3在臨床醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用4精選ppt鱟試驗是1968年由Levin和Bang建立。其原理是利用鱟的變形細(xì)胞與微量內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反響的現(xiàn)象，作為判斷試品中細(xì)菌內(nèi)毒素含量的一種方法。內(nèi)毒素的檢測方法精選ppt

背面觀

就像是古代武士的心甲

腹面觀

腹部基本呈六角形，

還可以看到它發(fā)達(dá)的附肢

精選ppt內(nèi)毒素的檢測原理GG精選ppt內(nèi)毒素的檢測方法鱟試劑〔LimulusamebocytelysateLAL)

凝膠法——0.03EU/ml范圍內(nèi)半定量1濁度法——0.006-300EU/ml,檢測范圍大2比色法——0.006-15EU/ml范圍內(nèi)定量3ELISA——0.1pg/ml4流式細(xì)胞術(shù)——測內(nèi)毒素的量而不是活性5化學(xué)發(fā)光測定法6精選ppt內(nèi)毒素檢測的參考值

10pg/ml以下：健康人值

10-20pg/ml：病變觀察期大于20pg/ml：內(nèi)毒素血癥

肝炎敗血癥腫瘤內(nèi)毒素濃度

50-32020-100020-700

精選ppt(1-3)--D-葡聚糖精選ppt侵襲性真菌感染的定義定義:

指致病性真菌侵犯皮下組織、黏膜、肌肉和內(nèi)臟器官等所引起的真菌感染性疾病，危害性較大。條件致病性真菌念珠菌屬曲霉屬其他精選ppt侵襲性真菌感染的特點(diǎn)1.不產(chǎn)生內(nèi)毒素和外毒素致病機(jī)理不明4.早期病癥無特異性，往往被原發(fā)病掩蓋，病程長，發(fā)現(xiàn)較晚，死亡率高2.致病力一般較弱，機(jī)體免疫低下時發(fā)生3.感染菌種變化，白色念珠菌感染下降，曲霉菌感染增長趨勢上升明顯精選ppt1.內(nèi)源性誘因2.外源性誘因影響機(jī)體抵抗力的各種疾病，如白血病、癌癥、結(jié)核、肺膿腫、糖尿病、肝臟疾病以及維生素缺乏等廣譜抗生素，抗腫瘤藥物和免疫抑制劑；插管等侵襲性治療，骨髓和實體器官移植；免疫缺陷綜合癥侵襲性真菌感染的誘因精選ppt侵襲性真菌感染〔IFI〕現(xiàn)狀I(lǐng)FI診斷困難及漏診情況嚴(yán)重IFI發(fā)生率不斷增加IFI感染病死率很高123精選ppt國內(nèi)侵襲性真菌感染不容無視

劉正印等，中華醫(yī)學(xué)雜志2003,83(5):399-402感染人數(shù)精選ppt國內(nèi)侵襲性真菌感染不容無視

臨床藥物治療雜志2007年第5卷第1期感染率(%)精選ppt中國感染與化療雜志2021年7月20日第8卷第4期精選ppt

尸檢研究發(fā)現(xiàn)，75%的侵襲性真菌感染病例在生前漏診診斷困難的主要原因：---臨床表現(xiàn)不典型，易被根底疾病所掩蓋---確診常需侵入性手段獲得組織標(biāo)本，侵入性操作常因患者的病情所限難以實施---真菌檢測工程開展相對缺乏或滯后IFI診斷困難及漏診情況嚴(yán)重精選ppt主要可引發(fā)侵襲性真菌感染的疾病肺炎肺纖維癥腦出血腦堵塞硬膜下血瘤術(shù)后胸部大動脈瘤術(shù)后糖尿病再生障礙性貧血MODSDIC胃癌，肝癌，肝內(nèi)膽管癌，肺癌，多發(fā)性骨髓瘤，白血病，惡性淋巴瘤肺結(jié)核腹腔內(nèi)膿腫AIDS呼吸系統(tǒng)疾病感染癥及寄生蟲病循環(huán)系統(tǒng)疾病內(nèi)分泌疾病血液及造血器官疾病腫瘤類精選ppt侵襲性真菌感染(invasivefungalinfection,IFI)的發(fā)病率逐年上升,其中又以侵襲性肺部真菌感染(invasivepulmonaryfungalinfection,IPFI)最常見,大約占50%～60%。未經(jīng)及時治療的肺部真菌感染患者的病死率可高達(dá)30%～80%

。

侵襲性肺部真菌感染精選ppt臨床表現(xiàn)：缺乏特異性,多表現(xiàn)為發(fā)熱、咳嗽、咳痰、咯血、胸悶、呼吸困難等。

現(xiàn)狀：兩高兩低一快檢測方法相對滯后,早期診斷和治療仍存在困難,副作用小的新型抗真菌藥物價格昂貴,導(dǎo)致病死率高。高院內(nèi)感染率和病死率低臨床和實驗室診斷率患者病情惡化快

侵襲性肺部真菌感染精選ppt死亡率(%)診斷延遲時間(h)ICU診斷延遲時間與死亡率的關(guān)系1133303510152025303512h12-24h

24-48h48hMorrellMetal.AntimicrobAgentsChemother2005,49:3640–3645.精選ppt美國四大醫(yī)療中心做的一項回憶性研究死亡率(%)診斷延遲時間(d)GareyKWetal.ClinInfectDis2006,43:25–31.精選pptb1,6葡聚糖

磷脂雙分子層幾丁質(zhì)麥角固醇b1,3葡聚糖合成酶mannoproteinsβ1,3真菌細(xì)胞膜、壁結(jié)構(gòu)羊毛固醇C－14去甲基化酶14位復(fù)原和7－8位異構(gòu)酶角鯊烯環(huán)氧化酶精選ppt1-3-β-D-葡聚糖本質(zhì)及特點(diǎn)真菌細(xì)胞壁成分，占50%以上1其他微生物、動物及人的細(xì)胞不含該成分2用于侵襲性真菌感染的早期診斷3精選ppt(1-3)-β-D-葡聚糖特性1.2.3.對熱極為穩(wěn)定，高壓121℃并不能使其滅活。在念珠菌和曲霉菌細(xì)胞壁中含量較多，對G試驗靈敏。當(dāng)真菌進(jìn)入人體血液或深部組織后，經(jīng)吞噬細(xì)胞的吞噬、消化等處理后，(1-3)-β-D-葡聚糖可從胞壁中釋放出來，從而使血液及其它體液中含量增高。當(dāng)真菌在體內(nèi)含量減少時，機(jī)體免疫系統(tǒng)可將其去除。在淺部真菌感染中，(1-3)-β-D-葡聚糖未被釋放出來，故其在體液中的量不增高。精選ppt“G〞試驗緣何而來？1-3-β-D-葡聚糖可特異性激活鱟變形細(xì)胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故稱G試驗。（1-3）

-D-GlucanLAL-RM(反應(yīng)物)G因子活化G因子凝固酶原 凝固酶凝固蛋白原凝固蛋白（凝膠）試驗反應(yīng)機(jī)理圖：精選ppt內(nèi)毒素與β-葡聚糖的檢測比較能與鱟試劑發(fā)生反響的物質(zhì)有細(xì)菌內(nèi)毒素和β-葡聚糖，但它們的反響曲線不一樣。內(nèi)毒素反響曲線為S型特征曲線，而β-葡聚糖反響曲線為經(jīng)過0點(diǎn)的斜線。精選ppt

內(nèi)毒素和β-葡聚糖與鱟試劑反響的特征曲線精選ppt觀察期不確定，費(fèi)時費(fèi)力，特征性不明顯并對醫(yī)師的專業(yè)水平要求高輔助方法：臨床表現(xiàn)，免疫學(xué)，病理學(xué)，影像學(xué)檢查等用于實驗室檢測，已成為這一領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)3.PCR技術(shù)：真菌的抗原、抗體及代謝產(chǎn)物的血清學(xué)檢查和真菌核酸檢測對兒童及接受造血干細(xì)胞移植患者、ICU患者不適用2.GM試驗：曲霉屬半乳甘露聚糖抗原檢測。判斷是否曲霉屬真菌感染耗時短，靈敏度高，特異性強(qiáng)，定量檢測可判斷感染嚴(yán)重程度1.G試驗：通過檢測(1-3)-β-D-葡聚糖的含量，判斷是否有真菌感染非傳統(tǒng)檢查敏感性低，耗時長,培養(yǎng)陽性率低。培養(yǎng)結(jié)果是定性的，有些標(biāo)本采集困難直接培養(yǎng)真菌法傳統(tǒng)檢查特點(diǎn)方法侵襲性真菌感染的臨床檢測方法比照精選ppt－D－葡聚糖的評價可檢測多種致病真菌感染念珠菌，曲霉，肺孢子菌，鐮刀菌，地霉，組織胞漿菌，毛孢子菌等不能檢測隱球菌、接合菌〔根霉、毛霉、根毛霉、犁頭霉等〕敏感性、特異性：90％左右對于念珠菌血癥,G試驗檢測是首選檢查

J.Clin.Microbiol.2021.46:1009–1013.

精選pptBG值在IFI臨床表現(xiàn)出現(xiàn)之前就已經(jīng)高于正常值Pazos等報道5例確診IFI及3例臨床診斷的IFI患者，發(fā)現(xiàn)BG值升高出現(xiàn)在發(fā)熱、咳嗽、胸痛等病癥和肺部HRCT檢查發(fā)現(xiàn)以前。平均早于發(fā)熱5d早于呼吸道病癥平均10.7d

JClinMicrobiol，2005，43(1)：299—305G試驗檢測評價精選ppt

Odabasi等對確診為粒細(xì)胞缺乏人群進(jìn)行為期3周每周2次采血檢測及臨床觀察發(fā)現(xiàn)：BG值開始高于60pg／ml的時間比最后確診為IFI或臨床診斷IFI平均提前了10d

ClinInfectDis，2004，39(2)：199—205G試驗檢測評價精選ppt－D－葡聚糖參考值健康人：<10pg/ml

可疑感染：10~20pg/ml深部真菌感染：>20pg/ml精選ppt關(guān)于G試驗建議G試驗臨床應(yīng)用1明確診斷〔抗真菌藥物治療前〕2治療效果監(jiān)測〔抗真菌藥物治療后〕3連續(xù)2次采血進(jìn)行G試驗精選ppt臨床細(xì)菌內(nèi)毒素及

(1-3)--D-Glucan檢測的國內(nèi)外開展國外：血液〔包括血漿、腦脊液、血清、腹水液、尿液、唾液、乳汁等〕中內(nèi)毒素以及(1-3)--D-Glucan微量定量檢測已經(jīng)成為現(xiàn)實，目前在美國、日本等國均已出現(xiàn)專用細(xì)菌內(nèi)毒素及(1-3)--D-Glucan檢測儀器及配套的檢測試劑盒，而且獲得FDA及厚生省批準(zhǔn)文號，作為一種日常檢測工程。國內(nèi)：MB-80檢測系統(tǒng)，為國內(nèi)獨(dú)家研制和生產(chǎn)的檢測臨床內(nèi)毒素及(1-3)--D-Glucan的專用儀器，同時具有配套的檢測試劑盒EKT-5MsetandGKT-%Mset獲得SDA批準(zhǔn)文號,精選ppt降鈣素原精選ppt生化結(jié)構(gòu)和生物合成1生物來源2降鈣素原概述

116個氨基酸組成，相對分子量為13KD的糖蛋白。在甲狀腺濾泡旁細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成。

人血清PCT含量極低，約0．0025μg/L。當(dāng)發(fā)生嚴(yán)重細(xì)菌感染和敗血癥時，其濃度可增高10000倍。在甲狀腺切除后嚴(yán)重感染患者血中PCT的濃度仍升高，推測各種器官中的巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞可能是敗血癥時PCT的來源。精選pptPCT的半衰期大約為20～24h。PCT的去除途徑尚不完全清楚。它很少經(jīng)腎臟排出。因此血漿PCT檢測也適用于腎衰或人工腎治療的患者。代謝3降鈣素原概