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文檔簡介
44
1509 DB
1509/T
0001—2023奶綿羊冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程Technical
regulations
for
the
production
of
dairy
sheep
frozen
seme 烏蘭察布市市場監(jiān)督管理局??發(fā)
布DB
1509/T
00012023 本文件按照GB/T
1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則
第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定DB
1509/T
00012023
GB
4789.2
GB/T
GB
motility
abnormal
percentage
bacteria
acrosome
plasma
membrane
frozen
經(jīng)特殊方法處理超低溫冷凍后在液氮中（-196
c)精子密度≥2×10
DB
1509/T
00012023
c)精子密度≥2×10
適量40
℃～45
時(shí)，利用假陰道迅速采集精液并將其置于38
a)
b)
d)
A液：Tris
2.71
g、檸檬酸1.4g、果糖1g、
M199
mL、大豆卵磷脂1
g、青霉素10000
素10
g，加超純水至100
B液：取A液90
mL，甘油10
mL。稀釋密度大于等于1.2×10
DB
1509/T
00012023稀釋密度大于等于1.2×10
38
30
10
min
10
min
10
38
℃冰箱中平衡
用無菌0.25
mL細(xì)管分裝，兩端封口應(yīng)嚴(yán)密，管內(nèi)無氣泡。細(xì)管橫向標(biāo)識(shí)順序從左到右依次為：羊
制作凍精的設(shè)備為適用0.25
℃～-10
-10
℃～-100
60℃/min）；-100
℃～-140
20
30
30
當(dāng)溫度下降至-140
30
貯存凍精的低溫容器應(yīng)符合GB/T
5458的要求；及時(shí)補(bǔ)充液氮，每年補(bǔ)充液氮；取放凍精時(shí)，凍精離開液氮不應(yīng)超過10
℃～40
氣中放置15
DB
1509/T
00012023
GB
GB
細(xì)菌數(shù)≤800
GB
4789.2
DB
1509/T
00012023A.1
A.2
解凍3管冷精于1.5
mL離心管中，加入1
mL洗精液并混勻；1500
rpm離心5
min，棄上清，留約20
min。
向精液中加入PBS
mL，1500
rpm離心5
mL
PBS
FITC-PSA
熒光顯微鏡下觀察，共計(jì)數(shù)至少200個(gè)精子來統(tǒng)計(jì)凍后精子頂體完整性，若精子頭部均染成明亮的
C=C1/S×100%............................... （A.1）CC1SDB
1509/T
00012023 B.1
B.2
吸取200μL精液加到1
mL低滲溶液中。放入恒溫水浴鍋里38
℃，30
min。
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